各种细菌培养标本留取要求课件

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细菌培养标本采集

细菌培养标本采集1、标本采集时间（1）一般原则应在寒战或高温高峰到来之前采集，因为细菌进入血流与寒战发作通常间隔1小时。

无论何时采集，原则上应选择在抗生素应用前，对已用抗生素而无法停药的病人，应在下次用药前采集。

（2）不明原因发热可于发热周期内多次采血作培养，如果24小时培养结果为阳性，应继续采血2～3份或更多血标本进行培养。

（3）心内膜炎急性心内膜炎：治疗前1～2小时内分别在3个不同部位抽血样，分别进行培养。

炎急性内膜炎：除在发热期采血外，应多次采血，第1天做3次培养，如果24小时培养阴性，应继续抽血3份或更多次进行培养。

（4）肺炎链球菌感染最佳时机是在寒冷、高热休克时，此时采集的标本阳性率较高。

2、标本送检时间采集好的血液培养瓶要及时送检。

如应某种原因不能及时送检，应将已采集好的血液培养瓶放在室温，切勿放在冰箱内，否则使阳性率降低送检要保温，并在化验单上标明采集血液标本的准确时间。

3、血液标本采集的量成人采血量一般为10mL，婴幼儿1～2Ml,儿童4～5Ml,在无法确定病人感染何种微生物时，应同时做多种生物培养，如需氧培养、厌氧培养和真菌培。

如病人应用抗生素时间较长，则应和检验科联系调整血液标本和培养基比例，一般血液标本和培养比例为1：10，如使用抗生素达10～15日以上，比例则为1：20或>1:20，儿童血液培养必须使用相应的儿童血液培养瓶。

4、标本采集部位和次数细菌培养阳性率与标本的采集部位和次数关系很大，而且一般成人菌血症感染率是非常低的，因此要多部位、多次采集血液标本进行培养，以提高阳性率。

通常从肘正中或股静脉抽取，不可从静脉注导管处抽血。

5、采集好的血液标本应更换针头，用酒精消毒培养瓶瓶盖后再将血液注入培养瓶。

标本采集PPT课件

非越多越好，超过一定的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，影响检测结果。
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先）凝血试管（蓝色）其它有抗凝剂管（黑-绿-紫）无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑，立即核查，通知医生，做好解释，重新采集标本。各类标本在采集、暂存与运送过程中发生标本撒漏、标本容器破损等紧急意外事件时，立即按医疗垃圾处理标本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述

常见细菌培养标本的采集方法及注意事项

常见细菌培养标本的采集方法及注意事项所有标本应在未使用抗生素之前，或在抗生素停药三天后留取，留取标本后应记录留取时间，保证在留取标本后1小时内送至检验科。

粪便标本:自然排便后，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便一小勺.液体粪便则取絮状物，一般取1~3ml，直接装入粪便容器中送检。

清洁中段尿标本：应保证尿液在膀胱内至少停留4h以上.最好留取早晨清洁中段尿标本。

注意:容器内是无菌的，所以打开容器盖后，应拿在手中,不要随意乱放。

留取方法：(1）患者睡前少饮水；（2)清晨起床后先用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮,仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；（3）开始排尿,将前段尿排出，弃去，不要停顿，直接将中段尿约5ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检。

自然咳痰标本:患者清晨起床后，用清水或冷开水反复漱口去除过量的口腔细菌,有假牙者应取下假牙.先轻咳,咳出口腔中的痰液弃去，再用力深咳，从气管咳出呼吸道深部的痰，直接吐入清洁、无菌的容器中。

常见细菌培养标本的采集方法及注意事项所有标本应在未使用抗生素之前，或在抗生素停药三天后留取，留取标本后应记录留取时间,保证在留取标本后1小时内送至检验科。

粪便标本：自然排便后，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便一小勺.液体粪便则取絮状物，一般取1～3ml，直接装入粪便容器中送检。

清洁中段尿标本：应保证尿液在膀胱内至少停留4h以上。

最好留取早晨清洁中段尿标本。

注意:容器内是无菌的，所以打开容器盖后，应拿在手中，不要随意乱放.留取方法：(1）患者睡前少饮水；(2)清晨起床后先用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗,再用清水冲洗尿道口周围；（3）开始排尿，将前段尿排出，弃去，不要停顿，直接将中段尿约5ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检。

自然咳痰标本：患者清晨起床后,用清水或冷开水反复漱口去除过量的口腔细菌，有假牙者应取下假牙。

先轻咳，咳出口腔中的痰液弃去，再用力深咳，从气管咳出呼吸道深部的痰，直接吐入清洁、无菌的容器中。

微生物标本检验的采集(共77张PPT)

【标本采集注意事项】
• ①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。
• ②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。
• ③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
•
皮肤消毒程序
• 严格按以下三步法进行：
• ①75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
•
②用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2%碘酊作用30s或碘伏作用
60s，从穿刺点向外以1.5～3cm直径画圈进行消毒
• ③75％酒精脱碘。
•
对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺
支气管刷直接取得标本。 • 3.胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，
有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
• 4.管穿刺法：主要用于厌氧菌培养 • * 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到
刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
【标本采集注意事项】
【标本的送检地点】 • 检验科微生物室，非正常上班时间送检验
科急诊化验室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目 • 上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真
菌涂片、结核菌涂片。二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
• 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

标本的采集和运送PPT课件

标本的采集和运送
正确规范的采集和运送标本，通过实验室检查，结合病史、症状或体疾病的病程确定标本采集的时间、部位和种类。所有采集的标本均应置于无菌或清洁容器中，不能接触消毒剂和抗菌药物。标本采集后应按要求处理，立即送往实验室；对于烈性传染病标本的运送还需专人送检。

创伤、组织和脓肿标本

损伤范围较大的创伤：应从不同部位采集多份标本。采集部位应首先清除污物，以碘酒、酒精消毒皮肤，防止杂菌混入标本。开放性脓肿：用无菌棉拭采取脓液及病灶深部分泌物。封闭性脓肿：以无菌干燥注射器穿刺抽取；疑为厌氧菌感染者，取脓液后立即排净注射器内空气，针头塞入无菌橡皮塞并送检。

脑脊液与其它无菌体液
引起脑膜炎的病原体因其抵抗力弱，不耐冷，容易死亡，故采集的脑脊液应立即保温送检或床边接种。浆膜腔积液因含菌量少，宜采集较大量标本以保证检出率。

泌尿生殖道标本
根据不同疾病的特征及检验目的采集不同标本：性传播疾病－尿道口分泌物、外阴糜烂面分泌物、阴道宫颈口分泌物、前列腺液；生殖道疱疹－穿刺疱疹液；盆腔脓肿－于直肠子宫陷凹处穿刺脓液。除淋球菌保温送检外，所有标本收集后4℃ 保存。
血清
用于检测患者特异性抗体效价以辅助诊断感染性疾病。采集血液置于无菌试管中，自然凝固、血块收缩后吸取血清，56℃加热30分钟以灭活补体成分。灭活血清保存于－20℃。

粪便
取含脓、血或粘液粪便置于清洁容器中送检，排便困难者可用直肠拭子采集。根据细菌种类不同选用合适运送培养液以提高阳性检出率（如霍乱）。一次粪便培养阴性不能完全排除胃肠道病原菌的存在，对于传染性腹泻患者需三次送检粪便进行细菌培养。

《标本采集》幻灯片

——《郑州大学学报（医学版）》2004年第39卷第4期
三、特别说明
止凝血实验标本的采集要特别注意：压脉带使用不能超过30s；抽血一定要迅速顺利；标本量要准确；混匀要充分、轻柔；送检要及时。
四、尿标本的留取及防腐剂的使用
剂名
机理
应用举例
40%甲醛固定尿中有机成分，抑制细菌生长。爱 0.5迪 ml氏计数100ml 尿中加
〔八〕充分混匀
✓ 一旦把血注入抗凝管中，应迅速上下颠倒混匀；
✓ 不能用力过大，要轻柔的上下颠倒，以免破坏红细胞，造成溶血；
✓ 血沉的血标本，要求颠倒6次。
〔九〕送检时间
标本尽快送往检验科。止凝血实验和血液分析实验必须在4小时内检测完毕。有些标本如果我们不能及时检测，我科也可以用保质的方式保存。
《标本采集》幻灯片
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一、前言
• 对于任何一个实验而言，全过程质量控制包括实验前〔分析前〕、实验中〔分析中〕和实验后〔分析后〕三个阶段的质量控制。
• 对于住院病人来说，实验前的质量控制主要就要由病房的医务人员来保证。
〔一〕抽血前的准备 ①做好三查三对。 ②血脂、肝功能、空腹血糖、血液流变学等：严格
空腹。 ③采血前：保持平静，住院病人在早晨卧床时采血
。 ④冬天：病人从室外进入室内，应等其暖和后采血
。 ⑤如果急查，不能保证空腹或者平静，那么应在抽
〔二〕采血部位避开有炎症，化脓，冻伤等皮肤损害
处采血。
（三）遇到输液的情况时
24h尿标本留取方法：
一般从第一天晚上8点到第二天的晚上8点。第一天晚上8点，让病人排空一次小便，然后收集以后的每次小便。到第二天晚上8点，让病人再留一次小便，这次小便也应该算在24h尿量中，并与之前的小便一起收集。

常见标本的采集及注意事项ppt课件

动脉血标本采集法
【目的】常用于作血液气体分析。【用物】注射盘内备无菌2ml或5ml 一次性注射器、
肝素、无菌纱布、无菌软木塞。必要时备无菌手套【部位】
①桡动脉穿刺点位于前臂掌侧腕关节上2cm，动脉搏动明显处。 ②股动脉穿刺点见股静脉定位法。
动脉血标本采集法
❖ [步骤] 1.查对医嘱，携用物至病人床旁。 2. 选择穿刺部位。 3. 抽取肝素液湿润整个注射器。 4 .常规消毒。 5. 找准穿刺点，进针见鲜血入针芯，利用动脉压力自
血清全血血浆全血血浆
3.5—5.0ml 2.0--5.0ml 1.8--2.7ml 1.8--2.4ml 3.0—5.0ml
操作方法：
1．查对医嘱，贴标签于标本容器上，携用物至病人床旁。
2．床旁核对，解释采血的目的和配合方法。 3．选择静脉，采血。 4．整理用物，及时送检。
❖ 2.注射器抽血
12小时或24小时尿标本的采集
[目的] 作各种尿生化的检查。 [用物] 容量3000～5000毫升的清洁带盖广口瓶、防腐剂。 [方法] 7am—次日7am 7ｐm—次日7ａm [注意] 集尿瓶应放于阴凉处，并根据检验要求加入防腐剂，
及时送检。
尿培养标本的收集
[目的]
取未被污染的尿液标本作细菌学检查。
注意：１、采样时２、及时送检３、无法咳痰或不合作的病人，
叩击背部、使用集痰器
❖ 痰培养标本
❖ 时间：清晨醒来未进食前 ❖ 方法：先漱口（漱口先用漱口溶液、再用清水）—
数次深呼吸—用力咳、盛于痰盒内—送检
※ 严格无菌操作
❖ 24小时痰标本
在集痰器里加少量清水从清晨醒来未进食前漱口后第一口痰至次日晨未进食前

微生物样本采集的标准化与规范化ppt课件

4）咽用压舌板压舌；用无菌拭子在后咽部、扁桃体和其它感染部位采集标本；怀疑白喉可用无菌拭
子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。肉汤拭子≤2小时，室温；拭子：≤1小时，室温， 1次/天。
咽拭子标本采集
3. 尿
外尿道多寄居有正常菌群，故采集尿液时更应注意无菌操作，常用清洁中段尿作为送检标本。中段尿用于细菌培养，最好用晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般为菌落计数≥105CFU/ml。针对于老年人多重症及卧床患者排尿困难，可相应采用导尿管采集标本。采集和容器为无菌尿瓶，标本量≥1毫升，条件≤2小时，室温，1次/ 天。
3）肛拭子：小心将拭子插入肛门，大约在括约肌之上2-3厘米；轻轻旋转拭子采集肛门隐窝的标本；
要在拭子上明显看到粪便，才能检测腹泻病原体。拭子采集，≤2小时，室温，1次/天。除了长期
卧床、无便（如中毒性痢疾）患者及频繁腹泻患
者，不推荐做拭子常规培养。用于检测淋病奈瑟菌、志贺菌、弯曲菌、B群链球菌的肛携带者以及不能留取粪便标本的患者。可检测霍乱弧菌。
培养瓶消毒程序：
用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体．然后注入血液。
血培养标本采集流程需氧和厌氧血培养瓶
采集次数
急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次；急性感染性心内膜炎从不同部位抽血3次，每次
10. 褥疮
褥疮拭子培养的临床意义不大。应选择供活检组织或注射器吸出物。以无菌盐水清洗褥疮表面；如不做活检，用力以拭子抹取褥疮基底部；将拭子置入肉汤培养基中。≤2小时，室温，1次/天/来源。
参考文献
汪复张婴元吴菊芳等，实用抗感染治疗学，北京：人民卫生出版社，2004，24 ~33.

留取细菌培养标本的要求

留取细菌培养标本的要求[留取细菌培养标本的要求]正确采集细菌标本进行细菌学检查，是正确检验病人细菌感染的关键，因此留取细菌检验标本应注意以下几点：1.如何采集血液标本?血液标本应在病人发热1～2日或发热高峰采集培养为宜。

此时阳性率高。

采集时应以无菌手续由静脉取血5～10ml，立即注入适当的液体增菌培养瓶内，并迅速轻摇，使充分混匀，以防凝固，并有利于细菌生长。

作厌氧菌培养时，抽血后应立即接种厌氧培养基中，避免接触空气，并尽快送往细菌室放入温箱，避免温度对细菌生长不利。

另外磺胺类药物和抗生素可影响细菌检出的结果，因此采集标本应力争在抗菌药物治疗之前，否则应提醒细菌室，选用可以中和抗生素的培养基，这样血液中残留的抗生素被中和掉，有利于细菌生长，以便准确地检测出种类。

2．脓及创伤感染标本的留取。

(1)应首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，再采集标本，以免影响检验结果。

(2)一般用棉拭子采取脓液及病灶的深部的分泌物，瘘管也可以无菌手续采取组织放入无菌试管内送检。

(3)脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可在切开排脓时，以无菌棉拭子采取，也可以将沾有脓汁的最内层敷料放人无菌平皿中送检。

(4)厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。

采集和运送标本是否合格，对厌氧培养是否成功至关重要，特别要注意两点：①避免正常菌群所污染；②由采集至接种前尽量避免接触空气。

标本采取完毕应立即送往细菌室检测。

如一时来不及送，应在室温内作暂短保存，一般认为不要冷藏，因冷藏对某些细菌有害，而且在低温时氧的溶解度较高。

3．痰液标本的留取。

(1)痰液标本的采集以清晨为好，因此时痰量多，含菌量大。

标本收集前，病人最好用清水漱口数次，除去口腔内大部分杂菌。

然后用力自气管深部咳出痰液，吐人无菌器皿内，及时送检。

咳痰时应尽量防止唾液及鼻咽部的分泌物混入，以减少污染。

(2)若病人痰量较少，需要检查结核菌时，则应收集24小时痰液，以提高阳性率。

(3)支气管分泌物内含的细菌常能正确地反映出下呼吸道中的病理变化，标本的采集应由专科医生利用支气管镜直接从患者支气管内采取。

完整微生物标本的正确采集运送ppt课件

︕
极易由表皮葡萄球菌造成污染
标本采集步骤
血培养标本的运送要求和拒收标准
采血量
• 成年人采血量为10～20ml, 婴幼儿为1～2ml，儿童3～5ml
血液标本与培养基之比1:5 -1:10为宜
成人血液中含有的菌量 <=10cfu/ml 儿童血液中含有的菌量 100～1000cfu/ml
• 需氧瓶和厌氧瓶
– 对常规血培养，建议采需氧和厌氧的一套血培养瓶 – 当采血量不能满足推荐的血量时，需氧培养优先
先注入哪个瓶？
影响阳性标本检测的因素
绝对需氧菌
苛养菌？
生长因子X，V 维生素B6，K3
1.细菌
兼性厌氧菌微需氧菌绝对厌氧菌
影响阳性标本检测的因素
高？
２. 血中细菌的浓度
低？ - 成人：血中细菌1～30 CFU/ml - 儿童：血中细菌高于成人（100～1000 CFU/ml或更高）
为何要多次采血？
• 血循环中的细菌有“暂时性”、“持续性” • 一过性的菌血症，细菌仅在外周血中持续数秒 • 共生菌、复数菌 • 提高检出率、减少漏检，判断病原
采血部位
• 多次采血时，应在不同部位进行消毒剂的作用时间 • 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本
避免由插管或导管取标本
4. 标本的采集次数和采集量
采血量与检出率的关系
每增加 1 毫升血 = 增加 3% 的敏感度（由0.6%至4.7%)
每天1、2、或3次血培养对敏感度的影响
100% 95% 90% 85% 80% 75% 70% 1 2 3
96% 89%
99%
所以一般要求血培养一天做3次
血培养的阳性检出率低原因：

标本的正确采集ppt课件

术采集尿液。
18
肾盂尿采集法
• 确定bacteriuria(菌尿)是否来自肾脏，可通过膀胱镜，输尿管插管采集左、右肾盂尿。
19
膀胱穿刺术
• 采用耻骨上膀胱穿刺术取尿 • 一般用于anaerobe培养，故在取得尿液后，
针头插于无菌橡皮塞上立即送检 • 一般应用于新生儿、幼儿以及中段尿培养
阴性又怀疑泌尿系感染的患者。
各种标本的留取方法
1
标本类型
• 血液 • 尿液 • 粪便 • 痰及上呼吸道标本 • 脑脊液 • 浆膜腔积液 • 胆汁 • 脓性分泌物
2
血液标本
3
采血指征
患者出现一下体征时可作为采血的重要指征：
• 发热（≧ 38 ℃ ）或低温（≦ 36 ℃ ），寒战 • 白细胞增多（计数大于10，000×109/L,特别有“核左
20
便标本
21
临床问题
• 人体肠道中的细菌种类和数量繁多，健康
人肠道内常见细菌有无芽孢厌氧杆菌（如拟杆菌等）、大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、粪产碱杆菌、枯草杆菌、棒状杆菌、葡萄球菌、肠球菌及酵母菌、念珠菌属等，这些细菌在肠腔内通常是不致病的。引起腹泻的病原菌有致病性大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属、爱德华菌属、弧菌属、弯曲菌属、厌氧芽孢杆菌属等。
刺向外以1.5cm-2cm直径画圈进行消毒 • 70%酒精脱碘（对碘过敏的患者，用70%酒精
消毒60秒，带酒精挥发干燥后采血）
5
培养瓶消毒程序
• 用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60秒 • 用无菌纱布或棉签清除橡皮塞表面酒精，然
后把血液注入培养瓶。
6
静脉穿刺和培养瓶接种程序
• 在穿刺前或穿刺期间，防止静脉滑动，带无菌乳胶手套固定静脉，如行第二次穿刺，应换针头。

环境卫生学监测及标本采集方法 ppt课件

计算公式：菌落数/m3 ＝
50000N AT
A＝平板面积（C㎡） T＝平板暴露于空气的时间（min） N＝平均菌落数
3、物体表面的采样
采样时间：根据采样目的选择采样时间，如进行常规物体表面监测，选择消毒处理后4小时内进行采样，若是暴发流行时的环境微生物学监测则尽可能对未处理的现场进行采样。
计算公式：菌落数/ C㎡＝
平均菌落数×稀释倍数采样面积×0.2
4、透析液微生物监测
检测方法：用无菌吸管吸取透析液进出水各2～3ml，放入无菌试管，检测时可视透析液污染程度分别取原液或10倍稀释液0.5ml放入2个灭菌平皿内，45 ℃ ～48 ℃的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，将平板置37 ℃培养24小时，观察结果。
硫代硫酸钠（0.1%～0.5%）
硫代硫酸钠（0.1%～1.0%）
吐温－80（0.5%～3.0%）卵磷脂（0.3%）硫代硫酸钠（0.1%～0.5%）亚硫酸钠（0.1%～0.5%）
亚硫酸钠（0.1%～0.5%）；卵磷脂（0.1%～0.3%）硫代硫酸钠（0.1%）；半胱氨脂（0.1%）
吐温－80（1%～10%）；卵磷脂（0.1%～0.3%）
对于门把手，金属，玻璃等曲面小型物体则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样，敷料，卫生纸等一次性物品采样时，用无菌法取样品5g，放入装有10ml灭菌生理盐打80次（或1分钟） 2）用灭菌吸管吸取0.2ml于营养琼脂平皿中，然后用无菌L棒涂在整个平皿表面，置36°C温箱24小时观察结果。
细菌总数/ml＝2个平板上的菌落总数×稀释倍数
评价标准：进水≤200cfu/ml 出水≤2000cfu/ml
5、使用中消毒剂监测

各种细菌培养标本留取要求(杨娟)

当怀疑血流感染或脓毒症时时机部位采血量其他外周静脉肘静脉怀疑细菌性心内膜炎除外成人一般810ml婴幼儿15ml不宜静脉导管或静脉留置口取血成人至少两套血一套血包括需氧与厌氧婴幼儿只需做需氧培养室温保存即可不可放入冰箱保接受抗生素前若导管设施取血要留初段血同时静脉取血对比采集23套有助于污染的判断在一小时内送检已用抗菌药物在下次用药前采血多次采血应在不同血管采血量不足时应保75酒精消毒培养瓶橡皮塞不宜在静滴抗菌药物肢体处采血痰培养sputumculture在抗生素应用前采集痰标本
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尿培养（ Urine Culture ）
应在用药前或停药5天后留取标本以晨起第一次尿为宜,使尿液在膀胱内停留6-8h
以上(给细菌足够的繁殖时间)。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。取中段尿20-30ml；肥皂清洗女性的外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗；直接导尿可减轻污染留置尿管者，消毒尿道口处的导尿管壁，用细针斜穿管壁抽吸尿液做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。采集标本后应立即送检，否则可存于4℃冰箱但不可超过六小时
各种细菌培养标本的留取要求
杨娟
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细菌培养(Bacterial Culture)
细菌培养是指用人工方法使细菌生长繁殖的技术，将其接种于培养基上，使其生长繁殖，用于研究、鉴定和应用，一般细菌可在有氧的条件下，37摄氏度中放18-24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境下2-3天后生长。个别细菌如结核菌需培养1个月之久。
物治疗之前，或在停止污染菌，去除旧的分泌物，引流的的方法
使用抗菌药物之后2 ～用灭菌拭子采集病灶深部采样，应在用
3d采集标本。
或边缘的标本分泌物，也药前采集

细菌学检验ppt课件

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二、染色标本
（一）常用染料 1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等 2．酸性染料：有伊红、刚果红等 3．复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料有
瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等；荧光染料有荧光标记的抗体
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革兰染色（gram stain）方法：
（二）常用的染色方法
1、结晶紫初染
1 min
2、卢戈氏碘液媒染 1 min
革兰阳性球菌
3、95％酒精脱色 30sec～1 min
4、稀释石炭酸复红复染 1 min
原理：
G+等电点低，带正电荷的碱性燃料作色牢固
G+细胞壁肽聚糖层多，G-细胞壁脂质含量高
G+含有多量核糖核酸镁盐与结晶紫、碘结合成大分子复合物
革兰阴性杆菌
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(一)培养基的组成成分
1．营养物质蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、无机盐类、鸡蛋和动物血清生长因子
2．凝固物质琼脂、明胶、卵白
3．抑制剂和指示剂胆盐、蔷薇酸等，酚红、中性红、溴甲酚紫等
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（二）培养基种类
1．基础培养基（based medium） 2．营养培养基（nutrient medium） 3．鉴别培养基（differential medium） 4．选择培养基（selective medium） 5．特殊培养基（special medium）
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1．基础培养基（based medium）
含有大所属细菌生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤（broth），主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。用于培养一般细菌