菌落总数不确定度评定方案

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食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、实验目的1.了解细菌在食品中的分布情况，掌握食品中菌落总数的测定方法；2.学习不确定度分析的基本原理和计算方法。

二、实验原理菌落总数是一个评估食品卫生状况的指标，可通过细菌在富养基上形成的可见菌落数来间接反映食品中细菌的总数。

菌落总数的测定方法主要包括表面菌落数和悬浮菌落数两种。

1.表面菌落数测定将待测食品取适量均匀涂布在含有富养基的琼脂平板上，经过一段时间后，培养基上出现的可见菌落即为表面菌落，通过计算菌落的数量可以得到菌落总数的测定结果。

2.悬浮菌落数测定将待测食品样品进行均质化处理，然后以一定比例取样，将取样液经过一系列稀释操作后，滴加在琼脂平板上，在适宜条件下进行培养，计算悬浮液中的菌落数量，以此推算原液中的菌落总数。

实验中使用的琼脂平板是一种可与菌落直接接触的透明胶状物质，其中含有滋养菌繁殖所需的成分，利于菌落的生长。

三、实验步骤1.取适量待测食品样品，进行均质化处理。

2.取一定量的琼脂平板，倒置于平顶培养皿中。

3.将待测食品样品均匀涂布在琼脂平板上，覆盖培养皿。

4.将培养皿以适当角度倒置，放入恒温箱中，在适宜温度下进行培养。

5.培养一段时间后，取出培养皿，观察并计算菌落总数。

四、实验注意事项1.操作过程中要注意最小化空气扰动和污染，避免细菌交叉感染。

2.在涂布琼脂平板时要注意均匀性，以避免过度或不足的涂布导致结果偏差。

3.培养过程中要控制好温度和时间，以保证菌落生长的适宜条件。

五、不确定度分析不确定度是指测量结果与所测量值的真实值之间的差异。

在菌落总数的测定中，存在多种不确定因素，如操作误差、环境条件、样品质量等。

进行不确定度分析是保证实验结果准确性的重要步骤。

不确定度的计算可以采用均匀型高斯不确定度扩展法。

首先根据实验数据计算菌落总数的平均值和标准偏差，然后根据高斯分布的原理，计算95%的置信区间。

通过比较置信区间和数据范围，评估实验结果的可信度。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中的微生物污染是影响食品安全的重要因素之一。

为了保障食品的质量和安全，需要对食品进行微生物指标的测定。

食品中菌落总数的测定是最常见的指标之一。

本文将介绍食品中菌落总数的测定和不确定度分析。

二、方法1. 实验材料和仪器（1）实验材料：待测食品样品、平板计数培养基、无菌培养皿、无菌移液器、无菌培养基平板。

（2）实验仪器：恒温培养箱、计数板。

2. 测定步骤（1）将待测食品样品进行消毒处理，常用的消毒方法有热处理、酸碱处理等。

（2）准备培养基：将平板计数培养基加热至溶解，然后冷却至约45℃。

（3）将样品取约1g加入到无菌培养皿中。

（4）将培养基翻匀到无菌培养皿中，使其覆盖整个培养皿。

（5）将培养皿倒置放入恒温培养箱中，以适当的温度和时间进行培养。

（6）取出培养皿，使用计数板进行菌落计数。

三、结果与讨论1. 结果分析通过菌落计数，可以得到食品中菌落总数的数值。

通常情况下，食品中菌落总数应该符合国家标准或行业标准的规定。

2. 不确定度分析（1）实验误差：实验操作中的误差包括称量误差、计数误差等。

（2）装载量误差：由于不同的操作人员在装载培养皿过程中的个体差异，导致结果的误差。

（3）样品取样误差：由于样品取样的位置不同，导致结果的误差。

（4）环境误差：实验环境的温度、湿度等因素对结果会产生一定影响。

根据以上误差来源，可以进行不确定度的计算和分析。

常用的不确定度计算方法有合成不确定度法和扩展不确定度法。

四、结论通过菌落计数技术，可以对食品中的菌落总数进行测定。

在测定过程中，需要注意控制实验误差，并分析不确定度以评估结果的可靠性。

五、参考文献。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析为了确保食品安全和卫生，必须对食品中的菌落总数进行测定，并进行不确定度的分析。

食品中的菌落总数是指在特定条件下，通过培养方法检测出的食品中的微生物菌落数量。

食品中菌落总数的测定方法通常采用平板计数法。

该方法主要包括以下步骤：1.准备培养基：选择适宜的培养基，如营养琼脂平板培养基。

将培养基加热溶解，然后冷却至约 45-50℃。

2.样品制备：按照一定比例将食品样品加入到培养基中，使用均匀撒布法或稀释法将菌液平铺在培养基表面。

3.培养：将制备好的培养基进行培养。

培养条件包括培养温度、时间和湿度等，根据食品样品的特性和微生物的生长特点进行合理设置。

4.统计：在菌落出现后，使用显微镜和计数器进行菌落的计数。

根据计数的结果和稀释倍数，计算出食品中的菌落总数。

测定菌落总数时，不确定度的分析是非常重要的。

不确定度是指对测量结果的估计误差。

菌落总数测定的不确定度分析主要包括以下几个方面：1.操作误差：操作人员在样品制备和培养过程中的误差。

可以通过重复测量多次来评估操作误差。

2.测量误差：使用显微镜和计数器进行菌落计数时的误差。

可以通过重复计数多次来评估测量误差。

3.稀释误差：使用稀释法进行样品制备时的误差。

可以通过重复制备多次进行评估。

4.环境误差：温度、湿度和空气质量等环境因素对菌落生长的影响。

可以通过控制环境条件和进行平行实验来评估环境误差。

评估不确定度后，可以使用统计方法来进行分析。

常用的统计方法包括平均数、标准差、方差和置信区间等。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析是确保食品安全的重要工作。

通过合理的测定方法和不确定度评估，可以提高菌落总数检测的准确性和可靠性。

食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定

食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定依据JJF1059－1999《测量不确定度评定与表示》、CNAL/AG06《测量不确定度政策实施指南》和CNAL/AR11《测量不确定度政策》分析一、测量方法按照国家标准GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的检测程序进行。

检测过程为：1）以无菌操作将检样25g（mL）剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其它稀释液灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做出1：10的均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后，最好置均置器中以8000r/min～10000r/min的速度处理1min，做出1：10的均匀稀释液。

2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其它稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管，混合均匀，做出1：100的稀释液。

3）另取1mL灭菌吸管，按上条操作方法，做10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL灭菌吸管。

4）根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2个～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做两个培养皿。

5）稀释液移入培养皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基（可放置于46℃±1℃水浴保温）注入培养皿约15mL，并转动培养皿使混合均匀。

同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液灭菌培养皿内作空白对照。

6）待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48h±2h。

7）作平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。

在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

8）选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。

一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数是指在特定条件下，通过培养基培养和统计法，对食品中细菌和真菌等微生物菌落数的测定。

食品中菌落总数是评价食品卫生质量的重要指标之一，可以反映食品是否受到污染、保存条件是否良好等情况。

对食品中菌落总数进行准确测定和不确定度分析，对于食品卫生和质量控制至关重要。

二、食品中菌落总数的测定方法食品中菌落总数的测定方法通常采用菲尔氏杯平板法和薄膜法。

菲尔氏杯平板法是将食品样品稀释后均匀铺在富含寒天的琼脂培养基上，培养并统计菌落数；薄膜法是将食品样品均匀涂抹在琼脂培养基上，培养并统计菌落数。

三、食品中菌落总数的不确定度分析1. 采样不确定度：食品中菌落总数的测定首先要进行食品样品的采样和样品的制备，采样过程中可能会存在采样不均匀、采样器具的精密度等因素，引入采样不确定度。

2. 复现性不确定度：食品中菌落总数的测定通常需要进行多次重复测定，由于操作者、环境等因素的影响，可能会出现不一致的结果，引入复现性不确定度。

3. 实验条件不确定度：食品中菌落总数的测定受到实验条件的影响，如温度、湿度等条件会对微生物生长产生影响，引入实验条件不确定度。

4. 测量设备不确定度：食品中菌落总数的测定需要借助于培养箱、平板计数器等设备，设备的准确度和精度会影响测定结果，引入设备不确定度。

四、食品中菌落总数的不确定度评定食品中菌落总数的不确定度评定需要考虑上述不确定度因素的影响，并采用合适的方法进行计算评定。

不确定度评定的目的是为了确定测定结果的可靠性和准确性，提高测定结果的可信度。

1. 不确定度计算方法食品中菌落总数的不确定度可以采用GUM不确定度评定方法，通过不确定度传递法和不确定度组分法计算总的不确定度。

在实际计算中，需要考虑到各种不确定度来源的具体数值和权重，综合计算得出总的不确定度值。

2. 不确定度控制方法为了减小不确定度的影响，可以采取以下控制方法：（1）采样不确定度的控制：采用合适的采样方法和器具，确保样品的均匀性和代表性；（2）复现性不确定度的控制：严格控制实验条件和培养操作流程，尽量减小操作者和环境的影响；（3）实验条件不确定度的控制：控制实验条件的稳定性和准确性，进行实验前后的环境监测和校准；（4）测量设备不确定度的控制：对测量设备进行定期维护和校准，确保设备的准确度和精度。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析1. 引言1.1 研究背景食品中菌落总数的测定和不确定度分析是食品质量安全管理中重要的内容。

菌落总数是指食品中菌落形成的总数量，是评价食品卫生质量的一个重要指标。

菌落总数的测定可以反映食品的卫生状况和是否受到了细菌的污染。

在食品加工和保存过程中，细菌的增殖和污染是不可避免的，因此及时准确地测定菌落总数对保障食品安全至关重要。

随着人们生活水平的提高，对食品安全的关注度也越来越高，食品生产企业和监管部门对食品中菌落总数的测定更加重视。

开展菌落总数的测定和不确定度分析研究具有重要的理论和实践意义。

通过深入研究测定方法和不确定度分析方法，可以为食品行业的食品质量检测提供科学依据，提高食品安全管理水平。

对实验步骤、结果分析和讨论的详细研究也有利于进一步完善食品安全监测体系，保障人民群众的身体健康。

【研究背景】部分到此结束。

1.2 研究目的本研究的目的是通过对食品中菌落总数的测定和不确定度分析，探讨食品卫生安全的相关问题。

菌落总数是衡量食品中微生物污染程度的重要指标，对食品的质量和安全具有重要意义。

目前，随着人们对食品安全的要求越来越高，对菌落总数的准确测定和不确定度分析成为食品行业的一项重要工作。

本研究旨在探讨不同测定方法和不确定度分析方法对菌落总数测定结果的影响，为提高食品质量和保障食品安全提供科学依据。

通过本研究，我们希望进一步加深对食品中微生物污染的认识，为食品行业的监管和管理提供参考依据，促进食品行业的健康发展和消费者的健康权益保障。

通过本研究，我们也希望能够为食品安全领域的研究工作提供新的思路和方法，为食品安全的提升和保障做出贡献。

2. 正文2.1 菌落总数的测定方法菌落总数的测定方法是食品微生物学中非常重要的一个指标，通过菌落总数的测定可以评估食品是否受到微生物污染，从而判断食品的卫生质量和安全性。

以下是一些常用的菌落总数测定方法：1.平板计数法：将样品在适当的培养基上平铺均匀，经过一定的培养时间后，用放大镜或显微镜观察样品上的菌落，再进行计数，以确定菌落总数。

生活饮用水菌落总数检验中不确度的评定

生活饮用水菌落总数检验中不确度的评定1、测试原理1.1方法：依据GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》的方法进行检验。

1.2过程：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋转平皿，使水样与培养基充分混匀。

每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36℃±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数，即为水样1mL中的菌落总数。

进行菌落计数时，选择菌落数在30～300稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数作为检测结果。

2、建立数学模型设菌落总数为A，试验结果为X，则A=X CFU/mL3、不确定度来源分析主要为：重复性（检验环境、培养时间、培养温度、样品的均匀性、取样的重复性、人员计数、数值修约）、培养条件（培养时间和湿度的允差）、取样（稀释体积和取样体积）、仪器与试剂（吸管和培养基）、样品的保存条件（保存温度和保存时间）等，采用统计学的方法（A 类）评定测量不确定度。

4、不确度定评定举例：取同一批次的生活饮用水20个样品，由实验室内不同人员在同一时间段内按GB/T5750.12-2006进行检测结果见表1序号测试结果取对数结果均值残差平方和x1 x21 210220 2.3222 2.3424 2.3323 0.0002042 241231 2.3820 2.3636 2.3728 0.0001693 243198 2.3856 2.2967 2.3411 0.0039554 200225 2.3010 2.3522 2.3266 0.0013085 240235 2.3802 2.3711 2.3756 0.00004186 260243 2.4150 2.3856 2.4003 0.0004317 230241 2.3617 2.3820 2.3719 0.0002068 220235 2.3424 2.3711 2.3567 0.000419 215231 2.3324 2.3636 2.3480 0.00048610 196227 2.2923 2.3560 2.3241 0.00203311 234261 2.3692 2.4166 2.3929 0.00112512 251235 2.3997 2.3711 2.3854 0.00040913 225215 2.3522 2.3324 2.3423 0.00019514 234209 2.3692 2.3201 2.3447 0.00120415 213215 2.3284 2.3324 2.3304 0.0000082416 251262 2.3997 2.4183 2.4090 0.00017317 221201 2.3444 2.3032 2.3238 0.00084918 226231 2.3541 2.3636 2.3589 0.000045219 243261 2.3856 2.4166 2.4011 0.00048220 262236 2.4183 2.3729 2.3956 0.00103合计0.0147655、结果报告从检测结果可知，由于数据的发散性较大，因此对数据取对数后，计算出样本检验结果对数值的均值和残差，根据贝塞尔公式，可计算出检测结果对数值标准偏差的合并样本标准差，如下：S P===0.02717总体标准不确定度为：===0.0192扩展不确定度为：U=ku C取置信水平P=95%,V=20查t分布表得：t95(20)=2.086故扩展不确定度U=2.086×0.0192=0.040注：当检验结果以2次测量对数值的平均值表示时，其取值区间分布于±0.040之间。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品安全是人们关注的重点问题之一，而食品中的微生物污染更是引起广泛关注的话题。

菌落总数是一种常见的微生物指标，用于反映食品中细菌、酵母菌和霉菌的数量和品质，是评价食品卫生质量的重要指标之一。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析显得格外重要。

二、菌落总数的测定方法菌落总数的测定方法一般采用霉菌总数计数法或者菌落总数计数法。

下面以菌落总数计数法为例，介绍菌落总数的测定方法。

1. 样品制备首先需要准备好待测样品，这里以蔬菜为例。

将蔬菜样品洗净并切碎，然后取适量样品加入适量生理盐水中，进行样品的制备。

2. 稀释根据样品的预期菌落总数选择适宜的稀释倍数，将样品进行适当的稀释，以便于后续操作。

3. 菌落计数培养基将稀释后的样品平铺在含有琼脂的培养基上，然后放置在适宜的温度和湿度条件下进行培养，产生菌落。

4. 菌落总数的计数培养一定时间后，观察菌落的形态，进行计数并计算出样品的菌落总数。

三、菌落总数的不确定度分析不确定度是指在一定测量条件下，由于一系列测量误差和环境条件等因素引起的测量结果的不确定性。

菌落总数的测定同样受到不确定度的影响，因此需要进行不确定度分析。

1. 实验误差在菌落总数的测定中，包括样品制备、稀释、计数等环节都存在测量误差。

样品制备过程中的称量误差，培养基制备过程中的体积误差等都会引起测定结果的不确定性。

2. 环境条件菌落总数的测定过程中，温度、湿度、光照等环境条件的变化都会对测定结果产生影响，因此需要对这些因素进行控制和修正。

四、不确定度的计算菌落总数的不确定度可以通过以下步骤进行计算：1. 确定测定方法的不确定度根据实验数据和测定方法的特点，确定测定方法的不确定度。

这个过程需要考虑到实际测定过程中的各种误差和环境因素对测定结果的影响。

2. 计算出测定结果的标准偏差根据测定方法的不确定度和实验数据，可以计算出测定结果的标准偏差，从而确定实验数据的不确定度。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数的测定和不确定度分析是食品卫生检测中的重要一环。

菌落总数是指食品样品中各类菌落的总数，反映了食品样品的卫生质量和微生物状态。

通过对食品中菌落总数的测定和不确定度分析，可以评估食品样品中微生物的数量，并确定分析结果的准确度和可靠性。

二、测定方法食品中菌落总数的测定通常使用平皿计数法。

具体步骤如下：1. 准备样品：取食品样品适量，保持其完整性和天然状态。

2. 消毒处理：将样品进行消毒处理，通常采用酒精灼烧或辐射灭菌等方法，以确保样品中的微生物数量符合测定要求。

3. 取样：采用无菌技术，将样品取适量均匀地涂于含有营养物质的琼脂平板上。

4. 培养：将平板培养基斜放于培养箱中，控制培养环境的温度和湿度，使菌落得以生长。

5. 记录和计数：在培养一定时间后，观察平板上菌落的生长情况，并且根据菌落的形状、颜色、大小等特征进行记录和计数。

6. 计算菌落总数：统计记录的菌落数量，并根据实验过程中相应的计算公式计算出食品中菌落总数。

三、不确定度分析不确定度是对测量结果的可靠性和准确度的度量。

在食品中菌落总数的测定过程中，存在多个可能影响结果的因素，如样品的不均匀性、菌落的形状和大小的主观判断等。

通过不确定度的分析，可以评估测定结果的可靠性，并确保实验数据的准确度。

不确定度的分析可以通过以下步骤进行：1. 确定测定结果的标准偏差：通过进行多次实验测定，计算出测定结果的标准偏差。

标准偏差可以反映出数据的离散程度和测定的精确性。

2. 估计不确定度的类型：根据测定过程中存在的因素和误差来源，估计可能的不确定度类型，如随机误差和系统误差等。

3. 计算不确定度的组成：根据不确定度类型，分别计算出每个不确定度源的贡献度，并进行数值上的组合和求和。

4. 定量表示不确定度：通过数值表示不确定度的大小，常用表示形式包括标准不确定度和扩展不确定度。

5. 不确定度扩展：在测定过程中，不确定度可能会随着操作过程的复杂性而增加。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中细菌总数的测定和不确定度分析是食品科学与技术领域中的重要研究内容之一。

细菌总数的测定可以帮助我们了解食品的卫生状况，评估食品质量，保障公众的食品安全。

不确定度分析则是用来评估测定结果的可靠性和准确性，帮助我们判断测定结果的可信度。

食品中的细菌是以菌落的形式存在的，所以细菌总数的测定方法一般采用菌落计数的方法。

具体的步骤如下：1. 取样：从食品样品中取出适量的物质，一般是取适量食品，加入适量的生理盐水，通过均匀悬浮。

2. 稀释：将取样得到的悬浮液进行适当的稀释，以保证每个培养皿上的菌落数在可计数的范围内。

一般采用十倍的稀释系列进行稀释。

3. 接种：将稀释好的样品取适量，在无菌条件下倒入培养皿中，均匀涂布在培养基上。

4. 培养：将培养皿放入恒温箱温育，通常为30°C，培养时间一般为24-48小时。

5. 计数：培养完成后，通过裸眼或显微镜观察，根据菌落的形态、大小、颜色等特征进行计数，并将计数结果记录下来。

细菌总数的测定结果一般以CFU/g（菌落形成单位/克）为单位表示。

不确定度分析是对测定结果的评估，主要从随机误差和系统误差两方面进行分析。

随机误差是由于测定过程中的种种因素引起的结果的波动性。

在细菌总数的测定中，随机误差可能包括取样不均匀、稀释误差、接种误差等。

通过重复测定可以减小随机误差，并通过统计方法计算出标准偏差来表示测量结果的稳定性。

系统误差是由于测定方法的固有缺陷引起的结果的偏差。

在细菌总数的测定中，系统误差可能包括培养基的选择和准备、温度和湿度的控制、观察的主观判断等。

通过合理选择和优化测定条件，可以减小系统误差。

菌落总数不确定度

菌落总数不确定度菌落总数不确定度评定食品的质量直接关系到消费者的身体健康,食品中微生物的测量是食品质量优劣的重要卫生指标之一，因此对食品中菌落总数进行测量不确定度的评定非常有必要。

目前《GB 4789.2-2010 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》是食品中菌落总数测定的标准方法。

我们对食品样品营养包进行卫生微生物菌落总数检测后进行不确定度的评定。

1.材料与方法 1.1材料1.1.1 样品：婴幼儿辅食营养包。

1.1.2 培养基：平板计数琼脂培养基。

1．1.3 主要仪器设备：立式高压蒸汽灭菌锅、鼓风电热恒温干燥器、电热恒温培养箱、超净工作台、恒温水浴锅。

1.2.检验方法1.2.1依据《 GB 4789.2-2010 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》进行测定。

1.2.2检验过程：25g 样品+225mL 稀释液，均质→ 10倍系列稀释→选择2-3个适宜的样品匀液，各取1mL 分别加入无菌培养皿内→ 每皿加入15-20mL 平板计数琼脂培养基，混匀→ 培养→ 计数各平板菌落数→ 计算菌落总数1.2.3 建立数学模型：设菌落总数为A ，试验结果为X ，则A=Xcfu/g ，最佳∑===nii x n X A 111.2.4 不确定度来源及分析，见图1：不确定度的因果关系图2.结果与分析2.1试样在称重时天平带来的不确定度本实验中称取样品25.0g ，0.1g 天平的最大允许误差为±0.1g ，可认为服从均匀分布，则其导致的不确定度：u rel （m ）=0.1／﹙25×3﹚=0.002309 2.2 稀释和取样过程中导致的不确定度本实验中计数的稀释度为2个梯度，因此不确定度主要是由250mL 量筒、10mL 和1mL 刻度吸管的容量允许误差，容器和溶液温度与校准时温度不同引起的。

根据JJG196-1990《常用玻璃量器》检定规程规定，20℃时250mL 量筒的允许误差为±2.0mL ，10mL 刻度吸管的允许误差为±0.05mL ，1mL 刻度吸管的允许误差为±0.008mL ，取均匀分布，由容量允许差引入测定温度培养时间培养温度重复性样品均匀性取样重复性V 样品修约V 稀释培养时间允差时间培养温度允差培养条件样品保存条件温度ΔV 稀释稀释体积温度取样体积取样ΔV 样品温度菌落总数的不确定度：①由250mL量筒引入的不确定度：u rel（V1）=2／（225×3）=0.005132②由10mL刻度吸管引入的不确定度：u rel（V2）=0.05／（9×3）=0.003208③由1mL刻度吸管引入的不确定度：u rel（V3）=0.008／（1×3）=0.0046192.3 样品的均匀性引入的不确定度本实验将样品充分混合后随机取样，可认为样品是均匀的，具代表性，由此所致的不确定度可忽略不计。

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指
出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明，故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。

下面是yjbys 小编为大家带来的关于微生物检验中菌落总数的不确定度如
何评定的知识，欢迎阅读。

1 .检验方法
依据GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中要求以无菌操作取检样25 g(ml)剪碎放于含有225 ml 灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中，经振摇或研磨做成1︰10 的均匀稀释样液，按照标准要求制备10 倍系列稀释样品匀液。

根据污染情况的估计，选择2～3 个稀释度，每个稀释度作2 个平皿，每个平皿注入培养
基约15~20 ml，并转动培养皿使混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48 h±2 h。

计数后以同稀释度的各平板平均菌落总数报告。

2. 数学模型
设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X CFU/g(ml)。

3 .计算不确定度
3.1 在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因，而B 类不确定度分量对合成不确定度影响较少。

按GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中方法，同一样品每个稀释度作两个平衡样，因此可以采用合并样本标准差求检测结果的不确定度见表1。

3.2 从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样本标准。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中菌落总数的测定是一种常见的微生物检验方法，用于评估食品的微生物质量和卫生状况。

本文将介绍食品中菌落总数的测定方法以及不确定度分析。

食品中菌落总数的测定方法有几种，例如平板计数法、液体培养法和膜过滤法等。

平板计数法是最常用的方法之一。

该方法的步骤如下：1.准备培养基：选择适当的培养基，如营养琼脂平板培养基或大肠杆菌培养基。

将培养基加热煮沸，使其溶解均匀，然后倒入培养皿中，待其凝固。

2.取样：将要检测的食品样品称取一定重量，加入无菌生理盐水中，然后进行均质处理。

3.制备稀释液：将均质后的食品样品逐渐按一定比例进行稀释，通常选择1:10、1:100的稀释倍数。

4.接种：取适量的稀释液用无菌吸管滴于培养皿上，静置几分钟使液体完全吸收后倒置培养皿，将其置于恒温培养箱中进行培养。

5.计数：在适当的培养时间后，观察培养皿上的菌落形成情况，并根据菌落的形态和数量进行计数。

通常在30-35°C下培养24-48小时。

菌落总数的测定结果通常以菌落单位（CFU/g或 CFU/mL）表示。

根据样品的稀释倍数和计数结果，可以计算出样品中的菌落总数。

不确定度是测量结果的一个重要指标，用于表示测量结果与"真实值"之间的差异。

对于食品中菌落总数的测定，不确定度分析可以帮助确定测量结果的可靠性，并提供测量的可信度。

不确定度的计算通常包括两个方面：随机不确定度和系统不确定度。

随机不确定度是由于随机误差引起的，可以通过重复测量来评估。

系统不确定度是由于系统误差引起的，可以通过校准和其他适当的控制措施来评估。

在食品中菌落总数的测定中，随机不确定度可以通过进行多次独立实验来进行评估。

根据实验数据的离散程度和统计分析方法，可以计算得到菌落总数的随机不确定度。

系统不确定度可以通过进行校准和质量控制措施来评估。

使用已知浓度的菌液进行校准，或在实验中添加附加的质控样品来进行验证。

菌落总数测定结果不确定度评估报告

废水菌落总数测定结果不确定度评估1. 实验前准备1.1 设备：恒温培养箱、无菌吸管10ml（具0.1ml刻度）、微量移液器、无菌锥形瓶、无菌培养皿1.2 培养基及试剂：平板计数琼脂、无菌生理盐水1.3 因浓缩苹果清汁中一般菌落不容易生长，故用废水作为样品检测。

2. 检测依据及步骤2.1依据：GB4789.2—2010《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》2.2步骤：定量吸取废水，制备成15份均匀的检测样品，每份样品做两个平行样。

↓↓↓↓3. 不确定度来源分析检测步骤主要包括样品的吸取、稀释（移液器）、培养、计数、及结果修约等，由于结果发散性较大的特点，在本次实验中，我们只对样品吸取、重复测定结果的不确定度进行量化分析。

3.1 样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度u rel （V ） 3.1.1 吸管体积校准引入的标准不确定度u （V ）在吸取样品的过程中均使用经检定合格的10ml 刻度吸管，其允许误差为±0.05ml ，故10ml 吸管体积校准引起的不确定度按矩形分布（k=3）为： u 1（V ）=305.0=0.029ml则样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度： u rel （V ）=()V V u =10029.0=0.0029ml 3.2 重复测定结果的标准不确定度菌落总数测定结果不确定度评定3.2.1 对测定结果X 1、X 2分别取对数，得到lg X 1和lg X 23.2.2 每一个样品的残差(在重复性条件下得出n 个观测结果X k 与n 次独立观测结果的算术平均值X 的差)平方和：()221lg lg ∑=-i iX X式中：i X lg —每一个样品测定结果的对数值；X lg —每一个样品测定结果对数的平均值。

3.2.3 根据《JJF —1999测量不确定度评定》中4.3,计算15个样品的合并标准偏差： ()=X S lg ()()()X u XX n m m j ni i lg lg lg 11112=--∑∑==式中：m —测定样品总个数，本次实验共15个；n —对每个样品的独立测定次数，本次实验每个样品平行测定两次。

菌落总数不确定度评定方案

污水中菌落总数测定结果的不确定度评定1、引用标准依据GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》的方法。

2、适用范围污水及生活饮用水中菌落总数的测定3、检测方法以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10的稀释液；吸取1：10的稀释液1ml注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：100稀释液；按同法依次制成1：1000、1：10000的稀释液备用；用灭菌吸管取未稀释的水样和2～3个适宜稀释度的水样1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度作2个平皿。

然后在平皿内注入45℃左右营养琼脂约15ml，立即旋摇混匀，同时做营养琼脂空白对照；待琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数；选择菌落数在30～300稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数作为检测结果。

本次实验选取一个水样（已预试验），制备成1：10的稀释液，分别稀释13次，制备13管备用，每管均做两个平行，吸取另一管时需换枪头，测得的结果乘以稀释倍数后再进行分析。

4、建立数学模式y=x5、不确定度来源分析水样菌落总数检验中不确定度的来源有：样品保存条件，包括保存温度和保存时间；试剂，如培养基等；培养条件，包括培养时间的允差和培养湿度的允差；取样，包括稀释体积和取样体积；测量重复性。

样品中菌落总数测定的不确定度主要取决于细菌分布的均匀性，表现为测量的重复性，其他诸多影响因素相对于测量重复性可忽略不计。

因此本实验仅考虑测量重复性引起的标准不确定度。

6、不确定度的评估由于微生物测量结果分散性很大，其最大值与最小值之间可相差到1个数量级，因此不能直接利用测量数据做不确定度评估，而需要对数据做对数处理。

实验编号平皿1 平皿2Si ² x 1j lgx 1j x 2j lgx 2j 1 15360 4.1864 12460 4.0955 0.0041 2 1160 3.0645 1980 3.2967 0.0270 3 2040 3.3096 3220 3.5079 0.0196 4 3760 3.5752 2320 3.3655 0.0220 5 1320 3.1206 1220 3.0864 0.0006 6 2140 3.3304 1070 3.0294 0.0453 7 6760 3.8299 2870 3.4579 0.0692 8 2810 3.4487 4270 3.6304 0.0165 9 12400 4.0934 9780 3.9903 0.0053 10 5790 3.7627 4270 3.6304 0.0087 11 1500 3.1761 6180 3.7910 0.1890 12 1290 3.1106 1480 3.1703 0.0018 13 5290 3.7235 4640 3.6665 0.0016 求和45.731545.71810.4109具体计算过程如下：（1）共测量13个样品，每个样品测量两次。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析在众多食品中，菌落总数的测定是一项十分重要的检测指标。

菌落总数反映了食品中所有微生物的总体繁殖状况，是判断食品质量卫生状况的一个关键指标之一。

本文将介绍菌落总数的测定方法及不确定度分析。

一、菌落总数的测定菌落总数测定是通过色素作用在特定的培养基上，利用细菌中含有的酶将培养基中的营养成分转化为能被色素还原的成分，从而使细菌是否生长出现颜色变化，一般可采用香草醇（VRB）和普通营养琼脂培养基进行培养。

操作步骤如下：1、取适量的样品2、用加了生理盐水的系统棒刮15-20下3、取一部分样品涂抹在样品板上4、将样品板送入恒温培养箱内培养5、观察菌落数，进行计数菌落总数的检测过程中需要注意以下几个方面：1、尽量减少样品损失。

在采取样品的操作中，要保证不损伤食品，亦不能污染。

2、加强卫生及灭菌操作。

培养基及平板必须高温灭菌后再进行保存和运用，否则可能会导致检测失败。

3、根据PCI和RBT等理论可以对样品的检测数据进行进一步分析。

二、不确定度分析不确定度是指在特定条件下，测量值与被测量的真值之间的离差范围。

测量值与真值之间的差异，通常受到两方面因素的影响：1、测量设备的误差2、操作人员的误差由于以上因素的影响，菌落总数测定存在一定的误差，需要根据测定结果进行不确定度分析。

实验中有些误差是可以避免的，但有些误差却是不可避免的，因此必须判断误差的范围和可能的贡献因素。

在测定菌落总数时，菌落形态的不同、菌落大小的不同等也会引起误差，因此需要增加菌落形态的不确定度、菌落大小的不确定度等。

在不确定度分析中，进行正态分布测定时，需要对测量结果进行四个方面的考虑：1、下限和上限2、最小值3、最大值4、均值不确定度分析是一项复杂的研究工作，要根据不同的实验操作和数据结果，进行合理且详细的分析，以确保测量结果的准确性与精度。

同时，要注意在实验操作中采取合适的校正措施，降低误差，提高实验可靠性。

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明，故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。

下面是yjbys店铺为大家带来的关于微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定的知识，欢迎阅读。

1 .检验方法依据 GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中要求以无菌操作取检样25 g(ml)剪碎放于含有225 ml 灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中，经振摇或研磨做成1︰10的均匀稀释样液，按照标准要求制备10倍系列稀释样品匀液。

根据污染情况的估计，选择2～3个稀释度，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入培养基约15~20 ml，并转动培养皿使混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48 h±2 h。

计数后以同稀释度的各平板平均菌落总数报告。

2. 数学模型设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X CFU/g(ml)。

3 .计算不确定度3.1 在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因，而B类不确定度分量对合成不确定度影响较少。

按 GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中方法，同一样品每个稀释度作两个平衡样，因此可以采用合并样本标准差求检测结果的不确定度见表1。

3.2 从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样本标准差，由于数据的散发性较大，计算出的合并样本标准差很大，当样本均值较小时其不确定度则会过大，此时可以对上述数据取对数后，计算出样本检验结果对数值的均值和残差，将中间计算结果见表2。

根据贝赛尔公式，可计算出检测结果对数值的合并样本标准差：取置信水平P=95%，自由度ν=19，查t分布表得：分布于X±0.043之间。

能力验证菌落总数测定结果不确定度评定

能力验证菌落总数测定结果不确定度评定作者：张虹仙来源：《中国食品》 2018年第11期一、材料与方法材料。

（1）样品：奶粉〔（CFAPA-230能力验证样品（菌落总数175）），由大连中实国实检测技术有限公司提供；（2）培养基：平板计数琼脂（规格：500g；批号：3104066），广东环凯微生物科技有限公司生产，所用培养基在有效期内，适用性检查结果符合要求。

（3）主要仪器：GHP-9270电热恒温培养箱、50KB-Ⅲ蒸汽压力灭菌器。

实验方法。

（1）样品溶液制备。

无菌开启西林瓶，立即（1分钟内）加入少量（2ml－4ml）稀释液进行溶解，待溶解后，吸出放入无菌瓶中，反复用余下的稀释液清洗西林瓶内壁，回收清洗液放入上述的无菌瓶中，合计用稀释液40ml。

该40ml液体即为待测原液，即10o。

以无菌吸管吸取25mL待测原液置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶中充分混匀，制成1:10的样品匀液。

（2）样品溶液稀释。

用1mL无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中，混匀，依次制成1:103、1:104、1:105、1:106、1:107的稀释液备用。

在稀释的同时吸取1mL样品匀液于无菌平皿内。

1:104、1:105、1:106的稀释液做10个平皿，其它稀释度做2个平皿。

同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

（3）培养。

在平皿内倾注15mL左右46℃平板计数琼脂培养基，并转动平皿使其混合均匀。

待琼脂凝固后将平板翻转，36℃培养箱内培养48h。

（4）计算菌落总数。

选取菌落数在30CFU-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数进行报告，计算样品中菌落总数。

二、不确定度的分析一是建立数学模型：Y=κX/V。

其中，Y——样品的菌落总数，cfu/ml；κ——稀释倍数；X——某稀释度检测平板上的菌落数，cfu；V——某稀释度下取样体积，ml。

二是不确定度来源分析。

11 例10 废水中菌落总数测量的不确定度评定

废水中菌落总数测量不确定度的评定1．检验方法依据GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验》中的方法，测定废水中的菌落总数。

定量吸取废水，需要时用0.85%无菌生理食盐水稀释n 倍。

用无菌的移液管吸取1mL 稀释液置于无菌的培养皿内，再向培养皿中注入约15mL 培养基，转动培养皿使培养基与试样混合均匀，待培养基凝固后，置于36℃±1℃培养温箱内培养48 h 。

每个试样同时做两个平行试验，计数后取其平均值报告菌落总数。

2．结果计算二次平行检测菌落总数检测结果分别计为12A A 和，废水中的菌落总数A 按下式计算： 12A A A n 2+=⨯ 3．影响因素分析经验表明，样品中菌落总数的检测结果的不确定度主要取决于细菌分布的均匀性，表现为测量的重复性。

虽然在检测中有诸多影响因素，如培养基的组成、稀释倍数、培养温度和时间对测量结果会有一定程度的影响，但只要在规定的条件下培养，上述影响可以忽略不计。

再说，也很难在微生物检测结果和影响因素之间建立确定的函数关系，不能像物理化学测量那样从计量学上进行严密的评估，所以本评定将不讨论上述因素的影响。

4．不确定度的评估通常检测菌落总数时，每个试样仅平行检测两份，取其平均值报告菌落总数。

显然，不能凭两个数据计算标准偏差。

为了利用实验室早先积累的检测数据资源，计算具有较大自由度的重复性标准偏差，TELARC[1]提出了用菌落总数的对数值计算合并样本标准偏差的方法。

倪育才根据TELARC 的实例进行了改写[2]。

在《分析测量不确定度评估指南》[3]的实例中介绍了计算标准化差值标准偏差的方法，计算了数值相差一百多倍的多组观测值的合并样本标准偏差。

本评定参考了该方法，但在计算中用残差代替了差值。

为了与TELARC 的对数值计算法的结果相比较，本报告引用倪育才改写的文章中的原始数据计算标准化残差标准差。

表1列出了15组检测原始数据，以及每组数据的平均值、残差和标准化的残差（残差除以平均值）。