还原糖的测定讲解
食品中还原糖的测定方法
食品中还原糖的测定方法1. 概述还原糖(Reducing sugar)是指具有还原性的碳水化合物,能够还原其他物质。
在食品中,还原糖广泛存在于各种食材中,包括水果、蔬菜、谷物等。
准确测定食品中还原糖的含量对于食品质量的评估和营养分析具有重要意义。
本文将介绍食品中还原糖的测定方法。
2. 基本原理还原糖测定的基本原理是利用还原糖与碱性溶液中的某些金属离子(如铜离子)发生氧化还原反应产生沉淀物的特性。
在碱性条件下,还原糖与铜离子发生氧化反应,将铜离子还原为氧化铜(Cu2O),同时还原糖自身被氧化。
生成的氧化铜沉淀可以通过比色法或电化学法进行测定,从而确定还原糖的含量。
3. 还原糖测定方法3.1 Benedict’s试剂法Benedict’s试剂是一种常用于测定还原糖含量的试剂。
其成分包括硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸三钠。
该方法需要将待测溶液与Benedict’s试剂混合,加热反应一段时间后,观察溶液颜色的变化,通过比色法确定还原糖的含量。
实验步骤:1.准备试样:将待测食品样品加入适量的蒸馏水,搅拌均匀。
2.配制Benedict’s试剂:按照一定比例将硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸三钠溶解在蒸馏水中,得到Benedict’s试剂。
3.反应:将试样加入Benedict’s试剂中,加热反应5分钟。
4.观察:根据溶液颜色的变化,可以初步估计还原糖的含量。
优缺点:•优点:操作简便、成本低廉。
•缺点:适用范围有限,无法测定低浓度还原糖。
3.2 蔗糖氧化法蔗糖氧化法是利用蔗糖与硫酸铜和氯化铜反应生成氧化铜沉淀的特性,间接测定还原糖的含量。
该方法适用于含有蔗糖的食品样品。
实验步骤:1.准备试样:将待测食品样品加入适量的蒸馏水,搅拌均匀。
2.氧化反应:将试样加入含有硫酸铜和氯化铜的试剂中,反应一定时间。
3.沉淀溶解:将反应后的沉淀溶解,并根据氧化铜溶液的颜色进行测定。
4.计算含量:根据溶液颜色的浓度,计算出还原糖的含量。
优缺点:•优点:适用范围广泛,可以测定含有蔗糖的食品样品。
还原糖的检验方法和具体步骤
还原糖的检验方法和具体步骤如下:
1. 检验方法:使用班氏试剂或斐林试剂检测还原糖。
首先观察试剂的颜色变化,然后加入待测样品,将试管放入水浴加热的烧杯中。
2. 具体步骤:
(1)在试管中加入2ml待测样品溶液。
(2)向试管中加入5滴班氏试剂或斐林试剂。
(3)将试管放入水浴加热的烧杯中,观察颜色变化。
如果试管中出现砖红色沉淀或蓝色沉淀,则说明待测样品中含有还原糖。
这是因为班氏试剂或斐林试剂主要用于检测还原性糖,如葡萄糖,而葡萄糖在加热条件下会与组织中的蛋白质生成砖红色沉淀。
此外,斐林试剂还可以与醛基反应生成蓝色沉淀。
需要注意的是,检测还原糖需要待测样品中的还原糖与试剂发生反应,因此需要确保待测样品溶液是新鲜的、未被污染的。
此外,检测过程中需要控制好温度、时间等条件,以确保实验结果的准确性。
还原糖检测的操作步骤
还原糖检测的操作步骤还原糖检测的操作步骤1. 引言还原糖是指具有还原性的单糖和部分还原性的多糖,其检测是一种常用的分析方法,用于确定食品、饮料等样品中的糖含量。
本文将详细介绍还原糖检测的操作步骤,希望能帮助读者更全面地理解和掌握这个过程。
2. 实验所需材料在进行还原糖检测前,我们需要准备以下实验所需材料:- 还原糖检测试剂盒- 待测样品- 蒸馏水- 试管- 移液器- 离心管- 离心机- 恒温水浴器- 显色板3. 操作步骤3.1 样品制备将待测样品称取适量,加入适量的蒸馏水,充分混合均匀。
如需测定饮料或其他高浓度的样品,可以适当稀释,确保待测溶液的浓度在检测范围内。
3.2 样品处理将制备好的样品离心10分钟,以除去悬浮物。
借助移液器,小心地取出上清液转移至试管中。
3.3 加标处理在处理前期,可以加入一定浓度的加标溶液作为内标,以提高结果的准确度和可靠性。
3.4 消解处理将取自样品的上清液放入恒温水浴器中,使其保持在指定温度下。
加入相应的还原糖检测试剂盒中的消解剂,并严格按照试剂盒说明书的操作方法进行消解处理。
消解时间和温度会根据不同的试剂盒和样品要求而有所不同。
3.5 检测操作将消解后的样品均匀摇匀,并按照试剂盒的要求加入相应的试剂,一般是加入试剂A和试剂B。
摇匀后,放入恒温水浴器中反应一段时间。
3.6 显色反应将反应后的溶液转移到显色板上,并将显色板放入离心机中离心。
根据试剂盒的要求进行离心转速和离心时间的设置。
3.7 光度测定将离心后的显色板放入光度计中,选择合适的波长进行测定。
根据试剂盒的说明,可以设定合适的样品数量来进行测定。
3.8 结果分析根据光度计测得的吸光度值,结合试剂盒提供的标准曲线,计算出样品中还原糖的含量。
4. 本文观点和理解作为一种常见的定量分析方法,还原糖检测在食品、医药等领域具有广泛的应用。
在具体操作时,需要严格按照试剂盒的要求进行操作,并注意样品的制备、处理和消解等步骤。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质,通常用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖等在食品和生物样品中的含量。
测定还原糖的方法有很多种,其中包括费林试剂法、硫酸铜比色法、硼酸硫酸铜比色法等。
本文将介绍硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法两种测定还原糖的方法。
硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下:1. 准备样品,将待测样品溶解于适量的水中,得到一定浓度的溶液。
2. 配制硫酸铜溶液,取一定容量的硫酸铜溶液,通常浓度为0.1mol/L。
3. 反应,将样品溶液与硫酸铜溶液混合,加热至沸腾,使得还原糖与硫酸铜发生反应,生成红色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出,待反应结束后,将溶液冷却,沉淀析出。
5. 比色,用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度,根据标准曲线计算出还原糖的含量。
硼酸硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下:1. 准备样品,将待测样品溶解于适量的水中,得到一定浓度的溶液。
2. 配制硼酸硫酸铜试剂,将一定量的硼酸溶液与硫酸铜溶液混合制备硼酸硫酸铜试剂。
3. 反应,将样品溶液与硼酸硫酸铜试剂混合,加热至沸腾,使得还原糖与硫酸铜发生反应,生成蓝色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出,待反应结束后,将溶液冷却,沉淀析出。
5. 比色,用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度,根据标准曲线计算出还原糖的含量。
以上两种方法均是通过还原糖与硫酸铜发生反应生成沉淀,再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在具体操作时,需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制以及仪器的使用等细节,以确保测定结果的准确性和可靠性。
总结,硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法是常用的测定还原糖的方法,通过与硫酸铜发生反应生成沉淀,再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在实际操作中,需要严格按照方法步骤进行操作,以获得准确可靠的测定结果。
还原糖的含量测定
还原糖的含量测定引言还原糖是一类具有还原性的糖类物质,可以通过化学反应还原其他物质。
测定糖的含量对于食品工业和生物化学研究具有重要意义。
本文将介绍一种常用的方法——费林试剂法,用于测定还原糖的含量。
什么是还原糖还原糖是指能够还原氧化剂的糖类物质。
常见的还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
这些糖类物质在一定条件下能够与某些氧化剂反应,将其还原成相应的还原物。
费林试剂法原理费林试剂法是一种常用的测定还原糖含量的方法。
其原理基于还原糖在碱性条件下能够与费林试剂反应生成蓝色产物。
费林试剂是一种含有磷酸钒和磷酸钼的混合物,与还原糖反应后形成蓝色还原物。
实验步骤1.准备样品:将待测的糖溶解在适量的水中,制备出一定浓度的糖溶液。
2.配制费林试剂:将适量的费林试剂与稀硫酸混合,制备出费林试剂溶液。
3.反应过程:将一定量的糖溶液与费林试剂溶液混合,放置在适当的温度下反应一段时间。
4.测定吸光度:使用分光光度计测定反应体系的吸光度,记录下吸光度值。
5.绘制标准曲线:制备一系列已知浓度的糖溶液,重复上述步骤测定吸光度值,绘制出标准曲线。
6.测定未知样品:将待测样品的吸光度值代入标准曲线中,根据吸光度值确定其糖含量。
实验注意事项•实验过程中要严格控制温度和反应时间,以保证实验的准确性和可重复性。
•使用分光光度计时,应注意对比试剂溶液的吸光度值,以消除背景干扰。
•实验前应对仪器进行校准和预热,以确保测量结果的准确性。
结果分析根据实验测得的吸光度值和标准曲线,可以确定待测样品中还原糖的含量。
通过比较不同样品的含量,可以评估不同食品中的糖含量差异,为食品质量控制和营养评估提供依据。
应用领域费林试剂法可以广泛应用于食品工业、生物化学研究等领域。
在食品工业中,测定糖的含量可以帮助评估产品的甜度和质量,指导生产过程的调整。
在生物化学研究中,糖类物质是细胞代谢的重要组成部分,测定糖的含量可以帮助研究人员了解生物体内糖代谢的变化。
结论费林试剂法是一种常用的测定还原糖含量的方法,其原理基于还原糖与费林试剂反应生成蓝色产物。
还原糖的检测研究方法
还原糖的检测研究方法
还原糖的检测研究方法主要包括以下几种:
1. 比色法:将还原糖与金属离子(如铜离子)反应生成有色产物。
该方法常用的还原糖指示剂有费林试剂和巴西林试剂,可以通过比色反应的颜色强度来定量分析还原糖的含量。
2. 电化学法:利用还原糖在电极上发生电化学反应,通过测量电流或电势的变化来定量分析还原糖的含量。
常用的电化学方法包括循环伏安法、方波伏安法和安培法。
3. 高效液相色谱法(HPLC):通过将样品中的还原糖与某种反应试剂或色谱柱进行反应,在一定的条件下,测定生成物的色谱峰面积或峰高值与还原糖的含量成比例关系,以定量分析还原糖的含量。
4. 酶法:利用特定的酶催化还原糖与底物之间的反应,产生可测量的产物。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、葡萄糖去氢酶法和葡萄糖酸化酶法等。
5. 光度法:还原糖在酸性条件下能够与某些试剂发生特定的吸收峰,在特定波长下测量吸光度来定量分析还原糖的含量。
常用的试剂有安东氏试剂和费林试剂。
这些方法在还原糖的检测研究中应用广泛,可以根据具体实验需求选择合适的方
法进行研究。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法
还原糖是一种重要的碳水化合物,广泛存在于植物和动物体内。
它在食品加工中起着重要作用,也是一种重要的营养物质。
因此,
准确测定还原糖的含量对于食品加工和营养评估具有重要意义。
下
面将介绍几种常用的还原糖测定方法。
首先,最常用的还原糖测定方法是费林试剂法。
该方法利用费
林试剂与还原糖发生化学反应,生成可见的蓝色产物,通过比色法
测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
费林试剂法操作简便,结
果准确,广泛应用于食品工业和科研领域。
其次,还原糖的测定方法还包括硫酸铜法。
该方法利用硫酸铜
与还原糖在碱性条件下发生化学反应,产生沉淀物,通过沉淀物的
重量来计算还原糖的含量。
硫酸铜法操作简单,结果准确,适用于
各种类型的食品样品。
此外,还原糖的测定方法还包括酚酞法。
该方法利用酚酞与还
原糖在碱性条件下发生化学反应,产生可见的红色产物,通过比色
法测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
酚酞法操作简便,结果
准确,适用于各种类型的食品样品。
最后,还原糖的测定方法还包括高效液相色谱法。
该方法利用高效液相色谱仪对食品样品中的还原糖进行分离和测定,具有分离效果好、分析速度快、准确度高的优点,适用于各种类型的食品样品。
综上所述,还原糖的测定方法多种多样,各有其特点和适用范围。
在实际应用中,可以根据样品的特点和实验条件选择合适的测定方法,以获得准确的测定结果。
希望本文介绍的内容对您有所帮助。
还原糖的测定方法_国标
还原糖的测定方法(1)食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1) 滴定管(2) 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3) 真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g硫酸铜(CuSO4?5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
4.5碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2,3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2,3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
称取3.3g高锰酸钾,溶于1050 ml水中,缓缓煮沸15min,冷却,于暗处放置两周,用已处理过的玻璃滤锅过滤,贮存于棕色瓶中(注:玻璃滤锅的处理是指玻璃滤锅在同样浓度的高锰酸钾中溶液缓缓煮沸5min)标定:准确称取0.15~0.2克(准至0.001克)草酸钠,放入250ml的锥形瓶内,加80ml水和20ml硫酸溶液(1+4),加热到75~85?,然后以待标定的高锰酸钾溶液滴定,近终点时,保持液温在60--70?,继续滴至溶液所呈现的粉红色保持30秒不消失即为终点,同时作空白。
还原糖测定的方法及原理
还原糖测定的方法及原理糖测定是一种常见的化学分析方法,用于测量食品、饮料、生物样品等中糖类的含量。
常见的糖测定方法包括甘露醇法、硫酸还原法、蒽酮法、硫氰酸法等。
以下将介绍甘露醇法和硫酸还原法的原理及操作步骤。
甘露醇法是一种常用的显色滴定法,用于测量还原性糖(如蔗糖、葡萄糖等)的含量。
其原理基于还原性糖可以将甘露醇溶液中的亚铁离子(Fe3+)还原为二价铁离子(Fe2+),形成有色的络合物。
在滴定过程中,利用硫酸铁铵溶液作为试剂,溶液中亚铁离子的数量与还原性糖的含量成正比。
当滴定到终点时,蓝绿色的亚铁络合物转变为暗蓝色的铁络合物,这时在甘露醇滴定溶液中的还原性糖的含量可通过滴定溶液与甘露醇试剂的滴定体积计算得出。
甘露醇法的操作步骤如下:1. 准备试样:将需要测定的样品称重后溶解至一定浓度。
2. 进行甘露醇标定:称取一定量的甘露醇试剂溶液,通过滴定加入硫酸铁铵试剂,观察滴定溶液颜色的变化,并记录滴定体积。
3. 向甘露醇标定溶液中滴加定量的样品溶液,反应一段时间后再进行甘露醇试剂的滴定。
记录滴定体积。
4. 计算还原性糖的含量:根据甘露醇标定的结果,计算出滴定溶液中还原性糖的含量。
硫酸还原法是测定还原性糖的一种典型方法。
其原理是将还原性糖与稀硫酸反应产生羧酸,然后与石墨烯反应生成有色化合物,通过分光光度计测量其吸光度进而计算出还原性糖的含量。
硫酸还原法的操作步骤如下:1. 准备试样:将需要测定的样品称重后溶于稀硫酸中。
2. 水解反应:将溶有样品的稀硫酸加热,使糖类发生水解反应,生成羧酸。
3. 与石墨烯反应:将水解后的样品溶液与石墨烯混合,加热过程中,羧酸与石墨烯反应生成有色化合物。
该有色化合物对应了溶液中还原性糖的含量。
4. 分光光度计测量:将反应后的样品溶液取出,使用分光光度计测量其吸光度。
利用标准曲线,计算样品溶液中还原性糖的含量。
总结来说,糖测定方法通常基于糖类与某种试剂发生化学反应并产生某种可测量的物质的原理,通过测量产生物的量或者相应的物理参数,即可计算出糖类的含量。
测还原糖的方法
测还原糖的方法
测还原糖的方法:
概述:
还原糖是一种具有重要生化和营养学意义的简单糖类。
测定还原糖的含量在食品工业、医药工业等方面具有广泛的应用。
本文将介绍两种测定还原糖的方法。
方法一:法定含量法
该方法的原理是用铜离子还原剂将还原糖还原至醇,并测定铜离子的减量。
以下是测定步骤:
1.将已知量的样品加入酸性的铜离子还原剂中。
2.在恒温条件下,反应一定时间后,加入甲基橙指示剂,以测出剩余的铜离子量。
3.与标准曲线对比,计算出还原糖的含量。
方法二:显色法
该方法的原理是利用还原糖在碱性条件下能还原苏丹III为苏丹红色的特性。
以下是测定步骤:
1.将已知量的样品与酸性还原剂混合后,在沸水中加热反应。
2.反应结束后,将反应液冷却至室温,并加入苏丹III指示剂。
3.再加入苏丹红色指示剂,根据红色程度读取管理。
4.计算出还原糖的含量。
总结:
以上两种方法各有优缺点。
法定含量法适用于颜色较浅、待测糖分含量较高的样品,而显色法则适用于颜色较深、待测糖分含量较低的样品。
在实际操作中,应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
还原糖的测定讲解
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概述 食品中还原糖的测定 总糖的测定 淀粉的测定 纤维的测定 果胶物质的测定
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1 概述
1.1 碳水化合物分类 1.2 测定方法 1.3 可溶性糖类的提取和澄清
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1.1 碳水化合物分类
(一)定义和分类 碳水化合物统称为糖类,是由碳、氢、氧 三种元素组成的一大类化合物。 糖+蛋白质→糖蛋白 糖+脂肪→糖脂 ① 碳水化合物存在于各种食品的原料中(特别 是植物性原料中)。 ② 作为食品工业的主要原料和辅助材料。
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沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大
一般沸腾时间短,消耗糖液多。反之,消耗糖液少
滴定速度过快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少。 因此,测定时应严格控制上述实验条件,应力求一致。
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GB/T 5009.7—2008《食品中还原糖的测定》 1.直接滴定法 2.高锰酸钾法
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(二)高锰酸钾滴定法
1.原理 将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应, 还原糖将二价铜还原为氧化亚铜, 过滤氧化亚铜沉淀,加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶 解,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐, 用高锰酸钾标准溶液滴定亚铁盐,根据高锰酸钾溶液消耗量 可计算出氧化亚铜的量 再查检索表,得到氧化亚铜量相当的还原糖量,即可计算出 样品中还原糖含量。
乳糖 麦芽糖
淀粉
多糖
纤维素 果胶 无效碳水化合物
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1.2 测定方法
相对密度法
物理法
折光法
旋光法
单糖和低聚糖
化学法
还原糖法(斐林氏法、高锰酸钾法、 铁氰化钾法) 碘量法 缩合反应法
色谱法:纸色谱法、薄层色谱法、
还原糖的含量测定
还原糖的含量测定一、背景介绍糖是人们日常饮食中常见的一种营养物质,但过量摄入糖会导致肥胖、糖尿病等健康问题。
因此,了解食品中糖的含量对于人们合理膳食非常重要。
还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖,如葡萄糖、果糖等,其测定方法较为简便。
二、实验原理还原糖含量测定采用间接法,即先将样品中的多余物质去除,然后将还原糖转化为葡萄糖,并利用酶法或化学法测定葡萄糖含量。
其中,去除多余物质的方法有酸水解法、酶解法和乙醇沉淀法等;将还原糖转化为葡萄糖的方法有硫酸水解法和硝酸钠氧化法等;测定葡萄糖含量的方法有显色滴定法和比色法等。
三、实验步骤1. 样品制备:取适量待测样品,如果汁、奶制品等。
2. 样品预处理:根据样品的特点选择合适的去除多余物质的方法,如果汁可用酸水解法,奶制品可用乙醇沉淀法。
3. 还原糖转化:将经过预处理的样品加入硫酸或硝酸钠溶液中,在加热条件下将还原糖转化为葡萄糖。
4. 葡萄糖含量测定:根据实验需要选择合适的测定方法,如显色滴定法或比色法等。
四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全,避免接触有毒有害物质。
2. 样品预处理和还原糖转化过程要严格控制温度和时间,避免对样品产生影响。
3. 测定葡萄糖含量时要准确称量试剂和标准物质,并按照操作规程进行操作。
4. 实验前应对仪器进行检查和校准,保证实验结果的准确性。
五、实验结果分析通过测定样品中葡萄糖含量可以得到还原糖的含量。
不同食品中还原糖含量不同,其中果汁、甜点等含糖量较高的食品中还原糖含量也相对较高,而蔬菜、豆类等含糖量较低的食品中还原糖含量也相对较低。
通过对不同食品中还原糖含量的测定可以为人们制定合理膳食提供科学依据。
六、实验应用1. 食品生产:测定不同食品中还原糖含量,可以为生产厂家提供产品质量控制和改进方案。
2. 膳食指导:了解不同食品中的还原糖含量,可以帮助人们制定合理的膳食计划,避免过度摄入糖分。
3. 学术研究:测定不同食品中的还原糖含量,可以为相关学科领域提供数据支持。
直接测定还原糖含量
还原糖是指能够通过氧化邻苯二甲酸二钠(葡萄糖试剂)发生酯醇降解,被氧化还原成糖类的糖类化合物。
这类糖类中主要有葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖等。
直接测定还原糖含量是一种非常常用的实验技术,它可以帮助我们准确地测量物质中还原糖的含量。
一、直接测定还原糖含量的原理还原糖的测定采用的是葡萄糖试剂法,主要原理是将溶液中的葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖等还原糖类化合物进行氧化降解,释放出碳酸二钠,形成铵态碳酸,使电导率增加,以电导率的变化来测定还原糖的含量。
二、直接测定还原糖含量的方法(一)采集样品我们需要从溶液中取出一定数量的样品,用于分析其中还原糖的含量。
样品采集要求精确,以免影响测定结果的准确性。
(二)加入葡萄糖试剂在样品中加入葡萄糖试剂,即可开始测定还原糖含量。
葡萄糖试剂是一种含有氧化邻苯二甲酸二钠(葡萄糖试剂)的溶液,可以将溶液中的还原糖类化合物进行氧化降解,释放出碳酸二钠,形成铵态碳酸,使电导率增加。
(三)测量电导率将加有葡萄糖试剂的样品放入电导率仪中,测量电导率,以此来计算还原糖含量。
由于电导率随着还原糖含量的增加而增加,因此电导率可以用来指示还原糖含量。
(四)计算还原糖含量根据电导率的变化,利用关系式来计算出物质中的还原糖含量。
这一步需要有较好的实验技能,以确保测定结果的准确性。
三、直接测定还原糖含量的应用直接测定还原糖含量的方法在实验室和工业中都有着广泛的应用。
例如,在酿酒行业中,直接测定还原糖含量可以帮助调整酿酒过程中的参数,以保证酒体中的还原糖含量;在食品行业中,直接测定还原糖含量可以检测食品的糖度,从而判断食品的口感;在药品行业中,直接测定还原糖含量可以帮助我们更好地控制药物的质量。
四、总结直接测定还原糖含量是一种非常常用的实验技术,主要采用葡萄糖试剂法,即将溶液中的还原糖类化合物进行氧化降解,释放出碳酸二钠,形成铵态碳酸,使电导率增加,以电导率的变化来测定还原糖的含量。
它具有准确快速、操作便捷等优点,在工业、实验室和医学等领域都有着广泛的应用。
还原糖测定的原理
还原糖测定的原理还原糖是指能够还原其他物质的糖类化合物,如葡萄糖、果糖等。
在食品加工、医药生产等领域,对还原糖含量进行测定具有重要意义。
本文将介绍还原糖测定的原理及其常用方法。
一、原理。
还原糖的测定原理是利用还原糖与氧化剂发生反应,氧化剂被还原为相应的还原产物,而还原糖则被氧化为酸。
常用的氧化剂有硝酸铜、费林试剂等。
以硝酸铜法为例,其反应方程式为:C6H12O6 + 2Cu2+ + 4OH→ Cu2O↓ + H2O + 2CH3COOH。
根据反应中生成的氧化铜沉淀的重量,可以计算出还原糖的含量。
二、硝酸铜法测定。
1. 样品处理,将待测样品加入硝酸铜溶液中,加热至沸腾,使还原糖与硝酸铜反应生成氧化铜沉淀。
2. 沉淀收集,将生成的氧化铜沉淀过滤、洗涤、干燥至恒定质量。
3. 计算含量,根据氧化铜沉淀的质量,通过计算公式计算出还原糖的含量。
三、费林试剂法测定。
费林试剂法是利用费林试剂与还原糖在酸性条件下发生显色反应,根据显色深浅来测定还原糖的含量。
其原理是还原糖在酸性条件下与费林试剂反应生成蓝色产物,显色深浅与还原糖的含量成正比。
四、光度法测定。
光度法是利用还原糖与氧化剂反应生成显色产物,通过测定产物的吸光度来测定还原糖的含量。
常用的显色产物有甲基橙、菲罗啉等,通过比色计或分光光度计测定吸光度,再根据标准曲线计算出还原糖的含量。
五、总结。
还原糖的测定方法多种多样,选择合适的方法需要根据样品特性、实验条件等因素综合考虑。
无论采用何种方法,都需要严格控制实验条件,准确操作,确保测定结果的准确性和可靠性。
通过本文对还原糖测定原理及常用方法的介绍,相信读者对还原糖的测定有了更深入的了解,能够在实际操作中更加灵活、准确地选择合适的测定方法,为相关领域的研究和生产提供有力支持。
《还原糖的测定方法_国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖是利用还原性固体物质与硫酸酸作用而形成的糖类物质,是各种天然糖和蔗糖等碳水化合物的主要成分。
还原糖的测定方法主要包括酚酞法和锁紫法两种。
一、酚酞法1.原理还原糖在酸性溶液中能够与酚酞形成红色络合物,按照这个特性可以利用测定还原糖的含量。
酚酞法是将酚酞加入葡萄糖溶液,并加入硫酸,使葡萄糖反应生成邻磺酸基苯甲醛,酚酞与邻磺酸基苯甲醛产生红色络合物,根据颜色变化来测定还原糖的含量。
2.步骤(1)样品处理:将样品取适量加入标准瓶中,加入适量蒸馏水稀释。
(2)试剂溶液制备①酚酞指示剂:0.1%酚酞水溶液,加入适量氢氧化钠溶液调节其pH值到8左右;②还原剂:0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
(3)测定操作①在滴定管中加入5ml淀粉指示液;②将50ml试剂用热水浴加热至60℃,在加热的过程中不断振荡,直到试剂完全溶解;③加入3ml样品,再加入1.5ml的硫酸;④加入恰好的量的还原剂,至混合溶液变成淡绿色,继续振荡至反应彻底;⑤从头部滴入酚酞指示液,直至溶液变为粉色,记录滴定管体积。
(4)计算还原糖的质量浓度二、锁紫法1.原理锁紫法是一种定量测定还原糖的方法,其原理是利用还原性糖在酸性条件下氧化生成醛酸物质,再与锁紫剂作用形成深紫色络合物,根据反应色深与被测样品中还原糖含量成正比关系的特点,来定量测定还原糖的含量。
2.步骤(1)样品前处理:将样品取适量加入到锥形瓶中加入适量蒸馏水稀释,搅拌溶解。
(2)试剂溶液制备①锁紫试剂:将0.2g锁紫用少量水样吸湿后加入10mL浓氢氧化钠(4mol/L),用水稀释到100ml,在加入5ml浓硫酸搅拌,备用;②还原剂:0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
(3)操作流程①在锥形瓶中加入1ml锁紫试剂和30ml蒸馏水;②加入3ml样品后加入2ml还原剂,充分搅拌均匀;③经过10分钟左右,样品溶液颜色变为紫色,放置待沉淀,用滤纸滤掉沉淀;④将过滤后的溶液转移到光度计试样池,用蒸馏水稀释至标线;⑤根据光度计读数计算样品中还原糖的质量浓度。
还原糖的测定
还原糖的测定
还原糖是指能够被还原剂还原成糖醇的单糖、二糖和少量寡糖。
常见的还原糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。
测定还原糖含量是分析食品中糖类成分的重要手段之一。
还原糖的测定方法有许多种,下面介绍两种常用的方法。
一、费林试剂法
费林试剂法是将含还原糖的样品与费林试剂反应生成蓝色化合物,根据颜色深浅来测
定还原糖的含量。
试剂:1%费林试剂(若干费林试剂在50ml蒸馏水中搅拌,过滤后可得到1%的费林试剂),硫酸(浓度为98%),蒸馏水。
步骤:
1. 取适量样品,加入50ml蒸馏水搅拌均匀。
2. 取5ml上述混合液,加入试管中。
3. 加入2ml的费林试剂并摇匀。
4. 加入10ml的浓硫酸,容器要远离自己,慢慢倾倒并摇匀。
5. 用减色比色法,将混合液的吸光度在相应波长下读取。
6. 根据标准曲线计算还原糖的含量。
二、改良罗伯逊-梅利试剂法
试剂:改良罗伯逊-梅利试剂(一定量的酚水和氨水混合制成),硫酸(浓度为98%),蒸馏水。
无论使用哪种方法来测定还原糖的含量,都需要按照操作规范,严格控制试剂和样品
的量,避免误差的产生。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法糖是我们日常饮食中的重要成分之一,它不仅能提供能量,还能给食物增加甜味。
在食品加工、食品质量检验以及科研领域中,糖的测定方法显得尤为重要。
本文将介绍糖的测定方法,并探讨其原理和应用。
一、重量法测定糖含量重量法是一种常用的测定糖含量的方法。
其原理是通过测量待测样品和在特定条件下经过反应生成的产物的重量来计算糖的含量。
1. 总糖测定法总糖测定法是测定待测样品中所有可溶于水的单糖、双糖和多糖的总含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的稀酸使其溶解;(2)将溶液加热使糖分解成单糖;(3)将溶液加入定量的还原剂,产生还原物质,然后用碘量定法测定其浓度。
2. 还原糖测定法还原糖测定法是测定待测样品中的还原糖含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的稀酸使其溶解;(2)将溶液加热使糖分解成单糖;(3)将溶液与还原剂反应,生成还原物质,然后用氧化剂滴定还原物质的浓度。
3. 非还原糖测定法非还原糖测定法是测定待测样品中的非还原糖含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的酸进行水解;(2)将水解后的样品经过甲醇提取,得到提取液;(3)将提取液与酚酞试剂反应,生成红色化合物,并根据颜色的强度来推测非还原糖的含量。
二、光度法测定糖含量光度法是一种常用的测定糖含量的方法。
其原理是通过测量液体中糖溶液与特定试剂反应生成的产物的吸光度,来推测糖的含量。
1. 酚硫酸法酚硫酸法是一种测定还原糖含量的常用光度法。
其步骤如下:(1)取一定量的待测样品与酚硫酸试剂混合,在沸水中加热使其反应,生成有色产物;(2)然后用分光光度计测定产物的吸光度,根据标准曲线来推断糖含量。
2. 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法是测定葡萄糖含量的常用光度法。
其步骤如下:(1)取一定量的待测样品与葡萄糖氧化酶试剂混合,在适当的温度下反应,使葡萄糖发生氧化;(2)然后用分光光度计测定产生的还原物质的吸光度,根据标准曲线计算出葡萄糖的含量。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物,在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。
测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。
本文将介绍几种常用的还原糖测定方法,希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。
一、费林法测定法。
费林法是一种经典的还原糖测定方法,其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应,生成红色沉淀。
通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。
这种方法操作简单,结果准确,被广泛应用于食品工业中。
二、硫氰化铁法测定法。
硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法,其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物,通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法具有操作简便、结果快速的特点,适用于实验室中大批量样品的测定。
三、酶法测定法。
酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖,再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物,通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验,如生物化学实验和医学检测。
四、色谱法测定法。
色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法,其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来,再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。
这种方法操作复杂,但具有高分辨率、高灵敏度的特点,适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
五、红外光谱法测定法。
红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。
这种方法操作简单,无需样品的处理,适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。
六、电化学法测定法。
电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。
这种方法操作简单,结果准确,适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
总结。
以上介绍了几种常用的还原糖测定方法,每种方法都有其特点和适用范围。
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沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大
一般沸腾时间短,消耗糖液多。反之,消耗糖液少
滴定速度过快,消耗糖量多,反之,消耗糖量少。 因此,测定时应严格控制上述实验条件,应力求一致。
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GB/T 5009.7—2008《食品中还原糖的测定》 1.直接滴定法 2.高锰酸钾法
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(二)高锰酸钾滴定法
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⑦通过预测可知道样液大概消耗量,以便在正式测 定时,预先加入比实际用量少 1 ml 左右的样液,只 留下 1 ml 左右样液在续滴定时加入,以保证在 1 分 钟内完成续滴定工作,提高测定的准确度。
⑧影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热 源强度、煮沸时间和滴定速度。反应液的碱度直接 影响二价铜与还原糖反应的速度、反应进行的程度 及测定结果。
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2.适用范围及特点(GB2008) 本法是国家标准分析方法,适用于各类食品 中还原糖的测定,有色样液也不受限制。方法的 准确度高,重现性好,准确度和重现性都优于直 接滴定法。但操作复杂、费时,需使用特制的高 锰酸钾法糖类检索表。
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(四)其他方法简介
1. 碘量法 (1) 原理
样品经处理后,取一定量样液于碘量瓶中,加入 一定量过量的碘液和过量的氢氧化钠溶液,样液中 的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠
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总糖是麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料等许 多食品的重要质量指标。 总糖的测定以还原糖的测定方法为基础的, 常用的 直接滴定法(国标), 蒽酮比色法。 直接滴定法 原理:样品经处理除去蛋白质等杂质后 在加热条件下盐酸使蔗糖水解为还原性单糖,以 直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。
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③ 在各种食品中存在形式和含量不一。
糖分为单糖、双糖、多糖。
有效碳水化合物——人体能消化利用的单糖、双 糖、多糖中的淀粉。 无效碳水化合物——多糖中的纤维素、半纤维素、 果胶等不能被人体消化利用的。
这些无效碳水化合物能促进肠道蠕动。
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葡萄糖 单糖 果糖 半乳糖 碳水化合物 双糖 蔗糖 有效碳水化合物
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(2)适用范围及特点
本法又称快速法,它是在蓝一爱农容量法基 础上发展起来的,其特点是试剂用量少,操作和 计算都比较简便、快速,滴定终点明显。 适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱 油、深色果汁等样品时,因色素干扰,滴定终点 常常模糊不清,影响准确性。 本法是国家标准分析方法。
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(3)试剂
①能较完全地除去干扰物质; ②不吸附或沉淀被测糖分,也不改变被测糖分的 理化性质; ③过剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作,易于 除掉。 常用三种澄清剂: 中性醋酸铅[Pb(CHCOO)2•3H2O] 乙酸锌和亚铁氰化钾溶液 硫酸铜和少,达不到澄清的目 的 太多,会使分析结果产生误差。
① 碱性酒石酸铜甲液:硫酸铜+次甲基蓝. ② 碱性酒石酸铜乙液:酒石酸钾钠 + NaOH + 亚 铁氰化钾 ③ 乙酸锌溶液
④ 亚铁氰化钾溶液
澄清剂
⑤ 葡萄糖标准溶液:准确称取经 98 ~ 100 ℃ 干 燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后移入1000 m1 容量瓶中,加入5m1盐酸(防止微生物生长)。
常用于葡萄糖和果糖共存时,二者各自的定 量。 Fru-----先用碘量法反应掉葡萄糖,在直接 滴定果糖
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酶比色法
GOD β-D-葡萄糖(溶液)————D-葡萄糖酸-δ-内酯+H2O2 POD H2O2+4-氨基安替比林 +苯酚—— ——红色醌亚胺(505nm)
计算食品中葡萄糖的含量(仲裁法)
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④ 滴定必须在沸腾条件下进行,其原因一是可以 加快还原糖与Cu2+的反应速度;二是次甲基蓝 变色反应是可逆的,还原型次甲基蓝遇空气中 氧时又会被氧化为氧化型。此外,氧化亚铜也 极不稳定, 易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可 防止空气进入,避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧 化而增加耗糖量。
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准确沸腾30秒钟,趁热以每2秒1滴的速度继续滴加葡
萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次,
取其平均值。
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m1 = ρ × V F——10ml 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄 糖的 质量, mg; ρ——葡萄糖标准溶液的浓度, mg/ml; V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,ml。 也可不标定,直接查表求 ρ值。
① 物理法 ② 化学法 物理法
③ 色谱法
④酶 法 ⑤ 发酵法 ⑥ 重量法
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相对密度法 折光法 旋光法
化学法
直接滴定法法 (改良的兰—爱农法) 还原糖法 高锰酸钾法 萨氏法 铁氰化钾 碘量法 3,5—二硝基水杨酸 酚—硫酸法 蒽酮法 比色法 半胱氨酸—咔唑法
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色谱法
纸色谱 薄层色谱 GC HPLC
酶-比色法;酶-电极法(测葡萄糖) 酶水解测淀粉
酶法
重量法——测果胶、纤维素、膳食纤维素 电泳法,生物传感器
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1.3 可溶性糖类的提取和澄清
(1) 提取液的制备
常用的提取剂有
水(40~50℃) 乙醇溶液(除蛋白,淀粉;回流提取), ①取样量和稀释倍数的确定, 提取经净化和可能的转化后,每毫升含糖量应在 0.5-3.5mg之间,
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二、 还原糖的测定
根据糖分的还原性的测定方法叫还原糖法。 ㈠直接滴定法(GB法) (1) 原理:将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等 量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀; 这种沉淀很快与酒石酸钾反应,生成深蓝色的 可溶性酒石酸钾钠铜络合物。 在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用样 液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生 成红色的氧化亚铜沉淀; 这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合 物;二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲 基蓝还原,溶液由兰色变为无色,即为滴定终点; 根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
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②含脂肪的食品, 通常需经脱脂再提取。 ③ 含大量淀粉和糊精的食品, 宜采用70-75%乙醇溶液提取。
④ 含酒精和二氧化碳的液体样品,蒸发除去酒精和二氧 化碳。
⑤酸性食品,预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性,以 防止低聚糖被部分水解。
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(2)提取液的澄清
作为澄清剂必需具备以下几点要求:
⑤滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从 热源上取下来滴定,以防止空气进入反应溶液中。 ⑥样品溶液预测的目的;一是本法对样品溶液中还原 糖浓度有一定要求(0.1%左右),测定时样品溶液的消 耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近, 通过预测可了解样品溶液浓度是否合适,浓度过大或 过小应加以调整,使预测时消耗样液量在 10 ml 左右;
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在一定范围内,溶液碱度愈高,二价铜的还原 愈快。因此,必须严格控制反应液的体积,标定和 测定时消耗的体积应接近,使反应体系碱度一致。 热源一般采用 800 w 电炉,电炉温度恒定后才 能加热,热源强度应控制在使反应液在两分钟内沸 腾,且应保持一致。否则加热至沸腾所需时间就会 不同,引起蒸发量不同,使反应液碱度发生变化, 从而引入误差。
1.原理 将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应, 还原糖将二价铜还原为氧化亚铜, 过滤氧化亚铜沉淀,加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶 解,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐, 用高锰酸钾标准溶液滴定亚铁盐,根据高锰酸钾溶液消耗量 可计算出氧化亚铜的量 再查检索表,得到氧化亚铜量相当的还原糖量,即可计算出 样品中还原糖含量。
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(4)测定方法
样品处理
取适量样品,按本章第二节中的原则对样品 进行提取,提取液移入250 m1 容量瓶中,慢慢加 入 5 m1乙酸锌溶液和 5 m1亚铁氰化钾溶液,加 水至刻度,摇匀后静置 30分钟。用于燥滤纸过滤, 弃初滤液,收集滤液备用。
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碱性酒石酸铜溶液的标定 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5ml,置于 250 ml 锥形瓶中,加水10ml,加玻璃珠3粒。从滴定管 滴加约9ml葡萄糖标准溶液,加热使其在2分钟内沸腾,
酶电极法
GOD β-D-葡萄糖(溶液)————D-葡萄糖酸-δ-内酯+H2O2 H2O2——(电极电流)——正比于葡萄糖浓度(直接读数)
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三、蔗糖的测定
蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖,没有还原性,不 能用碱性铜盐试剂直接测定 在一定条件下,蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖 和果糖(转化糖)。因此,可以用测定还原糖的方法测 定蔗糖含量。 对于纯度较高的蔗糖溶液,其相对密度、折光率、 旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系,故也可用 物理检验法测定。这里介绍还原糖法。
由于反应液中碘和氢氧化钠都是过量的,两者作 用生成次碘酸钠残留在反应液中,当加入盐酸使反 应液呈酸性时,过量碘析出 用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘,则可计算 出氧化醛糖消耗的碘量,从而计算出样液中醛糖的 含量。
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碘量法
碱性溶液中,糖的醛基被碘氧化为糖酸
醛基糖+I2-----糖酸+I I2(过量)+NaS2O3----
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(5)计算结果
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(6)说明与讨论
① 此法测得的是总还原糖量。 ② 在样品处理时,不能用铜盐作为澄清剂,以免 样液中引入Cu2+,得到错误的结果。
③ 碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,用时才 混合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条 件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有 效浓度降低。
乳糖 麦芽糖
淀粉
多糖
纤维素 果胶 无效碳水化合物
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1.2 测定方法
相对密度法
物理法
折光法
旋光法
单糖和低聚糖
化学法
还原糖法(斐林氏法、高锰酸钾法、 铁氰化钾法) 碘量法 缩合反应法