血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒步骤
血液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)
血液基因组 DNA 提取试剂盒（离心柱型）
GK1043 20 Preps GK1041 50 Preps GK1042 100 Preps
一. 试剂盒组成
Components 2.0-ml Collection Tube TBP Solution(a) TBM Solution(b) TE (pH 8.0) Proteinase K(c) Boiled RNase A PB Solution Wash Solution(d) Elution Buffer(e) Buffer CBS Protocol
二. 基本原理:
临床常常需要从血液中抽提基因组 DNA， 用于病症的辅助性分析和诊断。 样品经本试剂盒提供的专用裂解液 处理后，在特定的 TBM Solution 中用 Protenase K 和去污剂裂解。gDNA recovery Column 柱膜能选择性吸附样品 中基因组 DNA，而不吸附蛋白质和其它非核酸类物质。经简单的洗涤步骤，即可得到样品基因组 DNA。
七. 储存
常温储存 1.5 年。
Product Use Limitation: This product is developed, designed and sold exclusively for research purpose and in vitro use only.
2
六. 提取基因组 DNA 操作步骤:
柱子准备：在 gDNA recovery Column 中加入 200μl Buffer CBS , 10,000rpm 离心 1 分钟，弃透过液，备用。
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件：1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。
2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处，避免冻结。
二、实验前准备：1.准备所需的实验耗材和设备，如离心管、恒温振荡器、离心机等。
2.取出全血样品，可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。
三、DNA提取步骤：1.取出全血样品，用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集，去除红细胞。
2.加入蛋白酶K将细胞裂解，释放DNA。
3.加入缓冲液和脱水溶液，沉淀DNA并洗涤。
4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。
四、实验注意事项：1.操作过程中需注意无菌操作，避免污染。
2.加入蛋白酶K的量应准确控制，不要过多或过少。
3.混合溶液时需轻轻摇匀，避免气泡的产生。
4.稀释保存DNA时，需使用无核酸酶的载体溶液，如TE缓冲液。
五、质控及结果分析：1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。
2.检测DNA浓度和纯度，确保提取的DNA适用于后续实验。
3.可以保存提取好的DNA样品，以备后续实验使用。
六、应用领域：1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA，可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。
2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。
总结：全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具，操作简便、提取效率高。
在实验中需注意操作规范，保证提取的DNA质量和纯度。
该试剂盒广泛应用于科研领域，为基因研究和临床诊断提供了有力支持。
希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。
血液基因组DNA 提取试剂盒 说明书
广州东盛生物科技有限公司 电话：020-87791356
传真：020-87791381 网址：
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核酸纯化系列
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 取血液样本，每 400 μl 血液加入到一只 1.5 ml 离心管中。加入 2 倍体积的红细胞裂解液 RS。漩涡振荡或上下来回颠倒混匀。 5,000 rpm 离心 3min，弃上清，收集白色或淡红色沉淀。
血液基因组 DNA 提取试剂盒（硅胶膜离心柱法）
核酸纯化系列
产品组分
组分
红细胞裂解液 RS 消化缓冲液 DS 裂解液 MS 蛋白酶 K 去蛋白液 PS 漂洗液 PE 纯化液 TE DNA 纯化柱 说明书
N1121
80 ml 15 ml 20 ml 1 ml 30 ml 15 ml 5 ml 50 个 1份
液氮，并在样品未完全解冻前加入含有抑制核酸酶作用的螯合剂的裂解液。
问：提取的基因组 DNA 生物活性差，为什么？
答：1 提取的基因组 DNA 盐浓度过高，沿管壁四周加入漂洗液 PE，这样有利于提高清洗效果；
2 DNA 中含有乙醇，严格按第 8 步的离心速度和时间操作；
3 进行 DNA 洗脱时请一定在膜的中央加入纯化液，尽量不要沾染管壁。
广州东盛生物科技有限公司 电话：020-87791356
从全血和体液中提取基因组DNA的操作步骤(精)
从全血和体液中提取基因组DNA 的操作步骤提取DNA 需要的仪器和试剂：⑴ 1.5ml 离心管⑵ 移液管: 1000ul, 200ul, 40ul 各一支和移液管尖头: 100-1000ul, 1-200ul 各一盒⑶ 微型滤柱（备用）⑷ 小型旋转混合器一台⑸ 小型离心机: 可放入1.5ml 离心管和2ml 收集管.⑹ 恒温水浴⑺ 电冰箱: -20 C, 4 C⑻ 无水乙醇(自备)⑼ 70% 乙醇(自备)⑽ 利普生DNA 提取试剂盒。
内含: ⑴ 裂解液1 ⑵ 裂解液2 ⑶消化液 ⑷纯化液⑸弥散液 ⑹蛋白酶K ⑺ 带钩细玻棒一盒 ⑻ 微型滤柱若干。
提取DNA 前注意：⑴ 使血样品内容物达到室温（15 – 25 C ）。
⑵ 预热水浴到58 C ， 为步骤3作准备。
⑶ 置弥散液于58 C 内，为步骤4或步骤7作准备。
⑷ 所有的离心步骤均在室温下进行。
⑸ lml 全血可提得15-60ug DNA 。
一．从1ml 全血或体液中提取DNA 的步骤：⑴ 裂解1： 取1ml 全血，血桨，血清，淋巴细胞放入到1.5ml 的离心管中，加入400ul 裂解液1。
上下翻转，使沉淀物分散，旋转脉动15秒后放入离心机中离心，离心速率为8000rpm ，1min.。
倒掉上层液，可见离心管底部有血色沉淀。
重复此裂解步骤一次，这次是加入1ml 裂解液1。
最后用移液管吸净所有上层液弃去, 以使离心管底部的血色沉淀不再残留有裂解液1。
⑵ 裂解2: 在上面离心管中加入1ml 裂解液2。
上下翻转，务必使沉淀物分散， 旋转脉动15秒后放入离心机中离心，8000rpm ，1 min.。
倒掉上清液，可见离心管底部有微量淡红色沉淀。
重复此裂解步骤一次，这次仍然是加入1ml 裂解液2，最后用移液管吸净所有上清液弃去，以使离心管底部的灰白色沉淀不再残留有裂解液2。
⑶ 消化： 吸取蛋白酶K 10ul ( = 0.2mg )加入到上面的离心管中，用移液管尖头反复吹打， 使蛋白酶K 与沉淀物均匀接触后， 加入320ul 消化液，上下翻转离心管， 务必使沉淀物分散于消化液中。
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明DNA提取是生物学、遗传学和分子生物学等领域的一项重要实验操作。
全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样本中提取DNA的试剂盒，本文将详细介绍其使用说明。
一、试剂准备：1.预先将试剂盒从-20℃的冷冻器中转移到4℃的冰箱中解冻，取出所需试剂。
2.将试剂A和试剂B随机摇匀，避免沉淀的产生。
二、样本处理：1.取出需要提取DNA的全血样本，将其加入离心管中。
2.加入适量的蒸馏水和样本量相等体积的10%梳酸混匀，使血细胞溶解。
三、样本裂解：1.准备离心管和4℃的离心机。
2.加入适量的样本处理试剂（试剂A和试剂B），混匀离心管。
4.将裂解后的样本置于冰上放置10分钟。
四、DNA纯化：1.准备离心管和4℃的离心机。
2.将样本离心管中的上清转移至新的离心管中，并加入适量的试剂C，混匀并置于冰上放置5分钟。
4.弃去上清，避免悬浮细胞的干扰。
五、脱脂：1.准备脱脂离心管和4℃的离心机。
2.加入适量的试剂D，混匀离心管，置于冰上放置5分钟。
4.弃去上清，避免沉淀的干扰。
六、洗涤：1.准备洗涤离心管和4℃的离心机。
2.加入适量的试剂E和试剂F，混匀离心管，置于冰上放置5分钟。
4.弃去上清，避免沉淀的干扰。
七、DNA溶解：1.准备离心管和4℃的离心机。
2.加入适量的试剂G，混匀并置于冰上放置5分钟。
八、DNA浓缩：1.准备离心管和4℃的离心机。
2.加入适量的试剂H，混匀离心管，置于冰上放置5分钟。
4.弃去上清，避免纯化后的DNA丢失。
九、DNA溶解：1.加入适量的蒸馏水，混匀使DNA溶解。
十、质检：1.准备质检相关设备和试剂。
2.使用紫外分光光度计检测DNA纯度和浓度。
3.对提取的DNA进行PCR扩增、酶切鉴定等质检步骤。
以上就是全血基因组DNA提取试剂盒的使用说明，希望对您在实验中提取DNA有所帮助。
在操作中，请严格按照试剂盒说明书和实验室操作规范进行操作，确保实验的准确性和可重复性。
全血DNA提取步骤
从全血中抽提基因组DNA的方法1、取全血700µL离心，5000rpm，5min，弃去上清液。
2、沉淀物用1mL的红细胞裂解液洗涤3次，5000rpm，5min，弃去上清液，倒干。
3、加入450µL细胞裂解液和6µL蛋白酶K（20mg/mL），55℃～66℃水浴4小时。
4、用等体积的酚、氯仿、异戊醇（25︰24︰1）抽提2次，12000rpm，5min。
5、用2倍体积冰预冷的无水乙醇沉淀（无水乙醇），有絮状沉淀后置于―20℃，沉淀30min。
6、沉淀结束后，12000rpm，5min，弃上清液。
7、用800µlL70%的乙醇洗涤沉淀，12000rpm，3min。
8、弃上清液，干燥。
9、加入50µL 1×TE缓冲液溶解，―20℃保存备用。
附：DNA提取相关试剂配制1、红细胞裂解液（PH 7.4）配制量：1L配制方法：（1）、称量NH4CL 0.802g、NaHCO3 0.84g、Na2EDTA·2H2O37.22g，置于1L烧杯中。
（2）、向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
（3）、加去离子水将溶液定容至1L后，高压灭菌。
（4）、室温保存。
2、细胞裂解液（PH 8.0）配制量：500Ml配制方法：（1）、称量NaCL 2.92g、SDS 5g、Tris 0.61g，置于1L烧杯中。
（2）、向烧杯中加入约300ml的去离子水，搅拌溶解，在溶解过程中用1mL移液器加入10mL的TriTon-100。
（3）、溶解后加入20mg/mL的蛋白酶K 3µL.（4）、加去离子水将溶液定容至500mL后，高压灭菌。
（5）、室温保存。
血液基因组DNA提取标准操作规程
1目的：规范血液基因组DNA提取的操作。
2适用范围：血液基因组DNA提取。
3职责：技术员4内容/程序：4.1仪器及耗材4.1.1 1.5ml、2ml灭菌离心管4.1.21ml、200ul灭菌枪头4.1.3Karroten TM Mini Column柱4.1.4手动移液器4.1.5金属浴4.1.6高速离心机4.2试剂4.2.1Buffer KB平衡液、Buffer KBL14.2.2Buffer KW4.2.370% 乙醇4.2.4KE4.3提取前准备4.3.1详细阅读该SOP熟悉各步骤，并准备好所有的试剂盒组分及温浴条件4.3.2KBL1在低温时可能产生混浊或沉淀，在37-65℃温浴片刻即可4.3.3Buffer KW第一次使用前请按瓶上标签加入50ml70%乙醇，每次使用后，请立即拧紧盖子4.4操作步骤4.4.1取一Karroten TM Mini Column柱装在一个2ml收集管上（已备）。
加入300ulBuffer KB平衡液至柱子内，室温13000rpm离心1min，使平衡液完全流过柱子。
弃收集管中的滤液，将空柱套回收集管内；注意：柱子不平衡，将导致DNA产率的减少。
4.4.2按200ul全血（适合各种抗凝剂，EDTA较好）加入1000ulKBL1的比例加入KBL1，混匀，静置3min。
如果样品是血清等无细胞体液。
应按比例增加体积。
注意：1）.静止时间超过3min不影响DNA抽提2）.取样最佳体积因物种不同有所差异。
人血以100-300ul为最佳，小鼠以50-100ul为最佳。
且当全血体积小于200ul时，KBL1体积不能小于1000ul 4.4.3将混合液转移至已平衡的吸附柱内，室温13000rpm离心30s，使裂解液完全流过柱子。
保留柱，弃去收集管中的过滤液，将柱重新放入收集管；注意：如混合液体积过大，可分数次上柱，每次上样量不要超过700ul。
4.4.4加入700ul Buffer KW，室温13000rpm离心30s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。
基因组DNA抽提操作流程
基因组DNA抽提操作流程一、原理与意义先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解，然后用蛋白酶去除其中的蛋白，再用氯仿一次抽提（无需用酚抽提）、预备液沉淀、RNase 去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。
该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G－细菌中快速抽提基因组DNA。
抽提出来的DNA能用于几乎所有的分子生物学实验，如DNA梯度分析、PCR、限制性内切酶反应、克隆、Southern Blot分析等。
二、试剂及其配制抽提试剂盒购于上海生工公司，内含以下试剂：1.TE缓冲液：PH8.0，由10 mM Tris HCl和1 mM EDTA配成。
2.RNase A（3 mg）：使用前加入300 µl无菌双蒸水，煮沸10 min后使其自然冷却后使用，-20 ℃冻存。
3.Proteinase K（12 mg）：使用前加入600 µl无菌水，分装成小份，-20 ℃冻存。
4.Cell Lysis Solution与Precipitation Solution：溶液出现絮状沉淀50 ℃加热溶解后使用。
5. 1.2 mol/L NaCl。
冰冷乙醇和氯仿自备。
三、实验器材水浴锅、普通冰箱、1.5/2 ml离心管、移液器及枪头、紫外分光计、离心管架、剪刀、镊子、滤纸等。
四、操作步骤1.组织匀浆制备：取30 mg左右新鲜组织，加600 μl TE缓冲液，手工匀浆数次。
2.细胞裂解：吸取300 µl匀浆加600 µl Cell Lysis Solution，混匀。
3.消化蛋白：再加入9 µl Proteinase K(可适当增加)混匀，置于55 ℃水浴30 min以上（可达2.5 h），其间上下混匀几次。
4.氯仿抽提：加入600 µl氯仿（用户自备），轻柔上下混匀，不能太剧烈，以保证DNA的完整性。
5.沉淀：在台式离心机上，10000转/分，室温离心2 min。
磁珠法血液DNA提取试剂盒-说明书
.血液DNA提取试剂盒（磁珠法）【简介】血液DNA提取试剂盒（磁珠法）适用血液的基因组DNA提取，尤其适用于人类以及哺乳动物的血液基因组DNA提取。
配合核酸自动纯化仪（GNT-SI系列），可实现一键式、自动化操作【参数】名血液基因DN提取试剂GNT-B02货号100T 规格2℃—储存条件30℃360保质期天【组分】100T 规格30ml Buffer LB120mg Buffer LB21ml Magnetic Beads80ml Buffer WB I30ml Buffer WB II11mlElution Buffer【血液DNA提取试剂盒（磁珠法）操作说明】（以实际说明书为准）1、取抗凝全血到离心管中，加入Buffer LB1、Buffer LB2，混合均匀后，将离心管置于水浴锅中，水浴30min2、将离心管取出，加入异丙醇，Magnetic Beads。
颠倒混匀数次（期间应静置数秒后继续颠倒混匀），将离心管置于磁力架，磁分离，吸弃废液3、将离心管从磁力架上取下，加入Buffer WB I。
颠倒混匀数次（期间应静置数秒后继续颠倒混匀），将离心管置于磁力架，磁分离，吸弃废液4、将离心管从磁力架上取下，加入Buffer WB II，颠倒混匀数次（期间应静置数秒后继续颠倒混匀），将离心管置于磁力架，磁分离，吸弃废液5、重复步骤5一次，并将废液完全吸弃干净6、将离心管从磁力架上取下，室温下开盖静置5min7、加入Elution Buffer，磁珠完全混匀后，置于水浴锅中，水浴10min8、将离心管置于磁力架，磁分离，小心吸取上清至新的离心管中，进行下游实验【特点】1、得率高：200ul人类抗凝全血的普遍产量可达3-8ug2、纯度高：OD260/280稳定在1.8左右，OD260/230稳定在1.8以上3、操作简便：手工提取过程无需离心4、自动化：具有成熟的自动化方案，可配合核酸自动纯化仪，实现一键式操作【提取效果】1 / 2.2 / 2。
3mL血液基因组DNA提取操作流程
3mL全血基因组DNA提取操作流程本实验成功的关键：1. 注意不要将沉淀倒弃 2.注意液体混合均匀3.保持实验器材清洁，防止交叉污染。
1.检查水浴锅内水量是否适宜，将水浴锅打开，调至37℃。
2.打开制冰机制冰，将异丙醇分装并放在冰上预冷。
3.用无水乙醇配制足够的70%乙醇，密封保存。
4.检查试剂盒内溶液是否充分溶解，若产生沉淀，放入37℃水浴锅内10min以溶解沉淀。
5.温度稳定后将血标本准备好，及时投入37℃水浴锅内充分解冻。
6.将离心管和采血管对应编号并进行登记，离心管的管头和管壁都要标记。
7.将血标本上下颠倒充分混匀5次，将采血管中的血标本直接缓慢倒入离心管至3mL刻度处，至于离心管中。
8.向3mL血液中加入3mL细胞裂解液CL，颠倒混匀5次，3600 rpm离心5min，慢慢倒弃上清。
（此步骤注意红色粘稠沉淀中含有DNA，若不能完全看清沉淀，在倾倒时可保留一部分上清，一定要保证粘稠沉淀不被倒出。
）9.向离心管中加入4.5mL细胞裂解液CL，颠倒混匀5次，3600 rpm离心5min，慢慢倒弃上清，将离心管倒置在干净的吸水纸上停留2min，期间仔细观察，防止有时沉淀因松散而从管壁滑落，确保沉淀在管中，尽量让废液流干净。
10.配制缓冲液FG和Proteinase K的混合液。
（现配现用，在配好后1h内用完）配制方法：每管含缓冲液FG 1500 μLProteinase K 15 μL若每次做16个样，需要配制缓冲液FG 24 mL和Proteinase K 240 μL的混合液，混合液配好后需充分混匀再使用。
11.加入1.5mL缓冲液与Proteinase K的混合液，立即旋涡混匀至溶液无团块。
（每加一个样品，立即旋涡震荡5 sec，不要加完所有样品再震荡。
若有物质难以混匀，补加300 μL缓冲液与Proteinase K 的混合液，再进行震荡。
）12.65℃水浴20~30min，期间颠倒混匀数次。
大量全血基因组DNA提取试剂盒说明书-_39769
大量全血基因组DNA提取试剂盒说明书操作步骤：(以5ml血液为例)1.将10x红细胞裂解液用纯水稀释成1x红细胞裂解液，两组共用一个50ml离心管去稀释。
2. 从4度冰箱拿出血液，恢复室温，将5ml血液从抗凝管转移到新的已灭菌的50ml的大离心管中。
3.在大离心管中加入1x红细胞裂解液的量是血液原体积的3倍（若原血液体积为5ml,即加入1x红细胞裂解液的量是15ml,若原血液体积为4ml,即加入1x红细胞裂解液的量是12ml），即将1x红细胞裂解液3ml加入抗凝管冲洗抗凝管中残留血液，一并倒入盛有血液的50ml离心管里，然后再加1x红细胞裂解液12ml，上下颠倒混匀15-20min，确保充分混匀。
4. 将混好的大离心管两两同学相互配平，在大离心机上离心2min，转速为4000r/min，离心结束后将红色上清小心的倒在废液缸里，剩余部分用枪吸去（注意不要吸到管底的细胞团）留下和管底白细胞团等体积的残留上清。
（离心后在管底也有可能有一些红细胞残片和白细胞团在一起，但是如果看到的是大部分的红色细胞团，说明红细胞裂解很不充分，应再重复步骤2和3）。
5. 然后在涡旋振荡仪上涡旋震荡直到白细胞团充分重悬、分散。
（白细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，白细胞末打散就加入裂解液，会导致白细胞不能充分裂解，形成肉眼可见团块）。
6. 向涡旋好的离心管中加入5ml细胞核裂解液到重悬的白细胞（加入细胞核裂解液的量与血液原体积相等），在涡旋振荡仪上涡旋震荡，一定要让液体漩涡起来，时间为从漩涡起共10-20S。
7. 加入1.67ml蛋白沉淀液后（加入蛋白沉淀液的量是血液原体积的1/3），在漩涡振荡器上从漩涡起30s，混匀后可能见到一些小的蛋白团块。
8.将混好的大离心管两两同学相互配平，在大离心机上离心5min，转速为4000r/min，，这时候应该可以见到管底暗褐色的蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
9.离心结束后，直接将上清倒入另一个新的15ml的离心管中。
大量全血基因组DNA提取试剂盒操作方法及步骤说明书
大量全血基因组DNA提取试剂盒目录号：DN04DN0401 16次×10mlDN0402 32次×10mlDN0403 96次×10ml适用范围：适用于快速提取各种动物全血基因组DNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存16次×10ml 32次×10ml 96次×10ml10x红细胞裂解液室温50 ml 100 ml 300 ml细胞核裂解液室温180 ml 180×2 ml 250 m l×4蛋白沉淀液室温55 ml 110 ml 330 mlDNA溶解液室温15 ml 30 ml 90 ml 本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。
储存事项:1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：本试剂盒根据全血特点采用几个快速步骤提取基因组DNA。
首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞，细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA 溶解液。
产品特点：1.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方，裂解快速完全。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.结果稳定，产量高（典型的产量10ml全血可提取出150-500µg），OD260/OD280典型的比值达 1.7～1.9，长度可达50kb-150kb，可直接用于构建文库、PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒步骤
血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒步骤血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒步骤使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 处理材料a. 如提取材料为血液，可直接使用200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200ul可加入缓冲液GA补足；注意：如需处理更大体积血液，如300ul-1ml，可按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如300ul血液加入900ul 红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5min，期间再颠倒混匀几次。
10000rpm(~11500×g)离心1min（若离心机最高转数不允许，可3000rpm(~3400×g)离心5min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
b. 如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核红细胞，因此处理量5-20ul，可加入缓冲液GA补足200ul后进行下面的裂解步骤；c. 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm(~11200×g)离心1min，倒尽上清，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；d．动物组织（脾组织用量应少于10mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10000rpm(~11200×g)离心1min，倒尽上清，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；注意：如果需要去除RNA，可加入4ul RNase A(100mg/ml)溶液（客户自备，目录号：RT405-12），振荡15s，室温放置5min。
2. 加入20ul Proteinase K，混匀。
a. 提取血液基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
b. 提取细胞基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
d. 提取组织基因组时，加入Proteinase K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
试剂盒DNA提取详细操作步骤
试剂盒DNA提取详细操作步骤一、试剂盒打开后需要准备的工作1、Proteinase K（蛋白酶K）的溶解①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管，每管100u l～200ul③将分装好的Proteinase K放入-20℃冰箱中保存，使用期限为12个月2、组织抑制剂（Inhibitor Removal buffer）的调配加入20ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩3、洗液（wash buffer）的调配加入80ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩二、组织DNA提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将采集来的样品剪碎（≤0.1cm）洗净保存液。
②加入组织破解液Tissue-lysis 200ul 蛋白酶K 40ul然后放入55℃水浴锅内3个小时使其充分消化。
2、DNA提取①在消化好的组织样品中加入结合液binding buffer 200ul 然后放入70°水浴锅中10分钟。
②再加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g一分钟。
③倒掉底液，加500ul组织抑制剂Inhibitor Removal 然后离心倒掉底液④加洗液washing buffer500ul离心（洗液加两次）⑤在70℃预热Elution Buffer，然后将洗好的柱体下部分丢掉，换新的离心管加入Elution Buffer200ul溶解10分钟离心保留底液放-20℃保存。
三、细胞DNA的提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将带有培养基的样品用PBS清洗干净8000rpm/1min离心，倒掉上清②加PBS200ul振荡摇匀使之样品成为单个细胞的悬浊液③加200ul Binding Buffer，40ul蛋白酶K 混合均匀放入70℃水浴锅内消化10分钟。
2、DNA提取①加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g一分钟。
细胞基因组dna提取
细胞基因组dna提取一、细胞基因组DNA提取的概念细胞基因组DNA提取是指从生物体内的细胞中提取出其基因组DNA，以便进行分子生物学实验。
DNA提取是许多分子生物学技术和实验的前提，如PCR、限制性酶切、电泳等。
二、细胞基因组DNA提取的原理1. 细胞破碎：将细胞破碎以释放DNA。
可以使用机械方法（如超声波）、化学方法（如溶液中加入洗涤剂）或酶解方法（如加入蛋白酶）等方式进行破碎。
2. DNA分离：将破碎后的混合物离心，使得DNA沉淀到底部。
然后通过去除上层液体和洗涤沉淀来纯化DNA。
3. DNA溶解：将沉淀的DNA溶解在适当的缓冲液中，以便进行后续实验操作。
三、细胞基因组DNA提取的步骤1. 收集样品：收集需要提取DNA的样品，如血液、组织或菌落等。
2. 细胞破碎：使用适当的方法对样品中的细胞进行破碎，释放出DNA。
3. 清洁DNA：通过离心等方法将DNA沉淀到底部，去除上层液体和洗涤沉淀来清洁DNA。
4. 溶解DNA：将沉淀的DNA溶解在适当的缓冲液中，以便进行后续实验操作。
四、细胞基因组DNA提取的影响因素1. 样品来源：不同的样品来源对细胞基因组DNA提取有不同的影响。
如血液、组织或菌落等。
2. 细胞数量：细胞数量越多，提取到的DNA量越多。
3. 细胞类型：不同类型的细胞具有不同的细胞壁和膜结构，需要采用不同的破碎方法。
4. 存储条件：样品在收集后需要妥善存储，避免样品受到污染或降解。
五、细胞基因组DNA提取常用方法1. CTAB法：CTAB法是一种化学法，使用CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）来裂解细胞壁和膜，并与核酸结合形成复合物。
该方法适用于高含量多酚类物质的样品。
2. 盐溶法：盐溶法是一种简单易行的方法，使用盐和洗涤剂来裂解细胞壁和膜，并与核酸结合形成复合物。
该方法适用于低含量多酚类物质的样品。
3. 商业化试剂盒：商业化试剂盒是一种快速方便的DNA提取方法，通过购买商业化试剂盒来进行DNA提取。
离心柱型dna提取试剂盒的基本流程
离心柱型dna提取试剂盒的基本流程
1. 样品的准备
在进行DNA提取之前，首先需要准备样品。
样品可以是血液、唾液、组织、细胞等，但
是需要根据样品的性质选择合适的提取方法。
一般来说，采用离心柱型DNA提取方法的
样品需要先经过离心、洗涤等处理，去除其中的细胞碎片、蛋白质和其他杂质。
2. DNA的溶解
将样品中的细胞溶解在含有离子表面活性剂的缓冲液中，使DNA从细胞核中溶解出来。
通常情况下，使用蛋白酶K进行细胞溶解，加速DNA的释放。
3. DNA的结合
将DNA溶解液加入离心柱中，离心柱上的硅胶膜能够特异性地结合DNA，将其分离出来。
此步骤是离心柱提取法的关键步骤，也是DNA提取的核心步骤。
4. 杂质的去除
经过上一步骤，DNA和其他细胞组分已经成功地分离出来，接下来需要对离心柱中的杂
质进行去除。
通常会使用洗涤缓冲液进行洗涤，从而将杂质彻底去除。
5. DNA的洗脱
经过洗涤之后，将离心柱插入含有洗脱缓冲液的离心管中，通过离心将DNA洗脱出离心柱。
此时，得到的洗脱液中含有纯度较高的DNA，可以用于后续的分子生物学实验。
6. DNA的保存
将洗脱后的DNA溶液保存在-20℃或更低的温度下，以防止DNA的降解。
此外，也可以
将DNA进行分装，并标记好相关信息以便后续实验使用。
总结来说，离心柱型DNA提取试剂盒的基本流程包括样品的准备、DNA的溶解、DNA的
结合、杂质的去除、DNA的洗脱和DNA的保存。
通过这些步骤，可以快速、高效地从样
品中提取出高质量的DNA，为后续的实验研究提供充分的保障。
血液基因组dna提取试剂盒实验原理
血液基因组dna提取试剂盒实验原理
血液基因组DNA提取试剂盒主要是利用化学和物理方法分离纯化血液样本中的DNA。
其原理可以分为以下几个步骤：
1. 血液样本处理：首先，将静脉血液样本添加到试剂盒中，加入血液抗凝剂，并通过离心步骤将血液细胞与血浆分离。
2. 细胞裂解：将血液细胞沉淀洗涤后，加入细胞裂解缓冲液，破坏细胞膜释放DNA，并加入蛋白酶K来消化细胞蛋白。
3. DNA沉淀：加入乙酸和异丙醇使DNA凝固和沉淀，然后通过离心将DNA沉淀从上清液中分离出来。
4. DNA洗涤：将DNA沉淀用乙酸盐缓冲液洗涤，去除杂质和残余的蛋白酶。
5. DNA溶解：最后，用无水溶液或TE缓冲液溶解DNA，并将其储存在低温下，以供后续实验使用。
综上所述，血液基因组DNA提取试剂盒通过细胞裂解、DNA 沉淀和溶解等步骤实现对血液样本中的DNA的高效提取与纯化。
组织 细胞基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN07目录编号包装单位DN0701 50次DN0702 100次DN0703 200次DN0711 50次(带蛋白酶K粉)DN0712 100次(带蛋白酶K粉)DN0713 200次(带蛋白酶K粉)适用范围：适用于快速提取各种动植物细胞/组织基因组DNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次平衡液室温 5 ml 10 ml 20 ml 裂解液TL 室温11 ml 20 ml 40 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40 ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 15 ml 15ml×2 蛋白酶K粉（可选）20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg 吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性、方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1ml灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
基因组DNA抽提操作流程
基因组DNA抽提操作流程
1.收集样本：首先需要从待测样本中收集细胞。
这可以是任何包含细胞核的生物组织，如血液、组织样本或细菌培养物。
选择合适的样本类型根据具体的研究目的和实验要求。
2.细胞裂解：将收集到的样本进行细胞裂解，使细胞内部的DNA释放出来。
这可以通过一系列方法实现，如物理破碎、化学裂解或酶的作用。
具体使用哪种方法取决于待测细胞的特点和实验室的设备条件。
3.蛋白质去除：在细胞裂解的过程中，细胞核中的DNA会与蛋白质连接在一起形成复合物，需要进一步去除蛋白质。
可以使用蛋白酶对DNA溶液进行处理，将蛋白质降解分解，并使用盐溶液或酒精进行去除。
4.DNA沉淀：将去除蛋白质的DNA溶液中加入盐溶液或酒精，使DNA 沉淀下来。
这可以通过离心的方法加快DNA的沉淀速度。
离心操作常常需要根据DNA溶液的体积和设备的转速进行优化。
5. 溶解DNA：将沉淀下来的DNA溶于适当的缓冲液中，使其稳定并易于后续的分析和实验。
常用的溶解液包括TE缓冲液（含有Tris-HCl和EDTA）或纯化水。
6.检测DNA浓度和纯度：使用光谱分析仪或比色法等方法检测DNA的浓度和纯度。
这可以帮助确定DNA样本的适用性和是否需要进一步纯化。
需要注意的是，基因组DNA抽提的操作步骤可能会因实验目的和样本类型的不同而有所差异。
在具体操作过程中，应该根据实验室的设备和实验条件进行优化和调整。
同时，实施基因组DNA抽提操作的人员还需要注意安全规范，避免对人体和环境造成潜在的危害。
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血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒步骤
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 处理材料
a. 如提取材料为血液，可直接使用200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200ul可加入缓冲液GA补足；
注意：如需处理更大体积血液，如300ul-1ml，可按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如300ul血液加入900ul红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5min，期间再颠倒混匀几次。
10000rpm(~11500×g)离心1min（若离心机最高转数不允许，可3000rpm(~3400×g)离心5min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
b. 如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核红细胞，因此处理量5-20ul，可加入缓冲液GA补足200ul后进行下面的裂解步骤；
c. 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm(~11200×g)离心1min，倒尽上清，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
d．动物组织（脾组织用量应少于10mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10000rpm(~11200×g)离心1min，倒尽上清，加200ul缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
注意：如果需要去除RNA，可加入4ul RNase A(100mg/ml)溶液（客户自备，目录号：RT405-12），振荡15s，室温放置5min。
2. 加入20ul Proteinase K，混匀。
a. 提取血液基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
b. 提取细胞基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
d. 提取组织基因组时，加入Proteinase K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
注意：不同组织裂解时间不同，通常需1-3h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。
不会影响后续操作，每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可。
3. 加入200ul缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。
如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，肯能导致提取DNA 量少和提取出的DNA不纯。
当血液体积≤200ul且没有采用红细胞裂解处理，
或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
4. 加200ul无水乙醇，充分振荡混匀15s，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm(~13400×g)离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
6. 向吸附柱CB3中加入500ul缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(~13400×g)离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7. 向吸附柱CB3中加入600ul漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(~13400×g)离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm(~13400×g)离心2min，倒掉废液。
将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10. 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200ul洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12000rpm(~13400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50ul，体积过小影响回收率。
洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。
若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。
为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2min，12000rpm(~13400×g)离心2min。
注意事项：
1. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇。
2. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3. 若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
4. 所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。