第3章消毒灭菌与病原微生物
3细菌的分布与消毒灭菌带答案2016.10.30
第三章细菌分布与消毒灭菌一、单5选11.杀灭物体上所有微生物的方法称为:A.消毒B.灭菌C.无菌D.防腐E.无菌操作2.杀灭物体上病原微生物的方法称为:A.消毒B.灭菌C.无菌D.防腐E.无菌操作3.微生物学实验过程中防止污染与感染的方法称为:A.消毒B.灭菌C.无菌D.防腐E.无菌操作4.消毒的含义是:A.杀灭物体上所有的微生物B.杀死物体上的病原微生物C.使物体上无活菌存在D.杀死含芽胞的细菌E.抑制微生物生长繁殖5.灭菌的概念是:A.杀灭物体上所有微生物B.杀死物体上的病原微生物C.抑制微生物生长繁殖的方法D.杀死细菌繁殖体E.使物体不含活菌6.防腐的概念是:A.杀灭物体上所有的微生物B.杀死物体上的病原微生物C.使物体上无活菌存在D.杀死含芽胞的细菌E.抑制微生物生长繁殖7.无菌是指:A.杀灭物体上的所有微生物B.杀死物体上的病原微生物C.物体上无活的微生物存在D.杀死含芽胞的细菌E.抑制微生物生长繁殖8.下列哪项可经巴氏消毒法灭活:A.牛奶B.空气C.手术器械D.基础培养基E.物体表面9.巴氏消毒法的温度和时间是:A.100℃ 10分钟B.121℃ 15分钟C.80℃ 10分钟D.62℃ 30分钟E.71.7℃ 30分钟10.高压蒸汽灭菌法的参数为：A.100℃10～20分钟B.121.3℃15～20分钟C.80 ℃ 5～10分钟D.62℃30分钟E.71.7℃15～30分钟11.正常微生物群是指:A.广泛存在于正常人体内脏的微生物群B.存在于正常人体所有腔道的微生物群C.正常时对人体无害也无利的微生物群D.存在于出生前后的正常人群体表的微生物群E.存在于正常人体体表的微生物群12.条件致病微生物的致病条件不包括:A．寄居部位的改变 B．免疫功能降低 C．微生物群分布失调D．长期大量应用广谱抗菌药，正常微生物群被抑制E．使用有关的微生态制剂13.正常微生物群对人体的生理作用不包括:A．生物拮抗 B．营养作用 C．抗炎症作用D．免疫作用 E．抗衰老作用14.大肠杆菌通常寄生于正常人体的:A．皮肤 B．口腔 C．外耳道 D．肠道 E．尿道15.幽门螺杆菌常寄生于人体的部位是：A．胃 B．口腔 C．皮肤 D．外耳道 E．尿道16.因长期大量使用抗生素引起的腹泻属于:A．外源性感染 B．微生物失调 C．交叉感染D．环境污染感染 E．潜伏感染17.治疗微生物群失调症可使用:A．维生素 B．纤维素 C．抗生素 D.类毒素 E.微生物制剂18.*随着年龄的增长，肠道内明显减少的细菌是:A.双岐杆菌 B．乳酸杆菌 C．大肠杆菌 D．葡萄球菌 E．肠球菌19.关于条件致病微生物感染，下列叙述哪项正确:A.为外源性感染B.均为医院内感染 C．近年感染率明显下降D.当机体抵抗力下降时易发生 E．均为菌群失调所致20.水源被细菌污染后，常可引起：A.呼吸道传染病B.消化道传染病 C．伤口化脓性感染D.泌尿道感染 E．厌氧菌感染21.正常人体有正常菌群分布的部位是：A.脑组织B.胃内 C．血液D.心脏 E．体表及外界相通的腔道22.土壤的芽胞菌感染人体的常见途径为：A.消化道B.呼吸道 C．血液D.伤口E.接触23.下列何种不是湿热灭菌法：A．巴氏消毒法 B. 滤过除菌法 C. 煮沸法D. 高压蒸气灭菌法 E．间歇蒸气灭菌法24．火焰灼烧灭菌法适合的对象是：A.培养基B. 接种环C.手术器械D. 敷料E. 一次性注射用具25.下列消毒灭菌法正确的是：A. 接种环——干烤B. 手术器械——漂白粉C. 饮水——过滤除菌D.体温表——煮沸E.敷料包——离压蒸汽灭菌法26．下列有关紫外线描述，哪项不正确：A．穿透力强 B.常用于空气、物品表面消毒C.消毒效果与作用时间有关D.对人体皮肤、眼睛有损失作用E．能干扰细菌DNA复制与转录27．利用紫外线灯杀菌时,紫外线的照射时间为：A. 5minB. 30minC. 60minD.10minE.15min28. 紫外线最强的杀菌波长应为：A.265-266nmB.200-300nmC.136-390nmD.136-260nmE.236-300nm29．一次性医用塑料制品的大量消毒可采用：A．煮沸 B．巴氏消毒法 C．电离辐射D．干热灭菌法 E．高压蒸汽灭菌法30.不属重金属盐类的消毒剂是：A.高锰酸钾B. 氯化汞C. 汞溴红D.硝酸银E. 蛋白银31.乙醇消毒剂常用的浓度是：A．100% B．95% C．75% D．50% E．30%32.乙醇的消毒机制是：A. 干扰染色体的复制和转录B. 改变细胞膜的通透性C. 蛋白质凝固、变形 D .干扰代谢 E.破坏细胞壁33.新生儿预防淋病奈瑟菌性结膜炎可用哪种化学消毒剂：A.0.1%硝酸银B. 1%硝酸银C. 3%过氧化氢D.75%乙醇E.以上不是34.地面、排泄物消毒可采用的是：A. 0.1%高锰酸钾B. 1%硝酸银C. 3%过氧化氢D .75%乙醇 E.生石灰35.含糖类、血清或鸡蛋的培养基灭菌宜采用：A.煮沸法B.流通蒸汽灭菌法C. 间歇蒸汽灭菌法D.高压蒸汽灭菌法E.干烤法36.正常菌群变为条件致病菌的条件中，错误的是：A.机体免疫力下降B.寄居部位改变C. 机体外伤D.饮食不洁E.大剂量使用抗生素37.常用于手术器械灭菌的是：A.高压蒸汽灭菌法B.紫外线照射法C.巴氏消毒法D.滤过除菌法E.干烤法38.影响消毒剂效果的因素中，最不重要的是：A. 消毒剂的使用浓度B. 消毒剂的作用时间C. 微生物的种类与数量D. 湿度E.温度39.根据微生物的危害程度分类埃博拉病毒属于：A. 第一类微生物B. 第二类微生物C.第三类微生物D.第四类微生物E.第五类微生物40.病原微生物实验室分级中安全防护级别最高的是：A. BSL-1B. BSL-2C. BSL-3D. BSL-4E. BSL-5答案：1.B2.A3.E4.B5.A6.E7.C8.A9.D 10.B 11.E 12.E 13.C 14.D 15.A 16.B 17.E 18.A 19.D 20.B 21.E 22.D 23.B 24.B 25.E 26.A 27.C 28.A 29.C 30.A31.C 32.C 33.B 34.E 35.C 36.D 37.A 38.D 39.D 40.D二、填空题1.化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机制有、和改变细胞膜的通透性等类型2.常用于饮用水消毒和游泳池水消毒的消毒剂是和。
微生物学第三章消毒与灭菌(共60张PPT)
介质的性质
细菌在非水介质中，比水作介质时对热 的抵抗力大
水分、2~4℃石炭酸、油类、干焦空气
不同介质对微生物抗热力的影响
2、低温抑菌法
低温可降低微生物代谢的速度。 大多数微生物对低温有很强的抵抗力 一般的：4-10℃ 淋球菌、脑膜炎球菌、流行感冒杆菌敏感，
伤寒杆菌、白喉杆菌耐低温 冷冻干燥：采用迅速冷冻和抽真空除水。
消毒（Disinfection）：杀灭物体上的病原微生物的方法，
叫消毒。消毒只要求达到消灭传染性的目的，而对非病原微 生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生物 生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。
无菌（asepsis）：指没有活的微生物的状态。
夜培养，残余的芽孢发芽为繁殖体；
第三天：100℃-30分钟，杀死所有微生物。
巴氏消毒法
常用于牛乳及一些饮料
最大限度地消灭病原体，尽可 能少地损害食品的营养物质
•低温维持巴氏消毒法（LTH)： •63～65℃-30分钟； •高温短时间巴氏消毒法(HTST):
•71～72℃-15秒， •超高温巴氏消毒法(UHT): •132℃-1～2秒
•巴氏消毒法
•高压蒸气灭菌法
干热灭菌法
火焰灭菌法
以火焰直接灼烧杀死物 体中的全部微生物的方 法。
灼烧 焚烧
酒精灯
热空气灭菌法
适用于高温下不损坏、 不变质的物品，需在 160℃维持1－2小时，才
能达到杀死所有微生物 及其芽孢、孢子的目的。
干烤箱
湿热灭菌法
煮沸灭菌
100℃，煮沸10～20分钟，可杀死所有细 菌繁殖体，芽孢常需煮沸1－2h才能杀死。
噬菌体（phage）：是指寄生于微生物 （细菌、霉形体、螺旋体、放线菌以及 蓝细菌等）中的病毒。
第3章 消毒与灭菌
长。
37
3.温度
温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。温度每增高
l0℃，重金属盐类的杀菌作用约增加2～5倍，石炭酸的杀
菌作用约增加5～8倍。
4.酸碱度
消毒剂杀菌作用受pH影响。如新洁尔灭pH 9时
杀菌作用强。同时pH也影响消毒剂的电离度，一般说，未 电离的分子，较易通过细胞壁，杀菌效果好。 5.有机物 6.药物颉抗 7.其他因素 环境中有机物，可降低消毒剂效果。 两种消毒剂合用时，有的能相互颉抗。如阴 湿度、穿透力、表面张力等。
800nm。可见光线只有微弱的杀菌作用。 2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用，是天然杀菌因素，紫外线是日光
杀菌作用的主要因素。许多微生物在直射日光下，半小时到数小时即 可死亡。芽抱的抵抗力强，经20h才死亡。
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3.紫外线 紫外线中波长200-300nm部分具有杀菌作用，其 中以265-266nm段的杀菌力最强，这与DNA吸收光谱范围一 致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm，杀菌力强而稳定。
14
（1）干热灭菌法 包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。
火焰灭菌法是以火焰直接烧灼杀死物体中微生物的方 法。分为灼烧和焚烧两种。 热空气灭菌指利用干热灭菌器以干热空气进行灭菌的 方法。用于耐高温物品。灭菌条件：160℃维持 l-2h，才 能杀死所有微生物（芽孢、孢子）。
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高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121 ℃ 20~30分钟 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 水蒸汽100 ℃ 15~30分钟(繁殖体) 巴氏消毒法 较低的温度（61 ℃ 30分钟）杀灭致病菌 间歇蒸汽灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌
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巴氏消毒法具体方法有三种
病原微生物第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全习题与答案
第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全一、选择题【A型题】1.杀灭包括芽胞的所有微生物的方法称作:A.消毒B.无菌C.灭菌D.灭活E.防腐2.判断彻底灭菌的依据是:A.细菌繁殖体被完全消灭B.芽胞被完全消灭C.细菌菌毛蛋白变性D.鞭毛蛋白被破坏E.细菌的荚膜被破坏3.热力灭菌的方法中，效力最强的是:A.煮沸法B.干烤C.巴氏消毒法D.使用流通蒸气E.使用103.4kPa高压蒸气4.去除血清标本中污染的细菌常用:A.巴氏消毒法B.紫外线照射法C.煮沸法D.滤过除菌法E.高压蒸气灭菌法5.外科手术敷料使用前宜采用的灭菌方法是:A.干烤B.巴氏消毒法C.紫外线照射法D.流动蒸气消毒法E.高压蒸气灭菌法6.将牛乳加热71.7℃经15-30s的目的是:A.消毒B.灭菌C.防腐D.灭活病毒E.保鲜7.细胞培养用24孔塑料板适用下列哪种杀菌法?A.煮沸法B.紫外线照射法C.红外线照射法D.高压蒸气灭菌法E.间歇灭菌法8.紫外线的杀菌机制是:A.破坏细菌DNA构型B.破坏酶系统C.破坏菌体蛋白D.干扰蛋白质合成E.破坏RNA9.紫外线杀菌的最佳波长为:A.200nmB.265nmC.300nmD.560nmE.650nm10.属于表面活性剂的消毒剂是:A.高锰酸钾B.来苏C.甲醛D.0.05%～0.1％杜灭芬E.龙胆紫11.漂白粉属于:A.酚类消毒剂B.醇类消毒剂C.氧化剂消毒剂D.表面活性剂E.酸碱类12.用于除菌的薄膜滤菌器，其滤膜孔径应为:A.O.12～0.25μmB.O.22～0.45μmC.O.52～0.65μmD.0.72～0.85μmE.O.95～1.0μm 【X型题】1.可以杀灭芽胞的方法是:A.煮沸法2小时B.巴氏消毒法C.流动蒸气消毒法15～30分钟D.间歇蒸气灭菌法E.高压蒸气灭菌法2.关于紫外线杀菌，正确的叙述是:A.其杀菌与波长有关B.可直接破坏细菌的DNA构型C.穿透力弱，故适用于空气或物体表面消毒 D.可杀死细菌的芽胞 E.波长265～266m杀菌作用最强3.化学消毒剂的杀菌机制是:A.促使菌体蛋白变性B.破坏细菌DNA构型C.干扰细菌的酶系统和代谢D.损伤菌细胞膜 F.使菌体蛋白凝固4.影响消毒剂消毒效果的因素有:A.消毒剂浓度、性质与作用时间B.温度C.酸碱度D.菌种与生长期E.环境中有机物和其他因素的影响5.在温度和时间相同的情况下，湿热杀菌效力比干热杀菌效力大的原因是:A.湿热中细菌菌体蛋白较易凝固B.湿热灭菌能够杀死细菌芽胞C.湿热蒸气的穿透力比干热强D.湿热灭菌对细菌DNA损害较大E.湿热的蒸气有潜热存在二、填空题1．消毒与灭菌的方法一般可分为和两大类。
消毒灭菌和病原微生物实验室生物安全医学知识
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二、病原微生物实验室的分级
级别Leabharlann 处理对象一级 二级 三级
对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植 物致病的致病因子。
对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病 因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有 有效的预防和治疗措施。
对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使 人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具 有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。
的物品。所有这些物品都应该灭菌。
（二）中危器械物品 用时不进入无菌组织
但接触黏膜的器械。采用消毒即可。
（三）低危器械物品 只接触未损伤皮肤但
不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。
（四）快速周转的医疗器械
第二节
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消毒灭菌的运用
（二）室内空气消毒灭菌
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一、病原微生物的分类
根据传染性、感染后对个体或者群体的危 害程度，病原微生物分为四类：
第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾 病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布 消灭的微生物。
第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病， 比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、 动物与动物间传播的微生物。
1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂
（三）低效消毒剂 （low-level disinfectants）
1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾
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固体二氧化氯消毒剂
第二节
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消毒灭菌的运用
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。
3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。
4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。
4 消毒灭菌
9. 能达到灭菌效果的方法
A．煮沸10分钟 煮沸10分钟 10 干烤160℃ 1～ B．干烤160℃ 1～2小时 C．巴氏消毒法 D．高压蒸汽灭菌 E. 滤菌器滤过除菌
（3）人工紫外线灯原理：将水银放入石 人工紫外线灯原理： 英玻管中通电气化而成。 英玻管中通电气化而成。 （4）紫外线的穿透能力弱，不能通过普 紫外线的穿透能力弱， 通玻璃、尘埃， 通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及 空气、手术室、 空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病 亦可用于不耐热物品表面消毒。 房，亦可用于不耐热物品表面消毒。 杀菌波长的紫外线对人体皮肤、 （5）杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
第三章 消毒与灭菌
梅 雪
一 基本概念
消毒（Disinfection） 消毒（Disinfection）
杀灭物体上病原微生物的方法。 杀灭物体上病原微生物的方法。用以消毒的 药物称为消毒剂(Disinfectants) (Disinfectants)。 药物称为消毒剂(Disinfectants)。一般消毒剂 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。对于芽胞 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
A． 杀灭物体上所有微生物的方法 B． 杀死物体上病原微生物的方法 C． 抑制微生物生长繁殖的方法 D．杀死细菌芽胞的方法 E. 物体中没有任何活的微生物存在
2．杀灭细菌芽胞最有效的方法是
A． 煮沸法 B． 流动蒸汽消毒法 C． 间歇灭菌法 D． 高压蒸汽灭菌法 E. 巴氏消毒法
病原微生物实验室的消毒与灭菌
病原微生物实验室的消毒与灭菌消毒和灭菌是保护人员和环境不被病原微生物感染和污染的重要环节。
含有病原微生物的废物必须经过灭菌才能作为普通废物处理；对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消毒达到对病原微生物的杀灭，对操作人员进行保护，对环境保护。
消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。
消毒是通过物理或化学手段杀灭或清除病原微生物，但不一定能杀死所有细菌芽孢的方法。
灭菌是杀灭物体上的所有微生物，包括病原性和非病原性微生物、细菌繁殖体和芽孢的一切方法[1]。
消毒与灭菌的方法可分为物理方法和化学方法两大类：①物理消毒灭菌法：包括热力法、射线法和过滤法三种。
超声波、干燥、冷冻也能杀菌抑菌。
热力灭菌法是利用热能去变性蛋白质或核酸、破坏细胞膜或胞膜来实现杀死微生物。
分干热灭菌和湿热灭菌两大类。
②化学消毒灭菌法：消毒剂在常用的浓度下，只对细胞的繁殖体有效，对其芽孢则需要提高消毒剂的浓度和延长作用时间[2]。
1 物理消毒灭菌法1.1热力灭菌法1.1.1干热灭菌法常用的干热灭菌法有：干烤、烧灼、焚烧。
焚烧常用于可废弃的污染物及人或动物的尸体的灭菌；烧灼用于微生物实验室内接种微生物所用器材的灭菌，也可用于外科手术器材的应急处理。
干烤灭菌可用于耐高温的玻璃制品、金属制品、糖瓷制品、油劑等的灭菌。
干烤灭菌是在干烤箱内进行的。
使用烤箱灭菌时，要求器械和用品应洗净、凉干或擦干，物品包装不易过大，粉剂和油剂厚度不宜超过1.3cm，箱内装载物品不宜超过烤箱高度的2/3，物品间应留有空隙。
灭菌时间应从温度升高到要求时算起，一般170℃时需60 min，160℃时需120 min。
1.1.2常用的湿热灭菌方法煮沸、流通蒸汽、低热消毒（巴氏消毒）、间歇灭菌（廷德氏灭菌）、高压蒸汽灭菌等方法。
高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽孢在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
本实验室使用的是全自动立式高压灭菌器，在103.4KPa蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15～20 min。
第三章 消毒与灭菌
耐热药品、手术敷料等。
手提式高压蒸汽灭菌器
二. 辐 射
辐射：能量通过空间传递的一种物理现象。按辐
射对微生物的灭活作用分：
1.非电离辐射: 可见光、日光、紫外线 2.电离辐射: 、、γ 、χ 射线以及高能质子、 中子等
(一)非电离辐射
1.可见光: 指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，
其波长400～800nm。可见光线对微生物一般无多大影 响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故
4. 何谓细菌素？
5. 毒性噬菌体和温和噬菌体的概念。 6. PFU的概念。
(2)巴氏消毒法 :以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，
而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 . 1.低温维持巴氏消毒法 63～65℃30min 2.高温瞬时巴氏消毒法 71～72℃15s 3.超高温巴氏消毒法 132℃1～2s
（3）流通蒸汽灭菌法 ：是一种常压蒸汽消毒法，细
菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。
培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。
光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料 如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂 在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。
2.阳光: 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因
素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小 时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得 多，往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因
（二）植物杀菌素 ：某些植物中存在的杀菌物质。
如黄连、大蒜、板蓝根等。
（三）细菌素 ：某种细菌产生的一种具有杀菌作用的
蛋白质，只能作用于与它同种不同菌株的细菌 以及与它亲缘关系相近的细菌，如大肠菌素 。
消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全(ppt)
含碘消毒剂： 碘伏、碘酊 氧化作用，但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
（三）低效消毒剂：
杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
（一）、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
煮沸法
煮沸温度为100℃，一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了，芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒， 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下，温度达到 121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理：
干扰代谢和DNA合成，破坏细胞膜、酶，产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点： 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对
不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。
运用： 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
医学微生物学 消毒灭菌
很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微
生物。肝炎病毒、CMV、EBV 第四类 是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。 如小鼠白血病病毒等。 第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。
二、病原微生物实验室的分级
级别 处理对象 一级 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、 动植物致病的致病因子。 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的 二级 致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危 害，具有有效的预防和治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶 三级 胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物 和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途 四级 径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有 预防治疗措施。
二、化学消毒灭菌法
化学消毒剂的作用机制
消毒剂的主要种类 消毒剂的应用
消毒剂杀菌机理：
1. 使菌体蛋白变性和凝固 ：
酚、醇、酸硷、醛类、 重金属盐类（高浓度）
2 . 干扰细菌的酶系统（酶失活）：
氧化剂、重金属盐类（低浓度）
3. 损伤细菌细胞膜 ：
酚类（低浓度）、表面活性剂
按杀菌能力又可将消毒剂可分
高压蒸气灭菌器 103.4Kpa 121.3º C×15-20 分 钟
品
灭菌
消毒
医疗器械
煮沸法
湿
饮水和食具
耐高温 耐湿物
灭菌
热
法
品
种类 巴氏消 毒法
方法
效果
用途
牛奶，酒类
湿
巴斯德创用，61.1消毒（杀死病 62.8℃×30分钟， 原菌，不破坏 71.7 ℃ ×30秒钟 营养成分） （常用）
临床微生物与检验 第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全
（4）环氧乙烷
作用机理：对细菌蛋白质和核酸的烷化作用。 特点：
①为杂环类化合物，沸点10.8℃，易蒸发。气体消毒剂。
②有穿透力，杀菌广谱高效，杀灭芽胞能力强。 ③对多数物品无损害作用。 ④易燃，对人有一定毒性。空气中浓度不得超过1ppm。 用途：现已有特制的环氧乙烷灭菌箱。使用安全方便。
2.中效消毒剂—能杀灭微生物的繁殖体，结核分枝杆菌、某些
辐射杀菌法
日晒和紫外线
[原理] 日光中杀菌的成分主要是紫外线。紫外线的波长在 200～300nm时，具有杀菌作用，其中以265～266nm杀菌 力最强，易被DNA吸收。细菌DNA吸收紫外线后，其生物学 活性发生改变，同时蛋白质也光解变性，导致细菌死亡。 [特点] 紫外线穿透力弱，玻璃、尘埃、纸张、水蒸气均能阻 挡紫外线。 [应用范围] 日晒是有效的杀菌方法，用于病人的衣服、被褥、 书报等的灭菌。紫外线仅适用于手术室、婴儿室、烧伤病房、 传染病房和无菌室的空气消毒，亦可用于不耐热物品的表面 消毒。
2.熏蒸
3.二氧化氯溶液 4mg/m3
4.中草药
三、手和皮肤的消毒
（一）肥皂和流动水经常正确洗手是预防多种病原微生物感染的有效方法。 （二）被病原微生物污染时
1. 75%酒精 2. 氯己定溶液 3. 过氧乙酸 4. 次氯酸钠溶液 5. 碘伏
四、黏膜的消毒
（一）口腔黏膜 3%H2O2 （二）冲洗尿道、阴道、膀胱0.1%~0.5%氯己定溶液；1g/L高锰酸钾溶液
（1）含氯消毒剂
次氯酸钠
常用种类
二氯异氰酸尿酸钠
漂白粉
作用机理：
这类制剂遇水可产生氯（Cl2）、次氯酸（HClO）及新生态氧。 氯可氧化细菌的-SH、次氯酸（HClO）可与胞质成分作用，形成氮 -氯复合物，干扰细胞代谢。 特 点：（1）具有强大的杀菌作用。
03第三章 消毒与灭菌
第二类：高温瞬时巴氏消毒法，在71-72℃保持15s。
第三类：超高温巴氏消毒法，在132℃ 保持1-2s。
加热消毒后需迅速冷却至10 ℃以下，称为冷击。
3）流通蒸汽灭菌法 ：利用蒸汽在蒸笼或 流通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法，也称 间歇灭菌法。灭菌后需保温过夜再灭菌， 以达到完全灭菌的目的。
髓、尾鞘、尾板、尾刺、尾丝组成。
不同的噬菌体示意图
（二）抗原性及抵抗力 1、抗原性：能刺激机体产生特异性抗体。
特性：该抗体能抑制相应噬菌体侵袭敏感 细菌，但对已吸附或已进入宿主菌的噬菌体 不起作用。 2、抵抗力：对理化因素的抵抗力较强，较 耐热、耐低温和冰冻，但对紫外线和Ｘ射线 敏感；大多数能抵抗乙醚、氯仿和乙醇，在 0.5%升汞或苯酚中经3—7天不丧失活性。在 饱和NaCl溶液中保持活力数年。
可见光线对微生物一般无多大影响，但长时 间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培 养细菌和保存菌种，均应置于阴暗处。 （二）阳光：直射日光有强烈的杀菌作用，紫外 线是日光杀菌作用的主要因素。
（三）紫外线：紫外线中波长200-300nm部分具有 杀菌作用，以265-266nm波长段的杀菌力最强。一 般实验室常用253.7nm，杀菌力强而稳定，照射1015min即可。 特点：穿透力很差，即使是很薄的玻璃也不能透 过。 适用范围：常用于微生物实验室、无菌室、手术室、 传染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高 温或化学药品消毒的物品表面消毒。
二、消毒剂的种类及其应用
消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。 理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保存、对动 物毒性很小、无残留污染、价格低等。 消毒剂的分类 （1）使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、 醛类； （2）损伤胞浆膜 如酚类(低浓度)、表面活性剂、醇类等脂 溶剂；
消毒灭菌与病原微生物
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Байду номын сангаас
Sec.4 影响消毒灭菌效果的因素
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32
微生物种类
微生物的物理状态 –营养缺陷下生长的微生物抵抗力强。
数量 消毒剂的性质,浓度,作用时间 –表面活性剂对G-效果好,芽孢菌,真菌无效。 –浓度高比低效果好,但乙醇70-75%最好 温度,酸碱度,有机物 –显著影响消毒剂的效果。
–化学消毒 过氧乙酸喷雾 0.5%水溶液30ml/m3 1hr。 过氧化氢喷雾 0.3%溶液,30ml/m3 1hr。 二氧化氯熏蒸 水溶解饱合液自然逸散。 中药烟熏
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手和皮肤的消毒
–医护人员带菌,院内感染重要途径,30%。 –勤洗手,会洗手,肥皂,水;乙醇,次氯酸钠。
粘膜的消毒 口腔-过氧化氢,泌尿-氯已定。 病人排泄物分泌消毒 粪尿脓痰,次氯酸钠2h。 病人污染物品 蒸,煮,熏,擦;过氧乙酸浸泡,烧。 饮用水消毒 氯气消毒,或漂白粉。 环境消毒 房间-过氧乙酸喷洒,厕所-生石灰,污水-氯。
2003年1月11日，美国得克萨斯州工业大学的微生物学家巴特勒教授 检查实验室的时候发现，实验室中30份鼠疫杆菌样本不翼而飞。
2004年冬春之交，新加坡、我国台湾及北京地区相继发生实验室 SARS病毒泄漏，造成人员感染事件。
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3月25日，在腹泻病毒实验室进修的安徽医科大学研究生 宋某感到全身酸痛、发热、身体不适。在不经意中，她已 感染了SARS病毒。由于从未接触过这种致命的病毒，也 没有得到任何提醒，甚至在被自己传染的母亲去世后，宋 某也没有想到“非典”二字。
–中危器械物品 呼吸机,麻醉机,胃镜,支气管镜, 体温计接触黏膜。消毒使用。
第三章 消毒与灭菌
3. 流动蒸气消毒法又称常压蒸气消毒法，是利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体经15～30min可被杀灭，但芽胞常不被全部杀灭。该法常用的器具是Arnold消毒器，我国的蒸笼具有相同的原理。
三、滤过除菌法
滤过除菌法（filtration）是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌目的。所用的器具是滤菌器（filter），滤菌器含有微细小孔，只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。滤过法主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。滤菌器的除菌性能，与滤器材料的特性、滤孔大小、静电作用等因素有关。滤菌器的种类很多，目前常用的有薄膜滤菌器、素陶瓷滤菌器、石棉滤菌器（亦称Seitz滤菌器）、烧结玻璃滤菌器等。
二、消毒剂的应用
病人排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等，一般多用等量的20％漂白粉、5％石炭酸或2％来苏，搅拌均匀，作用2h再倾去。
皮肤2.5%碘酒、70％乙醇、2％红汞均可应用。
粘膜新生儿预防淋病奈瑟菌性眼结膜炎可用1％硝酸银或2％蛋白银滴眼；口腔粘膜消毒可用3％过氧化氢；冲洗尿道、阴道、膀胱等可用0.01%～0.1%洗必泰或0.1％高锰酸钾。
表面活性剂又称去污剂，易溶于水，能减低液体的表面张力，使物品表面油脂乳化易于除去，故具清洁作用。并能吸附于细菌表面，改变胞壁通透性，使菌体内的酶、辅酶、代谢中间产物逸出，呈现杀菌作用。表面活性剂有阳离子型、阴离子型和非离子型三类。因细菌带阴电，故阳离子型杀菌作用较强。阴离子型如烷苯磺酸盐与十二烷基硫酸钠解离后带阴电，对革兰阳性菌也有杀菌作用。非离子型对细菌无毒性，有些反而有利于细菌的生长，例如吐温80（tween 80）对结核分枝杆菌有刺激生长、并有使菌分散的作用。常用于消毒的表面活性剂有新洁尔灭、杜灭芬等。
0Azhxq《医学微生物学》复习思考题
生活需要游戏，但不能游戏人生；生活需要歌舞，但不需醉生梦死；生活需要艺术，但不能投机取巧；生活需要勇气，但不能鲁莽蛮干；生活需要重复，但不能重蹈覆辙。
-----无名《医学微生物学》复习思考题绪论1、微生物的概念，微生物分哪三型八大类？第1章细菌的形态与结构1、名词解释：细菌L型；中介体；质粒；芽胞2、细菌的基本结构与特殊结构以及它们的主要功能、G+菌与G-菌的细胞壁的比较。
3、简述细菌L型的形成、主要生物学性状及其临床意义。
4、试述某些抗生素（青霉素、溶菌酶、红霉素、链霉素）的抗菌作用机制。
5、革兰染色的原理、方法、结果判断与临床意义。
第2章细菌的生理1、名词解释：IMViC试验；热原质；细菌素；内毒素；外毒素；培养基；菌落；纯培养2、简述细菌生长繁殖的基本条件有哪些？为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生长繁殖？3、细菌的合成代谢产物种类及其在医学上的意义？4、细菌的生长曲线可分为几期？各自的主要特点是什么？5、按物理性状不同可将培养基分哪几种？各有何主要用途？6、按用途不同可将培养基分为哪几种？请各列出一种常用的培养基。
7、根据细菌代谢时对分子氧的需求与否，可将细菌分为哪几类？第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1、名词解释：消毒；灭菌；无菌；无菌操作；2、常用湿热灭菌方法的种类及其效果与适用范围。
3、高压蒸汽灭菌法所要求的条件和用途各是什么？4、请叙述紫外线的杀菌作用机制、特点和注意事项。
5、化学消毒剂按其杀菌能力可分为哪三大类？6、简述乙醇、碘酊、过氧化氢、过氧乙酸、戊二醛、环氧乙烷消毒灭菌的主要特点。
7、请简要说明手术室常规使用的消毒灭菌方法。
8、病原微生物实验室生物安全的核心是什么？9、根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，可将其分为哪四类？10、化学消毒剂的杀菌机制有哪些？各自种类的代表是什么？11、影响消毒灭菌效果的因素有哪些？第4章噬菌体1、名词解释：噬菌体；前噬菌体；毒性噬菌体；溶原性细菌2、毒性噬菌体增殖以何种方式增殖？它的增殖过程包括哪几个阶段？3、温和噬菌体在宿主菌内有哪几种存在状态？第5章细菌的遗传与变异1、名词解释：转化；接合；转导；溶原性转换；耐药性变异；卡介苗（BCG）2、医学上重要的质粒的种类有哪些？简述质粒的主要特征。
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高压蒸汽灭菌器
第3章消毒灭菌与病原微生物
湿热灭菌效果为何优于干热灭菌？
原因： ①湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性 ②湿热的穿透力比干热大 ③湿热的蒸气有潜热效应存在。
第3章消毒灭菌与病原微生物
（二）辐射杀菌法
1、紫外线 2、电离辐射：β、γ射线等 3、微波
第3章消毒灭菌与病原微生物
低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存 细菌菌种。
为避免解冻时对细菌的损伤，可在低温状态 下真空抽去水分，此方法称为冷冻真空干燥法。 该法是目前保存菌种的最好方法。
第3章消毒灭菌与病原微生物
二、 化学消毒灭菌法
许多化学药物能影响细菌的化学组成、物理 结构和生理活动，从而发挥防腐、消毒甚至杀菌 作用。这些化学药物称为化学消毒剂。一般对人 体组织有害，只能外用或用于环境的消毒。
除去尘埃和一切污秽以减少微生物数 量的过程。
第3章消毒灭菌与病原微生物
无 菌 (asepsis)
不存在任何活菌、多是灭菌的结果。
**无菌操作 (antisepsis technique)
防止细菌进入人体或其他物品的操 作技术。
第3章消毒灭菌与病原微生物
Sec.2 消毒灭菌的方法
物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法
紫外线杀菌试验
37℃ 24h
紫外灯下50cm处照射30min
照射后培养结果观察
第3章消毒灭菌与病原微生物
紫外线
波 长 240~300nm的紫外线具有杀菌作用，其 中以265~266nm最强。 ***杀菌机制 主要作用于DNA，形成二聚体，干 扰DNA的复制与转录，导致细菌的变异或死亡。 特 点 紫外线穿透力较弱，一般只用于手术室等 的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。 紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用。
–低效消毒剂 可杀灭多数繁殖体，不能杀灭芽胞、结核分枝杆菌 及某些抵抗力强的真菌和病毒。 季铵盐类消毒剂 –新洁尔灭:表面活性剂,清洁作用。 –皮肤粘膜,地面。 氯已定 –洗必泰:皮肤粘膜,地面。 高锰酸钾 –氧化杀菌作用皮肤粘膜,餐具,水果,蔬菜消毒第3章消毒灭菌与病原微生物来自Sec.3 消毒灭菌的运用
第3章消毒灭菌与病原微生物
高效消毒剂
–杀灭所有微生物包括芽孢。 –适用于不耐受热力灭菌、进入人体内部的物品
含氯消毒剂: –次氯酸钠,漂白粉等。 –水中产氯,次氯酸,新生态氧,杀菌。 –饮用水,皮肤,地面,排泄物,污水。
过氧化物消毒剂:过氧化氢,过氧乙酸，二氧 化氯。 醛类消毒剂:戊二醛,甲醛。 环氧乙烷:高效杀菌,易燃,有毒性。
第3章消毒灭菌与病原微生物
***化学消毒剂的杀菌机制
①促进菌体蛋白质变性或凝固 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等 ②干扰细菌的酶系统和代谢 破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化重金属盐类 与细菌蛋白的-SH基结合； ③损伤细菌的细胞膜 如酚类、表面活性剂、脂溶剂等能降低细菌胞膜 和病毒包膜的表面张力并增加其通透性。
第3章消毒灭菌与病原微生物
–中效消毒剂
不能杀灭芽胞，能杀灭繁殖体、真菌和大多数病毒 内窥镜,喉镜,阴道窥器，麻醉器材,皮肤粘膜消毒。
含碘消毒剂: –碘酊,碘伏:
沉淀蛋白,氧化杀菌,皮肤、体温计。 醇类消毒剂: –乙醇:70-75%,皮肤粘膜消毒。 –异丙醇:作用强,毒性强,器材体温计。
第3章消毒灭菌与病原微生物
第3章消毒灭菌与病原微生物
（三）滤过除菌法
器 具： 滤菌器
用 途： 不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生
素以及空气等的除菌。
第3章消毒灭菌与病原微生物
薄膜滤菌器：硝基纤维素膜
第3章消毒灭菌与病原微生物
层流室
第3章消毒灭菌与病原微生物
（四）干燥和低温抑菌法
有些细菌的繁殖体在空气中干燥时会很快死亡, 干燥法常用于保存食物。
杀灭物体或环境中的病原微生物。但不 一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。
用以消毒的药品称为消毒剂。
第3章消毒灭菌与病原微生物
防 腐 (antisepsis)
体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 用以防腐的药品称为防腐剂。
同一化学药品在高浓度为消毒剂，低浓度时常 为防腐剂。
清 洁（cleaning)
以1～10 μm波长的热效应最强。 ……
第3章消毒灭菌与病原微生物
2. 湿热灭菌法
100℃煮沸5min 巴氏消毒法：71.7 ℃/15～30sec；
61.1～62.8 ℃/30min 流动蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 ***高压蒸汽灭菌法：在103.4kPa
（1.05kg/cm2）温度可达121.3ºC，15~20min， 可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。
第3章消毒灭菌与病原微生物
消毒灭菌的运用
1、医疗器械物品
2、室内空气 3、手、皮肤、粘膜 4、病人的排泄物与分泌物 5、病人污染的物品 6、饮水 7、环境
第3章消毒灭菌与病原微生物
一 医疗器械物品的消毒灭菌
–高危器械物品 注射器,手术器械,注射液体,导 管进入无菌组织物品。灭菌使用。
第3章消毒灭菌与病原微生物
一、 物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法：干热、湿热。 （二）辐射杀菌法 （三）滤过除菌法 （四）干燥和低温抑菌法
第3章消毒灭菌与病原微生物
1. 干热灭菌法
焚烧 用于废弃物品或动物尸体等 烧灼 用于接种环、试管口等的灭菌。 干烤 171℃/1h或160 ℃/2h。 红外线 0.77～1000 μm 波长的电磁波，
第3章消毒灭菌与病原微生物
2. 电离辐射
（包括高速电子、β射线和γ射线） 具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用。 常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于
食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。
第3章消毒灭菌与病原微生物
3. 微 波 波长为1~1000mm的电磁波
可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质，但不能穿透 金属表面。 主要用于食品、非金属器械、检验室用品、无菌 室和病室中食品用具、药杯及其他用品的消毒。
第3章
消毒灭菌与病原微生物 实验室生物安全
第3章消毒灭菌与病原微生物
Sec.1 消毒灭菌的常用术语
第3章消毒灭菌与病原微生物
***灭 菌 (sterilization)
杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀 灭细菌芽胞、病毒、霉菌在内的全部病原微 生物和非病原微生物。
***消 毒 (disinfection)