胶乳增强免疫比浊反应原理

胶乳增强免疫比浊反应原理：

免疫比浊反应原理：

当样本中的待测抗原与试剂中的特异性多克隆抗体相遇后，即可发生特异性的结合反应（一个抗原具有多个不同的抗原决定簇（反应位点），可以连接多个不同的对应位点抗体；而抗体具有两个相同的抗原结合位点，可以同时结合两个待测抗原；），从而形成网状的抗原-抗体分子复合物，引起溶液中浊度的变化，通过测试溶液中透射或散射的吸光度变化，从而确定样本中待测抗原的浓度；

胶乳增强免疫反应比浊原理：

基于免疫反应原理，和纳米颗粒的特殊效应（表面效应、量子尺寸效应、小尺寸效应、宏观量子隧道效应），不只可以检测样本中的完全抗原，也可以检测样本中的半抗原、抗体，从而引起浊度变化，此时浊度与空白样本的不同作为待测物浓度的检测依据。

免疫透射比浊法

原理：

可溶性抗原与相应抗体反应后形成的免疫复物，使介质浊度发生改变，光线通过抗原抗体反应后的溶液时，被其中的免疫复合物微粒吸收，在保持抗体过量的情况下，吸光度（A 值）与免疫复合物量呈正相关。透射光强度和形成的免疫复合物呈反比。

优点：透射比浊法灵敏度比单扩高5-10倍，重复性好，结果准确，操作简便，且能用全自动或半全自动生化分析仪进行检测。

不足：

①抗体用量较大；

②溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大（35-100nm)，分子太小则阻挡不了光线的通过；数量要足够多，如果数量太少，则溶液浊度变化太小，对光通量影响不大。灵敏度较散射比浊法低；

③透射比浊测定在抗原-抗体反应的第二阶段，需在抗原抗体反应达到平衡后进行检测，耗时较长。

胶乳增强免疫比浊法

在一般的透射比浊法中，少量小分子免疫复合物极难形成浊度，要形成较大的免疫复合物，参与反应的抗原、抗体量应较大（浓度高），这无法满足高灵敏度检测项目的要求。胶乳增

强免疫比浊法为。为提高免疫浊度测定的灵敏度，发展了一种使用纳米胶乳颗粒作为信号放大器的免疫比浊法，即胶乳增强免疫比浊法。

单个胶乳颗粒在入射光波长之内并不阻碍光线透过，两个及其两个以上胶乳颗粒凝聚时则使透过的光减少或散射光增强，其透射光减少的程度和散射光增强的程度与胶乳颗粒凝聚的程度在一定范围内呈正比。

原理如下：

用抗体致敏的大小适中、均匀一致的纳米胶乳颗粒（根据检测灵敏度不同，纳米胶乳颗粒的粒径在几十纳米到几百纳米不等），在遇到相应抗原时，胶乳颗粒上的抗体与抗原特异结合，引起胶乳颗粒凝聚，从而引起溶液中的浊度变化。

优点：

本法测定灵敏度大大高于普通比浊法，可达ng/L水平，操作简便。