实验1植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

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植生实验 植物组织渗透势的测定

植生实验 植物组织渗透势的测定

实验一、植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验原理:将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中,使细胞将要产生初始质壁分离的浓度,就等于细胞液的浓度,根据浓度可计算出渗透势。

【注::典型植物细胞水势(Ψw)组成为:ψw=ψs+ψp+ψm (ψs 为渗透势,ψp为压力势,ψm为衬质势)。

渗透势(osmotic potential,ψs):由于溶质的存在而使水势降低的值称为渗透势或溶质势(solute potential,ψs),以负值表示。

渗透势值按公式ψs=-iCRT来计算(C为溶液的摩尔浓度;T为绝对温度,即实验温度+273;R为气体常数,R=0.0083;i为渗透系数,表示电解质溶液的渗透压非电解质溶液渗透压的倍数,如蔗糖i=1,NaCl i=1.8)。

压力势(pressure potential,ψp):由于细胞吸水膨胀时原生质向外对细胞壁产生膨压(turgor),而细胞壁向内产生的反作用力——壁压使细胞内的水分向外移动,即等于提高了细胞的水势。

由于细胞壁压力的存在而引起的细胞水势增加的值叫压力势,一般为正值。

当细胞失水时,细胞膨压降低,原生质体收缩,压力势则为负值。

当刚发生质壁分离时压力势为零。

衬质势(matrix potential, ψm):衬质势是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水的束缚而引起的水势降低值,如处于分生区的细胞、风干种子细胞中央液泡未形成。

对已形成中心大液泡的细胞含水量很高,ψm只占整个水势的微小部分,通常一般忽略不计。

因此一个具有液泡的成熟细胞的水势主要由渗透势和压力势组成,即ψw=ψs+ψp 】。

将细胞置于纯水或稀溶液中,外液水势高于细胞水势,外侧水分向细胞内渗透,细胞吸水,体积变大;外液水势等于细胞水势,水分进出平衡,细胞体积不变;将植物置于浓溶液中,外液水势低于细胞水势,水从细胞内向外渗透,细胞失水,体积变小。

将植物材料(带色洋葱表皮组织)置于浓溶液中,由于细胞壁的伸缩性有限,而原生质层的伸缩性较大,当细胞继续失水时,原生质层便和细胞壁慢慢分离开来,这种现象被称为质壁分离。

实验一、植物细胞渗透势与组织水势的测定

实验一、植物细胞渗透势与组织水势的测定

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如何确定质壁分离临界状态?
理论上:50%细胞发生角隅质壁分离。
• 实际操作:常以两个临界浓度的平均值作 为等渗溶液的浓度:
1.引起质壁分离的最低浓度; 2.不引起质壁分离的最高浓度。
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将土豆条浸入不同浓度蔗糖溶液后:
溶液Ψw >土豆条Ψ w: 土豆条吸水,长度↑ 溶液失水,C↑比重↑
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5.试比较两种方法的测定水势结果是否相同?如果 测定材料为叶片时,该采用什么方法测定叶片组 织的水势?
6.植物组织在蔗糖溶液中保持时间长短对测定结果 会产生什么影响?为什么?
7.小液流法测定组织水势与质壁分离法测定细胞渗 透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势作依据 的,试问两者在测定原理上有什么不同?
• 药品: 1mol/L蔗糖母液:每34.23g蔗糖定容到100mL。保存于 4℃。 蔗糖梯度浓度溶液:用母液配制(0.50mol/L、 0.40mol/L、 0.30mol/L、 0.20mol/L、 0.10mol/L、 0.10mol/L各10mL于中试管中。
• 实验材料: 洋葱、土豆。
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一、实验原理
基本概念
➢ 植物细胞对水分的吸收: 扩散、集流、渗透(扩散+集流的组合) 成熟的植物细胞以渗透性吸水为主。
➢ 决定因素:水势高低 ➢ 渗透作用:
水分从水势高的系统通过半透膜向水势低的系统移动。 ➢ 植物细胞的半透膜:原生质层(质膜、细胞质、液泡膜)
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(二)植物组织水势的测定

实验1 植物组织渗透势的测定

实验1 植物组织渗透势的测定

实验1 植物组织渗透势的测定实验1植物组织渗透势的测定实验1植物组织渗透势的测定一、质壁分离法【实验目的】掌控用质壁分离法测量植物非政府扩散势的原理,学会观测质壁拆分现象,并展开细胞扩散势的排序。

【实验原理】将植物组织细胞浸泡在某种外界溶液中时,植物细胞内汁液与外液之间因渗透势存在差异会发生渗透作用。

当细胞汁液的浓度大于外界溶液时,细胞失水,会发生质壁分离;当细胞汁液的浓度小于外界溶液时,细胞吸水;当细胞汁液与外液之间处于渗透平衡状态时,植物细胞内的压力势为零,细胞汁液的渗透势等于该溶液的渗透势。

该外界溶液的浓度成为等渗浓度。

【实验仪器与材料、用品】显微镜载玻片盖玻片镊子刀片1mol/l的蔗糖母液(称取34.23g的蔗糖用蒸馏水配置成100ml的溶液)移液器带有色素的洋葱或紫鸭趾草【主要内容】设计并酿制一系列浓度梯度的蔗糖溶液,通过实验找到并使细胞出现起始质壁拆分的浓度,排序植物非政府的扩散势。

【实验步骤】1、按下表配制一系列浓度的蔗糖溶液,放入小烧杯中。

2、挑一层洋葱鳞片(或青色鸭趾草叶片、蚕豆、玉米等作物的叶片表皮),出外表皮上用刀片切成约0.5-0.8×0.5-0.8的小方快,用小镊子从一角开始撕取表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入5-10分钟。

3、从高浓度的外液即为0.5mol/l蔗糖溶液已经开始依次抽出表皮薄片,放到几滴存有相同溶液的载薄片上,盖上盖玻片于低倍显微镜观察,并记录质壁分离的相对程度。

4、确定使细胞发生初始质壁分离的浓度,即一个引起半数以上细胞原生质体刚刚从细胞壁角隅处为拆分的浓度,和不引发质壁拆分的最低浓度。

两个音速溶液浓度的平均值即为与细胞的扩散势成正比。

酿制新鲜溶液和撕取新鲜叶的表皮,重复将以上步骤,直到有把握确认年才,结果记录在表中-2中。

表中-2实验结果记录表实验人日期材料名称实验室室温oc蔗糖的终浓度(mol/l)渗透势(巴,bar)0.50.450.40质壁分离的相对程度(作图表示)0.350.300.250.200.150.105、排序细胞质液的扩散势测出以上两个极限溶液浓度的平均值后,代入以下公式,计算出常压下该组织细胞质液的渗透势。

实验1植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

实验1植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

实验1 植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验目的观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。

二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。

该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

代入公式即可计算出渗透势。

三、实验仪器、试剂、材料等显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。

称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。

再配制成下列各种浓度:0.50mol/L:吸母液25ml+水25ml0.45mol/L:吸母液22.5ml+水27.5ml0.40mol/L:吸母液20.0ml+水30.0ml0.35mol/L:吸母液17.5ml+水32.5ml0.30mol/L:吸母液15.0ml+水35.0ml0.25mol/L:吸母液12.5ml+水37.5ml0.20mol/L:吸母液10.0ml+水40.0ml0.15mol/L:吸母液7.5ml+水42.5ml0.10mol/L:吸母液5.0ml+水45.0ml四、实验方法将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。

撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。

实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。

植物生理学实验

植物生理学实验

实验一植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)一、原理将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间后,植物细胞与蔗糖溶液之间将达到平衡状态。

如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψp将下降为零,此时细胞液的渗透势ψπ等于外液的渗透势ψπ′,即ψπ=ψπ′。

此溶液称为该组织的等渗溶液,其浓度称为该组织的等渗浓度,即可计算出细胞液的渗透势。

实际上临界质壁分离状态镜下很难看到,一般以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。

(细胞水势=渗+压+衬,其中渗=外渗=-iCRT)(注:内外浓度差不一定质壁分离,因为外高内低才会分离)二、器材、试剂与材料1、器材:显微镜,小培养皿(60mm),载盖玻片,温度计,试剂瓶,吸水纸等。

2、试剂:1mol/L蔗糖溶液,蔗糖系列标准溶液。

3、材料:洋葱。

三、操作步骤1、取干燥、洁净培养皿9套,顺序编号,顺序加入蔗糖系列标准溶液,呈一薄层,盖好皿盖。

(为什么?)2、用镊子撕取材料内表皮(0.5cm见方即可),吸去表面水分,迅速浸入上述培养皿中,每皿4—5片。

3、经20~30min(为什么等这么长时间?因为达渗透平衡)记录室温,同时从高浓度开始依次取出材料放于载片上,滴一滴同浓度的蔗糖溶液,盖上盖片,显微镜下观察。

若所有细胞都发生质壁分离现象,则取相邻低浓度的材料观察,并记录质壁分离的相对程度。

若有50%左右细胞发生初始质壁分离(即原生质体刚从细胞壁的角隅处分离),则该浓度就是等渗浓度。

若两个相邻浓度的材料中,一个未发生质壁分离,另一个发生质壁分离数超过50%,则两浓度平均值即为等渗浓度。

4、由所得的等渗浓度和室温计算细胞液的渗透势:ψπ=ψπ′=-iCRT(MPa),其中:ψπ——细胞的渗透势,MPa;ψπ′——供试溶液的渗透势,MPa;C——供试溶液的浓度,moL/L;R——气体常数,0.008314·L·MPa/(moL·K);T——绝对温度,(273十t℃)K;i——等渗系数,蔗糖为1。

植物生理学实验讲义最新

植物生理学实验讲义最新

实验一植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验目的植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度,因此又称溶质势。

渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。

在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,在一定程度上保持膨压,保持细胞的生长和气孔的开放,这种现象称为渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示,在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。

二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势,该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

带入公式即可计算出其渗透势。

三、实验材料、仪器设备和试剂1. 实验材料洋葱鳞茎(最好是紫色洋葱)2. 仪器设备光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。

3. 试剂(1)1 mol/L蔗糖溶液,(2)蔗糖系列标准液以1 mol/L蔗糖溶液作为母液,配置梯度溶液: 0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L的蔗糖溶液。

四、实验步骤1. 取10套干燥洁净的小培养皿,编号,将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层,盖好皿盖。

2. 用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块,用镊子将表皮小块轻轻撕下,依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中,每个培养皿中放材料3个左右,使其完全浸没,并立即盖好皿盖。

浸泡10~15分钟。

3. 从0.70 mol/L 蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上载玻片,于显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的表皮做制片,进行同样观察,并记录质壁分离的相对程度。

植物生理学实验 植物组织渗透势的测定

植物生理学实验 植物组织渗透势的测定

4 将结果记录于表中。确定引起半数以上细胞刚 发生质壁分离的蔗糖溶液最低浓度和不能引起 质壁分离的最高浓度。
5 这两个浓度的平均值为等渗浓度。
6 可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的 渗透势。
四、结果与计算

细胞渗透势 ψs=-RTiC R 为气体常数=0.083×105/L·Pа/mol·K。 T 为绝对温度,单位K,即273℃+t,t 为实验 温度。 I 为解离系数,蔗糖为1。 C 为等渗溶液的浓度,单位为mol/L。 则: =0.083×105×(273℃+t)×1×C
质壁分离现象——水分的渗透作用
高渗溶液
二、实验设备与材料
– 显微镜; – 镊子; – 载玻片; – 盖玻片; – 刀片;培养皿; – 移液管; – 蔗糖; – 洋葱 –
水绵
三、实验步骤
1. 配制一系列不同浓度的蔗糖溶液10ml于试管中, 编号,浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6M。
编号 1 浓度 0 M
1M 蔗糖 ml数 水ml 数
2 0.1
3 0.2
4 0.3
5 0.4
6 0.5
7 0.6
8 0.7
9 0.8
记录
适于水绵
编 号 1
0
2
0.05
30.14 Nhomakorabea0.15
5
0.2
6
0.25
7
0.3
8
0.35
9
0.4
浓 度
1M 蔗糖 ml数 水ml 数
记 录
2. 用镊子撕取洋葱的外表皮(水绵)投入各浓 度的蔗糖溶液中,使其完全浸没。投入时先从 高浓度开始,每隔5min向下一浓度放2~3片洋 葱表皮。 3. 在洋葱表皮在各浓度的蔗糖溶液中平衡 30min后,从高浓度开始依次取出放入显微镜 下观察质壁分离的情况(低倍镜即可),记录 观察结果。

实验 1 植物细胞渗透势的测定.

实验 1 植物细胞渗透势的测定.
5. 测量液温
6. 根 据 公 式 ψs=-CiRT, 计 算 出 所 测 材 料 的 ψw (ψs).
实验报告
1、简述实验原理 2、简述实验步骤 3、完成植物细胞渗透势测定记载表(表中
需包括有质壁分离的细胞占总细胞的%), 说明或计算出等渗浓度。
实验 2 叶绿体色素的提取分离 及其性质鉴定
一、目的
实验 1 植物细胞渗透势的测定 (质壁分离法)
目的
1.学会用质壁分离法测量植物细胞水势。
材料用具及仪器药品
洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀 片、滴管、培养皿、蔗糖溶液
原理
植物细胞是一个渗透系统,若将植物细胞放在各种不 同浓度的蔗糖溶液中时,由于细胞液的浓度与外界溶液的 浓度(或水势)的差异。两者便会发生水分的交换。
把植物的这些必要矿质元素用适当的无机盐配 成培养液,对植物进行培养,即能使植物正常生 长发育,这种培养法叫溶液培养法。
实验材料
玉米苗
实验步骤
1. 取7个500ml培养瓶,分别装入完全培养液, 缺N、缺P、缺K、缺Ca、缺Mg、缺Fe培养液 500ml,贴上标签,写明日期。培养液配法详 见植物生理学实验指导(12页)表3-2。
计算结果:
CA = 12.7 D663 - 2.59 D645 CB = 22.9 D645 - 4.67 D663 • CT = CA + CB = 20.3 D645 + 8.04D663
• 叶绿素含量 ( mg/g 鲜重 ) =

• 叶绿素浓度 ( mg /l ) × 提取液总体积 (ml)
对透性。 相对电导率(%)=R1/R2 X 100%
4、植物在不良的环境下,其电导度会增高吗? 为什么?

植物组织水势的测定 质壁分离法

植物组织水势的测定 质壁分离法

植物组织水势的测定质壁分离法水势是植物生长的一个重要指标,反映了植物内部水分的分布情况和物质运输情况。

而测定植物组织的水势对于研究植物干旱适应机制、水分调节机制等方面具有重要意义。

质壁分离法是一种常用的测定植物组织水势的方法,下面本文将详细介绍这种方法的原理、步骤和注意事项。

一、原理质壁分离法比较适用于脆性植物样品,如草本植物、叶片等。

这种方法的基本原理是利用质壁分离的原理,在未破坏细胞壁的情况下将细胞质与细胞外液分开,并通过测量两者的渗透压来计算出植物组织的水势。

二、步骤1、样品的收集与处理:首先需要收集新鲜的样品,例如嫩叶、嫩枝等,而且需避免在干燥和潮湿环境下取样。

处理时要将样品快速冷藏至4℃以下,以减缓水势的变化。

2、样品的加工:将样品进行切片、碎片或打浆处理,以使细胞破裂后自然分层。

然后取出分散的细胞组织保存备用。

3、测定细胞外液的渗透压:将所收集的分散组织放在额外的离心管中,在高速离心下分离出细胞外液,并通过比色法或折射仪测定其渗透压。

4、测定细胞液的渗透压:将分离出的细胞组织放在离心管中,离心到细胞组织形成上下两层。

收集上层细胞液,利用比色法或折射仪测定其渗透压。

5、计算水势:根据水势的公式计算样品的水势值,一般情况下使用质壁分离法测得的水势值为负值。

三、注意事项1、样品处理时需要快速,避免过度破坏细胞,导致结果偏差。

2、实验过程要保持温度和相对湿度适宜。

过高的温度或干燥的环境会影响样品的水势。

3、出于实验操作精度和结果准确度的考虑,针对实验数据要进行重复。

4、实验中所用的溶液浓度和温度要严格控制,以避免人为误差。

总之,质壁分离法是一种简单可靠的测定植物组织水势的方法,但实验操作人员需要严格控制实验条件,确保结果的准确性。

实验植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

实验植物组织渗透势的测定(质壁分离法)

实验1 植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验目的观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。

二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。

该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

代入公式即可计算出渗透势。

三、实验仪器、试剂、材料等显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。

称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。

再配制成下列各种浓度:0.50mol/L:吸母液25ml+水25ml0.45mol/L:吸母液22.5ml+水27.5ml0.40mol/L:吸母液20.0ml+水30.0ml0.35mol/L:吸母液17.5ml+水32.5ml0.30mol/L:吸母液15.0ml+水35.0ml0.25mol/L:吸母液12.5ml+水37.5ml0.20mol/L:吸母液10.0ml+水40.0ml0.15mol/L:吸母液7.5ml+水42.5ml0.10mol/L:吸母液5.0ml+水45.0ml四、实验方法将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。

撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。

实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。

实验一植物细胞渗透势的测定

实验一植物细胞渗透势的测定

实验一植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)植物细胞的渗透势主要取决于细胞的溶质浓度,因此又称溶质势。

渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系。

已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持澎压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞渗透势地降低值来表示,在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

以下介绍两种测定方法。

[原理] 将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。

如果在某一溶液中细胞脱水达到一平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψs 等与外液的渗透势ψso,即ψs=ψso,此溶液称为该组织的等渗溶度,其溶度称为该组织的等渗浓度,即可计算出细胞也渗透度(ψs0)。

实际测定时,由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到,所以一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。

处于初始质壁分离状态的细胞体积,比吸水饱和时略少,故细胞也浓缩而渗透势略低于吸水饱和时的渗透度,此种状态下的渗透势称基态渗透势。

[仪器与用具] 显微镜1台;载玻片与盖玻片各若干;温度计1支;尖头镊子1把;刀片1片;100ml试剂瓶9套;500ml试剂瓶9套;烧杯、容量平、量筒、吸管等;吸水纸适量。

[试剂]1 mol浓度的蔗糖溶液(1000ml水溶解342.3g蔗糖)称取预先在60~80℃下烘干的蔗糖34.2g,溶于100ml蒸馏水中,即为1摩尔浓度的蔗糖溶液。

0.03%中性红溶液。

蔗糖系列标准液:取干燥洁净的小试剂瓶9号编号,用1摩尔浓度的蔗糖溶液依C 1V1=C2V2公式配置0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.60、0.70摩尔浓度等一系列不同浓度的蔗糖溶液(具体范围可根据材料不同而加以调整),贮于试剂瓶中,瓶口加塞以防蒸发浓缩。

[方法]:1.用洋葱的外内表皮或紫色鸭跖草的表皮等作实验材料。

实验01植物细胞渗透势的测定

实验01植物细胞渗透势的测定

实验01 植物细胞渗透势的测定植物细胞的渗透势主要取决于细胞液的溶质浓度,因此又称溶质势。

已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞渗透势的降低值来表示,在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

以下介绍两种测定方法。

一、质壁分离法测定植物细胞的渗透势【原理】将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。

如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψp下降为零。

此时细胞液的渗透势ψs等于外液的渗透势ψs0,即ψs=ψs0,此溶液称为该组织的等渗溶液,其浓度称为该组织的等渗浓度,因此,只要测出植物组织的等渗浓度,即可计算出细胞液的渗透势ψs。

实际测定时,由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到,故一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。

处于初始质壁分离状态的细胞体积,比吸水饱和时略小,故细胞液浓缩而渗透势略低于吸水饱和时的渗透势,此种状态下的渗透势称基态渗透势。

【仪器与用具】显微镜1台;载玻片与盖玻片各若干;温度计1支;尖头镊子1把;刀片1片;小培养皿(直径6cm)9套;试剂瓶若干;烧杯、容量瓶、量筒、吸管等;吸水纸适量。

【试剂】1mol/kg H2O蔗糖溶液称取预先在60~80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸馏水中,即为1质量摩尔浓度蔗糖溶液。

蔗糖系列标准液取干燥洁净的小试剂瓶9支编号,用1mol/kg H2O蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70mol/kg H2O等一系列不同浓度的蔗糖溶液(具体范围可根据材料不同而加以调整),贮于试剂瓶中,瓶口加塞以防蒸发浓缩。

植生实验 植物组织渗透势的测定

植生实验 植物组织渗透势的测定

实验一、植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验原理:将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中,使细胞将要产生初始质壁分离的浓度,就等于细胞液的浓度,根据浓度可计算出渗透势。

【注::典型植物细胞水势(Ψw)组成为:ψw=ψs+ψp+ψm (ψs 为渗透势,ψp为压力势,ψm为衬质势)。

渗透势(osmotic potential,ψs):由于溶质的存在而使水势降低的值称为渗透势或溶质势(solute potential,ψs),以负值表示。

渗透势值按公式ψs=-iCRT来计算(C为溶液的摩尔浓度;T为绝对温度,即实验温度+273;R为气体常数,R=0.0083;i为渗透系数,表示电解质溶液的渗透压非电解质溶液渗透压的倍数,如蔗糖i=1,NaCl i=1.8)。

压力势(pressure potential,ψp):由于细胞吸水膨胀时原生质向外对细胞壁产生膨压(turgor),而细胞壁向内产生的反作用力——壁压使细胞内的水分向外移动,即等于提高了细胞的水势。

由于细胞壁压力的存在而引起的细胞水势增加的值叫压力势,一般为正值。

当细胞失水时,细胞膨压降低,原生质体收缩,压力势则为负值。

当刚发生质壁分离时压力势为零。

衬质势(matrix potential, ψm):衬质势是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水的束缚而引起的水势降低值,如处于分生区的细胞、风干种子细胞中央液泡未形成。

对已形成中心大液泡的细胞含水量很高,ψm只占整个水势的微小部分,通常一般忽略不计。

因此一个具有液泡的成熟细胞的水势主要由渗透势和压力势组成,即ψw=ψs+ψp 】。

将细胞置于纯水或稀溶液中,外液水势高于细胞水势,外侧水分向细胞内渗透,细胞吸水,体积变大;外液水势等于细胞水势,水分进出平衡,细胞体积不变;将植物置于浓溶液中,外液水势低于细胞水势,水从细胞内向外渗透,细胞失水,体积变小。

将植物材料(带色洋葱表皮组织)置于浓溶液中,由于细胞壁的伸缩性有限,而原生质层的伸缩性较大,当细胞继续失水时,原生质层便和细胞壁慢慢分离开来,这种现象被称为质壁分离。

植物生理学实验步骤与实验原理

植物生理学实验步骤与实验原理
植物生理学实验步骤和实验原理
一、实验目的
本实验是植物生理学课堂教学中的一个重要环 节,不仅与课堂讲授的基本理论、基础知识相 结合,而且要使学生学会植物生理学的基本实 验方法,并在科学态度、实验技能技巧、独立 工作能力、理论联系实际能力等方面获得基本
的训练。
二、基本要求
通过教学,要使学生学会植物生理学的基本实 验方法、技术和设计思路,掌握植物生理学基 本原理的验证方法和定量测定植物体内发生的 生理生化变化,并初步具有完成综合性、设计 性实验的能力。每次实验结束,学生均需写出 一份实验报告。
实验3 印迹法测定气孔开张度
【实验原理】
有些有机溶剂涂在叶片表面,失水很快形成一层 薄膜,上面就印在叶片表面的保卫细胞与气孔的 轮廓。在显微镜下可观察到,结合显微测微尺可 测其开张度大小。
【仪器与用品】
植物叶片
显微镜 显微测微尺 载玻片 盖玻片 牛皮胶(或 火棉胶)
【方法与步骤】
配制牛皮胶溶液→在叶的下表皮涂胶→成膜后取一小 片→镜检→测量
原子吸收分光光度计测定其Ca、K、Mg、Fe、Zn、Mo含 量(同时要测定和元素的标准曲线)
观察的现象描述及计算
【思考题】
灰分元素在植物样品中的含量是怎样的? 各灰分元素的化学反应原理是什么? 原子吸收分光光度计的工作原理以及他可以测定多 种灰分元素的技术关键是什么?
实验5 植物的无土培养和缺素症状
【思考题】
测量不同生境下、不同植物叶片的气孔开张度,比较 后说明原因。
实验4 植物灰分元素的定性鉴定 和定量分析
【实验原理】
植物风干样品在高温灼烧后,剩下灰分 灰分元素发生特定的化学反应后显现出颜色及结晶 灰分元素在高温下吸收特定光谱的能量发生能级的 跃迁,可用原子吸收分光光度计定量测定

植物细胞的质壁分离和渗透势的测定

植物细胞的质壁分离和渗透势的测定

植物细胞的质壁分离和渗透势的测定一、实验结果3、计算植物细胞渗透势R为气体常数=0.083×105/L·Pа/mol·K。

T为绝对温度,单位K,即273℃+t,t为实验湿度。

I为解离系数,蔗糖为1。

C为等渗溶液的浓度,单位为mol/L。

则:=-0.083×105×(273℃+t)×1×C算得φ=-607975二、问题思考1、质壁分离起于质膜内外渗透压差异,对于植物细胞来说,由于细胞壁的存在,收缩性有差异,当外部渗透压高于内部时,液泡内部水分外流导致细胞失水,原生质体皱缩,产生质壁分离。

外界渗透压低于内部时,细胞吸水,原生质体膨胀,而由于细胞壁存在导致细胞大小只能发生轻微扩大。

对于动物细胞来说,处于高渗溶液中时,细胞质失水产生皱缩。

处于低渗溶液中时,细胞质吸水膨胀,由于没有细胞壁的阻挡,细胞会持续吸水直到内外等渗,若细胞质浓度过大会导致细胞吸水过多涨破。

2、由于蔗糖分子量较大且细胞膜上没有蔗糖载体,导致蔗糖无法进入细胞内。

因此无法在质壁分离后自动复原。

而细胞膜上有钠钾泵可以主动泵入钾离子,因此在高渗钾离子溶液中,细胞可以自主复原。

而由于水通道蛋白的存在,初期内外渗透压大,水分子外流速度大于钾离子泵入速度,发生质壁分离。

之后由于内外渗透压减小,水分子外流减慢,钾离子继续泵入,内部渗透压逐渐大于外部,水分重新回流细胞内,产生自主质壁分离复原。

3、视野中部分细胞紫色较浅或呈无色说明该部分细胞在表皮分离是受到损伤而使细胞膜及液泡破裂,内部色素流出而呈浅色或无色。

另一部分细胞颜色无明显变化但不发生质壁分离,说明细胞已经死亡,无活性,原生质层的选择透过性丧失,蔗糖溶液可以自由进入细胞。

实验01植物细胞渗透势的测定

实验01植物细胞渗透势的测定

实验01 植物细胞渗透势的测定植物细胞的渗透势主要取决于细胞液的溶质浓度,因此又称溶质势。

已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。

渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞渗透势的降低值来表示,在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。

以下介绍两种测定方法。

一、质壁分离法测定植物细胞的渗透势【原理】将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。

如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψp下降为零。

此时细胞液的渗透势ψs等于外液的渗透势ψs0,即ψs=ψs0,此溶液称为该组织的等渗溶液,其浓度称为该组织的等渗浓度,因此,只要测出植物组织的等渗浓度,即可计算出细胞液的渗透势ψs。

实际测定时,由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到,故一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。

处于初始质壁分离状态的细胞体积,比吸水饱和时略小,故细胞液浓缩而渗透势略低于吸水饱和时的渗透势,此种状态下的渗透势称基态渗透势。

【仪器与用具】显微镜1台;载玻片与盖玻片各若干;温度计1支;尖头镊子1把;刀片1片;小培养皿(直径6cm)9套;试剂瓶若干;烧杯、容量瓶、量筒、吸管等;吸水纸适量。

【试剂】1mol/kg H2O蔗糖溶液称取预先在60~80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸馏水中,即为1质量摩尔浓度蔗糖溶液。

蔗糖系列标准液取干燥洁净的小试剂瓶9支编号,用1mol/kg H2O蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70mol/kg H2O等一系列不同浓度的蔗糖溶液(具体范围可根据材料不同而加以调整),贮于试剂瓶中,瓶口加塞以防蒸发浓缩。

质壁分离法测定植物细胞的渗透渗出势[整理版]

质壁分离法测定植物细胞的渗透渗出势[整理版]

质壁分离法测定植物细胞的渗透势一、实验目的1.掌握植物细胞渗透势的测定方法。

2.根据所测植物细胞渗透势的大小,对比各植物的抗盐性强弱。

二、实验原理在植物生活细胞和外界溶液构成的渗透体系中,水分总是从高水势一方流向低水势一方。

放入不同浓度蔗糖溶液中的植物生活细胞,有的吸水,有的失水,直至发生质壁分离。

当在某一浓度蔗糖溶液中的细胞发生初始质壁分离时,外界溶液渗透势等于植物细胞渗透势,所以通过计算此时的外界溶液渗透势,即得出植物细胞的渗透势。

三、实验仪器及材料1.仪器:显微镜。

2.材料:载玻片、盖玻片、镊子、刀片、称量瓶、小滴瓶(50mL 容量瓶(50mL)。

3.试剂:0.10~0.50mol/L蔗糖溶液(浓度间隔0.05mol/L),或用NaCl溶液。

(1) 1.00mol/L蔗糖(C12H22O11)溶液:称取342g蔗糖,用蒸馏水溶于1000mL烧杯中,再转移到1000mL容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀。

(2)0.10~0.50mol/L蔗糖溶液:分别吸取 5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0、22.5、25.0mL的1.00mol/L蔗糖溶液,转移到50mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。

配成0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mol/L蔗糖溶液。

4.样品:大葱、洋葱鳞茎、大麦叶片等。

四、实验步骤1.将0.10~0.50mol/L蔗糖溶液分别注入干净带盖的称量瓶内。

2.用刀片切取样品表皮组织小片,每瓶各投放2片,使其完全浸没,置10分钟,并记录室温。

3.按蔗糖溶液浓度由浓到稀顺序取出组织小片,放在载玻片上,加1滴原称量瓶内溶液,盖上盖玻片,置于显微镜下观察。

确定使50%的表皮组织细胞发生初始质壁分离的蔗糖溶液浓度。

如果该浓度界于两个相邻浓度之间,则取两相邻浓度的平均值。

五、结果计算ψs=- iCRT式中:ψs——渗透势,bar;i——等渗系数,i=1;C——蔗糖溶液浓度,mol/L;R——气体常数,R=0.083L·bar/M·K;T——绝对温度,T=273+t℃。

实验一 植物组织渗透势的测定 (质壁分离法)

实验一  植物组织渗透势的测定   (质壁分离法)

4.实验记录 实验人
时期
材料名称
实验室温度
0.40 0.35 0.30

0.25
蔗糖摩尔浓度(mol/L) 0.55 0.50 0.45
质壁分离的相对程度
5. 计算:
Ψπ =-icRT
Ψπ为细胞渗透势,一般以MPa (兆帕)为单位。 R为气体常数,为0.008314MPa.L/(mol.K) T为绝对温度,单位K,即273+t,t为实验温度(℃)。 i为解离系数,蔗糖为1。 C为等渗溶液的浓度,单位为mol/L。 则:Ψπ =-1×C×0.008314×(273+t) (MPa)
剥取洋葱鳞茎表皮05cm迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中高到低34片510min低倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度高到低100个确定使细胞将要发生初始质壁分离的浓度计算渗透势
考核标准


平常技能考试占70% 实验报告占20% 考勤占(卫生+考勤)10%
实验一 植物组织渗透势的测定(质壁分离法)
五、结果与讨论 1.实验结果与预期是否相符,并说明什么原因? 2.如何根据计算结果确定植物是否需要灌溉? 3.注意事项
未发生质壁分离
三、材料、设备与试剂
材料:带色洋葱 设备: 50ml烧杯1个,小培养皿7个 ,镊子1把, 解剖刀1把, 10ml移液管1支,显微镜1台,载 玻片和盖玻片 试剂:1mol/L蔗糖溶液、蒸馏水
四、方法与步骤
1.母液的配制:配1mol/L蔗糖溶液50mL。 2.蔗糖梯度浓度溶液的配制:配制0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、 0.55mol/L蔗糖溶液各10ml。 3.剥取洋葱鳞茎表皮0.5cm2→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中 (高到低)3-4片→ 5-10min→低倍显微镜观察并记录质壁分离 的相对程度(高到低)100个→确定使细胞将要发生初始质壁分 离的浓度→计算渗透势。
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实验1 植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、实验目的观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。

二、实验原理当植物组织细胞的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。

该溶液的浓度称为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。

代入公式即可计算出渗透势。

三、实验仪器、试剂、材料等显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。

称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。

再配制成下列各种浓度:0.50mol/L:吸母液25ml+水25ml0.45mol/L:吸母液22.5ml+水27.5ml0.40mol/L:吸母液20.0ml+水30.0ml0.35mol/L:吸母液17.5ml+水32.5ml0.30mol/L:吸母液15.0ml+水35.0ml0.25mol/L:吸母液12.5ml+水37.5ml0.20mol/L:吸母液10.0ml+水40.0ml0.15mol/L:吸母液7.5ml+水42.5ml0.10mol/L:吸母液5.0ml+水45.0ml四、实验方法将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。

撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。

实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。

在找到上述浓度极限时,用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次,直至有把握确定为止。

在此条件下,细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。

将结果记录下表。

测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后,可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。

RTiC s =-ϕs ϕ-为细胞渗透势。

R 为气体常数=0.083×105/L·Pа/mol·K。

T 为绝对温度,单位K ,即273℃+t ,t 为实验湿度。

I 为解离系数,蔗糖为1。

C 为等渗溶液的浓度,单位为mol/L 。

则:s ϕ-=0.083×105×(273℃+t )×1×C五、实验作业:1、 叙述细胞渗透作用的原理。

2、 测定并计算不同植物组织的渗透势。

实验2 植物组织水势的测定(小液流法)一、实验目的了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方法和它们的优缺点。

二、实验原理将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时,则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。

因溶液的浓度是已知的,可以根据公式算出其渗透压,取其负值,为溶液的渗透势(ψπ),即代表植物的水势(ψw)(waterpotential)。

ψw=ψπ=-P=-CRT(大气压)三、实验仪器、试剂、材料等(一)材料:小白菜或其它作物叶片(二)仪器设备:1.带塞青霉素小瓶12个;2.带有橡皮管的注射针头;3.镊子;4.打孔器5.培养皿。

(三)试剂:1.0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L 蔗糖溶液;2.甲烯蓝粉末。

四、实验方法1、取干燥洁净的青霉素瓶6个为甲组,各瓶中分别加入0.05~0.30mol/L蔗糖溶液约4ml(约为青霉素瓶的2/3处),另取6个干燥洁净的青霉素瓶为乙组,各瓶中分别加入0.05~0.30mol/L蔗糖溶液1ml和微量甲烯蓝粉末着色,上述各瓶加标签注明浓度。

2、取待测样品的功能叶数片,用打孔器打取小圆片约50片,放至培养皿中,混合均匀。

用镊子分别夹入5~8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中(乙组)。

盖上瓶塞,并使叶圆片全部浸没于溶液中。

放置约30~60min,为加速水分平衡,应经常摇动小瓶。

3、经一定时间后,用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许,将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部,小心地放出少量液流,观察蓝色液流的升降动向。

(每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头)。

如此方法检查各瓶中液流的升降动向。

若液流上升,说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小(即植物组织失水);表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势;如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势,若蓝色液流静止不动,则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势,此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度4、将求得的等渗浓度值代入如下公式:ψw=ψπ=-CRTi×1.013×0.1。

式中:ψw=植物组织的水势(单位:Mpa)ψπ=溶液的渗透势C=等渗浓度(mol/L)R=气体常数(0.008314MPa/L/mol/K)T=绝对温度i=解离系数(蔗糖=1,CaCl2=2.60)1大气压=1.013=0.1MPa。

五、实验作业用小液流法测定植物组织的水势与用质壁分离法测定植物细胞的渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势,它们之间的区别何在?实验3 蒸腾速率的测定(快速称重法)一、实验目的学会用快速称重法测定植物的蒸腾速率,加深对植物水分代的认识。

二、实验原理植物蒸腾失水,重量减轻。

因此,用称重法测得一定面积或一定重量的蒸腾器官在一定时间里的失水量,即可测得其蒸腾速率。

三、实验仪器、试剂、材料等精度为10mg 的扭力天平1架;枝剪1把;剪刀1把;铅笔1支;线1根;坐标方格纸1;标签1个;尺子1把;各种树木的带叶枝条。

四、实验方法1、将扭力天平放在被测树木附近的平稳处,调平,然后在被测植株上选一重约10g 左右且有代表性的枝条,在其基部挂上标签,并缚一细线。

在绑线处上方1~2cm 处将、枝条剪下,立即称重(记为W 1,精确至0.001g ),并在读数时准确计时(t 1)。

2、迅速将枝条用线悬挂原处,使其在原环境中蒸腾,约15min 后,取下枝条,第二次称重(记为W 2,精确至0.001g ),并准确计时(t 2)。

两次所称重量只差即是这段时间枝条蒸腾部位的鲜重。

3、求算叶面积或蒸腾部位的鲜重。

(1)用称纸法求算叶面积 用尺量出坐标纸边长,算出全纸面积,称出全纸重,精度同上。

摘下叶子,平摊在坐标纸上,在坐标纸上用铅笔绘出叶子轮廓,剪下叶形,称重,精度同上。

按下式计算叶面积(S ):S(cm 2)=剪下的叶形纸重(g )×)全纸重()全纸面积(g cm 2(2)求算蒸腾部位的鲜重 剪下枝条上的叶片和嫩梢,称枝重(W 3),精度同上,W 1减去W 3即为蒸腾部分的鲜重:蒸腾部位的鲜重=W 1-W 24、计算蒸腾速率。

蒸腾速率[g /(m 2·h 1)]=)(min)()(6010000))((12221t t cm S  g W W -⨯⨯⨯- 或:蒸腾速率[mg /(g·min)]=)(min)())(())((122131t t g W W mg W W -⨯--五、实验作业计算所测植物的蒸腾强度。

实验4 单盐毒害及离子间拮抗现象一、实验目的通过简单试验说明培养液中各种离子平衡(各种离子及其浓度)的重要性。

二、实验原理离子间的拮抗现象的本质是复杂的,它可能反映不同离子对原生质亲水胶粒的稳定度、原生质膜的透性,以及对各类酶活性调节等方面的相互制约作用,从而维持机体的正常生理状态。

三、实验仪器、试剂、材料等;0.12mol/L NaCl 烧杯;纱布;石蜡; 0.12mol/L KCl;0.06mol/L CaCl2(所用药品均需用AR)四、实验方法实验前3—4天选择饱满的小麦种子100粒浸种,在室温下萌发,待根长1cm 时即可用作材料。

取4个小烧杯,依次分别倒人不列盐溶液:(1)0.12mol/L KCI(2)0.06 mol/L CaCl2(3)0.12 mol/L NaCI1 ml十0.12mol/L KCl(4)0.12 mol/L NaCl 100 ml+0.06 mol/L CaCl22.2 ml小烧杯用涂石蜡的纱布盖上。

挑选大小相等及根系发育一致的小麦幼苗10株或20株,小心种植在纱布盖的孔眼里,使根系接触到溶液,在室温下培育2—3星期后,即可看出在单盐溶液中,小麦幼苗生长,特别是它们的根部出现畸形。

五、实验作业比较小麦在不同盐溶液中的生长情况并加以解释。

实验5 叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)一、实验目的了解叶绿体色素提取分离的原理以及它们在光合作用中的意义。

二、实验原理叶绿体色素是植物吸收太能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。

从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。

利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用丙酮提取。

分离色素的方法有多种,纸层析是其中最简便的一种。

当溶剂不断地从层析滤纸上流过时,由于混合物中各成分在两相(即流动相和固定相)间具有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的混合物得到分离。

三、实验仪器、试剂、材料等大试管台天平研钵量筒烧怀漏斗软木层新华滤纸丙酮四氯化碳无水硫酸钠碳酸钙石英砂四、实验方法1、称取新鲜叶子 2 g,放入研钵中加丙酮 5ml,少许碳酸钙和石英砂,研磨成匀浆,再加丙酮 5 ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。

2、取准备好的滤纸条(2×2 cm),将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。

3、用毛细管取叶绿素溶液点于窄条的上方,注意一次所点溶液不可过多。

如色素过淡,用电吹风吹干后再点1一2次。

4、在大试管中加入四氯化碳3—5ml及少许无水硫酸钠。

然后将滤纸条固定于软木塞上,插入试管,使窄端浸入溶剂中(色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰图到试管壁),盖紧软木塞,直立于阴暗处进行层析。

5、经过0.5一1小时后,观察分离后色素带的分布。

最上端橙黄色为胡萝卜素,其次黄色为叶黄素,再下面蓝绿色为叶绿素a,最后的黄绿色为叶绿素b。

五、实验作业提取叶绿素时为什么要加少量的碳酸钙,加多了会出现什么问题?实验6 光合速率的测定(改良半叶法)一、实验目的光合速率是一项重要的生理指标,对研究植物的生命活动、分析环境条件与植物生长发育一级产量的关系,均具有重要的意义。

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