柠檬中柠檬酸含量的测定
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柠檬中柠檬酸含量的测定
目的:
(1) 熟悉紫外—可见分光光度法测定柠檬中柠檬酸含量的操作方法及原理。
(2)掌握标准曲线的绘制和回归直线方程的计算、评价及使用。原理:
分光光度法和比色法是通过测定被测物质在某一特定波长处或一定波长范围的光的吸收度,对该物质进行定量测定的方法。单色光穿过被测物质溶液时,在一定浓度范围内,被测物质的吸光度与该物质的浓度和介质的长度成正比:A = ELC
仪器与试剂:
紫外分光光度计,25mL的容量瓶7只,5mL的移液管,烧杯,标准柠檬酸(1.00mg/L),柠檬一个,洗瓶和洗耳球各一只,擦镜纸若干。操作步骤:
1. 标准曲线的绘制
分别吸取柠檬酸标准液0.00 ,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL于6只25mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。以试剂空白为对照测定,在545nm波长处测定吸收度。以吸光度为纵坐标,柠檬酸含量为横坐标,绘制标准曲线或求回归直线方程。
2. 柠檬酸含量的测定
准确量取柠檬酸(由柠檬压汁取得,已过滤)2.00mL,用水定容至25.00mL,摇匀。以试剂空白为对照测定其吸光度,由标准曲线中回归直线方程求得相应的柠檬酸的浓度,并计算试样中的柠檬酸含量。计算:
浓度C-吸光度A标准曲线方程:
标准偏差R2:
柠檬中柠檬酸的含量: