Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i 手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
1301 Waters1525液相色谱仪标准操作规程
山东药业有限公司GMP管理文件文件编号：PS-ZL-1301- 00一、目的：建立WATERS1525型高效液相色谱仪的标准操作规程，确保液相色谱仪的正确使用。
二、适用范围：适用于WATERS1525型高效液相色谱仪的操作。
三、责任者：质管部经理、检验员。
四、正文：1.开机依次打开自动进样器、检测器、柱温箱、泵的电源开关置“︳”位。
仪器自检5分钟后（检测器自检完成）打开电脑，双击“Breeze2”进入软件。
2.灌注泵2.1把水和配制好的流动相，过滤超声分置于清洁的溶剂瓶中。
2.2打开参比阀置右边。
2.3点击“操作”中的“流量”设置最大流量为5ml/min，点击“确定”，程序即可运行本操作。
冲洗大约5分钟即可。
重复上述操作把流量设定为“0.00”压力降下后把参比阀扳回原位置，冲洗完毕。
3.平衡系统/监视基线3.1双击“仪器”找到“TCM”点击设定启用区域1，温度一般设为35℃；3.2找到W2489输入所做样品的波长，设置采样速率一般为“2”；3.3找到“PCM1525XX”设置流量和所用溶剂，点击“保存”该方法。
3.4 然后单击“平衡系统/监视基线”系统即可监视基线待基线平稳后等待进样。
4.编辑样品4.1找到“2707自动进样器”右击“Movesstrayforwerd”样品盘会自动外移，按从前到后的顺序放置样品。
4.2点击2707右击找到“Wash/primeneedle”设置时间后仪器会自动清洗针头。
4.3编辑样品板找到“ANSI-48Vial2mlHolder”点击“确定”。
5.采集样品5.2单击“样品队列”找到“SampleName”选择所做的样品名称；5.3点击功能选择下拉框中找到进标样/进样；5.4在“方法组/报告方法”中选择品种名称；5.5设置进样体积。
5.6设置运行时间，点击“运行”系统进入运行模式。
6.结束采样及数据处理6.1采样完毕后，点击菜单进样中的“中断”退出基线监视器。
6.2点击“查询数据”在“通道”中选择要看的样品。
waters高效液相色谱
Waters高效液相色谱操作说明一．简介本高效液相色谱实验包括：waters1525泵+waters2487双波长检测器+色谱柱+电脑（breeze 图谱处理软件）+流动相二．操作流程0.准备工作确定色谱实验方法，处理好流动相1，换好流动相，确定色谱柱选择无误1.开机打开泵开关，听到两声“嘀”的响声之后，再打开波长检测器。
检测器进入预热阶段（此时检测器面板进入5min倒计时）这期间打开电脑，进入英文windows操作系统2，待检测器自检完毕（整个自检过程约6~7min），打开电脑桌面的（Breeze软件）。
待程序完全启动，整个开机过程结束。
系统默认进入上次使用的方案。
2.建立新方法和新方案2.1新建方案方案主要用来储存你的各个实验方法，数据等内容，你可以把它理解为一个文件夹。
2.1.1创建步骤选择→单击→单击"next"→在"project name"中输入方案名称（如abc），"comments"中可填注释，也可不填。
→单击"finish"2.1.2打开创建的方案在界面下→单击→在"project"中找到你创建的方案（如abc）→点击"OK",即进入到我们自己的方案中了2.2新建方法在新建的方案中，需要建立不同的试验方法。
试验方法主要设定的包括洗脱方式，检测波长等参数。
2.2.1新建方法步骤单击→单击→单击（Flow选项卡）→在programmed flow中设定你的洗脱方式（此步在2.2.2详述）→单击→单击（channel 1选项卡）→在"wavelength"框内设定你的检测波长（如265nm,280nm,215nm等等）→（设定结束，保存）：单击→输入方法名称如（abc 1）→单击"save"32.2.2洗脱方式的设定（重要）在programmed flow中可看到。
Waters高效液相色谱仪标准操作规程
XXXXXXXXXX部仪器设备标准操作规程1 目的：建立Waters高效液相色谱仪标准操作规程。
2 范围：Waters高效液相色谱仪。
3 责任：化验室操作者。
4 规程：4.1 型号与主要性能指标4.1.1 型号4.1.1.1 主机Waters2695分离单元、Waters2489紫外/可见光检测器。
4.1.1.2 工作站Empower2。
4.2 主要技术指标:4.2.1 泵流量设定：0.000和0.010到10.000毫升/分，增量为0.001毫升/分。
流量准确度：±1%或10μL/分，取其中的较大值（0.200到5.000毫升/分），反压为600psi下的脱气甲醇。
４.2.2 检测器：光源：氘灯。
波长范围：190～700nm波长精度：±1nm4.2.3 柱温箱：温度设定范围：20～60℃，间隔：1℃控温精度：±5℃4.2.4 工作站计算机：Dell OPTIPLEX330（操作系统Windows XP）。
4.2.5 打印机：HP LaserJet P1008打印机。
5 操作条件：5.1 电源要求：950VA（最大值）线电压：85到132Vac或180到250Vac频率：47到63Hz5.2 环境条件：温度：4～40℃，相对湿度：20～80%。
5.3 机房内应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。
5.4 仪器应平稳放置在工作台面上，便于操作，周围无强烈的机械震动和电磁干扰，仪器接地应良好。
6 操作前准备:6.1 配制所需流动相。
6.2 配制和制备所需的对照品溶液和供试品溶液。
6.3 将色谱柱连接到色谱仪管路系统上。
7 操作步骤：7.1 打开交流稳压电源开关，稳压电源上电压表指示并稳定至220V。
7.2 将“2695分离单元”电源开关（位于左侧面板的面板顶部）推到（开）I 位置即可启动“2695分离单元”, 启动诊断程序将启动。
启动诊断程序的初始部分成功后，前面板上将显示Main（主）屏幕。
waters超高效液相色谱仪操作步骤
第一部分：仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态，检查仪器是否连接电源，是否有故障指示灯显示。
2. 打开色谱仪软件，检查仪器参数设置是否符合实验要求，包括流速、温度、检测波长等。
3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。
第二部分：样品准备1. 准备实验所需的样品，确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。
2. 根据实验要求，将样品溶解在适当的溶剂中，并进行稀释或者稀释。
第三部分：超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前，先进行系统平衡。
具体操作步骤为：将色谱柱连接至色谱柱连接器上，然后连接至色谱仪，用洗脱液平衡色谱柱。
2. 设置色谱仪的操作参数，包括流速、温度、检测波长等。
3. 进行样品进样，具体操作步骤为：将进样器连接至色谱仪，将稀释好的样品注入进样器中，设置好进样量。
4. 开始进行实验，监控色谱图谱的变化，记录实验数据。
5. 实验结束后，对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护，确保仪器干净、整洁。
第四部分：数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析，比对标准曲线，计算样品中所含物质的浓度或者纯度。
2. 对实验结果进行统计分析，进行数据呈现，如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。
3. 通过数据处理和分析，得出实验结论，对实验结果进行解释和讨论。
第五部分：实验安全及注意事项1. 在操作过程中，注意个人安全，避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。
2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行，如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。
3. 实验结束后，及时清理实验台面和仪器设备，妥善存放试剂和耗材。
通过以上步骤的操作，可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时，能够得到准确、可靠的实验结果，为科研工作和学术研究提供有力支持。
第六部分：精密控制与调试1. 在进行实验操作前，要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。
这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。
新waters操作规程
目的：建立高效液相色谱仪标准操作规程，规范操作。
范围：Waters高效液相色谱仪职责：操作人员。
规程：一、开机1、依次开启电脑、泵、检测器电源。
1.1 泵（2695）自检完成后出现以下画面：.按右侧按键面板上的Menu/Status 出现以下画面：按会出现选择图片中的3WetPrime点OK以替换系统中的溶剂。
选4PurgeInjector以新流动相替换样品定量环和注射器中的旧流动相。
完成此操作后即可设定流速走流动相。
1.2 紫外检测器（2489）自检完成后检测器面板显示如下：按数字键输入待测波长后按 Enter 即可。
1.3 蒸发光散射检测器（2424）自检完成后检测器面板显示如下：按数字键设定Gain (增益)，按箭头键移动光标同法设定 psi (气体压力)，每项设定均需按Enter 。
Neb (喷雾器温度)，Tube(漂移管温度)设定时需先按键再同前项方法进行设定。
二、检测2.1数据采集Empower工作站点击桌面上的图标出现只有在用户名及密码处输入操作人的用户名及密码才可进入工作站进行样品检测及数据处理先点击配置系统设置泵及将用检测器的连接，如下图设置完成后退出，再点击运行样品进行样品检测，如下选择所要运行的仪器连接及所保存的项目名点确定后出现下图点击创建方法组编辑样品检测方法文件，如下图设定流速，流动相，温度，波长等检测条件并保存方法。
如下图操作示例点击下图中的箭头处选定所设定的方法，并点击设置仪器即按所设方法运行，如想查看基线则点击监视器即可。
柱平衡完成后即可进样，进样可选择单进样，在下图中输入相关项目点击完成进样。
也可编辑样品组进样，点击出现下图按项目编辑完成保存后点击运行样品组即可对样品进行采集。
（样品的所有信息，如名称，批号都可以在“样品名称”项中体现）2.2数据处理访问数据的查看界面在下图中点击浏览项目选择目标项目出现下图点通道即可查看采集完成的样品（如未看到想要查看的样，点即可）使用向导建立处理方法处理方法中的峰宽参数处理方法中的阈值参数处理方法中的时间参数处理方法中的其他参数处理方法中的校正参数2.3数据输出选中所需输出的样品，如下图操作三、关机检测完成后，执行关机程序清洗仪器，全部完成后关闭工作站及仪器电源即可。
Waters 1525型高效液相色谱仪操作及维护保养规程
文件制修订记录1．目的：规范Waters 1525型高效液相色谱仪的操作，确保检测设备安全稳定的运行。
2．范围：适用于Waters 1525型高效液相色谱仪、Waters 2489紫外检测器、GCK3308全自动空气源、ELSD 2000ES蒸发光散射检测器的操作使用。
3．职责：质量管理部检验员负责本规程的执行。
4．控制内容与要求：4.1仪器及部件Waters 1525输液泵；Waters 2489紫外检测器；GCK3308全自动空气源； ELSD 2000ES蒸发光散射检测器；Empower3色谱数据工作系统使用前检查室内温湿度，保持在15-30℃，和20-85%RH；线路连接是否正常，外部组装是否完整，液体管道连接是否正确，废液瓶是否需要更换或者或者倾倒；若不正常应尽快上报并检修。
4.2开机4.2.1 依次打开Waters 1525输液泵（左面板上部）、Waters 2489紫外检测器（主面板底部）、柱温箱电源（右板面下部），待自检通过后打开计算机电源，进入Empower色谱工作站。
4.2.2 依次打开Waters 1525输液泵（左面板上部）、GCK3308全自动空气源（主面板底部）、ELSD 2000ES蒸发光散射检测器（后面板底部左侧）、柱温箱电源（右板面下部），（注意空气源的排水及更换硅胶和活性炭）待达到设置的条件时打开计算机电源，进入Empower色谱工作站。
根据情况可先用甲醇或者异丙醇冲洗色谱柱。
4.3设置4.3.1设置系统进入Empower3色谱数据工作系统，单击“配置系统”，单击Empower3配置下“系统”，若有在线系统，查看是否是所需系统，如果不是，则单击在线系统，后右击“离线”，单击“确定”；再单击所需系统，后右击“启用”，单击“确定”。
4.3.2设置项目和方法4.3.2.1设置项目配置系统→文件→新建→项目→下一步→设定表空间为250，取消全面审计跟踪→下一步→选择PDA→下一步→下一步→选择一个源项目→下一步→项目名（例如:花青素20150922）→完成，关闭窗口4.3.3设置仪器方法双击“运行样品”，选择已设置的项目和系统，单击“确定”。
高效液相色谱操作流程
1. 开机自检具体操作如下：（1）打开Alliance 2695和2489的电源开关至ON，仪器开始自检；（2）仪器进行大约5分钟的自检过程，待仪器自我测试完毕后，出现画面上方的状态显示区出现Idle，表示开机测试正常。
（3）打开Empower软件，进入系统(用户名system，密码manager)2. 流动相（1）有机溶剂要求用色谱纯（进口名牌最好），水合缓冲盐溶液要用超纯水，每48小时制备新鲜的水相流动相，尤其是100%含水流动相使用时间不超过两天。
（2）检查6根管子是否都在液面以下，溶剂的位置必须高于溶剂混合阀，并检查、计算溶剂的用量，不够需及时配制、添加。
洗针液的溶剂瓶应放于试验台面上，与2695仪器底部位于同一水平面上。
（3）柱塞密封垫（Seal Wash）、针以及进样器选用甲醇进行清洗，所用所有溶剂或溶液均需用0.45μm的膜过滤并超声脱气20分钟，用洁净的玻璃容器盛放，避免污染，同时玻璃容器应用超纯水清洗而不能用自来水。
3. 灌注柱塞密封清洗清洗操作步骤：（1）回到Menu画面，选择Diag，确定Seal Wash的管路放在正确的位置；（2）按Prime Sealwash，再按Start，直到清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液管，先按Halt，再按Close4. 灌注针头清洗操作步骤：回到Main画面，选择Diag，按下Prime NdlWash。
设定值为30秒，若想多洗几次，按Start Again。
5. 打开真空脱气机如液相仪管路干，可进行使用，如管路不干则按照以下步骤进行操作：按Menu/Status键，进入Status(1)画面；利用方向键将光标移至Degasser位置，按Enter；利用上下键选择模式为ON。
注意在开启除气装置时，要确认所用溶剂管路都充满溶剂；若没有溶剂时请执行溶剂的Dry Prime操作。
6. 执行干灌注确定流动相溶剂的管子放在正确的位置，检测器（Detector）废液管及定量环（Sample Loop）的废液管是否放置于适当的废液容器中。
Waters液相色谱仪操作规程doc
Waters液相色谱仪操作规程1、开机：打开脱气机、泵、检测器和电脑开关（如需控制温度，还要打开柱温箱开关）2、脱气：点击Setup键，—clirect键进入isocratic窗口，拔掉废液出口堵头，接上废液杯，打开排气阀，设定流速5ml/min，调流动相比例，按光标键“▲”至光标出现在A%（甲醇）下方，按数字键，输入输入数字如80，按Enter键，光标出现在B%（水）的下方，按数字键，输入数字如20，按Enter键继续按Enter键，一直到使光标出现在左下角的OFF为止，进行排气（若气泡太多，短时间内排不完就用针管抽气：将旋钮旋至DRAW位，抽气至气泡没有为止，然后将旋钮旋至RUN位），排完气泡后，将流速调至0，关闭排气阀，然后将流速设置为1ml/min。
3、双击桌面上的Empower图标，输入用户名和密码①创建新项目：双击“配置系统”—新项目（选择菜单“文件—新建—项目）—选择父项目（选”项目”文件夹）—“下一步”—表空间100，不选“支持，全面审计追踪”—“下一步”—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—输入项目名—“完成”②运行样品双击“运行样品”—选“项目名***”—“确定”输入样品名：***功能：方法组：样品瓶：进样体积：进样时间：点击“创建方法组”—“新建”（出现仪器方法编辑器）点击“W600”图标—“流量”—泵模式：等度；流量比例设定—“事件”—启用事件监视—点击“W2998”图标，—点“通用”—启用3D数据设定“采样速度1—2”—“2D通道”—选“通道1”设定波长（编辑完成后保存）击“文件”—“另存为”—输入仪器方法名称—“保存”关闭“仪器方法编辑器”窗口选中所要的“仪器方法”—单击“下一步”—“下一步”—完成在“运行样品”页选中刚建立的“仪器方法”—点“监视器”（观察基线平滑无毛刺）待系统平衡后，即基线平滑无毛刺时，单击“终止监测”图标，（此时屏幕下边显示”系统空闲”),点击“进样图标”，屏幕下部出现“正在设置”—“等待进样”—这是扳动进样阀可以进样—进样后屏幕下边出现“正在运行”③数据处理A 双击“浏览项目”—项目—“确定”B在“通道”中查看，选中要处理的数据C选择“工具”—“查看”—打开（出现“查看”主窗口）D单击菜单中“文件”—“新建”—“处理方法”（出现新处理方法对话框）选使用处理方法向导—“确定”（出现“积分—峰检测1”）—设定“峰宽”—“下一步”（出现“积分—峰检测2”）—设定“阈值”（50）—“下一步”（出现“积分—积分区域”），输入保留时间：“开始时间—结束时间”—“下一步”（出现“积分—剔除峰”）—设定最小面积，最小高度，（或不做任何改动）—“下一步”—“下一步”，选择“否”，在“名称”栏中输入组分的名称（或不改动）—“下一步”—“下一步”输入“方法名”—”完成“。
Waters高效液相色谱仪标准操作规程
1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。
4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。
5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程6.1.Waters HPLC的组成：贮液器→输液泵→自动进样器→分离柱 (柱温箱 )→紫外检测器→控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。
6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序∙对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是Loca ，按 Edit/Enter 键，在Local 的L 前有闪动的光标显示，按 键，Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。
泵的任何动作都可由工作站来控制。
还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45 m 的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：打开LC各单元电源－控制器电源－电脑－LC-Solution工作站，开机后能听到“哔”声。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－控制器－LC各单元电源2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。
流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟，然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min，BCONC 0％，并设置合适的检测波长，柱温，停止时间。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作。
4．进样准备●观察基线及柱压，待基线平直（－5～80mv），压力稳定（0.5Mpa内）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
●填完后点击“start”，出现触发窗口，进样，仪器开始自动采样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
●打开文件搜索器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
waters高效液相的标准操作规程（sop）
WATERS高效液相的标准操作规程（SOP）适用于所有使用此仪器者1 流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。
本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择（反光面朝上），过滤水溶性流动相时（如甲醇/水），先用1-2ml甲醇润湿过滤膜，有助于快速抽滤。
1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3 保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合为系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器被微粒所阻塞或长霉，去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的过滤器则可。
有时候换上新的过滤器仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的过滤器。
不管如何，流动相都需要重新过滤。
流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。
如果流速大于10ml/min，常会出现这种现象。
使用下列方法解决：（1）使用低流速；（2）换大孔径的过滤器；（3）增加进液管道内径；（4）抬高或加压储液器；（5）不用过滤器，但流动相一定要先过滤；（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。
WATERS高效液相色谱仪操作规程
建立W ATERS高效液相色谱仪的使用操作规程，保证检验人员使用仪器的规范化、标准化，保证企业产品质量。
2．依据中华人民共和国药典(2010年版附录)3．范围适用于W ATERS高效液相色谱仪使用。
4．责任QC科化验员。
5．内容5.1仪器的组成和一般要求：5.1.1仪器的组成：高压输液泵；色谱柱；柱温箱；紫外检测器；蒸发光散射检测器。
5.1.2对仪器的一般要求：所用的仪器为高效液相色谱仪。
色谱柱的填充剂和流动相的组分应按各品种项下的规定。
除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。
在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法(药典2010年版附录IV A)项下对溶剂的要求。
正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。
5.2.操作方法5.2.1.首先制备新鲜流动相，清洗液以及样品5.2.1.1.对流动相的要求有机溶剂要求用色谱纯，经0.45μm微孔滤膜（有机膜）过滤；水或缓冲盐溶液要用纯化水（当天制备），经0.45μm微孔滤膜（水膜）过滤；超声波脱气约2分钟。
5.2.1.2.对样品的要求经0.45μm微孔滤膜（有机膜）过滤5.2.2.打开计算机电源，进入电脑操作系统5.2.3.打开仪器硬件电源蒸发光散射检测器还需打开气源。
5.2.4.进行仪器的操作5.2.4.1.打开泵抽液阀，逆时针转一到两圈，用注射器抽出液体8到10ml。
切记完成后将抽液阀关闭；5.2.4.2.设定流速如果用缓冲盐流动相，需要先用10%甲醇溶液（或乙腈）冲洗色谱柱至少15分钟，再用方法平衡系统约30分钟；如果不用缓冲盐做流动相，只是用水和甲醇或者乙腈做流动相，就可以直接调用方法平衡系统30分钟。
等待系统压力稳定后就可以进样。
Waters高效液相的标准操作规程(SOP)
Waters高效液相的标准操作规程（SOP）一、操作前准备1. 流动相准备：流动相所用试剂必须是色谱纯。
必须经过滤，脱气。
2. 检查色谱柱的链接：色谱柱出入口不能颠倒，出口螺帽必须拧紧防漏液。
二、色谱仪的启动、设置和应用操作流程图图1.开机进入breeze系统：依次打开泵以及检测器、柱温箱的电源，等到检测器自检完毕后，打开计算机登录windows，并进入breeze软件。
2.选择系统:在“选择项目和系统”对话框中，选择所需的项目和色谱系统，然后单击“确定”。
（色谱系统2489为紫外检测器；2414为示差折光检测器）3.创建方法:(1):管理→项目→创建项目→defaults→输入自建的项目名称和注释名→确定→项目创建完毕(2):切换系统：在窗口下切换系统→系统名称空白→确定管理→切换系统→系统名称（选择要用的检测器）→确定。
（可通过节点属性来检查和确定目标检测器是否处于在线状态）(3):调用方法组编辑器→新建→单击PCM泵按钮→高压限制:4000→泵模式（等度/梯度）→（设置各流动相流速）（C18反相柱总流速限定在2mL/min以内）单击TCM柱温箱按钮→区域1：设定柱温单击W2489：→设定波长（紫外可见光波长）→模式（单/双波长）→采样速率（1-2）文件→另存为→名称→保存。
新方法组→请选择用使用该方法组的数据有关的仪器方法→自建方法→下一步→完成。
4.灌注、清洗泵、清除系统、平衡系统4.1灌注和清除泵：1.在灌注和清洗泵之前的准备工作•如果泵处于干燥状态，在继续操作前应进行干灌注。
•将泵的参比阀旋钮向右旋转 1/2 圈，确保洗脱液流（绕过泵下游的所有连接组件）引至废液。
2.在“选择项目和系统”对话框中，确认色谱系统已完成配置并在线。
•确保已在“节点属性”中正确配置泵。
•将系统设置为在线。
3.在“运行样品”窗口中，单击“开始流量”图标，然后为泵流量和梯度设置输入适当的值。
提示：要快速灌注和清除以下型号的泵•对于 1525 泵，将流量设置为 4.0 毫升/分，并将梯度设置为 50% A、 50% B。
Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程
编写：审核：批准：日期：日期：日期：生效日期：1.目的：规范Waters1525型高效液相色谱仪的操作，确保检测设备安全稳定的运行。
2.范围：适用于Waters1525型高效液相色谱仪的操作使用。
3.职责：检验员负责本规程的执行。
4.操作步骤4.1开机前检查流动相对应泵单元放置，检查电源线接口连接完好4.2色谱柱的安装安装待测样品所需的色谱柱，注意色谱柱方向。
打开柱温箱电源开关，设置柱温箱温度。
4.3开机4.3.1泵单元打开泵电源，待自检通过后排气泡。
（注：上泵是B泵，一般放置水系流动相；下泵是A泵，一般放置有机系流动相。
）拧开上泵排液（空）阀螺旋，用注射器抽去管道及泵头内气泡，然后立即拧紧排液（空）阀螺旋。
下泵排气泡操作与上泵相同。
4.3.2打开检测器电源等待自检通过，大约5min。
4.3.3打开色谱工作站打开计算机电源，点击桌面图标，进入Breeze2 色谱工作站，用户名输入breeze，点击确定按钮，操作的项目选择“hd”，色谱系统选择“1525/2489”，点击确定。
4.4建立分析方法点击（调用方法组编辑器向导）图标，点击对话框中的“新建”，在电脑下方任务栏中出现（仪器方法编辑器），点开，设置波长等条件，再点击，设置A、B两泵的流速，然后点击保存图标，在对话框中输入此方法的名称，比如“亚麻酸方法”，再点击保存。
在“新方法组”的对话框中点击图标，选择“亚麻酸方法”，点击两次下一步，再点击完成。
4.5平衡仪器点击(平衡系统/监视基线图标)，在对话框中，选择方法如“亚麻酸方法”，点击设置。
等待仪器设置反应，再次点击（平衡系统/监视基线）。
等待基线平衡（一般约30-40min）。
4.6进样与数据采集：基线平衡后（30-40min），点击（中断正在运行的样品组或单进样）图标，结束平衡。
点击（单进样）图标，编辑样品名称、进样体积和运行时间，选择方法组，点击进样即可开始进样。
4.7谱图处理：点击图标，点，再点，双击所要查看的谱图。
waters高效液相操作规程
Waters 高效液相操作规程1. 简介高效液相色谱（High-performance liquid chromatography，HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。
Waters 公司是高效液相色谱仪器和耗材的主要供应商之一，本文将介绍 Waters 高效液相操作规程，以确保用户能正确、高效地操作 Waters 高效液相色谱仪器。
2. 仪器准备在进行高效液相色谱操作之前，首先需要准备好仪器。
以下是准备步骤：2.1 仪器检查检查仪器是否处于正常工作状态，确保所有液体泵、进样器、检测器等部件均正常联通。
2.2 操作软件启动启动 Waters 高效液相色谱仪器的操作软件，并连接仪器。
确保软件能够正常与仪器通讯。
2.3 样品准备根据分析目的，准备好待测样品溶液，并根据需要进行适当稀释或前处理。
3. 方法设置3.1 选择方法根据分析目的选择合适的方法。
在 Waters 高效液相色谱仪器操作软件中，点击“Method”（方法）选项卡，选择已有方法或新建方法。
3.2 参数设置根据分析需求设置方法参数，包括流速、柱温、分析时间等。
在操作软件的方法设置界面中进行参数设置。
3.3 样品进样选择进样器类型（自动或手动），设置进样体积和进样方式。
将样品溶液注入进样器，并进行相关设置。
4. 色谱柱操作4.1 切换柱根据需要，选择合适的色谱柱，并确保柱已经连通到色谱系统中。
4.2 柱平衡对于新柱，需要首先进行柱平衡。
在操作软件中选择柱平衡功能，根据提示进行操作。
5. 运行实验5.1 实验开始确认实验条件设置正确后，点击操作软件中的“Run”按钮，开始实验运行。
5.2 监控运行在实验运行过程中，密切监控柱压、流速和检测器信号等参数，确保实验正常进行。
5.3 数据记录实验运行结束后，保存实验数据。
点击操作软件中的“Save”按钮，选择保存路径和文件名。
6. 仪器关闭6.1 实验结束实验完成后，点击操作软件中的“Stop”按钮，停止实验运行。
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程一. 准备1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。
2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
3. 接通电源，依次打开1525泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
4. 打开Breeze软件，进入系统主界面。
二. 操作步骤1.更换流动相。
2.在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各个部件是否连接好。
若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。
3.回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“Make a new project”，“Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。
单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。
4.单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。
点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。
单击“Save Method”按钮保存设置方法。
5. 打开泵的抽液阀，使用灌注注射器抽取一定量的洗脱剂。
单击Purge图标，出现“Purge Wizard”对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”“Next”，调节A、B泵的流量分别为约3ml/min。
打开泵的参考阀，点击“Next”。
Purge结束后关闭参考阀。
6.点击主界面中的“press to equilibrate system/ monitor baseline”按钮，平衡系统0.5－1h，直至基线稳定。
7.点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。
(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程
1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。
4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。
5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程6.1.Waters HPLC的组成：贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 )紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。
6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的L 前有闪动的光标显示，按键，Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。
泵的任何动作都可由工作站来控制。
还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
编写：审核：批准：
日期：日期：日期：
生效日期：
1.目的：规范Waters1525型高效液相色谱仪的操作，确保检测设备安全稳定的运行。
2.范围：适用于Waters1525型高效液相色谱仪的操作使用。
3.职责：检验员负责本规程的执行。
4.操作步骤
4.1开机前检查
流动相对应泵单元放置，检查电源线接口连接完好
4.2色谱柱的安装
安装待测样品所需的色谱柱，注意色谱柱方向。
打开柱温箱电源开关，设置柱温箱温度。
4.3开机
4.3.1泵单元
打开泵电源，待自检通过后排气泡。
（注：上泵是B泵，一般放置水系流动相；下泵是A泵，一般放置有机系流动相。
）拧开上泵排液（空）阀螺旋，用注射器抽去管道及泵头内气泡，然后立即拧紧排液（空）阀螺旋。
下泵排气泡操作与上泵相同。
4.3.2打开检测器电源
等待自检通过，大约5min。
4.3.3打开色谱工作站
打开计算机电源，点击桌面图标，进入Breeze2 色谱工作站，用户名输入breeze，点击确定按钮，操作的项目选择“hd”，色谱系统选择“1525/2489”，点击确定。
4.4建立分析方法
点击（调用方法组编辑器向导）图标，点击对话框中的“新建”，在电脑下方任务栏中出现（仪器方法编辑器），点开，设置波长等条件，再点击，设置A、B两泵的流速，然后点击保存图标，在对话框中输入此方法的名称，比
如“亚麻酸方法”，再点击保存。
在“新方法组”的对话框中点击图标，选择“亚麻酸方法”，点击两次下一步，再点击完成。
4.5平衡仪器
点击(平衡系统/监视基线图标)，在对话框中，选择方法如“亚麻酸方法”，点击设置。
等待仪器设置反应，再次点击（平衡系统/监视基线）。
等待基线平衡（一般约30-40min）。
4.6进样与数据采集：
基线平衡后（30-40min），点击（中断正在运行的样品组或单进样）图标，
结束平衡。
点击（单进样）图标，编辑样品名称、进样体积和运行时间，选择方法组，点击进样即可开始进样。
4.7谱图处理：
点击图标，点，再点，双击所要查看的谱图。
建立谱图处理
方法：在通道中选中标准品谱图，双击点开，出现的对话框点击“是”，再点击（处理参数向导），选择“新建处理方法”，点确定，用鼠标左键拖住选择目标峰段，然后点基“下一步”，直到出现，输入目标峰名称后点击“下一步”，直到出现，输入谱图处理方法名称，点击完成，在出现的对话框中点击保存。
点击图标，点，再点，选择所需处理的标准品及样品图谱，单击右键，单击处理，选择“使用指定的方法处理”，单击下拉菜单，选择所需方法后点击确定，点击，再点，选择所需查看的图谱双击左键，即可查看目标峰的数据。
4.7结果计算（标准曲线）
进入查询数据，在通道中，选择标准谱图，右击选择改变样品，在其工具栏中点击（量），在对话框中将样品类型选择标准样，点击（从处理方法复制），选择谱图新建的处理方法名，在当前项下，输入组分名称，对应组分的浓度，单位（<mg/ml），确定，保存，关闭对话框。
点击标准品，右击选择处理，选择使用指
定的处理方法，选择谱图新建的处理方法名称，标准品（选择清除校正）；样品（无需校正），确定。
在结果中，更新查看。
系统计算出样品浓度C
样
（mg/ml）
组分质量分数X（%）=C
样（mg/ml）*稀释倍数/ M
样
4.8报告打印
在结果中，选择样品，右键选择预览，在报告方法对话框中，选择Peak Summary Report。
4.9色谱柱清洗、关机：
样品分析结束后，关闭检测器电源及柱温箱。
按规定20倍柱体积冲洗色谱柱，（如反相色谱：含盐或酸、碱的流动相先用10%甲醇水冲洗再用甲醇冲洗）清洗结束后，点击图标，在流量A和流量B栏中分别输入0，变化率栏中输入0.5-1.0min，点击应用，确定，等压力为0时即可关掉泵的电源。
进样针用甲醇清洗后放回，然后做好仪器使用记录。
5.注意事项：
5.1 双泵在运行中需要更换流动相之前，必须把双泵的流速设置为0，即把泵关掉，具体操作为点击图标，在流量A和流量B栏中分别输入0，最好在变化率栏中输入0.5-1min，保护泵单元。
点击应用，再确定，等压力为0时再更换流动相。
5.2 每次更换流动相后，必须排（液）气泡。
5.3 每隔一段时间（约一周），在使用仪器时，上下泵排完气泡后，将泵单元的参比阀切换至排空（向右转90°），单击图标，设置A、B两泵流量，使其排空约10mL液体，完成后，再单击图标，将A、B两泵流量设置为0，当压力为0时，再将参比阀向左转动90°即可。
5.4 检测器：通讯失败时，右键重设TUV。
6.相关文件：无
7.附录：无。