疟原虫实验室检查
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? 经8～10小时，虫体增大，胞质增多，伸出 伪足。
? 出现黄褐色的疟色素。 ? 红细胞胀大，变形，颜色变淡，并出现数量
较多，淡红色的小点，称薛氏小点
间日疟裂殖体
? 2.1
? 经40小时晚期滋养体发育成熟， 虫体变圆，空泡消失
未成熟裂殖体? （核i开m始m分at裂u又re称裂sc殖h体izo前n期t ）
体一侧
? 疟色素分散
间日疟（P. vivax）鉴定要点
1. 红细胞通 常涨大
2. 薛氏点明 显
3. 成熟环状 体粗大
4. 滋养体有 阿米巴样 伪足
5. 可见不同 发育期的 原虫
恶性疟原虫--环状体
? 环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大 ? 可见数粒，大小不一，红色粗大的茂氏点 ? 核1个，但2个常见，红细胞常含 2个以上原虫 ? 虫体常位于红细胞的边缘 ，呈“飞鸟状” ? 不带色素
吉氏染色方法
? 成批染色： 3 ％的吉氏稀释液滴加(或在 染色缸内染色亦可），→ 30 分钟→用水 冲干净，凉干。
? 单片染色：1毫升蒸馏水加1滴吉氏原液， 染色 30-40 分钟； (或 10%吉氏稀释液， 染色 10-15 分钟) 。其他同上。
瑞氏染液配制
?将瑞氏染剂粉 1g置于研钵内，加入 15ml甘油充分研磨后，倒入有塞玻 璃瓶中，再用 500ml甲醇洗出研钵 中的甘油溶液，倒入瓶中，摇匀后 置室温下，每天摇动 5分钟，3天后 即可使用。
生活史
抗疟原虫治疗
? 控制临床发作的药物：氯喹、青蒿素类 （青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯、双氢青蒿 素）。
? 防止复发：伯氨喹啉 、磷酸哌喹
实验室检查
?血片的制作 ?血片的染色 ?疟原虫的镜检
血片制作
? 载玻片：无油迹、无灰尘，无划痕、清洁 ? 推片：边缘光滑无缺口 ? 采血部位：耳垂、手指、足跟 ? 血液量：薄血膜1-1.5mm3，厚血膜4-5mm3 ? 推片与载玻片的角度：25-30度 ? 大小：薄血膜宽1.5-2cm，厚血膜直径0.8-1cm
瑞氏染色方法
? 厚、薄血膜间用蜡笔划一横线。薄血膜不用固 定，厚血膜需溶血。
? 在薄血膜上滴加瑞氏染液 5－8滴，染色 2分钟 后，再加与染液等量的水于薄血膜上，用吸管 将染液与蒸馏水混合均匀后，把染液引到厚血 膜上，使厚血膜再染色 10分钟。用清水轻轻冲 去染液，晾干。
厚薄血膜的标准
? 厚血膜血量适宜，不宜过多或过少 薄血膜平整，无皱折和空泡，红细胞单层排列
分类
? 寄生于人体的疟原虫有4种，即间日疟、恶 性疟、三日疟和卵形疟
发病机制
? 疟原虫在红细胞中增殖成裂殖子，使红细胞胀大 破裂时，大量的裂殖子和疟原虫代谢产物进入血 流，引起异性蛋白反应，机体肌肉收缩产热，网 状内皮系统吞噬细胞功能增强，故可引起肝、脾 肿大，多次发作可致贫血等。
? 疟原虫在红细胞内增殖成熟所需时间不同，间日 疟和卵形疟为 48小时，三日疟为 72小时，恶性疟 为24～48小时，故临床上出现周期性发作
? 色素聚集成团块
? 成熟裂殖体约有12－24个 细胞核
? 胞浆也随之分裂
? 受染RBC 胀大、颜色苍白、虫体几 乎充满红细胞
间日疟原虫雄配子体
? 虫体较小，占满胀大的红细胞 ? 胞质浅蓝 ? 核大疏松，淡红色，多位于虫体
的中央。 ? 疟色素分散
间日疟原虫雌配子体
? 虫体较大，占满胀大的红细胞 ? 胞质致密，色深蓝 ? 核小致密，深红色，多位于虫
薄血膜中常见的血液成分
人类四种疟原虫的基本特征
间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫
环状体 滋养体 裂殖体 配子体
疟原虫图谱
间日疟 三日疟 恶性疟 卵形疟
间日疟早期滋养体--环状体
约占寄生红细胞的1/3，很少见到一个红细胞寄生2 个环状体和一个环状体有2个核。
间日疟滋养体-大滋养体
恶性疟原虫—大滋养体
? 一般不出现在外周血 ? 虫体小结实，圆形，
不活动 ? 疟色素集中一团，黑
褐色 ? 原虫此时开始集中在
内脏毛细血管
恶性疟成熟裂殖体
? 裂殖子8～36个，通常 18～24个，排列不规则
染液（原液）配方
吉氏染液 : ?吉氏（ Giemsa ）染剂粉 ?甘油 ?甲醇 瑞氏染液 : ?瑞氏染剂粉 ?甲醇 ?甘油 （染液配制好后要过滤）
0.5 克 25 毫升 25 毫升
0.2 克 100 毫升 3 毫升
吉氏染液配制
? 吉氏染剂粉→研钵→甘油→研磨→甲 醇洗去甘油溶液→有色玻璃瓶中→每 日用力摇动5min，室温 一月后应用。 （此染液为原液）
疟原虫实验室检查
上海交通大学医学院附属瑞金医院 王剑飚
64370045-600612
背景
? 疟疾在我国古代称为瘴气，国外称malaria， 为意大利文mala（不良）与aria（空气）二 字合成。本病是由雌按蚊叮咬人体，将其 体内寄生的疟原虫传入人体而引起的。疟 疾是以周期性冷热发作为最主要特征，脾 肿大、贫血以及脑、肝、肾、心、肠、胃 等受损引起的各种综合征
血片的制作、染色、镜检中应注意的事项
? 血量 ? 血膜的厚薄 ? 血膜的固定 ? 染液（原液）质量、陈旧 ? 染液浓度、气温及染色时间 ? 稀释液配制时间 ? 稀释用水的酸碱度 ? 镜检技能 （滴加镜油，100倍油镜头检查；自上而
下、自左而右逐个视野顺序检查）
? 显微镜质量
自动化染片
镜检
? 疟原虫三要素 核---鲜红色 胞浆---蓝色 疟色素---黄褐色或黑褐色，
血片制作
? 位置：通常是将厚、薄血膜涂在一张载片上。方 法是将载片分为 6等分，第1、2格备贴标签及编 号用；厚血膜在第 2、第3格的交界处，薄血膜在 第3格中央至第 6格中部。作为标本的血片每张玻 片涂厚、薄血膜各 1个。
? 或将载片分为 6等分，第1、2格备贴标签及编号 用；厚血膜涂在第 3格中央，薄血膜涂在第 4格前 缘至第 6格中部。
血片的制作—采血
玻片的执持
厚血膜的位置：第2第3格中央
推片边缘沾取少量血液至玻片中部
玻片和推片之间角度25-30度
呈舌状样的薄血膜（2㎝宽）
血片的染色
?染色前的处理 ?薄血膜用甲醇固定 ?厚血膜进行溶血
薄血膜用甲醇固定
厚血膜必须当天பைடு நூலகம்血，一般不宜超过 24 小时
经甲醇固定、溶血处理后的血片
? 出现黄褐色的疟色素。 ? 红细胞胀大，变形，颜色变淡，并出现数量
较多，淡红色的小点，称薛氏小点
间日疟裂殖体
? 2.1
? 经40小时晚期滋养体发育成熟， 虫体变圆，空泡消失
未成熟裂殖体? （核i开m始m分at裂u又re称裂sc殖h体izo前n期t ）
体一侧
? 疟色素分散
间日疟（P. vivax）鉴定要点
1. 红细胞通 常涨大
2. 薛氏点明 显
3. 成熟环状 体粗大
4. 滋养体有 阿米巴样 伪足
5. 可见不同 发育期的 原虫
恶性疟原虫--环状体
? 环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大 ? 可见数粒，大小不一，红色粗大的茂氏点 ? 核1个，但2个常见，红细胞常含 2个以上原虫 ? 虫体常位于红细胞的边缘 ，呈“飞鸟状” ? 不带色素
吉氏染色方法
? 成批染色： 3 ％的吉氏稀释液滴加(或在 染色缸内染色亦可），→ 30 分钟→用水 冲干净，凉干。
? 单片染色：1毫升蒸馏水加1滴吉氏原液， 染色 30-40 分钟； (或 10%吉氏稀释液， 染色 10-15 分钟) 。其他同上。
瑞氏染液配制
?将瑞氏染剂粉 1g置于研钵内，加入 15ml甘油充分研磨后，倒入有塞玻 璃瓶中，再用 500ml甲醇洗出研钵 中的甘油溶液，倒入瓶中，摇匀后 置室温下，每天摇动 5分钟，3天后 即可使用。
生活史
抗疟原虫治疗
? 控制临床发作的药物：氯喹、青蒿素类 （青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯、双氢青蒿 素）。
? 防止复发：伯氨喹啉 、磷酸哌喹
实验室检查
?血片的制作 ?血片的染色 ?疟原虫的镜检
血片制作
? 载玻片：无油迹、无灰尘，无划痕、清洁 ? 推片：边缘光滑无缺口 ? 采血部位：耳垂、手指、足跟 ? 血液量：薄血膜1-1.5mm3，厚血膜4-5mm3 ? 推片与载玻片的角度：25-30度 ? 大小：薄血膜宽1.5-2cm，厚血膜直径0.8-1cm
瑞氏染色方法
? 厚、薄血膜间用蜡笔划一横线。薄血膜不用固 定，厚血膜需溶血。
? 在薄血膜上滴加瑞氏染液 5－8滴，染色 2分钟 后，再加与染液等量的水于薄血膜上，用吸管 将染液与蒸馏水混合均匀后，把染液引到厚血 膜上，使厚血膜再染色 10分钟。用清水轻轻冲 去染液，晾干。
厚薄血膜的标准
? 厚血膜血量适宜，不宜过多或过少 薄血膜平整，无皱折和空泡，红细胞单层排列
分类
? 寄生于人体的疟原虫有4种，即间日疟、恶 性疟、三日疟和卵形疟
发病机制
? 疟原虫在红细胞中增殖成裂殖子，使红细胞胀大 破裂时，大量的裂殖子和疟原虫代谢产物进入血 流，引起异性蛋白反应，机体肌肉收缩产热，网 状内皮系统吞噬细胞功能增强，故可引起肝、脾 肿大，多次发作可致贫血等。
? 疟原虫在红细胞内增殖成熟所需时间不同，间日 疟和卵形疟为 48小时，三日疟为 72小时，恶性疟 为24～48小时，故临床上出现周期性发作
? 色素聚集成团块
? 成熟裂殖体约有12－24个 细胞核
? 胞浆也随之分裂
? 受染RBC 胀大、颜色苍白、虫体几 乎充满红细胞
间日疟原虫雄配子体
? 虫体较小，占满胀大的红细胞 ? 胞质浅蓝 ? 核大疏松，淡红色，多位于虫体
的中央。 ? 疟色素分散
间日疟原虫雌配子体
? 虫体较大，占满胀大的红细胞 ? 胞质致密，色深蓝 ? 核小致密，深红色，多位于虫
薄血膜中常见的血液成分
人类四种疟原虫的基本特征
间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫
环状体 滋养体 裂殖体 配子体
疟原虫图谱
间日疟 三日疟 恶性疟 卵形疟
间日疟早期滋养体--环状体
约占寄生红细胞的1/3，很少见到一个红细胞寄生2 个环状体和一个环状体有2个核。
间日疟滋养体-大滋养体
恶性疟原虫—大滋养体
? 一般不出现在外周血 ? 虫体小结实，圆形，
不活动 ? 疟色素集中一团，黑
褐色 ? 原虫此时开始集中在
内脏毛细血管
恶性疟成熟裂殖体
? 裂殖子8～36个，通常 18～24个，排列不规则
染液（原液）配方
吉氏染液 : ?吉氏（ Giemsa ）染剂粉 ?甘油 ?甲醇 瑞氏染液 : ?瑞氏染剂粉 ?甲醇 ?甘油 （染液配制好后要过滤）
0.5 克 25 毫升 25 毫升
0.2 克 100 毫升 3 毫升
吉氏染液配制
? 吉氏染剂粉→研钵→甘油→研磨→甲 醇洗去甘油溶液→有色玻璃瓶中→每 日用力摇动5min，室温 一月后应用。 （此染液为原液）
疟原虫实验室检查
上海交通大学医学院附属瑞金医院 王剑飚
64370045-600612
背景
? 疟疾在我国古代称为瘴气，国外称malaria， 为意大利文mala（不良）与aria（空气）二 字合成。本病是由雌按蚊叮咬人体，将其 体内寄生的疟原虫传入人体而引起的。疟 疾是以周期性冷热发作为最主要特征，脾 肿大、贫血以及脑、肝、肾、心、肠、胃 等受损引起的各种综合征
血片的制作、染色、镜检中应注意的事项
? 血量 ? 血膜的厚薄 ? 血膜的固定 ? 染液（原液）质量、陈旧 ? 染液浓度、气温及染色时间 ? 稀释液配制时间 ? 稀释用水的酸碱度 ? 镜检技能 （滴加镜油，100倍油镜头检查；自上而
下、自左而右逐个视野顺序检查）
? 显微镜质量
自动化染片
镜检
? 疟原虫三要素 核---鲜红色 胞浆---蓝色 疟色素---黄褐色或黑褐色，
血片制作
? 位置：通常是将厚、薄血膜涂在一张载片上。方 法是将载片分为 6等分，第1、2格备贴标签及编 号用；厚血膜在第 2、第3格的交界处，薄血膜在 第3格中央至第 6格中部。作为标本的血片每张玻 片涂厚、薄血膜各 1个。
? 或将载片分为 6等分，第1、2格备贴标签及编号 用；厚血膜涂在第 3格中央，薄血膜涂在第 4格前 缘至第 6格中部。
血片的制作—采血
玻片的执持
厚血膜的位置：第2第3格中央
推片边缘沾取少量血液至玻片中部
玻片和推片之间角度25-30度
呈舌状样的薄血膜（2㎝宽）
血片的染色
?染色前的处理 ?薄血膜用甲醇固定 ?厚血膜进行溶血
薄血膜用甲醇固定
厚血膜必须当天பைடு நூலகம்血，一般不宜超过 24 小时
经甲醇固定、溶血处理后的血片