动物的克隆(浙科版)
动物克隆的基本过程
动物克隆的基本过程
嘿，朋友们！今天咱来聊聊动物克隆这神奇的事儿。
你说这克隆就像是变魔术一样，能复制出一个一模一样的动物来。
咱先说说这细胞吧，就好像是动物身体的小零件。
要克隆呀，就得先找到合适的细胞。
这就好比你要盖房子，得先找到好的砖头不是？然后呢，把这个细胞放到一个特殊的环境里，就像给小零件找了个特别的家。
接下来，就有个关键的步骤啦！得把这个细胞和一个卵细胞结合起来。
这就像是把两个不同的拼图块拼在一起，组成一个新的整体。
这可不是随随便便就能成功的哦，得非常精细地操作才行。
然后呢，这个新的组合就开始发育啦！就像一颗种子开始发芽、长大。
慢慢地，它就会长成一个和原来的动物几乎一样的新生命。
你说神奇不神奇？
想想看啊，如果我们能把那些珍稀的动物都克隆出来，那不是能保护它们不灭绝了吗？这多好呀！但是，这也不是没有问题的哟。
比如说，克隆出来的动物真的能和原来的完全一样吗？它们的性格、行为会不会有差别呢？这都是值得我们思考的问题呀。
而且啊，克隆也不是随便就能做的。
这需要很高的技术和很严格的条件。
可不是我们在家里就能随便试试的，那可不行！要是弄错了，那可就麻烦啦。
不过呢，虽然有这些问题，动物克隆还是给我们带来了很多希望和可能性。
说不定以后我们能通过克隆技术做出很多对我们人类有益的事情呢。
总之，动物克隆是个既神奇又复杂的事情。
我们既要看到它的好处，也要注意它可能带来的问题。
我们要好好地研究它，让它为我们的生活带来更多的好处，而不是坏处。
你们说是不是这个理儿呀？。
阐述动物克隆的原理和应用
阐述动物克隆的原理和应用1. 动物克隆的原理动物克隆是指通过繁殖方式以外的方法，如细胞核转移、人工激活卵细胞等技术手段，复制动物的遗传信息，产生与原始个体相同或相似的新个体。
1.1 细胞核转移技术细胞核转移技术是目前最常用的动物克隆方法之一。
其基本步骤如下：1.从原始个体中取出一个体细胞（如皮肤细胞）；2.从另一动物取得一个卵细胞，并将其细胞核移除；3.将步骤1中的细胞核植入步骤2中的卵细胞；4.通过化学方法或电脉冲激活复制后的卵细胞；5.将活化的卵细胞植入代孕母体；6.接受孕母体的胚胎着床发育，最终产生克隆个体。
1.2 人工激活卵细胞技术人工激活卵细胞技术是另一种常见的动物克隆手段。
其基本步骤如下：1.从原始个体中取得一个成熟的卵细胞；2.通过离体培养等方法，将该卵细胞激活；3.从另一动物中取得一个或若干个个体细胞；4.将步骤3中的个体细胞与步骤2中的激活卵细胞进行融合；5.通过培养等处理，使融合后的细胞发育成胚胎；6.将胚胎植入代孕母体；7.接受孕母体的胚胎着床发育，最终产生克隆个体。
2. 动物克隆的应用动物克隆技术的发展在许多领域都产生了广泛而深远的影响。
2.1 科学研究•动物克隆技术在科学研究中发挥了重要作用。
通过克隆动物，科学家能够深入研究某种基因的功能、遗传突变等现象，为生物学和医学研究提供了有力的工具。
•克隆动物也为疾病研究提供了模型。
通过研究克隆动物的发育过程和生理活动，科学家可以更好地理解疾病的发生机制，从而为疾病的防治提供思路和方案。
2.2 农业和畜牧业•动物克隆技术在农业和畜牧业中具有重要意义。
通过克隆技术，可以产生优质、高产、抗病的克隆农作物和克隆动物，从而提高农业生产效益和畜牧业的发展速度。
•克隆动物还可以用于提取优质种源，保护原生动物基因资源，以及恢复濒危物种等方面。
这对于生物多样性的保护和可持续发展具有重要意义。
2.3 药物研发•动物克隆技术在药物研发中的应用越来越广泛。
动物克隆的基本原理及过程
动物克隆的基本原理及过程《动物克隆的基本原理及过程》动物克隆是指通过人工手段复制原始个体的生殖过程。
这项技术的发展引起了广泛的关注和讨论，同时也引发了一系列伦理和道德问题。
本文将介绍动物克隆的基本原理及过程，以帮助读者更好地理解这一领域的发展和挑战。
动物克隆的基本原理是利用体细胞核移植技术，将一个成熟核移植到一个去核的卵细胞中，然后通过合适的刺激使其发育成一个完整的新个体。
在这个过程中，克隆个体将完全或部分地拥有捐赠体细胞的遗传信息。
动物克隆的过程可以分为以下几个关键步骤：1. 获取捐赠体细胞：捐赠体细胞可以来自成年个体的体细胞，比如皮肤细胞或肌肉细胞。
这些细胞将成为克隆个体的遗传来源。
2. 准备去核卵细胞：通过一系列的实验操作，去除卵细胞中的细胞核，以确保克隆个体将只携带捐赠体细胞的遗传信息。
3. 核移植：将捐赠体细胞的细胞核注射到去核卵细胞中。
4. 诱导发育：经过核移植后，为了启动克隆个体的发育，科学家通常需要提供一些刺激，比如电脉冲或化学物质。
这些刺激可以激活细胞的发育能力，使其开始分裂和发育。
5. 移植和孵化：克隆胚胎可以被移植到一只母兽体内，或在试管中孵化出来。
无论哪种方法，都需要为克隆个体提供适当的环境和条件，使其正常生长和发育。
需要注意的是，动物克隆是一项复杂和技术密集型的过程，目前仍然面临许多挑战和限制。
成功率仍然相对较低，伦理和道德问题也一直备受关注。
然而，动物克隆也有着广阔的应用前景。
它可以用于保护濒临灭绝的物种、提高家畜和农作物品质、以及研究人类和动物发育等基础科学问题。
随着技术的不断发展和完善，我们相信动物克隆将在未来发挥更大的作用。
总之，动物克隆是一项具有巨大潜力和困难的技术。
通过核移植和发育诱导等关键步骤，科学家可以实现原始个体的复制和繁殖。
尽管仍面临许多挑战，但动物克隆在生物学和应用领域的潜力仍然令人兴奋。
高中生物选修3浙科版知识点总结
1 第一章 基因工程一、工具酶的发现和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。
基因工程的核心是构建重组DNA 分子。
由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。
重组技术。
（3）基因工程诞生的理论基础：DNA 是遗传物质的发现过程、DNA 双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ① 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
主要是从原核生物中分离纯化出来的。
② 功能：能够识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。
例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,GAATTC,能在能在G 和A 之间切割DNA DNA，如，如下图所示。
下图所示。
黏性末端黏性末端③ 结果：能将DNA 分子切割成许多不同的片段。
分子切割成许多不同的片段。
备注：不同DNA 分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个 DNA 分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
（2）“分子缝合针”——DNA 连接酶 ① 作用：将具有末端碱基互补的2个DNA 片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的D NA 分子称为重组DNA 分子。
动物克隆的技术和原理
动物克隆的技术和原理
动物克隆是指通过人工手段复制一个动物的基因组，使其与原生态个体相同或相似的过程。
目前，动物克隆技术主要包括体细胞克隆和胚胎克隆两种方法。
体细胞克隆是利用已成熟的体细胞（如皮肤细胞）经过处理，使其转化为“全能细胞”，再将其注入到空心的卵细胞中，使其发育成胚胎，最终通过移植到代孕母体中获得一个新生个体。
这种方法最早应用于羊的克隆，被称为“多莉”，成功率较低，但是可以利用一个体细胞克隆出多个个体。
胚胎克隆是利用早期胚胎的细胞，通过细胞分裂产生多个完全相同的胚胎，再将其移植到代孕母体中发育成新生个体。
这种方法的成功率相对较高，但需要采集和操作早期胚胎，对于某些动物来说难度较大。
动物克隆技术的原理是基于细胞分裂和基因组重组的原理。
每个动物细胞都包含着完整的基因组，通过不同的基因表达和调控，才能发挥出不同的细胞类型和个体特征。
通过对细胞进行特殊处理，可以使其恢复到某种发育状态，从而重新分裂产生新的胚胎或个体。
动物克隆技术在基础研究、药物研发、种质保护等领域有广泛应用，但也存在伦理和安全等问题，需要进一步探究和规范。
- 1 -。
动物克隆技术
动物克隆技术嘿，咱们今天来聊聊这个神奇又有点让人惊叹的动物克隆技术！你知道吗？动物克隆技术就像是一场魔法表演，能把一个动物“复制粘贴”出另一个一模一样的来。
这可不是科幻电影里的情节，而是真真切切发生在我们生活的这个世界里的科学奇迹。
我先给你讲讲克隆羊多利的故事。
当年，多利的诞生可是引起了全球的轰动。
科学家们从一只成年绵羊的乳腺细胞中取出细胞核，然后把它植入到另一只绵羊已经去掉细胞核的卵细胞中。
经过一系列复杂的操作，多利就这么诞生啦！多利的出现，让人们对动物克隆技术充满了好奇和期待。
咱们再来说说动物克隆技术的原理。
简单来说，就是细胞核移植。
就好像是给一个细胞换了一个“大脑”，然后这个细胞就按照新“大脑”的指令开始生长发育。
但是这个过程可不简单，需要非常精细的操作和严格的环境控制。
动物克隆技术有啥用处呢？比如说，在农业方面，可以克隆出优良品种的家畜，提高农产品的产量和质量。
想象一下，一群长得又快又壮的牛或者羊，那得多让人开心啊！在医学领域，克隆技术可以用来制造和人类疾病相似的动物模型，帮助科学家们更好地研究疾病的发病机制和治疗方法。
还有啊，濒危动物的保护也能靠它。
一些濒临灭绝的动物，通过克隆技术，说不定就能增加它们的数量，让它们不再那么危险。
不过，动物克隆技术也不是完美无缺的。
比如说，克隆出来的动物可能会有一些健康问题，寿命也可能比正常出生的动物短。
而且，从伦理道德的角度来看，也引发了不少争议。
有人担心克隆技术会被滥用，造成一些不可预料的后果。
我记得有一次，我去一个农场参观。
农场主正在给我们介绍他们新引进的克隆牛。
那些牛看起来确实很强壮，但是农场主也有点担心地说：“虽然这些牛看起来不错，可不知道以后会不会有啥毛病。
”这让我深深感受到，动物克隆技术虽然带来了很多好处，但也伴随着一些未知和担忧。
总的来说，动物克隆技术就像是一把双刃剑。
用得好，能给我们的生活带来很多便利和惊喜；用不好，可能会带来一些麻烦。
动物克隆技术科普
动物克隆技术科普概述动物克隆技术是一种通过人工手段复制动物的生殖细胞或胚胎细胞，从而实现相同基因组的动物繁殖的技术。
它是遗传工程领域的重要研究方向，也是生物科学领域的一项重要突破。
本文将为大家科普动物克隆技术的原理、方法和应用，以及相关的伦理和社会问题。
一、动物克隆技术的原理动物克隆技术的原理是利用体细胞核移植。
首先，从一只成熟个体的体细胞中提取出细胞核，然后将这个细胞核移植到一个去除了细胞核的受体卵母细胞中，经过一系列培养和激活操作，使得受体卵母细胞重新分化和发育，最终形成一个与捐赠个体基因相同的胚胎。
这个胚胎可以继续发育成为一个新的个体，与捐赠个体具有相同的基因组。
二、动物克隆技术的方法动物克隆技术目前主要有两种方法，分别是细胞核移植和胚胎分裂法。
1. 细胞核移植细胞核移植是目前应用最广泛的动物克隆技术方法。
它可以通过将体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中，形成一个与体细胞相同基因组的胚胎。
这个胚胎可以继续发育成为一个新的个体。
细胞核移植技术的关键是如何使得受体卵母细胞能够重新分化和发育，而不是继续遵循卵母细胞的发育路径。
2. 胚胎分裂法胚胎分裂法是一种较少应用的动物克隆技术方法。
它通过将早期胚胎分裂成多个细胞团，每个细胞团继续发育成为一个新的个体。
这种方法主要应用于某些具有较高再生能力的动物，如蚯蚓和水螅等。
三、动物克隆技术的应用动物克隆技术在科学研究、农业和医学领域都有广泛的应用。
1. 科学研究动物克隆技术可以帮助科学家研究生物发育、基因表达和细胞分化等过程。
通过对克隆胚胎的观察和分析，科学家可以更好地理解生物的发育机制。
2. 农业动物克隆技术可以应用于畜牧业，提高优良品种的繁殖效率。
通过克隆技术，可以复制出优秀的农业动物，提高农产品的质量和产量。
3. 医学动物克隆技术在医学领域有着广泛的应用前景。
例如，通过克隆技术可以制备出与患者组织相匹配的干细胞，用于治疗一些难以治愈的疾病。
此外，动物克隆技术还可以用于生物药物的研发和生产。
第三节动物的克隆
思考题
动物细胞培养过程
悬浮培养
思考题
动物细胞生长特性： （1）贴壁生长：培养瓶中的悬浮液细胞， 紧贴培养瓶内壁才能生长 （2）接触抑制：当培养瓶中内壁生长细 胞彼此紧密接触时，细胞不再分裂 （3）细胞只分裂不分化
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？ 原代培养 机体中取 下经过处 理后的单 细胞 细胞株：
动物的组织培养
培养物： 离体的动物组织 培养环境： 人工控制的培养条件 培养过程： 细胞的运动、变化，使得培养物的
组织成分也发生结构和功能变异
培养产物：
单一类型的细胞
组织培养长期培养后最终成为了简单的细胞培 养,因此两者可以统称为组织培养. 器官培养： 器官的原基、器官的一部分或整个器 官，使之在体外和人工控制的条件下得以生存、生 长和保持器官的结构、功能及分化能力。
4、动物胚胎分割移植
解决某些妊 娠时间长、每胎 产子数量少的优 良种畜的繁殖速 度问题。
练习：
二、动物的细胞融合技术及其应用
1、细胞融合与细胞杂交：
物理法：离心、振荡、电融合技术
诱导方式
化学法：聚乙二醇
生物法：灭活的仙台病毒
灭活的病毒颗粒 黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒 穿通，细胞膜连接
细胞融合，形 成杂种细胞
（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。）
3、温度和PH 保证细胞顺利的 36.5 ± 0.5℃，7.2-7.4 生长增殖 4、气体环境： 有O2和CO2（95%空气和5%CO2 ）
[讨论]动物细胞离体培养时，是否会表 现和体内细胞一样的生命活动？
①细胞能生存并保持生长、分裂乃至接触抑制和 有规律的衰老、死亡等。 ②细胞之间相互依存，在某种程度上呈现一定的 组织特性。
高中生物选修3(浙科版)知识点总结
高中生物选修3(浙科版)知识点总结第一章基因工程一、工具酶的发现和基因工程的诞生1.基因工程的概念基因工程是将一种生物的基因转移至另一种生物体中，使其产生需要的基因产物或获得新的遗传性状。
基因工程的核心是构建重组DNA分子。
2.基因工程的基本工具限制性核酸内切酶（限制酶）是“分子手术刀”，能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并切割使其断开，具有专一性。
DNA连接酶是“分子缝合针”，将具有末端碱基互补的DNA片段连接在一起形成重组DNA分子。
载体是“分子运输车”，具有自我复制能力的双链环状DNA分子，能在受体细胞中复制并稳定保存，供外源DNA片段插入和重组DNA鉴定和选择。
二、基因工程的原理和技术基因工程的基本原理是让目的基因在宿主细胞中稳定和高效地表达。
为了实现基因工程，需要准备多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作：目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞（宿主细胞），筛选含有目的基因的受体细胞、基因表达。
目的基因的获得有两种方法：一种是目的基因的序列已知，可以用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因；另一种是目的基因的序列未知，需要建立一个包括目的基因在内的基因文库，从中寻找目的基因。
形成重组DNA分子的方法是使用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA，然后用DNA连接酶将它们连接在一起，形成重组DNA分子。
将重组DNA分子导入受体细胞的方法是使用适当的方法将形成的重组DNA分子转移到合适的受体细胞中，常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。
筛选含有目的基因的受体细胞需要使用选择性培养基进行筛选，因为并不是所有细胞都能接纳重组DNA分子。
最后，目的基因在宿主细胞中表达，能产生人们需要的功能物质。
基因工程的核心是构建重组DNA分子，而DNA的遗传信息传递方式的认定、限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒载体的发现与应用为基因工程提供了技术上的保障。
浙江生物高考专题二轮课件专题三第2讲克隆技术和胚胎工程
(2)原代培养和传代培养含义。
①原代培养:从 培养,图中属于原代培养的是 ②传代培养:将 取出后立即进行的细胞或组织 过程。 细胞分成若干份,接种到
若干份培养基中,使其继续生长、繁殖,即将细胞从一个培养瓶 转移或移植到另一个培养瓶。 提示:①机体 丙 ②原代培养
【解析】选C。本题综合考查了动物细胞培养相关操作过程和
3.(2011江苏高考·T18B)受精卵发育到原肠胚阶段才能进行
胚胎移植。 (×)
分析:适于移植的胚胎应是桑椹胚或囊胚,原肠胚不宜进行胚胎 移植。 4.(2009浙江高考·T1B)用动植物成体的体细胞进行离体培 养都须用液体培养基。 (×)
分析:动物成体的体细胞离体培养用液体培养基,而植物成体的
体细胞离体培养一般用固体培养基。
B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养
【解析】选D。动物细胞在培养过程中有接触抑制现象,细胞在
培养瓶中会贴壁生长,形成一层细胞,相互接触后停止生长。克 隆培养法培养过程中,仅有极少数细胞的基因型会发生改变。 二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了。恶性 细胞系的细胞具有不死性,可以进行传代培养。
种类 有限 细 胞 细胞株 连续 细胞株
来
源 传代次 数有限 可连续
特
点
通过一定的选 择或纯化方法, 从原代培养物
一般具有恒定的 染色体组型、同 功酶类型、病毒
株
或细胞系中获
得
多次
传代
敏感性和生化特
性等
【变式训练】(2013·丽水模拟)下列关于动物细胞培养的叙述, 正确的是 ( )
A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
浙科版(2019)选择必修三 5-2 我国禁止生殖性克隆人 课件(28张)
思考与练习
我国政府坚持反对生殖性克隆、支持治疗性克隆的立场。在就“治疗性克隆”研 究问题上，你的观点是什么？有什么证据支持你的观点？
THANKS
4. 德国：1991 年德国实行《胚胎保护法》，严格禁止 人类胚胎干细胞研究以及克隆胚胎干细胞。2000 年11 月，德国卫生部提出一项新的《生殖医学法》草案，再 次强调在德国不允许进行胚胎干细胞的培育研究。
世界各国政府对生殖性克隆人的反应
5. 意大利：2001 年3 月，意大利众议院批准了政府于 1998 年签署的加入欧洲禁止克隆人协议。 6. 日本：2000 年4 月14 日，日本内阁会议通过关于 《限制对人的克隆技术的法律》草案，禁止克隆人，违 者最高将被判处5 年徒刑。
中国政府坚持反对生殖性克隆、支持治疗性克隆的立场（图5-7）。
生殖性克隆与治疗性克隆
有关人类胚胎的克隆性研究主要分为两种类型：一种是生殖性克隆，即克隆人研究， 就是以产生新个体为目的的克隆。用生殖技术制造完整的克隆人，目的是产生一个 独立生存的个体。另一种是治疗性克隆，即从克隆胚胎中提取干细胞，然后将之培 养成人们所需要的各种人体器官。
生殖性克隆人面临诸多伦理问题
真正的科学实验具有可重复性，但生产“多莉”的 研究所也难以很快用同样方法获得第二只克隆羊； 同时，“多莉”只存活了几年，它死前在遗传、生 理方面表现出许多衰老特征，留下了大量尚待研究 解决的问题；除此之外，克隆的动物在遗传上是完 全相同的，一种特定病毒或其他病原体的感染，可 能带来严重灾难。
我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
2005 年2 月18 日，第59 届联合国大会法律 委员会以71 票赞成、35 票反对、43 票弃权 的表决结果，以决议的形式通过一项政治宣言 《联合国关于人的克隆宣言》，要求各国禁止 有违人类尊严的任何形式的克隆人。
高中生物PPT课件《动物的克隆》第三课时 (1)
一、动物细胞全能性的表现程度
细胞全能性 指单个细胞具有发育成完整个 体的潜能。
受精卵具有全能性
一、动物细胞全能性的表现程度
• 2、“受精卵、多能干细胞、胚胎干细胞、 单能干细胞、高度分化细胞”请按细胞表 现全能性程度由高到低排序：
• 3、“低等动物细胞、高等动物细胞、植物 细胞”请按细胞表现全能性程度由高到低 排序：
一、动物细胞全能性的表现程度
2、 受精卵> 胚胎干细胞 > 多能干细胞 > 如多能造血干细胞： 单能干细胞 > 高度分化细胞 可分化为红细胞、 白细胞、血小板等 3、
植物细胞 > 低等动物细胞 > 高度动物细胞
培育过程
去核卵细胞 体细胞核
细胞核移植
动物难以克隆的 根本原因？
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体
二、动物难以克隆的根本原因
在动物的个体发育过程中，分化的结果使 得细胞在形态和功能上高度特化，这是由于细 胞在伴随着它们发育过程中在时间、空间的变 化，基因表达的调控使得细胞中合成了专一的 蛋白质,使得基因组中基因的活动很不完全。
培育过程
去核卵细胞 体细胞核
细胞核移植
体细胞克隆动物成 功可以证明？
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体
体细胞克隆动物成功可以证明：
1、证明了高度分化的细胞也可以回复到类 似受精卵时期的功能。 2、证明了细胞质具有调控细胞核发育的作 用。
三、体细胞克隆猴成功的分子细胞生 物学机理
重组卵细胞最初分裂时虽复制了DNA,但基 因的转录并未开始； 重组移核细胞丢失了源于供体细胞的调节蛋 白； ，供体细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中 的蛋白因子替换了，因此核DNA表达程序被重 新编排，细胞开始表达自己的基因。
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多莉的培育用到了哪些技术? 核移植、动物细胞培养、胚胎移植
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊 乳腺细胞
多 莉 羊 的 培 育 过 程
卵细胞
细胞质
细胞核移植
细胞核
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎 C母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊 胚胎移植
三、核移植和动物的克隆繁殖
1、核移植：
利用一个细胞的细胞核（供体核）,来取代 另一细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子” （重组细胞），使发育成一个新的个体。
CO保温培养 2水平（5%），来对细 胞或组织进行体外培养 的一种装臵。
分装到多个卡氏瓶中 传代培养 细胞系 选择或纯化
细胞株
离体动物细胞的生长特性：
（1）贴壁生长： 悬浮液中分散的细胞紧贴培养瓶内壁才能生长。 （2）接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就 会停止分裂。 （3）正常的生命活动： 生长、分裂、有规律的衰老、死亡等现象，但不 分化。
五、克隆培养法（细胞克隆）
1、概念： 把一个单细胞从群体中分离出来单独培养， 使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。
异质性细胞系
克隆培养
纯系（克隆）
2、特点：
遗传性状均一、表现的性状相似，便于研究 3、最基本要求: 保证所建成的克隆来源于单个细胞
4、适合于克隆的细胞：
对环境有较大适应范围和具有较强独立生存能力的细胞
重组细胞 电脉冲处理 早期胚胎 b 另一头母绵羊子宫 妊娠、出生 克隆绵羊多莉
体细胞克隆羊成功的分子细胞生物学机理： 1、核移植前对乳腺细胞的营养限制性培养（调节 牛血清浓度）和电脉冲细胞融合技术，有利于核 的变化和细胞融合后基因表达分子开关启动。 2、重组卵细胞最初分裂时，转录并未开始。 3、重组卵细胞的供体核DNA丢失了来源于乳腺细 胞的阻止核基因表达的调节蛋白。 4、开始第三次分裂时，原乳腺细胞的调节蛋白全 部被卵细胞质中的蛋白因子替换了，核DNA被重新 编排，胚细胞开始表达自己的基因。
一、动物细胞、组织培养
1、什么方法取得离体的单个动物细胞？
机械消化或者胰酶消化（胰蛋白酶）
2、离体的动物细胞能否正常的生活、表现出正 常的生命活动？
能，在人工控制的培养条件下，生长、分裂乃至 接触抑制和衰老、死亡等，并呈现一定的组织特性。
3、是不是所有的动物细胞都能在离体的情况下表 现出生命活动？
动物器官培养：体外培养动物器官原基、部分
或整个器官，使之得以保存、生长。保持器官的 结构、功能及分化能力。
二、动物组织培养技术的发展
“组织培养”一词产生 1.1885年，鸡神经板在生理盐水中培养成活。 2.1903年，皮肤及白细胞在腹水及血清中存活一个月， 且观察到细胞分裂。 真正的组织培养开始； 3.1907年，蛙胚神经管在蛙淋巴液中悬浮培养，成功 创立了悬浮培养法 看到神经末端的阿米巴运动。 成功进行了传代培养； 4.1912年，鸡胚浸出液对鸡胚心脏组织块进行原代培养 发明了卡氏瓶； 和传代培养。 5.1943年，获得长期培养细胞系（可连续传代）和细胞 克隆。 标志着组织培养工作进入 6.1950年，人工培养液“199”研制成功 全新阶段 7.1951年，海拉细胞系的建成。
从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系。 用于研究细胞的遗传规律和生理特性。
一、动物细胞全能性的表现程度
受精卵 二分 裂球 四分 裂球 八分 裂球 桑椹胚 囊胚 原肠胚 组织、器官 幼体
1、动物的受精卵，卵裂球含有2-8个细胞时，每个 细胞具有全能性。 2、随着胚胎发育的继续，有的细胞只具有分化出各 种组织细胞的潜能，这样的细胞叫多能干细胞。
四、细胞系、细胞株
原代培养 传 代 培 养
原代培养物 细胞系：可连续传代的细胞
原代培养物在首次传代时就 成为细胞系。 能连续 培养的 不能连续 培养的
有限细胞系 （异倍体核型细胞）（二倍体细胞） （1）恶性细胞系，异体致瘤性 ………… （2）保留接触抑制，不致癌 （遗传物质改变，不死性）
连续细胞系
1、动物细胞全能性的特点？ 随着细胞分化程度的提高而全能性逐渐受到限制， 分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。
2、离体的植物细胞和组织可以通过组织培养技术克隆 成完整的植株，那么动物细胞和组织能否也进行同 样的克隆？ 不能，动物细胞的全能性受到限制，到现在为止 将离体的动物细胞直接克隆成个体还很困难，所以 动物细胞和组织不能进行与植物一样的个体克隆。
3、有的细胞只能分化为一种细胞，叫单能干细胞。
一、动物细胞全能性的表现程度
1、高等动物细胞
受精卵 > 胚胎干细胞 > 多能干细胞 > 单能干细胞 > 分化的 体细胞
2、低等动物细胞：全能性一般容易体现。 3、癌细胞：仍能逆转为正常细胞。
无论分化还是癌变，变化的都是表现型， 基因组成的完整性可以保留。 为什么动物细胞很难表现出全能性？
二、动物难以克隆的根本原因
基因的选择性表达（差异表达），使得细 胞中合成了专一的蛋白质，即动物细胞已经发 生了分化。 分化的细胞，其基因组中的基因不同时进 行活动。 管家基因：维持生存，各种细胞 中都处于活动状态 奢侈基因：随着组织器官和发育 阶段不同而选择性表达。
动物基因组
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动物体细胞难以实现克隆，那么如何 实现动物的克隆？ 多 莉 诞 生
三、动物细胞培养过程
（一）培养条件 1、含全部营养物质的培养液
成分：无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素和动物血清等
2、适宜的环境条件
无菌、无毒环境：加抗生素，定期更换培养液 适宜的温度和pH值：温度：36.5±0.5 ℃
pH值：7.2-7.4
适宜的气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）
适宜的渗透压等
5、某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性， 准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙) 进行动物细胞培养。下列说法正确的是 ( ) A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用 胃蛋白酶处理 B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的 作用是刺激细胞的呼吸
C
C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现
A．用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或 组织 B．将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成 单个细胞 C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离 ，制成悬浮液 D．动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部 衰老死亡
D
3、用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述 正确的是 C A．都需用CO2培养箱 B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 4、动物细胞克隆是指 A A．一个单细胞培养成一个新的细胞群的技术 B．一个重组细胞经分裂、分化发育成一个动物个体 的技术 C．几个同种动物的细胞培养成一个新的细胞群的技 术 D．一个卵裂球经胚胎分割发育成四个细胞群的技术
3、动物克隆成功的条件：
（1）具有包含本物种完整基因组的细胞核的活细胞 如：乳腺上皮细胞； （2）能有效调控细胞核发育的细胞质物质 如：去核卵的细胞质； （3）完成胚胎发育的必要的环境条件 如：诱导重组细胞生长、分化的实验条件和怀胎母 体的子宫环境
4、动物克隆的意义：
（1）有利于遗传疾病的治疗，优良品种的培育 （2）对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物 的扩群有重要意义
群体细胞> 单细胞 无限细胞系、转化或肿瘤细胞 >原代细胞、有限细胞系
5、提高细胞克隆形成率的措施：
•选择适宜的培养基 •添加血清 （胎牛血清） (能促进细胞的生长、增殖和贴附) •以滋养细胞支持生长（经射线照射的小鼠成纤维细胞） •激素刺激（胰岛素等） •使用CO2培养箱，调节PH
6、细胞克隆的主要用途：
体细胞克隆羊的培育成功，证明了什么？
高度分化细胞经一定技术处理，也可回复 到类似受精卵时期的功能。
在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细 胞核（包括异源的细胞核）发育的作用。 （核质互作）
体细胞核移植技术存在的问题： 许多克隆动物表现出遗传和生理缺 陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难， 脏器缺陷，免疫失调等。
⑴写出 ａ、ｂ所指的细胞工程 各称：ａ ｂ 。 ⑵实施细胞工程ａ时，所需的 受体细胞大多采用动物卵细胞 的原因是： 。 ⑶多莉面部的毛色是 判断依据： ， 。 黑面绵羊去 白面绵羊卵 核卵细胞 腺细胞核 a
Hale Waihona Puke ⑷继植物组织培养之后，克隆 绵羊培育成功，证明动物细胞 也具有 。 ⑸请举例说明克隆绵羊培育成 功的实际意义： 。
1、幼嫩细胞（如：动物胚胎或幼龄动物组织、器官） 2、含全部营养物质的液体培养基和适宜的环境条件。
动物细胞培养：体外培养分散后的单个细胞，
使其得以生存，并保持生命活动现象。像体内 一样呈现一定的组织特性。
组 动物组织培养：体外培养动物组织，使其维持 织 生活状态或生长特性。可以伴随组织分化，但最 培 终成为细胞培养。 养
去 核 注 核 重组细胞
2、动物克隆繁殖： • 胚胎细胞克隆：使用的供体核来自胚胎
1952年，罗伯特.布里格斯：
豹蛙→ 囊胚细胞核+去核的卵母细胞 → 发育成个体
• 体细胞克隆：使用的供体核来自体细胞
1978年，童第周： 黑斑蛙→成体红细胞核→去核的卵细胞中→发育成蝌蚪
胚胎细胞核移植成功率远高于成体细胞核移植。
（3）丰富人们的物质生活，降低畜牧业的成本，缩 短育种年限，提高生产效率
1、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因 是这样的组织细胞 （ ）
D
A、容易产生各种变异
B、具有更强的全能性
C、取材十分方便
D、分裂增殖的能力强
2、下列为有关动物细胞培养的叙述，其中不正确的是
（二）培养过程
（二）培养过程
从动物胚胎或幼龄动物组织 切片中取小片样品 机械消化或胰酶消化 （胰蛋白酶） 单个细胞悬浮液 转入特殊培养液 原代培养 原代培养物 选择或纯化 细胞株