DIC实验室诊断共35页文档

8．抗凝血酶活性（AT:A）检测
• [原理] 发色底物法
在待测血浆中加入过量的凝血酶， 凝血酶与血浆中的AT形成1：1的复合物， 剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显 色基因对硝基苯胺（PNA），显色程度 与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆 AT：A呈负相关。
• [材料] 缓冲液、凝血酶、发色底物、 标准血浆、终止液。
• [评价] 方法简便，灵敏度较高，费用低，为 早年临床诊断DIC常用的确诊试验之一；但由 于Fg含量过低易导致3P假阴性等因素，目前
弥散性血管内凝血（DIC）是一种 在多种较严重疾病基础上发生的临床综 合征。以弥散性毛细血管微血栓形成及 继发性纤维蛋白溶解亢进为主要病理变 化。广泛出血、微循环衰竭及多脏器功 能不全为临床特征。
DIC改变几乎涉及到临床每一个专科，严 重危及患者的生命。因此近数十年来国内外学 者对于本病患者的血管、血小板、凝血及纤溶 功能进行了广泛、深入的研究，并在本症的诊 断与防治方面取得了较大进展。目前有关DIC 诊断的实验室检测甚多，但存在不少问题，如 部分特异性强、敏感度高的实验其不能及时提 供为临床结果而且价格昂贵，反之则特异性、 敏感性较差。
浓度的已知因子Ⅷ含量的标准血浆混合后测定 APTT，绘制标准曲线；测定患者血浆同乏因子 基质血浆混合后的APTT，通过曲线查结果。
• [注意事项] 乏因子基质血浆活性<1％，其它因子正常；
所有标本检测前冰水浴；正常混合血浆>30人。
• [参考值] 79%-128%
• [临床意义] 血浆中凝血因子Ⅷ活性增 高，主要见于血栓前和血栓状态。
• [临床意义] AT水平降低：遗传性AT缺乏是一种常染
色体显性遗传性疾病，患者常在手术、创伤、
感染、妊娠或产后发生静脉通栓，并可在多处 反复发生血栓；获得性AT缺乏分为三个方面： AT合成降低（主要见于肝硬化、重症肝炎、肝 癌晚期）；AT丢失增加（见于肾病综合征）； AT消耗增加见于前血栓状态和血栓性疾病，如 心绞痛、心肌梗死、脑血管疾病、弥散性血管 内凝血、外科手术后等）。
• [材料] 10g/L硫酸鱼精蛋白、阳性对照 血浆、水浴等。
• [操作] 贫血小板0.5ml于试管中37℃水浴 3min；加硫酸鱼精蛋白溶液0.05ml混匀， 37℃15min，立即观察结果。
• [注意事项] 1.本试验需用枸橼酸钠抗凝，不能用草酸盐、
肝素或EDTA盐等做抗凝剂。 2.抽血不顺利、抗凝不完全、标本保存于冰
一、DIC常用检测方法(一）
1．血小板计数
3．APTT
2．PT 4．Fbg
5．D-D
DIC常用检测方法（二）
•6. TT • 7. Ⅷ：C 8. AT:A 9. 3P
6. 凝血酶时间（TT）测定 • [原理] 在血浆中加入“标准化”的凝血
酶溶液后，血浆凝固所需的时间。
[材料] 0.13mol/L枸橼酸钠溶液；凝血酶溶 液；正常血浆；水浴箱、秒表等。
箱、到时未立即观察结果等，均会导致假阴性 结果。
3.若水浴温度太低或纤维蛋白原的含量过低， 都会造成假阴性结果。
• [参考值] 正常人3P试验阴性。
• [临床意义] 阳性见于DIC的早期或中期；但 本试验假阳性常见于大出血（创伤、手术、咯 血、呕血）和样品置冰箱后测定等。阴性见于 正常人、DIC晚期和原发性纤溶症。如用连续 稀释硫酸鱼精蛋白副凝固试验（SDPST）， 其结果较3P试验敏感。
• [操作] 血浆0.1ml于试管中、37℃水浴， 加0.1ml “标准化”的凝血酶溶液，计 时。连续测定两次或三次取平均值。
• [注意事项] 稀释凝血酶溶液4℃可保存3 天；血浆室温下<3h；不宜EDTA和肝素 抗凝；终点判断：出现混浊的初期凝固 为准。
• [参考值] 16~18秒，受检者超过对照3 秒以上为异常。
减低多见于血友病患者，对于诊断 轻型血友病和血管性血友病以及判断血 友病携带者有一定的意义。因子Ⅷ:C水 平减低也是协助诊断肝病伴发DIC者的重 要诊断指标（因子Ⅷ：C活性<50%）。
• [评价] • 1. 急性期反应中可明显升高； • 2. 降低时需与VWF含量测定同时进行； • 3. 单纯APTT延长时检测。 • 4. 受检标本可用缓冲液另行稀释。
• AT水平增高：见于血友病A和血友病B、 口服抗凝药物、使用黄体酮类药等。
• [评价]
AT水平下降是高凝状态较好指标； 对疑难DIC具有诊断价值，急性白血病时 DIC的危险信号；抗凝治疗中可对肝素治 疗进行监测。
9． 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验）
• [原理] 在凝血酶作用下，纤维蛋白原释 出纤维蛋白肽A、B后，转变为纤维蛋白 单体（FM）；纤维蛋白在纤溶酶降解下 产生（FDP）。FM与FDP形成可溶性纤 维蛋白单体复合物（SPMC）。硫酸鱼精 蛋白可使该复合物中FM游离，然后又自 行聚合呈肉眼可见的纤维状、絮状，反映 FDP尤其碎片X的存在。
wenku.baidu.com
• [操作] 制备标准曲线：稀释标准血浆加 入酶标板；同时稀释待测血浆；加入过 量凝血酶；混匀，37℃湿盒30min；加 入发色底物，混匀3min后加终止液；酶 标仪测定数据。
• [注意事项] 不能用肝素抗凝；标本不能 反复冻融，检测前应快速解冻；每次检 测均需做标准曲线。
• [参考值] 108.5%±5.3％。
7． 血浆因子Ⅷ促凝活性检测
[原理] 在缺乏因子Ⅷ的血浆中，加入正 常血浆或病人的受检血浆，观察APTT的 结果值，依据实验室制定的标准曲线， 可以计算出病人受检血浆中凝血因子的 含量。
[材料] 乏因子Ⅷ基质、APTT试剂、缓 冲液、正常血浆、水浴箱、秒表等。
• [操作]（一期法） 将乏因子基质血浆与经过倍比稀释成不同
• [临床意义] TT延长多见于肝素增多或类 肝素抗凝物质存在，如系统性红斑狼疮、 肝病或肾病等；低（无）纤维蛋白原血 症，异常纤维蛋白原血症；FDP增多等。
• [评价] 过高、过低Fg可影响结果；过多 FDP和类肝素造成TT延长，可用鱼精蛋 白或蛇毒时间测定纠正及鉴别；TT可作 为临床尿激酶等溶栓及肝素等抗凝治疗 的监护指标。