高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)
高效液相色谱法测定鸡蛋、牛奶和猪肉中环丙 氨嗪及三聚氰胺的
高效液相色谱法测定鸡蛋、牛奶和猪肉中环丙氨嗪及三聚氰胺的实验研究魏瑞成，王 冉，刘伟荣(江苏省农科院 江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室，江苏 南京 210014)摘 要：本实验研究建立用NH 2柱和97%乙腈水溶液做流动相洗脱测定鸡蛋、猪肉和牛奶中环丙氨嗪和三聚氰胺残留量的高效液相色谱法，样品均质后经NaOH 和20%氨水乙腈溶液重复提取2次、浓缩、过C 18固相萃取小柱净化等处理后上机检测，环丙氨嗪和三聚氰胺得到了很好的分离，各自的保留时间分别是8min 和12min 。
标准曲线在0.01～1.0μg /ml 浓度范围内呈线性相关，环丙氨嗪、三聚氰胺标准曲线的相关系数(r)分别为0.9999、0.9994。
检测限为0.02mg/kg ，定量限低于0.05mg/kg 。
关键词：环丙氨嗪；三聚氰胺；残留；高效液相色谱法Study on Analytical Method of Cyromazine and Melamine Residues in Egg, Milk and Pork with HPLCWEI Rui-cheng ，WANG Ran ，LIU Wei-rong(Key Laboratory of Animal-derived Food Safety of Jiangsu Province, Jiangsu Academy ofAgricultural Science, Nanjing 210014, China)Abstract ：A high-performance liquid chromatography (HPLC) with NH 2 column and 97% acetonitrile-water as mobile phase to determine the cyromazine and melamine residues in egg, milk and pork was described in this paper. Samples were treated with NaOH, extracted with acetonitrile containing 20% NH 4OH, and cleaned up by using C 18 column solid-phase extraction (SPE).A perfect separation for cyromazine and melamine was achieved with their respective retention time 8 and 12 min. The calibration curves for cyromazine and melamine are linear in the concentration range of 0.01 to 1.0 μg/ml, with the correlation coefficients of 0.9999 and 0.9994, respectively. The detection limits of both the compounds is 0.02 mg/kg and the quantification limit is less than 0.05 mg/kg.Key words ：cyromazine ；melamine ；residues ；high-performance liquid chromatography中图分类号：O657.72 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2008)12-0605-05收稿日期：2007-10-10基金项目：江苏省科技厅攻关项目(BM2003306)作者简介：魏瑞成(1979-)，男，硕士，主要从事畜产品安全性评价研究。
液相色谱-串联质谱法检测禽蛋类产品中26种类固醇激素的含量
液相色谱-串联质谱法检测禽蛋类产品中26种类固醇激素的含量李新一【摘要】本实验采用高效液相色谱-电喷雾质谱法对禽蛋类产品中的26种类固醇激素进行了测定。
实验过程包括乙腈提取、ZnCl2去除磷脂、PLEXA固相萃取柱净化等。
柱后注射法观察ZnCl2去除磷脂效果，并对固相萃取条件进行了优化。
实验结果表明，应用酶水解法测定游离或结合态的类固醇激素精确性好（RSD≤15%），本方法的定量限为0.05~25 ng/g，平均回收率为63.2%~121.5%。
该法可用于检测不同种类（鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋、鸽子蛋）与不同养殖方式（普通鸡蛋、有机鸡蛋）的蛋类产品，具有灵敏度高，实用性强等特点。
此外，此法也可进行类固醇激素残留检测，为食品安全风险评估提供参考依据。
%A means employed liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) in electrospray ionization mode(ESI)for analyzing 26 steroids in egg was constructed.The step included extraction with acetonitrile and re-moval of phospholipids by zinc chloride(ZnCl2) before SPE cleanup with a Plexa cartridge.The effect of ZnCl2 on phospho-lipid removal was directly observed using the post column infusion and SPE washing and elution conditions were optimized using a shallow gradient procedure.The results indicated that enzyme hydrolysis was used to determine free and conjugated steroids and satisfactory precision (RSD≤15%) was aquired, th e limits of quantification were between 0.05 and 25 ng/g depending on steroid types,the recoveries ranged from63.2%to 121.5%and this method was effectively employed to com-pare thesteroids in eggs belonging to different species (i.e., hen,duck,quail and pigeon eggs) or different raising system (i.e., normal anic eggs).The developed method is sensitive and useful for detection and quantification of steroids in eggs and can be used for residue controlprograms.Furthermore,the acquired steroid content will provide a reference for food risk assessment analysis.【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2015(000)013【总页数】9页(P29-37)【关键词】类固醇激素;蛋类产品;液相色谱-串联质谱;主成分分析【作者】李新一【作者单位】全国畜牧总站中国饲料工业协会，北京朝阳 100125【正文语种】中文【中图分类】S816.17类固醇激素在动物的生长发育、成熟和衰老的各阶段发挥着重要的作用，其作用机制是在体内充当化学信使，通过与雄激素、雌激素、皮质激素的受体结合，激发信号转导，从而发挥相应的作用。
鸡蛋中提取胆固醇
试剂和溶液：除另有规定外，使用分析纯试剂，水为GB/T6682推荐使用的一级水甲醇：色谱纯无水乙醇石油醚：沸程30-60℃无水乙醚无水硫酸钠氢氧化钾60%氢氧化钾溶液：60克氢氧化钾，加水40ML 混合溶解胆固醇：纯度≥99%标准贮备液：胆固醇标准品0.05g(精确至0.1mg)，用无水乙醇溶解定容至50mL，溶解每毫升相当于1mg胆固醇，放置4℃密封可贮藏半年标准工作溶液：分别吸取标准贮备液1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml，用无水乙醇定容至10ml，配置相当于0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.5mg/ml浓度标准溶液仪器和设备：高效液相色谱仪，具有紫外检测器或相当的检测器分析天平，感量0.1mg色谱柱，C18反相色谱柱（4.6mm*150mm,5um）分析步骤1.样品处理1.1皂化称取粉碎均匀的样品0.25-10g（胆固醇含量约为0.5mg-5mg,精确至0.1mg)，于250ml平底烧瓶中，加入30ml无水乙醇，10ml60%氢氧化钾溶液（4.7），混匀，将试样在100℃磁力搅拌加热套皂化回流1h，不时震荡防止试样粘附在瓶壁上，皂化结束，用5毫升无水乙醇（4.2）自冷凝管顶端冲洗其内部，取下圆底烧瓶，冷却至室温1.2提取定量转移全部皂化液于250ml分液漏斗中，用30ml水分2-3次冲洗圆底烧瓶，洗液并入分液漏斗，再用40ml石油醚和乙醚混合液(1+1,体积比）分2-3次冲洗平底烧瓶并入分液漏斗，振摇2min，静置，分层，转移水相于第二个分液漏斗，再用30ml石油醚和乙醚混合液（1+1，体积比）重复提取两次，弃去水相，合并三次有机相，用蒸馏水每次100ml，洗涤提取液至中性，初次水洗时轻轻振摇，防止乳化，提取液通过约10g无水硫酸钠（4.5）脱水，转移到150ml平底烧瓶中1.3浓缩将上述平底烧瓶中的提取液在真空条件下蒸发至近干，用无水乙醇溶解定容至5ml，溶液通过0.45um过滤膜过滤，收集清液于进样瓶中，待色谱仪测定2.测定2.1色谱参考条件色谱柱：C18反相色谱住柱温：38℃流动相：甲醇流速：1ml/min测定波长：205nm进样量：10ul标准曲线检测分别取10ul标准工作液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰面积），以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，检测标准曲线2.3样品中胆固醇的测定取10ul样液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值（峰面积），由标准曲线上差得样液中胆固醇的含量，或利用回归方程式计算样液中胆固醇含量3.结果计算样品中胆固醇的含量（x）以毫克每百克（mg/100g)表示，按下式计算：x=（c×V）÷m×100式中：x-----样品中胆固醇的含量，单位为毫克每百克（mg/100g)c-----样液中胆固醇的含量，单位为毫克每毫升（mg/ml)V-----容体积，单位为毫升（ml)m----样品质量，单位为克（g)平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。
高效液相色谱法测定鸭蛋蛋黄粉中胆固醇含量【开题报告】
毕业设计开题报告应用化学高效液相色谱法测定鸭蛋蛋黄粉中胆固醇含量一、选题的背景和意义随着人民生活水平的提高，作为一种可能危害人体健康的食品组分—胆固醇已逐渐成为国内外食品医学界辩论的热门话题。
胆固醇—学名：5-胆烯-3-β-醇。
在类固醇核的C-3上连接一羟基，而在C-17位上接有一条八碳或更多碳原子的脂族侧链。
是由乙酰辅酶A通过异戊二烯单位的缩合反应而合成,可作为胆酸和类固醇激素的前体。
动物组织中含有大量胆固醇，又以肾上腺、神经组织与胆汁最为富集。
血浆中胆固醇水平过高，是引起动脉粥样硬化的危险因子。
胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。
其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶剂。
胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料。
胆固醇一般分为两类：低密度脂蛋白胆固醇(简称LDL-C)，能对动脉造成损害；而高密度脂蛋白胆固醇（简称HDL-C），则具有清洁疏通动脉的功能。
目前, 对食品中胆固醇的测定方法主要包括: 比色法、气相色谱法、高效液相色谱法及其它方法。
由于胆固醇不溶于水, 在食物中又常伴有共存脂质, 因而对其测定非常复杂。
在所报道的这些方法中, 样品的处理不可避免地要经过皂化-萃取步骤, 并以多步溶剂萃取进行纯化和浓缩。
尤其是样品的皂化过程, 往往是造成测量误差和操作不便的最主要的原因。
本项工作旨在建立一种测定蛋黄胆固醇的相对简单的高效液相色谱分析方法。
二、研究目标与主要内容（含论文提纲）本实验选择高效液相色谱分析法。
与其他测定方法相比，此法操作高效、高灵敏度、分析速度快,可广泛用于胆固醇含量的测定。
三、拟采取的研究方法、研究手段及技术路线、实验方案等本实验采用液相色谱法对鸭蛋蛋黄中胆固醇的含量进行测定，主要涉及实验所需溶液的制备，实验步骤，数据处理三个方面的问题。
实验方案：1.仪器（1）高效液相色谱系统（2）流动相：乙腈-异丙醇（4∶1, V/ V）2.试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，均为蒸馏水。
胆固醇含量测定方法的研究进展_葛军营_宋从从_郑颖
［３］ 曹 劲 松 ． 两 种 测 定 鸡 蛋 胆 固 醇 方 法 的 比 较 ［Ｊ］． 食 品 科 学 ， １９９６，１７（９）：４８－５１．
［４］ 张佳程，骆承痒．直接皂化—比色法测定食品中胆固醇的研 究［Ｊ］．食品与发酵工业，２０００，２６（３）：３５－３８．
［８］ 万 莉，赵常志，徐华筠，等．基于蛋白质直接电子转移的全 胆固醇传感器［Ｊ］．高等学校化学学报，２００９，３０ （４）：６７０－６７４．
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Research progress of detemrination methods of cholesterol
ＧＥ Ｊｕｎｙｉｎｇ， ＳＯＮＧ Ｃｏｎｇｃｏｎｇ，ＺＨＥＮＧ Ｙｉｎｇ
( College of Applied Chemistry and Bioengineering, Weifang Engineering Vocational College, Qingzhou 262500,China ) Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｉｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ａｎｉｍａｌｓ． Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｔｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｓ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎｃｌｕｄｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ， ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ， ｅｎｚｙｍｅ ｍｅｔｈｏｄ， ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄ， ｅｔｃ．． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｏｏｄｓ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ｗｉｔｈ Ｒａｍａｎ Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ ａｎｄ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｓｅｎｓｏｒ ｗａｓ ｒｅｐｏｒｔｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｉｔ ｉｓ ｐｏｉｎｔｅｄ ｏｕｔ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ； ｄｅｔｅｍｒｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ； ｆｏｏｄ； ｓｅｒｕｍ
鸡蛋胆固醇含量测定方法比较研究
鸡蛋胆固醇含量测定方法比较研究吴超;李润航;于中英;娄玉杰【摘要】试验随机选取了中华绿蛋鸡产的绿壳蛋和依莎褐蛋鸡产的褐壳鸡蛋各20枚,采用邻苯二甲醛分光光度计比色法和气相色谱法,测定鸡蛋中胆固醇的含量,比较两种方法在测定鸡蛋胆固醇含量上的差异.结果表明,用邻苯二甲醛比色法测得褐壳蛋蛋黄胆固醇含量176.79 mg/枚,浓度为13.35mg/g.用气相色谱法测得胆固醇含量142.74 mg/枚,浓度为9.69mg/g,二种方法测定的结果差异显著(P＜0.05).用邻苯二甲醛比色法测得绿壳蛋蛋黄胆固醇含量158.12mg/枚,浓度为10.65 mg/g.用气相色谱法测得胆固醇含量128.70 mg/枚,浓度为8.54 mg/g,二种方法测定的结果差异显著(P＜0.05).【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2013(034)011【总页数】4页(P57-60)【关键词】胆固醇;比色法;气相色谱;鸡蛋【作者】吴超;李润航;于中英;娄玉杰【作者单位】吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118【正文语种】中文【中图分类】S811.6在人们健康意识不断增强的今天，胆固醇往往片面的被认为是对人体有害的物质，但实际上，胆固醇是动物细胞各种膜结构及神经髓鞘的重要组成部分，可调节肠胃消化道中膳食脂肪的吸收，是胆汁酸、类固醇激素及维生素D3的前体，具有重要的生理功能[7]，但如果摄入量过多，可形成高血脂症，引起动脉粥样硬化，进而诱发冠心病、高血压等一系列心脑血管疾病[1-4]。
研究表明，来源于鸡蛋中的胆固醇与来源于其他原料的胆固醇相比更易导致人体血清胆固醇水平的提高[5-6]。
鸡蛋中的胆固醇总量在100～270 mg范围内变动[7]，为满足不同人群的需要，低胆固醇鸡蛋备受人们的关注，因而鸡蛋中胆固醇含量测定的方法及准确性是评定其营养价值的重要参数。
HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量
HPLC-ELSD测定鸡蛋中胆固醇的含量王术玲;郑夏生;黄敏娜;黄孟秋;冯燕兰;梁亮【摘要】应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)对不同种类鸡蛋中胆固醇的含量进行测定.采用C18色谱柱为固定相,以甲醇为流动相,流速为1 mL·min-1,柱温为25℃;蒸发光散射检测器的氮气流速为2 L·min-1,漂移管温度为85℃.结果表明,胆固醇进样量在4.008～40.080 μg范围内,其对数与峰面积的对数呈良好的线性关系,相关系数R=0.9991,低、中、高三个浓度回收率为95.4%～99.1%.该方法操作简便、快速,精密度好,结果准确可靠.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2009(026)003【总页数】3页(P76-78)【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测器;鸡蛋;胆固醇;含量测定【作者】王术玲;郑夏生;黄敏娜;黄孟秋;冯燕兰;梁亮【作者单位】广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006;广州中医药大学,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】O657.72胆固醇是环戊烷骈多氢菲的衍生物，亦称“胆甾醇”，是动物体内维持正常生理活动所必需的最重要的固醇，通常以游离状态或酯化状态存在于动物组织中[1]。
但是人体内过多的胆固醇将引起高血脂，进而引发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等一系列心血管疾病[2]，因此控制饮食中胆固醇摄入量非常必要。
鸡蛋中含有大量的胆固醇，是人体摄入胆固醇的重要途径。
对于鸡蛋中胆固醇含量的测定，文献报道多以在208 nm波长处紫外检测为主，对流动相的要求高，且样品中高紫外吸收物质的干扰大，易造成基线不稳，如果梯度洗脱则会引起基线漂移，使得胆固醇定量难度较大[3]。
测定鸡蛋胆固醇的高效液相色谱新方法
准确称取胆固醇
又常伴有共存脂质 因而对其测定非常复杂 ∀在所报 道的这些方法中 样品的处理不可避免地要经过皂 化 萃取步骤 并以多步溶剂萃取进行纯化和浓缩 ∀ 尤其是样品的皂化过程 往往是造成测量误差和操 作不便的最主要的原因 ∀ 本项工作旨在建立一种测定蛋黄胆固醇的相对 简单的高效液相色谱分析方法 ∀蛋黄以水稀释后 无 须皂化直接以乙醚和石油醚抽提 有机相抽空干燥 至
∀ 且测定方法更为简便 快速 并具有良好
的重现性 ∀ 该方法能有效地用于蛋黄中胆固醇的分 离和测定 对大批样品的测定效果尤其显著 ∀
参
考
文献 源自色 谱
卷
Αν Ι
ροϖεδ Μ ετηοδ οφ Χηολ εστερολ ∆ ετερ ινατιον ιν Ε γ γ Ψολ κ βψ Η ιγ η Περφορ ανχε Λιθυιδ Χηρο ατογ ρα ηψ
ε
谱
卷
而这些小峰在经皂化后萃取的样品色谱图 图 于 中几乎消失 ∀ 显然 在所选择的色谱条件下 包括脂 肪在内的其它组分能与胆固醇有效的分离 ∀ 由此可 见 采用反相高效液相色谱法测定蛋黄胆固醇含量 时可以有效地避免脂肪等其它组分的干扰 ∀ 我们的 实验也表明 采用不同前处理方法的同一样品 色谱 分离后胆固醇的峰高基本一致 ∀ 这表明皂化与否不 会对样品中胆固醇的测定带来影响 ∀很显然 在鸡蛋 蛋黄胆固醇的测定中 我们所采用的色谱条件可直 于 接用于不经皂化处理的样品的测定 并得到胆固醇 含量的可靠结果 ∀ 乙醇和
表
为皂化后萃取样品的
方法和比色法 方法直接萃取样品 胆固醇 Ù 个 蛋 法两种
高效液相色谱法测定鸡蛋中的脑磷脂和卵磷脂
高效液相色谱法测定鸡蛋中的脑磷脂和卵磷脂王雅蕾;黄建国;马春建【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2010(000)003【摘要】目的:建立鸡蛋中脑磷脂和卵磷脂的高效液相色谱测定方法.方法: 取冻干鸡蛋粉30mg,加入5mL甲醇,超声波震荡20min后离心取上清液进样检测.色谱条件为:色谱柱Zorbax SIL硅胶柱(4.6mm×250mm),流动相为甲醇:1%磷酸(50:1,V/V),流速0.5mL/min,柱温20℃,紫外检测器波长为205nm,进样量5μL.结果:脑磷脂在529.2～5292ng/μL浓度范围内呈线性关系(R2=0.9999),卵磷脂在4455～44550ng/μL浓度范围内呈线性关系(R2=0.9997),脑磷脂和卵磷脂的平均回收率分别为97.54%和96.42%.结论: 应用本方法能快速准确同时测定鸡蛋中脑磷脂和卵磷脂的含量,样品前处理简单易行.【总页数】4页(P34-37)【作者】王雅蕾;黄建国;马春建【作者单位】北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097;北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱法测定奶粉中卵磷脂的质量分数 [J], 王飞;农云军;苏流坤;窦文渊;石燕丽2.高效液相色谱法测定胡麻卵磷脂中磷脂酰肌醇含量 [J], 吕旭;关明;古再丽努尔·阿尔肯3.梅花鹿血液中卵磷脂含量的高效液相色谱法测定研究 [J], 张启迪;崔丽春;唐超;田长永;马泽方4.高效液相色谱-蒸发光检测器法测定鸡蛋中卵磷脂的含量 [J], 孔凡华;王轩;于连洋;白沙沙;徐佳佳;杨春雪;李东;崔亚娟5.高效液相色谱法测定大豆中卵磷脂的含量 [J], 张德权;陈卫涛;张柏林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应
2021，30（1）福建分析测试Fujian Analysis &Testing超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应黄碧慧（厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门361004）收稿日期：2020-9-3作者简介：黄碧慧（1984—），女，工程师，从事食品检验工作，Email ：****************摘要：研究了超高效液相色谱-串联质谱测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应。
比较了鸡蛋中7种喹诺酮类药物经固相萃取柱净化法、正己烷除油法和未净化法3种前处理方法在高效液相色谱-串联质谱检测模式下基质效应的差异，结果表明固相萃取柱净化法方法优于其他两种，在此基础上进一步研究了不同称样量和目标化合物不同进样浓度的基质效应评价。
结果表明随着称样量的增加，化合物的基质效应也越来越高；随着检测质量浓度的增大，目标化合物受基质效应的影响逐渐减小。
因此在设计喹诺酮检测实验步骤时，首先应在保证方法灵敏度的前提下尽可能的减少称样量，其次可以采用固相萃取柱法作为净化步骤，能有效去除基质中大部分杂质，最后如果有合适的同位素内标物或者与化合物性质相似的物质，也可以用内标校正法来降低目标化合物的基质效应。
关键词：鸡蛋；基质效应；喹诺酮类药物；超高效液相色谱-串联质谱法中图分类号：TS207.3+O657.72文献标识码：A文章编号：1009-8143（2021）01-0001-06Doi:10.3969/j.issn.1009-8143.2021.01.01Matrix Effects in the analysis of seven Quinolones Residues in Eggs by UPLC-MS/MSHuang Bi-hui（Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control ，Xiamen ，Fujian 361004，China ）Abstract:The matrix effect of seven quinolones in eggs was studied by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS ）.In this paper ，the matrix effects differences of seven quinolones in eggs were compared by three purification methods ：solid phase extraction （SPE ）purification method ，n-hexane degreasing and unpurified meth⁃od.The results showed that the solid phase extraction （SPE ）purification method was superior to the other two methods.On this basis ，the matrix effect evaluation of different sample weighting and different injection concentration of the target com⁃pound was further studied.It was found that the matrix effect of the compounds increased with the increase of the sample weighting ，and the influence of matrix effect on the target compounds decreased gradually with the increase of the detection concentration.Therefore ，when designing the experimental procedure of quinolones ，the author should first reduce the sam⁃ple weighting as much as possible on the premise of ensuring the sensitivity of the method ，and then take solid phase extrac⁃tion （SPE ）as the effectively purification step.Finally ，if the appropriate isotope internal standard or the substance with sim⁃ilar properties can obtain ，we can reduce the matrix effect of the target compound by internal standard method.Key words ：eggs ；matrix effects ；quinolone ；ultra performance liquid chromatography-mass /mass spectrometry （UPLC-MS /MS ）前言喹诺酮类抗生素是一类重要的合成广谱抗生素，这类抗生素在动物体内的残留可能给消费者带来的危害是，引起人体过敏反应或诱发病原体对抗生素的耐药性[1-2]。
高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)
高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)【关键词】色谱近年来，随着人们生活水平的不断提高，人们对膳食组成中胆固醇的含量越来越引起重视。
胆固醇可在胆道中沉积形成胆石，在血管中的沉积是动脉粥样硬化的重要原因之一。
鉴于胆固醇对人体的影响，人们不断地采取各种各样的措施来减少食物中的胆固醇含量，这就要求分析工作者建立一种快速、简便而又重现性好的测定胆固醇的方法。
鸡蛋是自然界中营养最为丰富的食品之一，但是蛋黄中的高胆固醇也引起人们的高度关注。
目前胆固醇的测定一般都要求萃取总脂质、移去溶剂、在碱性介质中热皂化、萃取出非皂化物质、洗涤及浓缩等〔1，2〕，这些步骤费时、费力又费材料，并因其繁琐的操作预处理，大大增加了实验结果的可变性，本文采用 2.0mol/L的KOH-乙醇溶液直接皂化，石油醚萃取，以乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10）作流动相、C18反相色谱柱分离，UV208nm检测，高效液相色谱法测定，简化了操作步骤，降低了操作强度，减少了试剂使用，并且大大节约了分析时间，整个分析过程仅需1.5h。
本方法用于实际样品的测定，结果满意。
1材料与方法1.1仪器与试剂Agilent1100高效液相色谱仪，紫外检测器G1314A，Agilent1100化学工作站，甲醇、乙腈、异丙醇（均为HPLC级），胆固醇（进口分装），石油醚（重蒸馏，30℃～60℃），无水乙醇、氢氧化钾、氯化钠（均为AR）。
胆固醇标准溶液（1.0mg/ml）:准确称取胆固醇100mg于100ml容量瓶中，用少量甲醇溶解后，用甲醇稀至刻度。
1.2色谱条件分析柱为μBondapakC18TM（30cm×3.9mm），流动相为乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10），流速为1.0ml/min，柱温为30℃，紫外检测波长208nm。
1.3样品处理及测定准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于50ml具塞比色管中，加入2.0mol/L 的KOH-乙醇液5.0ml，振荡混匀，置65℃水浴中皂化30min（每隔5min振摇1次）后取出，经流水冷却，加入饱和氯化钠溶液2.0ml后再加入石油醚20.0ml，旋涡混匀后离心分离，吸取上清液10.0ml于10ml刻度比色管中，通氮气吹干，再用1.0ml甲醇溶解残渣，过0.45μm 滤膜后，吸取10.0μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，外标法定量。
高效液相色谱-质谱联用法测定鸡蛋中三甲胺含量的方法研究
Abstract: The aim of this study was to establish a quantitative method for the determination of trimethylamine
contents in eggs by high performance liquid chromatography-mass spectrometry. The 5% trichloroacetic acid aqueous
作为评价鸡蛋品质的重要理化指标。
6 000 r·min-1 高速离心 10 min，采用胶头滴管转移
蛋，属于高频摄入的食物之一，三甲胺测定值可以
现有检测三甲胺的方法主要有分光光度法 [ 7 ]、
[8]
气相色谱法 、顶空-气相色谱法
[2]
[9-10]
、气相色谱-
[11]
[7]
质谱法 、顶空气相色谱-质谱法 、凯氏定氮法 、
多反应监控（MRM）；离子模式：正离子模式；去
簇电压 50 V；射入电压 10 V；子离子 44.00 的碰撞
加被检测物（三甲胺）的本底值。新鲜鸡蛋样品，
标试验，通过 2.1 选取的标准工作曲线定量其本底
平均值 C0 为 1.82 ng·mL-1。
鸡蛋样品中分别加标 0.3、0.75 和 1.5 mL 体积
量未有明确规定，但已经有三甲基胺尿症（臭鱼症）
患者出现，他们无法代谢体内过多的三甲胺。据国
内外相关研究报道，三甲胺在肠道中可被进一步氧
化形成氧化三甲胺，进而成为诱导动脉粥样硬化等
人类心血管疾病发生的协同因子
[4-6]
，食用存在一
定的安全风险。三甲胺主要来源于牛奶、鸡蛋、鱼
绿壳蛋和乌鸡蛋胆固醇含量的测定
绿壳蛋和乌鸡蛋胆固醇含量的测定杨朋坤;卢冉;田亚东;韩瑞丽;耿娟;高素敏;康相涛【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2011(32)2【摘要】The high performance liquid chromatography (HPLC) was used to determine the cholesterol content of eggs in Lushi green-shell layers and Silky Fowl after the HPLC and colorimetric method were compared.The results showed that the cholesterol concentration and content of colorimetric determination were significantly higher than that of HPLC determination.The cholesterol concentrate of eggs of Lushi green-shell layer was 7.75 mg/g and that of eggs of Silky Fowl was 8.99mg/g.There was significant difference in the cholesterol concentration of eggs between Lushi green-shell layer and Silky Fowl (P＜0.05).The cholesterol content of eggs of Lushi green-shell layer and Silky Fowl was 111.21 mg/egg and 116.80 mg/egg,respectively.No significant difference was found when the cholesterol content of eggs of Lushi green-shell layer and Silky Fowl were compared (P＞0.05).%为了研究绿壳蛋和乌鸡蛋的胆固醇含量,试验对比色法和高效液相色谱法进行比较后,选用高效液相色谱法对卢氏绿壳蛋鸡,丝羽乌骨鸡两个品种的鸡蛋胆固醇含量进行测定.试验结果表明:比色法的测定结果显著高于高效液相色谱法的测定结果(P<0.05);绿壳蛋和乌鸡蛋的胆固醇浓度分别为7.75 mg/g和8.99 mg/g,绿壳蛋胆固醇浓度显著低于乌鸡蛋胆固醇浓度(P<0.05);绿壳蛋和乌鸡蛋的胆固醇含量分别为111.21 mg/枚和116.80 mg/枚,两者之间差异不显著(P>0.05).【总页数】4页(P75-78)【作者】杨朋坤;卢冉;田亚东;韩瑞丽;耿娟;高素敏;康相涛【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南省家禽种质资源创新工程研究中心,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南省家禽种质资源创新工程研究中心,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;新乡市畜产品质量监测检验中心,河南新乡,453003;河南省家禽种质资源创新工程研究中心,河南郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S811.5【相关文献】1.鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋中胆固醇含量的比较 [J], 黄德仙;李江滨;陈海文;何月玲;徐锦滨;陈佛兰2.万寿菊提取物对苏禽青壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质和蛋黄胆固醇含量的影响 [J], 卢建;王克华;曲亮;窦套存;童海兵;李尚民3.饲粮中不同水平芝麻油对苏禽青壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质、血清脂质指标和蛋黄胆固醇含量的影响 [J], 卢建;王克华;曲亮;窦套存;童海兵;李尚民4.东乡绿壳鸡蛋中磷脂含量的比色法测定与分析 [J], 李瑞丽;李伟红;卢峰5.乳酵素对蛋鸡产蛋性能及鸡蛋中胆固醇含量的影响 [J], 孔凡勇;邱琼凤;赵锡安;周艳华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡蛋中胆固醇
目录摘要 (1)前言 (2)1实验器材 (2)1.1实验材料 (2)1.2主要仪器设备与试剂 (2)2实验方法 (3)2.1色谱条件 (3)2.2标准溶液的配置 (3)2.3样品的预处理 (3)2.4进样后的分离 (3)3结果与讨论 (4)3.1流动相的选择 (4)3.2波长的选择 (4)3.3样品皂化液的选择 (4)3.4样品萃取的选择 (4)3.5标准回归方程 (4)3.6精密度实验 (5)3.7准确度实验 (6)3.8对结果的讨论 (7)4鸡蛋的营养价值的研究 (7)4.1鸡蛋—全面天然的营养品 (7)4.2卵磷脂—胆固醇的重要抑制剂 (10)4.3高密度脂蛋白—防止动脉硬化的好胆固醇 (11)4.4维生素—血管的扩张和抗凝血剂 (12)4.5微量元素—代谢调控的总调度师 (14)参考文献 (15)致谢 (16)摘要柱（4.6mm×150mm，5µm）为固定相，以甲醇为流本文采用高效液相色谱法，以C18动相，流速为1.0mL/min；检测波长205nm，测定鸡蛋蛋黄中胆固醇的含量，检测结果表示鸡蛋蛋黄的胆固醇含量为1107mg/100g，表明鸡蛋蛋黄中胆固醇含量较高。
现在的社会一般讲究低胆固醇的食物，这也许会使人们对鸡蛋含有高胆固醇造成偏见而不愿去食用鸡蛋，通过营养学对鸡蛋营养的研究让人们更好的认识鸡蛋的营养价值。
关键词胆固醇高效液相色谱法蛋黄营养营养价值AbstractIn this paper, high performance liquid chromatography with C18 column (4.6mm ×150mm, 5μm) as the stationary p hase with methanol as the mobile phase, flow rate 1.0mL/min; detection wavelength of 205nm, determination of cholesterol in egg yolk, test results that egg yolk cholesterol content 1107mg/100g, showed a higher cholesterol content in egg yolk. Now the general attention to low cholesterol food, which may make people with high cholesterol on the eggs do not want to cause prejudice to eat eggs on egg nutrition through nutrition research give a better understanding of the nutritional value of eggs.Key words cholesterol high performance liquid chromatography egg yolk nutrition nutritional value前言胆固醇又称胆甾醇，一种环戊烷多氢菲的衍生物。
蛋黄的测定 文档
蛋黄中胆固醇含量测定方法的研究胆固醇含量的分析方法有酶法、比色法、液相色谱法、气相色谱法、液相色谱-质谱联用法等试剂盒法是基于酶法测定胆固醇的原理进行的比色法一种依据显色反应来分析的传统方法色谱法是适用范围较广、灵敏度较高的分析方法而高效液相色谱不需要载气在使用上较气相色谱和液相色谱-质谱联用的方法简便[ 6-11 ]。
本试验对液相色谱法、皂化-比色法和试剂盒法测定蛋黄胆固醇的过程和结果进行研究和比较为鸡蛋胆固醇含量测定工作提供方法指导。
1材料与方法1.1试验材料蛋黄由市售新鲜鸡蛋中取出胆固醇标准品纯度≥99.7%由中国计量科学研究院提供总胆固醇试剂盒酶法由北京北化康泰临床试剂有限公司提供显色液为FeSO4-冰乙酸-浓硫酸 将Fe⁃SO4100 mg溶于1mL蒸馏水中 再加入100 mL冰乙酸混合溶解 然后与100 mL浓硫酸缓慢混匀冷却后使用。
1.2试验方法1.2.1 HPLC法取新鲜蛋黄稀释液浓度为0.1 g·mL-1 1.0 mL于10 mL离心管中加入95%乙醇1.0 mL用漩涡振荡器混匀后加入乙醚2.5 mL再次混匀后加入石油醚2.5 mL震荡混匀3 000 rpm离心5 min移出上层萃取液在低于45℃下用氮气吹干加无水乙醇溶解残余物2.0 mL用0.45μm有机微孔滤膜过滤后进样。
色谱条件为色谱柱ZORBAXEclipse XDB-C184.6 mm×150 mm5μm流动相乙腈-异丙醇(4:1)V/V流速0.8 mL·min-1柱温35℃检测波210 nm 进样量10μL。
取胆固醇标准品用色谱级无水乙醇溶解配成浓度为1 mg·mL-1的标准液取标准液稀释成不同浓度0~1 000μg·mL-1以胆固醇浓度为横坐标峰面积值为纵坐标制作标准曲线。
采用外标法定量分析样品中胆固醇含量。
1.2.2皂化比色法称取鲜蛋黄100 mg于25 mL试管中加入KOH-甲醇溶液5 mL200 g·L-1漩涡震荡混匀置于80℃水浴恒温振荡器中皂化10 min取出冷却至室温加入正己烷10 mL漩涡震荡混匀静置将上层液体移入10 mL离心管中3 000 rpm离心10 min 取出上清液60℃下用氮气吹干。
高效液相色谱法在酚类化合物和胆固醇分析中的应用研究
高效液相色谱法在酚类化合物和胆固醇分析中的应用研究高效液相色谱法是非常常见的一种针对分离和分析的技术，它与传统的分离与分析技术相比，主要使用的是高压泵等设备，因为这种分离技术能够将指定的物质分离，而且在对其进行分析时，效率特别高，这也是它能够得到广泛使用的主要原因。
本文主要通过对这种技术的应用和发展状况的分析，进而探讨了这种技术在酚类化合物和胆固醇中的具体应用，仅此提供借鉴。
标签：高效液相色谱法酚类化合物胆固醇应用研究在所有色谱技术中，液相色谱法是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。
到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。
特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化。
从此，这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法，也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。
高效液相色谱法在我国的很多领域都得到了广泛的使用，比如化工、食品、农业、石油、医药行业等。
这种技术随着时代和科技的发展，在几乎所有学科领域中广泛应用，大大提高了分离和分析技术水平。
因为高效液相色谱法操作相对简单，原理也不复杂，最为重要的一点是，在某些行业应用这种技术能够起到环保的效果，在此，就高效液相色法在酚类化合物和胆固醇分析中的相关问题进行研究。
一高效液相色谱法简单原理及其发展现状1、简单原理高效液相色谱法开始逐渐引起人们的关注是在上世纪七十年代，它与传统分离技术相比，有很多的优势，可以说是一种新型的柱色谱技术。
虽然分离技术不止这一种，但是它无疑是最重要的一种。
因为样品中各组分在两相中有着不一样的吸附作用和不同的分配系数等，尤其是在固定相和流动相中这种不同体现的更为明显，而高效液相色谱法主要利用的就是不同组分在这些方面的不同来分离样品，各组分性质的不同使之在分离的过程中保留时间也不一样，这样就可已达到分离的效果。
高效液相色谱法检测鸡蛋中四种激素残留量
高效液相色谱法检测鸡蛋中四种激素残留量汪竟芝;胡琳;曹莹莹;程桂林;胡金玲【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2015(000)010【摘要】建立一个简便、重现性好测定鸡蛋中的雌二醇、雌酮、雌三醇及睾酮残留量的方法。
使用高效液相色谱法，选择流动相为：乙腈∶甲醇∶四氢呋喃∶（0.01 mol/l）醋酸钠=2∶2∶1∶5，能够有效提高色谱峰的分离度，190 nm～800 nm波段下扫描，选择270 nm为最佳吸收波长，柱温：30℃。
结果表明4种激素的方法检出限为0.06 mg/kg～0.17 mg/kg，样品回收率是79.23%～102.26%，相对标准偏差为1.05%～4.21%。
该方法准确度高，操作简便。
【总页数】3页(P94-95,114)【作者】汪竟芝;胡琳;曹莹莹;程桂林;胡金玲【作者单位】池州市食品药品检验中心，安徽池州247000;池州市食品药品检验中心，安徽池州247000;池州市食品药品检验中心，安徽池州247000;池州市食品药品检验中心，安徽池州247000;池州市食品药品检验中心，安徽池州247000【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱法检测鸡蛋中盐酸环丙沙星残留量 [J], 马素英;杨丽娟;杨利敏2.免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时检测鸡蛋中6种玉米赤霉醇类化合物残留量 [J], 游丽娜;李贤良;郗存显;唐柏彬;王国民;张雷;袁中珍;赵华3.高效液相色谱法检测鸡蛋中三聚氰胺残留量的探讨 [J], 陈玲;魏秀丽;尹伶灵;张呈军;张颖4.高效液相色谱法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的不确定度研究 [J], 王英;许利琴;严敏鸣;倪惠军;张海颖5.高效液相色谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量前处理方法的优化 [J], 陈蔷;达列亚·阿合买提;张崇威;司慧民;张磊;宋志超因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法检测酶促反应中底物胆固醇
高效液相色谱法检测酶促反应中底物胆固醇陈静;程怡;郑品劲;罗利华;陈宇潮;仝一丹【摘要】目的：建立酶促反应中底物胆固醇的高效液相色谱（HPLC）检测方法。
方法：HPLC检测胆固醇含量的最佳色谱条件：Dia－monsil C18（250mm×4.6mm，5μm）为固定相，甲醇∶环己烷（90∶10）为流动相，检测波长为215nm，流速为1.0μl·min-1，柱温为35°C。
结果：胆固醇峰呈尖峰，分离较好，理论塔板数为12545；在0.5～10mg·L-1范围内线性关系良好（A=19.136C-1.2707，r=0.9990）；平均加样回收率为104%，RSD为1.5%（n=6）。
结论：该方法专属性强，重复性良好，适合初步用于酶促反应体系中底物胆固醇的含量测定，以胆固醇减少量反映转化率。
%Objective:To establish a method for the determination of Cholesterol (CHS) as a substrate in the enzymatic reaction by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Methods: HPLC method was used to determine the content of CHS, the optimal HPLC conditions were as follows:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm)column as the stationary phase, Methanol-Cyclohexane(90:10) as the mobile phase,1.0μl·min-1 of flow-rate, 35°C of column temperature, the wavelength of UV detector (215nm). Results: CHS was well resolved (the number of theoretical plates was 12545). The calibration curve was in good linearity over the rang of 0.5~10mg·L-1 for CHS. The equation was (A=19.136C-1.2707,(r=0.9990)). The average recovery of CHS was 104%(RSD=1.5%,n=6). Conclusion:The method is sensitive and good repeatability,and it could be used for the determination of CHS which depends on its decrement to reflex the conversion rate.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】2页(P21-22)【关键词】高效液相色谱法;酶促反应;胆固醇【作者】陈静;程怡;郑品劲;罗利华;陈宇潮;仝一丹【作者单位】广州中医药大学中药学院广州 510006;广州中医药大学中药学院广州 510006;广州中医药大学中药学院广州 510006;广州中医药大学中药学院广州510006;广州中医药大学中药学院广州 510006;广州中医药大学中药学院广州510006【正文语种】中文【中图分类】R927.2胆固醇（Cholesterol，CHS）是脂质体的成膜材料之一，由于CHS结构中含仲醇结构和亲油性质，可与磷脂亲油部位相互镶嵌发挥稳膜作用，修饰脂质体可防止泄露而起稳定作用[1]从而控制药物在组织内的释放。
高效液相色谱法测定A549细胞中的胆固醇水平研究
高效液相色谱法测定A549细胞中的胆固醇水平研究魏思宇;卢蕾;蔺晓菁;何芸芸;丁世家;阮雄中;练雪梅【摘要】目的建立检测A549细胞内胆固醇水平的高效液相色谱(HPLC)方法,为以胞内胆固醇相对水平变化作为指标鉴定组织细胞泡沫化程度及特定组织细胞泡沫化对组织损伤提供技术支持.方法用氢氧化钾乙醇溶液和三氯乙酸分别除去细胞裂解液中的三酰甘油和蛋白,用正己烷-异丙醇的混合溶剂提取细胞内的胆固醇.胆固醇水平采用HPLC法测定,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150.0 mm,5 μm),流动相为乙腈-异丙醇(67∶33,V/V),流速为1 mL/min,检测波长为206 nm.结果细胞内胆固醇在5~100 ng/μL内线性关系良好(r=0.999 9);相对标准偏差(RSD)均低于3.0%,平均加样回收率为94.89%,RSD为2.86%(n=6).结论 HPLC法简便、准确、重复性好,可用于泡沫细胞程度鉴定,为探讨脂质代谢异常与器官损伤及进一步研究胆固醇代谢紊乱与肺损伤奠定基础.%Objective To establish a HPLC method for detecting intracellular cholesterol level in A549 cells so as to provide the technical support for the tissue injury by identifying the foaming degree of tissues cells with intracellular cholesterol relative level change as the indicator and specific tissue foaming.Methods Protein and triglycerides in the cell lysis solution were removed by using trichloroacetic acid and KOH ethanolic solution,the mixed solvent of normal hexane and isopropanol was used to extract intracellular cholesterol.The cholesterol level was detected by adopting the HPLC method.The chromatographic column was ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150.0 mm,5 μm),the mobile phase was acetonitrile-isopropanol(67∶33,V/V),the flow rate was1 mL/min and the detection wavelength was at 206 nm.Results The linear range ofintracellular cholesterol level showed good linearity in the range of 5-100 ng/μL(r=0.999 9).RSD was less than 3.0%.The average recovery rate was 94.89% and RSD was 2.86%(n=6).Conclusion The used method is convenient,simple and accurate with good repeatability,can be used to identify foam cell,and lays the foundation for exploring the lipid metabolism abnormality and organ injury and future studying the cholesterol metabolism disturbance and pulmonary injury.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2017(014)007【总页数】4页(P903-905,908)【关键词】高效液相色谱;A549细胞;胆固醇【作者】魏思宇;卢蕾;蔺晓菁;何芸芸;丁世家;阮雄中;练雪梅【作者单位】重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆 400016;重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆 400016;重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆 400016;重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆 400016【正文语种】中文·论著·胆固醇是细胞、动物组织重要的组成物质，不仅是细胞膜形成的重要原料，而且还参与合成体内维生素D、胆汁酸、性激素和肾上腺皮质激素等各类生命物质[1]。
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高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)
【关键词】色谱
近年来，随着人们生活水平的不断提高，人们对膳食组成中胆固醇的含量越来越引起重视。
胆固醇可在胆道中沉积形成胆石，在血管中的沉积是动脉粥样硬化的重要原因之一。
鉴于胆固醇对人体的影响，人们不断地采取各种各样的措施来减少食物中的胆固醇含量，这就要求分析工作者建立一种快速、简便而又重现性好的测定胆固醇的方法。
鸡蛋是自然界中营养最为丰富的食品之一，但是蛋黄中的高胆固醇也引起人们的高度关注。
目前胆固醇的测定一般都要求萃取总脂质、移去溶剂、在碱性介质中热皂化、萃取出非皂化物质、洗涤及浓缩等〔1，2〕，这些步骤费时、费力又费材料，并因其繁琐的操作预处理，大大增加了实验结果的可变性，本文采用 2.0mol/L的KOH-乙醇溶液直接皂化，石油醚萃取，以乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10）作流动相、C18反相色谱柱分离，UV208nm检测，高效液相色谱法测定，简化了操作步骤，降低了操作强度，减少了试剂使用，并且大大节约了分析时间，整个分析过程仅需1.5h。
本方法用于实际样品的测定，结果满意。
1材料与方法
1.1仪器与试剂Agilent1100高效液相色谱仪，紫外检测器G1314A，Agilent1100化学工作站，甲醇、乙腈、异丙醇（均为HPLC级），胆固醇（进口分装），石油醚（重蒸馏，30℃～60℃），无水乙醇、氢氧化钾、氯化钠（均为AR）。
胆固醇标准溶液（1.0mg/ml）:准确称取胆固醇100mg于100ml容量瓶中，用少量甲醇溶解后，用甲醇稀至刻度。
1.2色谱条件分析柱为μBondapakC18TM（30cm×3.9mm），流动相为乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10），流速为1.0ml/min，柱温为30℃，紫外检测波长208nm。
1.3样品处理及测定准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于50ml具塞比色管中，加入
2.0mol/L 的KOH-乙醇液5.0ml，振荡混匀，置65℃水浴中皂化30min（每隔5min振摇1次）后取出，经流水冷却，加入饱和氯化钠溶液2.0ml后再加入石油醚20.0ml，旋涡混匀后离心分离，吸取上清液10.0ml于10ml刻度比色管中，通氮气吹干，再用1.0ml甲醇溶解残渣，过0.45μm 滤膜后，吸取10.0μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，外标法定量。
1.4标准曲线绘制用胆固醇标准贮备液配成0.050、0.010、0.200、0.400、0.600mg/ml的胆固醇标准使用液，分别取10.0μl进行色谱测定，以峰面积（A）为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标（C，mg/ml）绘制标准曲线，得线性方程为A=556.13C+8.003，r=0.9993。
2结果与讨论
2.1皂化条件试验与萃取条件的选择见马建明等报道〔3〕。
2.2分析波长的选择选择较高灵敏度的检测波长可以提高分析数据的精密度，同时也可以降低检出限。
笔者对以流动相为溶剂的胆固醇标准液进行了扫描，结果发现胆固醇在205nm 处具有最大吸收峰，考虑到紫外区的影响，本方法选用208nm为检测波长。