还原糖的含量测定
食品中还原糖含量的测定-直接滴定法
• 3.试剂:
– 硫酸铜(CuSO4 · 5H2O) – 次甲基蓝 -碱性酒石酸铜甲液(费林试剂甲液) – 酒石酸钾钠 – 亚铁氰化钾 -碱性酒石酸铜乙液(费林试剂乙液) – 乙酸锌 – 冰乙酸 -乙酸锌溶液 – 葡萄糖 -葡萄糖标准溶液(1mg/ mL) – 氢氧化钠 -氢氧化钠溶液 – 盐酸
四、实验步骤
• 2. 碱性酒石酸铜溶液的标定 – 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置 于150mL锥形瓶中(甲液、乙液混合后生成氧 化亚铜沉淀,因此,应将甲液加入到乙液,使 生成的氧化亚铜沉淀重溶),加水10mL、玻璃 珠2粒,从滴定管中滴加9mL葡萄糖标准溶液, 控制在2min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速 度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚 好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总 体积。同法平行操作三份,取其平均值,计算 每10mL(甲液、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶 液相当于葡萄糖的质量(mg)。
• 4. 样品溶液的测定
– 吸取5.0mL碱性酒石酸铜溶液甲液及5.0mL乙 液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL、玻璃 珠2粒,从滴定管中滴加比预测体积少1mL的 样品溶液,使在2min内加热至沸,趁沸以以每 两秒1滴的速度滴定至终点。记录样液消耗的 体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。
• 1. 样品处理
– 汽水等含CO2的饮料-雪碧
• 吸取10mL样品置于蒸发皿中,在水浴上除去CO2后, 移入250mL容量瓶,并用水洗涤蒸发皿,洗液并入 容量瓶中,加水至刻度,混匀后备用。
– 酒精饮料-啤酒
• 吸取10mL样品,置于蒸发皿中,用1mol/L氢氧化钠 溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积的1/4后, 移入100 mL容量瓶中,加入50 mL水,摇匀后慢慢 加入5 mL乙酸锌溶液和5 mL 10.6%亚铁氰化钾溶液, 加水至刻度,摇匀。静置30min,用干燥滤纸过滤, 滤液备用。
DE测定(还原糖含量测定)
6.2.2 DE值6.2.2.1 试剂a) 次甲基蓝指示液10g/L:称取1.0 g次甲基蓝(C16H18ClN3S·2H2O),溶解于水并稀释至100ml;b) 葡萄糖标准溶液2g/L:称取于100±2℃烘干至恒重的无水葡萄糖0.5000g,称准至0.0001g,加水溶解,洗入250 ml容量瓶中并稀释至刻度,摇匀,备用。
C)费林溶液:按GB603配制。
标定:预滴定时,先吸取费林试剂Ⅱ,再吸取费林试剂Ⅰ各5.0ml于150ml三角瓶中,加水20ml,加入玻璃珠3粒,用50ml 滴定管预先加入24ml葡萄糖标准溶液(b),摇匀,置于铺有石棉网的电炉上加热,控制瓶中液体在120s±15s内沸腾,并保持微沸,加2滴次甲基蓝指示液(a),继续以葡萄糖标准溶液滴定,直至蓝色刚好消失为其终点,整个滴定操作应在3min内完成。
正式滴定时,预加入比上述滴定消耗的葡萄糖标准溶液少1ml,作平行试验,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
取其算术平均值。
RP=m1×v1/250式中:RP——斐林溶液Ⅱ、Ⅰ各5ml相当于葡萄糖的质量,g;m1——称取基准无水葡萄糖的量,gv1 ——消耗葡萄糖标准溶液的总体积,mL250——配制葡萄糖标准溶液的总体积,mL。
6.2.2.2 测定a) 样液的制备称取一定量的样品,称准至0.0001g(取样量以每100ml样液中含有还原糖量125-200mg为宜),置于50ml小烧杯中,加热水溶解后全部移入250ml容量瓶中,冷却至室温,加水稀释至刻度,摇匀,备用。
b) 预滴定按标定费林溶液操作,先吸取费林试剂Ⅱ,再吸取费林试剂Ⅰ各5.0ml于150ml三角瓶中,加水20ml,加入玻璃珠3粒,用50ml滴定管预先加入一定量的样液(a),将锥形瓶置于铺有石棉网的电炉上加热至沸,控制在120s±15s内沸腾,并保持微沸,以样液继续滴定(滴加样液的速度约为每两秒1滴),至溶液蓝色即将消失时,加入2滴次甲基蓝指示液,再继续滴加样液直至蓝色刚好消失为其终点,记录消耗样液的总体积。
还原糖的测定方法_国标
还原糖的测定方法(1)食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器(1)滴定管(2)25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚(3)真空泵(4)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂:称取10mg甲基红,用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液:称取34.639g 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖含量的测定(Somogyi~Nelson法)
还原糖含量的测定( Somogyi-Nelson 比色法)一.目的在植物营养及代谢研究中,常需测定还原糖的含量,本实验要求掌握Somogyi-Nelson 比色法的测定原理。
二、原理还原糖是具有羰基(> C = O )的糖,能将其他物质还原而其本身被氧化。
(1) 还原糖在碱性条件下加热,在酒石酸钾钠存在的情况下,可以定量地将二价铜离子还原为一价铜离子,即产生砖红色的氧化亚铜沉淀,其本身被氧化。
具体反应如下:生成的 Cu 复合物与糖反应, Cu 生成氧化亚铜( Cu 2 O )。
(2) 氧化亚铜在酸性条件下,可将钼酸铵还原,还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用,生成一种蓝色复合物即砷钼蓝,其颜色深浅在一定范围内与还原糖含量(即被还原的 Cu 2 O 量)成正比,用标准葡萄糖与砷钼酸作用,比色后用做标准,就可测得样品中还原糖含量。
三、仪器、试剂和材料1 .仪器( 1) 分光光度计( 2 )水浴锅( 3 )具塞刻度试管: 15ml X 10( 4 )吸管: 1ml X 1 , 2m1X4 , 5ml X 3( 5 )容量瓶: 100m1 X 2( 6 )漏斗( 7 )研钵( 8 )电子顶载天平2 .试剂( 1) 铜试剂A. 4 % CuS04 · 5H20B. 称取 24g 无水碳酸钠,用 850m1 水溶于大烧杯中,加120g含 4 分子结晶水的酒石酸钾钠,待全溶(可适当加热)后加入碳酸氢钠16g, 再加入120g 无水硫酸钠,全溶及冷却后加水至 900m1 ,沉淀 1~2 天,取上清液(要求严格时过滤)即可备用。
使用前将 A 与 B 按 1 : 9 混匀即可。
(2 )砷钼酸试剂:25g钼酸铵溶于 450ml 蒸馏水中(加热溶解,但温度接近 150 ℃时易分解),待冷却后再加入21 ml 浓 H2SO4 混匀。
另将3g砷酸氢二钠( Na2HAs04 . 7H20) 溶解于 25ml 蒸馏水中,然后加到钼酸铵溶液中,室温下放置于棕色瓶中可长期备用。
还原糖含量测定国标标准(一)
还原糖含量测定国标标准(一)还原糖含量测定国标标准•还原糖含量介绍•国家标准制定背景•标准制定的目的和意义•标准制定的内容•标准实施的作用•总结与展望还原糖含量介绍还原糖是指糖类物质被加热或者酸处理后的糖。
还原糖含量是食品中存在的糖类物质,是食品中营养成分的一个重要指标之一。
国家标准制定背景为了规范食品中还原糖含量的测定方法,加强对食品中还原糖含量的管理,我国于2016年制定了《食品还原糖测定》国家标准。
标准制定的目的和意义该标准的制定,旨在规范食品还原糖含量的测定方法,保障食品安全和消费者权益。
标准制定的内容该标准主要包括以下内容: 1. 术语和定义; 2. 试剂和仪器的要求;3. 样品的制备;4. 还原糖含量的测定方法;5. 结果计算和报告。
标准实施的作用该标准实施后,对于食品企业、食品检测机构以及消费者都有着重要的意义: 1. 对于食品企业:规范还原糖含量的测定方法,提高产品质量,满足国家食品安全标准。
2. 对于食品检测机构:统一测定方法和判定标准,提高检测精度和结果的可靠性。
3. 对于消费者:保证食品安全和消费权益,促进食品市场健康有序的发展。
总结与展望国家标准制定的目的在于保障公众健康和食品安全,对于加强对食品还原糖含量的监管和控制,具有重要的推动作用。
未来还需进一步完善标准体系,加强监督管理,保障食品安全和消费者权益。
还原糖含量测定方法根据国家标准《食品还原糖测定》的规定,测定还原糖含量的方法分为两种,一种是硫酸铜法,另一种是二氧化氮法。
两种方法具体步骤如下:硫酸铜法测定方法1.样品制备:将样品磨碎并过筛,取0.5克到1克的样品加入容量为100毫升的三角瓶中,加入适量蒸馏水。
2.加入试剂:加入5毫升的硫酸铜溶液,摇匀后加入2毫升的10%的钠碱溶液(约为200克/升),直至底部出现暗蓝色固体沉淀,再加入10毫升的钠饮料溶液(约为400克/升),摇匀。
3.加入蓝色还原剂:加入5毫升的蓝色还原剂,摇匀后再加入1毫升的蒸馏水,摇匀。
二硝基水杨酸法测定还原糖
还原糖含量测定(3,5-二硝基水杨酸比色法)一、实验原理还原糖的测定是各种糖类化合物定量测定的基本方法。
在碱性条件下,还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)共热后3,5-二硝基水杨酸(DNS)被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。
在一定范围内,还原糖的浓度与3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)颜色深浅的程度呈正比,利用可见分光光度计,在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值,查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。
二、实验试剂3, 5-二硝基水杨酸试剂( DNS):将6.3g DNS和262mL 2mol/L的NaOH溶液加到500mL含有182g酒石酸钾钠的热水溶液中,再加5g重蒸酚和5g亚硫酸氢钠,搅拌溶解,冷却后定容至1000ml。
溶液为黄色,贮于棕色瓶中。
1mg/mL 葡萄糖标准溶液:准确称取80℃烘至恒重的分析纯无水葡萄糖1g,置于烧杯中,加少量水溶解后再加5mL浓盐酸(防止微生物生长),以蒸馏水定容至1000ml,混匀,4℃冰箱中保存备用。
碘-碘化钾溶液:称取5g碘和10g碘化钾,溶于100mL蒸馏水中。
酚酞指示剂:称取1g酚酞,溶于250mL70%乙醇中。
6mol/L HCI溶液:取250mL浓HCI,用蒸馏水稀释到500mL。
6mol/L NaOH溶液:称取240g NaOH, 溶于1000mL蒸馏水中。
三、实验方法1.制作葡萄糖标准曲线取6支试管编号,按照表3-1分别加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂。
将各管混匀,用0号管调零点,在540nm波长处测1-5管吸光度。
以葡萄糖毫克数为横坐标,A540为纵坐标,绘制标准曲线。
2.样品中还原糖的测定(食用面粉为例)准确称取2.00g食用面粉,放入100mL烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入50-60mL蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保温20min,使还原糖浸出。
还原糖测定的原理
还原糖测定的原理还原糖是指能够还原其他物质的糖类化合物,如葡萄糖、果糖等。
在食品加工、医药生产等领域,对还原糖含量进行测定具有重要意义。
本文将介绍还原糖测定的原理及其常用方法。
一、原理。
还原糖的测定原理是利用还原糖与氧化剂发生反应,氧化剂被还原为相应的还原产物,而还原糖则被氧化为酸。
常用的氧化剂有硝酸铜、费林试剂等。
以硝酸铜法为例,其反应方程式为:C6H12O6 + 2Cu2+ + 4OH→ Cu2O↓ + H2O + 2CH3COOH。
根据反应中生成的氧化铜沉淀的重量,可以计算出还原糖的含量。
二、硝酸铜法测定。
1. 样品处理,将待测样品加入硝酸铜溶液中,加热至沸腾,使还原糖与硝酸铜反应生成氧化铜沉淀。
2. 沉淀收集,将生成的氧化铜沉淀过滤、洗涤、干燥至恒定质量。
3. 计算含量,根据氧化铜沉淀的质量,通过计算公式计算出还原糖的含量。
三、费林试剂法测定。
费林试剂法是利用费林试剂与还原糖在酸性条件下发生显色反应,根据显色深浅来测定还原糖的含量。
其原理是还原糖在酸性条件下与费林试剂反应生成蓝色产物,显色深浅与还原糖的含量成正比。
四、光度法测定。
光度法是利用还原糖与氧化剂反应生成显色产物,通过测定产物的吸光度来测定还原糖的含量。
常用的显色产物有甲基橙、菲罗啉等,通过比色计或分光光度计测定吸光度,再根据标准曲线计算出还原糖的含量。
五、总结。
还原糖的测定方法多种多样,选择合适的方法需要根据样品特性、实验条件等因素综合考虑。
无论采用何种方法,都需要严格控制实验条件,准确操作,确保测定结果的准确性和可靠性。
通过本文对还原糖测定原理及常用方法的介绍,相信读者对还原糖的测定有了更深入的了解,能够在实际操作中更加灵活、准确地选择合适的测定方法,为相关领域的研究和生产提供有力支持。
还原糖测定实验报告
一、实验目的1. 理解还原糖的化学性质及其在生物体内的作用。
2. 掌握使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量的原理和方法。
3. 通过实验,学会正确使用实验仪器和试剂,提高实验操作技能。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类,在生物体内具有重要的生理功能。
3,5-二硝基水杨酸法是测定还原糖含量的常用方法,其原理是:还原糖在酸性条件下与3,5-二硝基水杨酸反应,生成红色复合物,通过比色法测定还原糖含量。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁等。
2. 试剂:3,5-二硝基水杨酸、硫酸铜、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
四、实验仪器1. 分析天平2. 恒温水浴锅3. 离心机4. 分光光度计5. 移液管6. 试管五、实验步骤1. 标准曲线的制作:(1)分别配制0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL的葡萄糖标准溶液。
(2)取5支试管,分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液各1 mL。
(3)向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL,混匀。
(4)将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
(5)取出试管,用蒸馏水定容至10 mL。
(6)用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
(7)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定:(1)分别取葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁各1 mL于试管中。
(2)向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL,混匀。
(3)将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
(4)取出试管,用蒸馏水定容至10 mL。
(5)用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
(6)根据标准曲线,计算样品中还原糖含量。
六、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:标准曲线如图所示,线性回归方程为y = 0.0034x + 0.0128,相关系数R² = 0.9989。
2. 样品测定:葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁中还原糖含量分别为2.34 mg/mL、0.86 mg/mL、0.23 mg/mL、1.12 mg/mL、0.89 mg/mL。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告引言:还原糖是一类含有还原性基团的糖类物质,包括蔗糖、果糖、葡萄糖等,它们具有还原剂性质,能够还原某些化学试剂。
还原糖的测定对于食品工业、生物化学以及医学领域具有重要意义。
本实验旨在通过间接法,利用还原糖对氧化剂的还原能力来测定糖的含量。
实验设备:1. 分光光度计2. 烧杯3. 试管4. 10ml 称量瓶5. 称量盘6. 称重仪7. 20ml 锥形瓶8. 恒温水浴器9. 塑料注射器实验原理与步骤:原理:还原糖具有还原能力,能够将某些氧化剂还原为相应的还原剂。
本实验中,我们采用间接法来测定还原糖的含量。
首先,还原糖被氧化剂氧化生成相应的酸。
然后,我们利用已知浓度的氧化剂标定所需的还原糖的质量。
步骤:1. 取适量的还原糖样品,精确称量并记录其质量。
2. 将样品溶解在足够量的蒸馏水中,使得质量浓度为1克/10ml。
3. 取0.5ml还原糖溶液到一个20ml 锥形瓶中。
4. 加入50ml的磷酸盐缓冲溶液,并用塑料注射器将氧化剂硫酸亚铁溶液滴定到显红的终点,记录所需的滴定体积。
5. 用蒸馏水对照实验进行空白试验,并记录滴定体积。
6. 计算样品的还原糖含量。
实验结果与分析:1. 标定曲线:根据实验所得数据,绘制出硫酸亚铁滴定体积与还原糖质量之间的标定曲线。
2. 样品测定:根据实验步骤中测定的滴定体积数据,结合标定曲线,计算并记录样品中还原糖的含量。
讨论与结论:1. 实验误差:分析实验过程中可能存在的误差来源,如称量误差、滴定体积读取误差等。
提出改进实验方法的建议。
2. 结果分析:根据实验数据的分析与计算,得出样品中还原糖的含量。
3. 结论:通过实验,我们成功测定了还原糖的含量,并得出结论。
实验的意义与应用:1. 食品工业:测定食品中还原糖的含量,为食品质量评价提供重要依据。
2. 生物化学:研究生物体内糖代谢、酶的活性等方面的重要手段。
3. 医学领域:对于糖尿病患者管理血糖以及诊断疾病具有重要意义。
还原糖的测定
(1) 提取液的制备常用的提取剂有水和乙醇溶液,提取液的制备方法要根据样的性状而定,但应遵循以下原则:①取样量和稀释倍数的确定,要考虑所采用的分析方法的检测范围。
一般提取经净化和可能的转化后,每毫升含糖量应在0.5~3.5mg之间,提取10克含糖2%的样品可在100毫升容量瓶中进行;而对于含糖较高的食品,可取5~10克样品于250毫升容量瓶中进行提取。
②含脂肪的食品,如乳酪,巧克力,蛋黄酱及蛋白杏仁糖等,通常需经脱脂后再以水进行提取。
一般以石油醚处理一次或几次,必要时可以加热。
每次处理后,倾去石油醚层(如分层不好,可以进行离心分离),然后用水提取。
③含大量淀粉和糊精的食品,如粮谷制品,某些蔬菜,调味品,用水提取会使部分淀粉,糊精溶出,影响测定,同时过滤也困难,为此,宜采用乙醇溶液提取。
乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀,通常用70~75%的乙醇溶液。
若样品含水量较高,混合后的最终浓度应控制在上述范围内。
提取时可加热回流,然后冷却并离心,倾出上清液,如此提取2~3次,合并提取液,蒸发除去乙醇。
用乙醇溶液作提取剂时,提取液不用除蛋白质,因为蛋白质不会溶解出来。
④含酒精和二氧化碳的液体样品,通常蒸发至原体积1/3~1/4,以除去酒精和二氧化碳。
但酸性食,在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性,以防止低聚糖被部分水解。
●⑤提取固体样品时,为提高提取效果,有时需加热,加热温度一般控制在。
40~50℃,一般不超过80℃,温度过高时右溶性多糖溶出,增加下步澄清工作的负担,用乙醇做提取剂,加热时应安装回流装置。
(2)提取液的澄清作为澄清剂必需具备以下几点要求:①能较完全地除去干扰物质②不吸附或沉淀被测糖分,也不改变被测糖分的理化性质③过剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作,易于除掉。
常用三种澄清剂:中性醋酸铅[Pb(CHCOO)2•3H2O]乙酸锌和亚铁氰化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液澄清剂的用量样液除铅2食品中还原糖的测定直接滴定法、3高锰酸钾法、4萨氏法、5碘量法● 2.1 直接滴定法●(1) 原理●(2) 适用范围●(3) 试剂●(4) 测定方法●(5) 结果计算●(6) 说明与讨论(1) 原理将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法,了解还原糖在食品中的重要性,并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液(硫酸铜溶液)和乙液(氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液)组成,使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下:2Cu(OH)₂+RCHO → RCOOH + Cu₂O↓ + 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色,通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器(一)实验材料1、葡萄糖标准溶液:准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后定容至 1000mL,浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品:苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
(二)实验仪器1、电子天平:精度为 0001g。
2、容量瓶:100mL、500mL。
3、移液管:1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶:250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管:50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤(一)样品处理1、液体样品(如苹果汁、橙汁):准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中,加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
2、粘稠液体样品(如蜂蜜):称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中,加水约 50mL 溶解,慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
(二)斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中,加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液,摇匀,在电炉上加热至沸腾,保持沸腾 2 分钟,趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
斐林试剂置换法测定还原糖的含量
五、分析讨论 六、思考题: 思考题: 1、查阅资料还原糖测定检测方 、 法有哪些?其原理是什么? 法有哪些?其原理是什么? 2、总结本实验方法检测还原糖 、 应注意哪些事项? 应注意哪些事项?
四、结果计算
还原糖含量( 还原糖含量(以G计) ( g/ml) Vo=(Vo-V) *0.002 *1/10 * n 式中Vo Vo-------- 斐林试剂标定值, 式中Vo-------- 斐林试剂标定值,ml 样品糖液测定值, V--------- 样品糖液测定值,ml 0.002----- 标准GS液浓度, GS液浓度 0.002----- 标准GS液浓度,g/ml 10-------- 样品糖液体积, 10-------- 样品糖液体积,ml n--------- 样品稀释倍数
实验一 斐林试剂置换法测定还原糖的 含量
一、实验原理
糖类包括多糖、双糖和单糖, 糖类包括多糖、双糖和单糖,其中单糖和某 些双糖具有游离的羰基,称为还原糖 还原糖, 些双糖具有游离的羰基,称为还原糖,多糖 和蔗糖无还原性。利用糖的还原性, 和蔗糖无还原性。利用糖的还原性,与斐林 试剂(氧化剂) 试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价 进行氧化还原反应,而进行测定. 铜,进行氧化还原反应,而进行测定.非还原 糖必须转化为还原糖,再进行测定。 糖必须转化为还原糖,再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化 剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示 剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。 在碱性、沸腾环境下还原呈无色。 环境下还原呈无色 根据斐林试剂完全还原所需的还原糖 量,计算出样品还原糖量。 计算出样品还原糖量。
二、试剂与材料
1、斐林试剂
甲 乙 69.3g CuSO4.5H2O 1000ml 50ml/组 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法糖是我们日常饮食中的重要成分之一,它不仅能提供能量,还能给食物增加甜味。
在食品加工、食品质量检验以及科研领域中,糖的测定方法显得尤为重要。
本文将介绍糖的测定方法,并探讨其原理和应用。
一、重量法测定糖含量重量法是一种常用的测定糖含量的方法。
其原理是通过测量待测样品和在特定条件下经过反应生成的产物的重量来计算糖的含量。
1. 总糖测定法总糖测定法是测定待测样品中所有可溶于水的单糖、双糖和多糖的总含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的稀酸使其溶解;(2)将溶液加热使糖分解成单糖;(3)将溶液加入定量的还原剂,产生还原物质,然后用碘量定法测定其浓度。
2. 还原糖测定法还原糖测定法是测定待测样品中的还原糖含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的稀酸使其溶解;(2)将溶液加热使糖分解成单糖;(3)将溶液与还原剂反应,生成还原物质,然后用氧化剂滴定还原物质的浓度。
3. 非还原糖测定法非还原糖测定法是测定待测样品中的非还原糖含量。
其步骤如下:(1)取一定量的样品并加入适量的酸进行水解;(2)将水解后的样品经过甲醇提取,得到提取液;(3)将提取液与酚酞试剂反应,生成红色化合物,并根据颜色的强度来推测非还原糖的含量。
二、光度法测定糖含量光度法是一种常用的测定糖含量的方法。
其原理是通过测量液体中糖溶液与特定试剂反应生成的产物的吸光度,来推测糖的含量。
1. 酚硫酸法酚硫酸法是一种测定还原糖含量的常用光度法。
其步骤如下:(1)取一定量的待测样品与酚硫酸试剂混合,在沸水中加热使其反应,生成有色产物;(2)然后用分光光度计测定产物的吸光度,根据标准曲线来推断糖含量。
2. 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法是测定葡萄糖含量的常用光度法。
其步骤如下:(1)取一定量的待测样品与葡萄糖氧化酶试剂混合,在适当的温度下反应,使葡萄糖发生氧化;(2)然后用分光光度计测定产生的还原物质的吸光度,根据标准曲线计算出葡萄糖的含量。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物,在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。
测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。
本文将介绍几种常用的还原糖测定方法,希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。
一、费林法测定法。
费林法是一种经典的还原糖测定方法,其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应,生成红色沉淀。
通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。
这种方法操作简单,结果准确,被广泛应用于食品工业中。
二、硫氰化铁法测定法。
硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法,其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物,通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法具有操作简便、结果快速的特点,适用于实验室中大批量样品的测定。
三、酶法测定法。
酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖,再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物,通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验,如生物化学实验和医学检测。
四、色谱法测定法。
色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法,其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来,再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。
这种方法操作复杂,但具有高分辨率、高灵敏度的特点,适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
五、红外光谱法测定法。
红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。
这种方法操作简单,无需样品的处理,适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。
六、电化学法测定法。
电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法,其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。
这种方法操作简单,结果准确,适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
总结。
以上介绍了几种常用的还原糖测定方法,每种方法都有其特点和适用范围。
还原糖含量的测定
待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示 剂,用6mol/L NaOH中和至微红色,在 4000rpm、5分钟条件下离心,得到的上 清液转移到100ml容量瓶中,用蒸馏水定 容至刻度,上下颠倒几次混匀溶液,作为 总糖待测液。
(3)显色和比色,按下表操作
管号 样品量(ml) 蒸馏水(ml) DNS试剂(ml) 加热
1、绘制葡萄糖标准曲线 立即用流动冷水冷却至室温
立即用流动冷水冷却至室温
准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中,加少量蒸馏水调成糊状,再加入50ml蒸馏水,摇匀,置于50℃水浴条件下20分钟,使还 原糖浸出;
2、测定样品中还原糖和总糖含量。 2、测定样品中还原糖和总糖含量。 同时一起在沸水浴中加热5min*
还原糖
总糖
2.0
1.0
0
1.0
1.5
1.5
同时一起在沸水浴中加热5min*
冷却
立即用流动冷水冷却至室温
蒸馏水(ml)
21.5
21.5
吸光值(A540)
结果处理
以1、2号管的吸光值,分别在标准曲线 上查出相应的还原糖毫克数。按下列公式 计算出样品中还原糖和总糖的百分含量:
(2)提取样品中的总糖: 1g食用面粉放置于100ml三角瓶中,加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏水,沸水浴30分钟(注意不能把水烧干)。
1g食用面粉放置于100ml三角瓶中,加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏水,沸水浴30分钟(注意不能把水烧干)。 准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中,加少量蒸馏水调成糊状,再加入50ml蒸馏水,摇匀,置于50℃水浴条件下20分钟,使还 原糖浸出;
用滴管吸取1~2滴水解液于白瓷板上,加1 (3)显色和比色,按下表操作
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还原糖的含量测定
引言
还原糖是一类具有还原性的糖类物质,可以通过化学反应还原其他物质。
测定糖的含量对于食品工业和生物化学研究具有重要意义。
本文将介绍一种常用的方法——费林试剂法,用于测定还原糖的含量。
什么是还原糖
还原糖是指能够还原氧化剂的糖类物质。
常见的还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
这些糖类物质在一定条件下能够与某些氧化剂反应,将其还原成相应的还原物。
费林试剂法原理
费林试剂法是一种常用的测定还原糖含量的方法。
其原理基于还原糖在碱性条件下能够与费林试剂反应生成蓝色产物。
费林试剂是一种含有磷酸钒和磷酸钼的混合物,与还原糖反应后形成蓝色还原物。
实验步骤
1.准备样品:将待测的糖溶解在适量的水中,制备出一定浓度的糖溶液。
2.配制费林试剂:将适量的费林试剂与稀硫酸混合,制备出费林试剂溶液。
3.反应过程:将一定量的糖溶液与费林试剂溶液混合,放置在适当的温度下反
应一段时间。
4.测定吸光度:使用分光光度计测定反应体系的吸光度,记录下吸光度值。
5.绘制标准曲线:制备一系列已知浓度的糖溶液,重复上述步骤测定吸光度值,
绘制出标准曲线。
6.测定未知样品:将待测样品的吸光度值代入标准曲线中,根据吸光度值确定
其糖含量。
实验注意事项
•实验过程中要严格控制温度和反应时间,以保证实验的准确性和可重复性。
•使用分光光度计时,应注意对比试剂溶液的吸光度值,以消除背景干扰。
•实验前应对仪器进行校准和预热,以确保测量结果的准确性。
结果分析
根据实验测得的吸光度值和标准曲线,可以确定待测样品中还原糖的含量。
通过比较不同样品的含量,可以评估不同食品中的糖含量差异,为食品质量控制和营养评估提供依据。
应用领域
费林试剂法可以广泛应用于食品工业、生物化学研究等领域。
在食品工业中,测定糖的含量可以帮助评估产品的甜度和质量,指导生产过程的调整。
在生物化学研究中,糖类物质是细胞代谢的重要组成部分,测定糖的含量可以帮助研究人员了解生物体内糖代谢的变化。
结论
费林试剂法是一种常用的测定还原糖含量的方法,其原理基于还原糖与费林试剂反应生成蓝色产物。
通过测定反应体系的吸光度,并利用标准曲线,可以准确测定样品中还原糖的含量。
这种方法广泛应用于食品工业和生物化学研究领域,对于评估产品质量和研究糖代谢具有重要意义。