蔬菜中硝酸盐含量的测定(精)

蔬菜中硝酸盐含量的测定

摘要 :基于硝酸根在 219 nm处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取液的吸光度,

从标准曲线上查得相应浓度。提取液用 pH=9.6-9.7的氨缓冲液,从待测样品中提取硝酸根离子。此法测定的结果表明回收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。操作方法简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。

关键词:蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法

前言:蔬菜 ( 尤其叶菜类是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用工业废水和生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过

高 , 已证明 , 硝酸盐在人体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会造成智力迟钝等危害 [ 1]。因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 [ 2]。

蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多,如镉柱还原分光光度法、离子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国家标准方法 , 但由于干扰因素多, 操作步骤过于繁琐, 很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格,不适宜作常规监测分析 [3]。本实验采用操作简单、准确度高

的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。

1 实验仪器与材料

1.1 主要仪器与试剂

1.1.1仪器

紫外分光光度计 ; 容量瓶;乳钵

1 .1.2试剂

①氨缓冲液(pH=9.6~9.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中,混合后再加入 5ml 浓

氨水, 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。②粉末状活性炭(除去待测样品中的色素。③蛋白质沉淀剂Ⅰ,蛋白质沉淀剂Ⅱ (除去蛋白质及混浊物。④溶液Ⅰ:15克铁氰化

钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中, 定容于 100ml 。⑤溶液Ⅱ:30g 硫酸锌 (ZnSO4 溶于 60ml 蒸馏水中,定容于 100ml 。⑥硝酸盐标准液:称 0.722g 在 110℃条件下烘

干的 KNO3用蒸馏水溶解后定容至 1000ml 。此溶液为 100ug/ml标准贮液,放入冰

箱内保存。

1.1.3样品材料

京白菜 (Brassica campestris L. ssp. chinensis (L. Makino. var. communis Tsen et Lee、小瓜(Cucurbita moschata、胡萝卜 (Daucus carota 、莲花白 (Brassica oleracea L. var.capitata 、土豆 (Solanum tuberosum L 、黄瓜 (Cucumis sativus Linn. (以上各蔬

菜均在昆明蒜村农贸市场购买,产地昆明茨坝,高海拔的冬天摘取。

2 实验方法

2.1 标准曲线的绘制

依次配制 NO 浓度为 0.4ug/ml, 0.8ug/ml, 1.2ug/ml, 1.6ug/ml, 2.0ug/ml, 2.4ug/ml, 2.8ug/ml的溶液,以重蒸馏水做空白,用石英比色皿在 219nm 处测定吸光度(A 。以

标准溶液浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。如图 2, 得回归方程为 A = 0 . 00919 +0 . 0596C,相关系数 r = 0 . 9996( n = 5。

2.1.1 材料处理方法

将样品经自来水、去离子水洗净 , 用滤纸擦干后选取有代表性的可食部分 , 将其切碎、混匀 , 并于研钵中捣碎 , 处理后放入烧杯中。

2.1.2样品测定

准确称取蔬菜样品 0.5100g ,放入研钵中加入少量蒸馏水, 研磨成匀浆, 用 30ml 蒸馏水将研磨好的匀浆冲入 100ml 容量瓶中, 同时用蒸馏水 30ml 放入另一 100ml 容量瓶中做空白校正,两瓶分别加 5ml 氨缓冲液(pH=9.6 ,30ml 蒸馏水, 0.5g 粉末状

活性炭,摇动均匀,静置 20min ,加入蛋白质沉淀剂溶液Ⅰ 1ml 和蛋白质沉淀剂Ⅱ 2ml, 充分混合,用蒸馏水定容到 100ml (V ,摇匀,放置 5~10min,定量滤纸过滤;取滤液用石英比色皿在紫外分光光度计 219nm 处测定吸光度 (A 。如

吸光度太高, 可用蒸馏水稀释 5~10倍后再测 (空白同样稀释 [4]。

3 结果与分析:

六种蔬菜的吸光度(A 和硝酸盐浓度 (C

表一

0.0890 胡萝卜 0.3097 0.2274 0.2087 0.3026 1.0389 0.7644 0.7020 140.39 表二：各种蔬菜的硝酸盐含量 400 350 300 250 硝酸盐含量 200 150 100 50 0 京白菜小瓜土豆种类黄瓜莲花白胡萝卜系列1 由表可看出六种蔬菜硝酸盐含量大小为：小瓜>京白菜>黄瓜>胡萝卜>土豆>莲花白。 3.1 共存离子的干扰及消除按实验方法,对于硝酸盐溶液, 以相对标准偏差 ( RSD 小于 5 %为限, 少量的 K+, Na+、Ca2+、Mg2 +、SO42 -、F-不干扰测定; 而 NO-2、CO2-3 有干扰。实验证明,加入 1 mo l/L 盐酸溶液 2 mL 可消除碳酸盐的干扰,再加 1%氨基磺酸铵 0.1 mL 能很好消除 NO-2 的干扰。

NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。 3.1.1 结论利用本法测定蔬菜中硝酸盐含量,方法回收率在 95.1 % ~ 100 . 9 %之间,相对标准偏差在 1 . 55 % ~4 .

14 %之间,准确度和精密度较高, 且操作简便, 尤其适用于检测大批量样。参考文