水中挥发酚-4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法方法验证报告

4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法方法验证报告

本文通过一系列的验证分析，利用数理统计方法，计算得到了GB/T 5750.4-2006方法挥发酚的最低检出限和定量检出限、标准曲线相关系数、精密度和加标回收率。

一、方法原理

在pH10.0±0.2和有氧化剂铁氰化钾存在的溶液中，酚与4-氨基安替吡啉形成红色的安替吡啉染料，用三氯甲烷萃取后比色定量。

二、仪器设备与化学试剂

1. 紫外可见分光光度计；

2. 三氯甲烷溶液；

3. 硫酸铜溶液（100g/L）；

4. 氨水-氯化铵缓冲溶液（pH9.8）；

5. 4-氨基安替吡啉溶液（20g/L）；

6. 铁氰化钾溶液（80g/L）；

7. 溴酸钾-溴化钾溶液[c（1/6KBrO

3

）=0.1mol/L]；

8. 淀粉溶液（5g/L）；

9. 硫酸溶液（1+9）；

4. 酚标准溶液[ρ（C

6H

5

OH）=1.00ug/mL]

三、简要操作步骤

1．标准曲线绘制

取上述标准物质用纯水配成0mg/L、0.002mg/L、0.004 mg/L、0.008mg/L、0.016mg/L、0.024mg/L、0.032mg/L、0.040mg/L标准系列，用三氯甲烷萃取绘制标准曲线。

2. 测定

方法检出限用空白加标0.002mg/L标准工作液测试；精密度用空白加标0.016mg/L标准工作液测试，线性范围用0mg/L、0.002mg/L、0.004 mg/L、0.008mg/L、0.016mg/L、0.024mg/L、0.032mg/L、0.040mg/L标准工作液测试；空白加标回收率分别在限量附近、限量以上2个水平测试。

四、分析方法验证程序

1．方法检出限和定量限：因标准方法给出的检出限是：0.002mg/L，故将标准给出的检出限浓度配成实际样品进样，结果见表1。以检出限10倍为定量限配制实际样品进样结果见表1

表1 实验数据统计及方法检出限、定量限

2．标准曲线的绘制（见表2）

线性范围用0mg/L、0.002mg/L、0.004 mg/L、0.008mg/L、0.016mg/L、0.024mg/L、0.032mg/L、0.040mg/L标准工作液测试。标准曲线相关性系数如表2所示。

表2 标准曲线相关性系数

3．方法精密度实验（见表3）

精密度用空白加标0.016mg/L（挥发酚）标准工作液测试。数据如下表3所示

表3 精密度实验

4.准确度实验

以前项精密度实验测定数据最大值为基础，做准确度分析。

表4 准确度实验

5.空白加标回收实验（见表5）

在限量附近和限量以上两个水平做2个加标回收率实验，数据如下表5所示。

表5 加标回收率

五、评价与验证结论

1．评价

1.1 方法检出限和定量限评价

本方法挥发酚的检出限为0.002mg/L，定量限为0.020mg/L。

参考GB/T5750.6-2006《生活饮用水标准检验方法感官性状和物理指标》和GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》对检测限的要求，本方法测定的检测限符合该要求。

1.2 标准曲线评价

本方法挥发酚的标准曲线相关系数为0.9995，参考GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》对标准曲线的要求，本方法标准曲线相关系数大于0.99，符合该要求。

1.3 精密度评价

本方法挥发酚的变异系数为0.52%，参考GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》对精密度的要求，本方法的精密度小于5.3%，符合该要求。

1.4 准确度评价

本方法挥发酚的偏差为1.25%，参考GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》对准确度的要求，本方法的偏差小于15%，符合该要求。

1.5 加标回收率评价

参考GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》对回收率的要求，本方法的加标回收率均在90%-110%之间，符合该要求。

2．结论

通过对上述各项指标的验证，表明该项目可在本实验室开展。