微生物的分离和培养(终稿)

微生物。常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；测定培养液 中微生物数量，显微记数法可直接记数。生产上所用酶需检测 生物活性，为使酶可反复利用，可利用固定化酶或固定化细胞 技术。
[易错点击] 测定培养液中微生物数量的方法易答成平板划 线法，注意稀释涂布平板法和平板划线法的区别，前者可用于 记数，后者主要用于分离培养。
【生物—生物技术实践】生物柴油是
一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓
人类对化石燃料的消耗，能够合成生物柴油
（如下图）。“汉水丑生的生物同行”超级群大型 公益活动：历年高考题PPT版制作。
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45．Ⅰ号培养基称为__选__择__培__养__基__(按功能分)；该培养基中除
了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分___C__。
化的__PC_R__技术。
[解析] 提取植物油的方法有蒸馏、压榨、萃取等，由于用 于生产生物柴油的植物油不易发挥，故可采用压榨和萃取法； 添加的植物油为微生物生长提供碳源，可选择培养产脂肪酶的 “汉水丑生的生物同行”超级群大型
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44．①过程称为__稀__释___，②过程是为了_单__个__菌__落__的__筛__选__。 （或筛选）
【解析】由图中显示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀 释，②过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分 离纯化嗜热菌。
（1）根据上述资料可推论：甲中酶_b___的功能丧失；乙中 酶_a___的功能丧失，甲和乙中酶_c___的功能都正常。由野生 型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型不的同______（同一、 不同）菌体中的不同基__因____发生了突变，从而导致不同酶的 功能丧失。如果想在基本培养基上添加少量的X来生产中间 产物1，则应选用甲____（野生型、甲、乙）。
（1）在有光条件下培养海藻时，培养液中必须含有 ＿各＿种＿必＿需＿矿＿质＿元＿素＿,还需定 时向培养液通入空气，目的
是提供＿CO＿2＿。海藻光合 速率随不同光照强度的变化
曲线如右图，图中B点表示 最佳的＿＿光＿照＿＿培养条件。
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46．一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了 _杀__死__培__养__基__中__的__细__菌__芽__孢___。
【解析】细菌芽孢是在极端环境中产生的，具有耐高温等特 点，只有用高温高压，才能杀死细菌芽孢，防止培养基污染。
（2012北京5）．高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对
C 实验结果影响最大的一项是（
）
A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
【解析】植物组织培养中的外植体必须在严格的无菌环境中进行 培养，而且操作的各环节都要注意严格灭菌，必须无菌操作，C对；葡 萄酒的制作原理是利用酵母菌无氧发酵时产生酒精，在无氧条件下， 大部分微生物都不能生存，随着发酵的进行，酒精度增大，也有杀菌 的作用；而制作腐乳时，主要是将毛霉等微生物接种在豆腐上，此过 程的加盐、加卤汤等操作均有一定的杀菌作用；选择培养基只能允许 目的菌生长，会抑制其他杂菌生长，因此不是严格无菌操作时A、B、D 选项的情况下比C选项的受影响要小。
（2011新课标39）．【生物 ——选修1：生物技术实践】 （15分） 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。 某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。 回答问题： （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 原油 为 唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选__择__ 培养基。 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有 两种，即 平板划线法 和 稀释涂布平板法 。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大 小，分解圈说明该菌株的降解能力 强 。
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌 物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的_直__径__（__或_ 大小） 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
（ 2 0 1 0 山 东 3 4 ） . “汉水丑生的生物同行”超级群大型 公益活动：历年高考题PPT版制作。
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（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌 方法有灼烧灭菌、干热灭菌 和 高压蒸汽灭菌 。无菌技 术要求实验操作应在酒精灯 火焰 附近进行，以避免周围 环境中微生物的污染。
（2011四川30Ⅰ） Ⅰ.（9分）有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件，以获 得最大生物量（注：生物量指单位体积的藻体干重）。
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（
3
）
测
定
培
养
液
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微
生
物
数
量
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可
选
用
_____显__微___镜__直__接___记__数______法直接计数；从微生物M分离提取 的脂肪酶通常需要检测_酶__活__性_，以确定其应用价值； 为 降 低 生 物 柴 油 生 产 技 术 ， 可 利 用 _固___定__化___酶__ 技 术 使 脂 肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催
（2010全国Ⅱ34）、（12分）某种细菌体内某氨基酸（X） 的生物合成途径如图:
底物 酶a 中间产物1 酶b 中间产物2 酶c X
这种细菌的野生型能在基本培养基（满足野生型细菌生 长的简单培养基）上生长，而由该种细菌野生型得到的两种 突变型（甲、乙）都不能在基本培养基上生长； 在基本培 养基上若添加中间产物2，则甲、乙都能生长；若添加中间 产物1，则乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少 量的X，甲能积累中间产物1，而乙不能积累。请回答：
微生物的分离和培养
本卷整理：【闽】小齿轮 （陈燕芬 福建省泉州第十一中学）
D （2012大纲5）.关于细菌的叙述中，正确的是（ ）
A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期 D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
（2012重庆2）.下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C.向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长 D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
D）
【解析】菌落就是由单个细菌或同种细胞繁殖成的具有一定 形态结构等特征的子细胞群体，一个菌落就是一个种群，所 以单个菌落就只有一种细菌。青霉素只能抑制细菌的细胞壁 的形成从而抑制细菌的繁殖，破伤风杆菌是厌氧性的生物。 半固体培养基中可以观察细菌的运动
（2）该海藻在无光条件下仍能生长，但需在培养液中添加 葡萄糖等有机物，目的是提供＿碳＿源＿和＿能＿源＿。 （3）向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液，在一 定光照条件下培养该海藻，测定海藻的生物量如下表：
葡萄糖浓度（g/L）
0
0.1
0.2 0.4 0.6 1.0
海藻生物量（g/L） 0.84 0.93 1.00 1.03 0.79 0.67
要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度，还需设计＿在＿0.2＿～＿0＿.6 ＿g/L ＿之＿间＿更＿细＿分＿的＿浓＿度＿梯＿度＿的实验。
（4）综合上述实验，获得该海藻最大生物量的培养条件是 ＿适＿宜＿光＿照＿，＿添＿加＿适＿宜＿浓＿度＿的＿葡＿萄＿糖＿。
解析： （1）海藻是植物，培养时必需在培养液中加入各种必需矿 质元素。通入空气，目的是提供光合作用所需CO2。B点光 照强度生物量最大。 （2）无光条件下海藻不能进行光合作用，必需提供有机物 作C源、能量来源。 （3）要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度，还需在0.2～ 0.6g/L之间更细分的浓度梯度。 （4）根据图，获得该海藻最大生物量需光照强度适宜，据 表格知需添加适宜浓度葡萄糖。
【解析】自养型细菌可以利用无机碳源，异养型细菌只能 利用有机碳源，A错误。分离细菌并获得单菌落需要固体培 养基，B错误。芽孢是细菌为适应不利的环境而产生的休眠 体，而调整期资源丰富，不会产生芽孢，C错误。金黄色葡 萄球菌有耐高浓度盐的特点，D正确。
（2012上海44、45、46）高温淀粉酶在大规模工业生 产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产 生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。
汉水丑生群大型活动之三
2007-2012六年高考题知识点分类汇编
策划：汉水丑生 组织：汉水丑生、飞鸿翼、掌上的沙、暖风、