研究生实验室安全考试复习(1)

㈠、分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的一项技术。

特点：①灵敏度高、精确度高；②操作简便、快速；③对于复杂的组分系统，无须分离即可检测出其中所含的微量组分。

分光光度法所使用的光谱范围主要是波谱图中200～1000nm这一段波长的光谱。

紫外光区：200～400nm
可见光区：400～760nm
红外光区：760～1000nm
分光光度计使用的注意事项
试管架或试剂瓶不得放置于仪器上，以防试剂溅出腐蚀机壳。

拉杆动作要轻，防溶液溅出，腐蚀机件。

比色杯应持其侧壁的毛玻璃面。

盛液时不能太满（约达比色杯2/3体积），外壁如有液体，只能用滤纸沾去水份，再用擦镜纸擦干净。

测毕，比色液一般应倒回原试管中，直至计算无误后方可倒掉。

㈡、按转速分类：分为低速离心机、高速离心机、超速离心机
1. 低速离心机：
T 转速在10000rpm以内或相对离心力在15000 ×g以内T 实验室中常用于细胞和大分子的分离制备。

2. 高速离心机：
T 转速在10000-30000rpm以内或相对离心力在15000-70000×g以内
T 常用于生物大分子的分离制备
3. 超速离心机：
T 转速在30000rpm以上或相对离心力在70000×g以上。

T 常用于分离亚细胞器、病毒粒子、DNA、RNA和蛋白质分子。

据离心机的用途可分为：分析型，制备型和分析制备型。

2. 差速离心
a、差速离心法可以用来分离细胞，亚细胞结构或高分子。

差速离心比较
适用于差异比较明显的细胞或细胞器的分级分离，经过多次离心可以获得满意的效果。

原理：
利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。

b、密度梯度离心也称区带离心法。

是将样品加在惰性梯度介质中进行离
心沉降或沉降平衡，在一定离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置
上，形成不同区带的分离方法。

等密度梯度离心
等密度离心法也叫沉降平衡法。

所谓等密度是指样品密度与介质的密度相等，实际上是在梯度密度介质中进行的。

㈢、气溶胶(aerosols)：悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子（粒径一般为0.001~100μm）形成的相对稳定的分散体系
㈣一级防护屏障：是通过生物安全柜、负罩等实验设备和个人防护装备实现的，操作者
和被操作对象之间的隔离。

㈤、PCR仪使用方法
(1) 首先准备好反应管；
(2) 打开机盖，将反应管平稳、端正地置入，盖好机盖；
(3) 打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序。

(4) 运行程序。

PCR仪维护常识。

1、打开PCR仪机盖开关要轻，防止损坏盖锁，PCR仪工作时严禁打开机盖。

2、使用完毕后，看BLOCK上和样品槽中是否有冷凝水，如有用吸水纸吸干。

3、严禁过夜。

样品在机子上的保存温度建议设室温。

4、保持台面干净，定期清理底座的灰尘。

保持良好的升降温速度。

5、定期清洗仪器的外表面和热盖，定期用肥皂水清洗仪器的样品槽，不能使用强碱，高浓度酒精和有机溶液擦洗。

㈥、电子天平使用方法
一.准备
1.将天平放在稳定的工作台上，避免振动，气流、阳光直射和剧烈的温度波
动。

2.安装称盘，调整水平调节脚，使水泡位于水准器中心。

3.为获得准确的称量结果，在进行称量前必须使天平按通电源预热。

学术部庞一林11:39:31
二。

开机/关机
1.开机：使称盘空载并按压<ON>键，天平进行显示自检(显示屏所有字段短
时点亮)显示天平型号，当天平显示回零时，天平就可以称量了。

2.当遇到各种功能键有误无法恢复时，重新开机即可恢复出厂设置。

3.关机：确保称盘空载后按压<OFF>，天平如长时期不用，请拔去电源插头。

㈦、高压灭菌锅的使用：
一．不能使用此高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。

消毒这些物品将会导致爆炸或腐蚀内胆和内部管道，以及破坏垫圈。

二．含有盐分的液体漏出或溢出时，一定要及时擦干净，沿着盖子的密封圈要彻底擦干，否则会腐蚀容器和管道。

三．在打开盖子前，确认压力已降为零。

四．除蒸馏水外，不要倒任何液体于容器内。

五．每次使用前要先检查下水位。

㈧、显微镜使用规则
1. 显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。

2. 离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。

尽量避免频
繁开关显微镜电源。

㈨、超净台相关操作规则
1. 超净台使用前用紫外灯照射30min灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒。

2. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。

* 消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向灯内添加酒精时请注意。

3. 超净台中应摆放废液杯，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中，并冲洗晾干备用。

* 将废弃的枪头、管子内的残留液体打（倒）入废液杯后再弃入废品杯中，以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。

㈩、考勤制度必考：方式：刷卡，不定期签名抽查。

刷卡时间：早8：00，晚16:30-17：00。

考勤结果公布宣传栏，定期上报。

请假：请假需导师批准，然后把导师签署意见的请假单交实验室管理人员。

因事离岗需填写去向表，注明事由和时间段。

严禁代刷卡.一经发现，两人均按违反实验室管理条例处理。

门禁制度：方式：实验室授权人员使用校园一卡通刷卡进入。

准入程序：向实验室主任或分管领导申请批准，培训考核合格
权限区分：各授权人员按实验需要设置权限
注意：
1.非权限区不准擅自进入
2.严禁借用他人一卡通刷卡进入（本室人员也不行）
3.进出要随手关门，特别是大门
仪器使用要求：使用程序：
使用前登记：注明使用人，使用起始时间，仪器状况
严格按仪器操作流程使用
使用完毕必须清理仪器，登记结束时间。

预约制度
注明时间段及使用人
预约时效：预约只对当天有效
逾时30分钟，预约失效
预约次数：原则上一台仪器不能连续预约2轮。