生物 化学 实验室 常用试剂 大全

试剂配制方法

一、实验室常用储备液

（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）

在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。分装后高压蒸汽灭菌。室温贮存。注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。

（2）1mol/L Tri s·Cl

将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。

PH值HCl

7.4 70ml

7.6 60ml

8.0 42ml

应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。并使用质量更好的Tris。Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)

将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。

（4）甘油（10％，V/V）

用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。用0.22μm过滤器过滤除菌。分装成1ml每份，-20℃贮存。

（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)

在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。

注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。

（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml

70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。

（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）

将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。

（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）

将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。不要向NaOH颗粒中加水。烧杯可置于冰浴中，当颗粒完全溶解后，加蒸馏水至1L。注意：NaOH溶液的制备属于放热反应，液体制备要极为谨慎，预防玻璃器皿破碎和化学灼伤。如有条件，可使用厚的塑料烧杯。

（9） 3mol/L乙酸钠（PH5.2和PH7.0）

将408.1g乙酸钠·3H2O（M=136g/mol）溶于800ml蒸馏水中，加冰醋酸将PH值调至5.2，或用稀乙酸将PH值调至7.0，加蒸馏水定容至1L，等份分装，高压除菌，室温贮存。

（10）5mol/L NaCl

将292.2g NaCl溶于约800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，定容至1L。等份分装，高压除菌，室温贮存。

（11）1mol/L CaCl2

147g CaCl2·2H2O溶于约800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，加蒸馏水至1L。4℃贮存。

（12）1mol/L KCl

74.6g KCl溶于约800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，加蒸馏水定容至1L。高压蒸汽灭菌20min，室温贮存。理想的做法是将配好的溶液分装在灭菌管内，每小份约100μl，每份只使用一次。

（13）1mol/L MgCl2

20.3g MgCl2·6H2O，加水定容至100ml。室温贮存。

（14）1mol/L HCl

按以下顺序混合：913.8ml H2O，86.2浓盐酸。室温保存。

（15）1mol/L MgSO4

24.6g MgSO4·7H2O，加水定容至100ml。室温保存。

（16）1mol/L MnCl2

MnCl2的分子量为197.0。将197g MnCl2溶于约800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，蒸馏水定容至1L，室温贮存。

（17）1mol/L碳酸氢钠

将12.6g碳酸氢钠（M=84）溶于100ml蒸馏水中，体积调至150ml，即可获得1mol/L溶液，过滤除菌，室温贮存。

（18）1mol/L乙酸钾（KOAc，PH7.5）

将9.82gKOAc（M=98.14g/mol）溶于90ml超纯水中，用2mol/L乙酸将PH 调至7.5，加纯水至100ml，将溶液等份分装，-20℃贮存。

（19）8mol/L乙酸钾

将78.5g乙酸钾溶于80ml超纯水中，再将溶液体积调至100ml，经0.22μm过滤器除菌，室温贮存（时间不限）。

（20）10mol/L氯化锂（LiCl）

无水氯化锂分子量为42.4，取424g无水氯化锂溶于1L蒸馏水中配成10mol/L的溶液，高压除菌，室温贮存。氯化锂的一水合物易潮解，一般不用。（21）1mol/L乙酸镁

将214.46g乙酸镁·4H2O溶于800ml蒸馏水中，加蒸馏水将体积调至1L，高压除菌，室温贮存。

二、实验室常用缓冲液

（1）50×TAE电泳缓冲液（1L）

试剂用量

Tris碱242g

冰醋酸57.1ml

Na2EDT A·2H2O 37.2g

加蒸馏水定容至1L

（2）10×TBE电泳缓冲液（1L）

试剂用量

Tris碱108g

硼酸55g

0.5mol/L EDTA(PH8.0) 40ml

加超纯水定容至1L

（3）10×TPE缓冲液

试剂用量

Tris碱108g

85%磷酸(1.679g/ml) 15.5ml

0.5mol/L EDTA(PH8.0) 40ml

加超纯水定容至1L

（4）1mol/L磷酸钠缓冲液（PH6.0-7.2）（1L）

将1mol/L NaH2PO4（单盐）和1mol/L Na2HPO4（二盐）储备液按下表说明混合，可得到所需的不同PH值的1mol/L磷酸钠缓冲液1L。配制1mol/L储备液：将138g NaH2PO4·H2O（M=138g/mol）溶于足量蒸馏水制成1L溶液；将142g Na2HPO4（无水，M=142g/mol）溶于足量蒸馏水配成1L溶液。

1mol/L NaH2PO4的体积（ml）1mol/L Na2HPO4的体积（ml）最终PH值877 123 6.0

850 150 6.1

815 185 6.2

775 225 6.3

735 265 6.4

685 315 6.5

625 375 6.6

565 435 6.7

510 490 6.8

450 550 6.9

390 610 7.0

330 670 7.1

280 720 7.2 （5）0.1mol/L磷酸钠缓冲液（由1mol/L储备液制得）（25℃）（100ml）

1mol/L Na2HPO4的体积（ml）1mol/L NaH2PO4的体积（ml）最终PH值

7.9 92.1 5.8

12.0 88.0 6.0

17.8 82.2 6.2

25.5 74.5 6.4

35.2 64.8 6.6

46.3 53.7 6.8

57.7 42.3 7.0

68.4 31.6 7.2