常用缓冲液的配制
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂,主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内,有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种,其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法,包括常用缓冲液的配
制方法,复合缓冲液的配制方法,以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液,可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如,将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合,可以
得到一种磷酸缓冲液,其碱度为pH7.0。
同样,如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液,可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合,以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液,可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如,将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合,可以
得到一种碳酸缓冲液,其碱度为pH7.0。
同样,如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液,可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合,以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1.氯化钾-盐酸缓冲液(0・2mol/L)邻苯二甲酸氢钾:分子量=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 4.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85Na2HPO4分子量=141.98,0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4・2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.61g/L。
C6H8O7•H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
5.使用时可以向每升混合液中加入1g酚,若最后p H值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0・1mol/L)柠檬酸C6H8O7・H2O:分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
常见缓冲液配制大全
常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0,即得。
乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。
巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。
巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。
巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。
甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L 氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀,即得。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
常用的45种缓冲溶液的配制
常用的45种缓冲溶液的配制1.乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0,即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。
7.巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。
8.巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g 加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。
9.甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀,即得。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液(Buffer)在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用,它可以维持溶液的稳定性,调节pH值,同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法:- 配制0.1 M Tris缓冲液(pH 7.4):a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器,并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器,加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌,使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4,直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法:-配制10×PBS缓冲液:a.在1L去离子水中加入80gNaCl,2gKCl,14.4gNa2HPO4,2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液:a.取10×PBS缓冲液100mL,用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法:-配制50×TAE缓冲液:a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base,57.1 mL 0.5 M EDTA,100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液:a.取50×TAE缓冲液20mL,用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下:- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法,具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时,一定要注意使用高纯度的试剂,并按照配制方法进行准确的实验操作。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH 值有变化,再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L )6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O :分子量294.12,0.1mol/L 溶液为29.41克/毫升。
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L ) Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09,0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14,0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01,0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH 2PO 4: pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na 2HPO 4:pKa1=7.21,pKa2=12.32配酸性缓冲液:用NaH2PO 4,pH =1~4,配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH =6~8, 配碱性缓冲液:用Na 2HPO 4,pH =10~12。
用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度(pH值)的溶液,它可以稳定溶液的pH值,满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液,因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液:磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液,在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法:-0.2M磷酸盐酸(pH2.5):用稀磷酸(H3PO4)溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐(pH2.5):用0.2M磷酸钠(Na2HPO4)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液:乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法:-0.1M乙酸酸(pH3.6):用浓烧碱(CH3COOH)溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐(pH3.6):用0.1M乙酸钠(CH3COONa)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液:碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法:-0.1M碳酸酸(pH6.0):用稀碳酸(H2CO3)溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐(pH6.0):用0.1M碳酸氢钠(NaHCO3)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液:Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液,在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法:- 0.1 M Tris酸(pH 8.0):用三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐(pH 8.0):用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液,然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂,可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸,加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至3.6之间,X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸,加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至3.8之间,X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法:根据上表中的数据,取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸,加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围:pH值在2.2至8.0之间,具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中,正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章:柠檬酸的浓度可以用毫升表示,其浓度数据如下:9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4,其分子量为141.98,0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05,0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后,Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22,0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O,其分子量为210.14,0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据:pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L):10使用时可以每升中加入1克酚。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。
配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中,为了稳定反应介质,保持反应环境不变,在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度,
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。
因此,缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。
以下是各种缓冲液的配制方法。
一、PBS缓冲液(磷酸盐缓冲盐水)
1、配制PBS缓冲液,准备好以下试剂:
10×PBS缓冲液:NaCl 80 g,KCl 2 g,Na2HPO4 14.4 g,KH2PO4 2.4 g。
用蒸馏水调节至1 L。
2、按照以下比例制备:
0.5×PBS缓冲液:10×PBS 50 mL,蒸馏水450 mL,混合搅拌均匀即可。
二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM,EDTA pH8.0 1 mM。
Tris-HCl pH7.4,Tris-HCl pH8.0,Tris-Cl pH8.0,Tris-HCl pH8.3,Tris-HCl pH8.5,Tris-HCl pH8.8,Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5:Tris 7.4 g,NaCl 8.8 g,HCl 2 mL,蒸馏水至1 L。
MES 20 mM,NaOH 0.5 M,NaCl 100 mM。
七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M,NaOH。
HEPES缓冲液:HEPES 1 M约5 mL,NaOH 2 M溶液若干,蒸馏水至100 mL。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸/醋酸钠缓冲溶液:醋酸/醋酸钠缓冲溶液具有较宽的酸碱度范围,在生物化学以及分析化学实验中得到广泛应用。
其配制方法如下:(1)准备一定浓度的醋酸溶液,可以采用浓缩醋酸与适量的水混合而成。
(2)根据所需的缓冲溶液pH值,计算所需浓度的醋酸钠。
(3)将计算所需的醋酸钠溶解在适量的去离子水中,得到所需的缓冲溶液。
2.磷酸盐缓冲溶液:磷酸盐缓冲溶液在生物化学以及分子生物学实验中常用于维持pH值。
以下介绍两种常见的磷酸盐缓冲溶液的配制方法:(1)磷酸盐酸性缓冲液:-准备所需的酸性磷酸盐缓冲液,将一定量的二氢磷酸钠溶解在适量的去离子水中。
-根据所需的pH值,使用盐酸调节溶液的酸度,直至达到所需的pH 值。
(2)磷酸盐碱性缓冲液:-准备所需的碱性磷酸盐缓冲液,将一定量的氢磷酸二钠溶解在适量的去离子水中。
-根据所需的pH值,使用氢氧化钠调节溶液的碱性,直至达到所需的pH值。
3.碳酸盐缓冲溶液:碳酸盐缓冲溶液在一些生物化学实验中用于控制pH值。
以下介绍两种常见的碳酸盐缓冲溶液的配制方法:(1)酸性碳酸盐缓冲液:-准备所需的酸性碳酸盐缓冲液,将一定量的二氧化碳通过气体输注器向含有一定浓度的NaHCO3溶液中通入,直至溶液中的二氧化碳饱和。
(2)碱性碳酸盐缓冲液:-准备所需的碱性碳酸盐缓冲液,将一定量的Na2CO3溶解在适量的去离子水中。
4.三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液:三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液在DNA和RNA等生物大分子的提取和纯化过程中常用作酶及细胞的裂解缓冲液。
以下是常见的三氯乙酸/氯化钾缓冲溶液的配制方法:(1)将一定量的三氯乙酸和氯化钾溶解在适量的去离子水中,混合均匀。
(2)根据所需的缓冲溶液pH值,使用醋酸或氢氧化钾调节溶液的pH 值,直至达到所需的pH值。
5.甘氨酸缓冲溶液:甘氨酸缓冲溶液在生物化学实验中常用于维持pH值,并在一些药物的制剂和生物制品的稳定性中得到应用。
以下是甘氨酸缓冲溶液的配制方法:(1)准备一定浓度的甘氨酸溶液,将甘氨酸与适量的去离子水溶解。
53种常见缓冲液配制方法
53种常见缓冲液配制方法
一、磷酸缓冲液
1.0M磷酸缓冲液的配制方法
(1)将0.883克无水磷酸二铵(Na2H2PO4·2H2O)加入5升水中,
然后煮沸,以消除少量的氧气和杂质,然后用烧杯内的冻干机进行冻干;
(2)将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中,加热至90℃,按1.0M标准比重进行称重,比重合适时停止加热;
(3)将上述溶液加入15升的容量瓶中,加入足够的水,使它达到正
确的pH值(也就是7.00),用它精确测量pH值;
(4)最后,用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重,最终得到
1.0M磷酸缓冲液。
二、氯化缓冲液
1.0M氯化缓冲液的配制方法
(1)将0.314克氯化钠加入到5升水中,然后煮沸,以消除少量的
氧气和杂质,然后用烧杯内的冻干机进行冻干;
(2)将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中,加热至90℃,按1.0M标准比重进行称重,比重合适时停止加热;
(3)将上述溶液加入15升的容量瓶中,加入足够的水,使它达到正
确的pH值(也就是7.00),用它精确测量pH值;
(4)最后,用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重,最终得到
1.0M氯化缓冲液。
三、氨基乙酸缓冲液
1.0M氨基乙酸缓冲液的配制方法。
史上最全缓冲溶液配制方法
常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05M)X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0 甘氨酸分子量=75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05M)X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量=2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/mlpH0.2MNa2HPO4/ml0.1M柠檬酸/ml2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量=141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量=178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量=210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M柠檬酸C6H8O7·H2O/g氢氧化钠NaOH/g浓盐酸HCl/ml终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10 使用时可以每升中加入1g酚,若最后pH有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液,用于调节溶液的pH值,使其保持在特定的pH范围内。
常用缓冲溶液的配制方法有许多种,下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。
一、Tris缓冲液配制方法:Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:Tris碱(Tris base,化学名三羟基甲基氨基甲烷)。
2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱,并将其溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的Tris碱溶液。
3. 调节溶液pH值:使用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节Tris溶液的pH值。
通常,Tris缓冲液的pH范围为7-9,具体的pH值取决于实验的要求。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积,通过加入蒸馏水来调节。
二、Phosphate缓冲液配制方法:Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液,其配制方法如下:1.准备所需的试剂:磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)。
2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。
3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积。
三、Acetate缓冲液配制方法:Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液,在酶反应、DNA电泳等实验中常用,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:乙酸(Acetic acid)和醋酸钠(Sodium acetate)。
2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。
3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。
4.定容:将溶液调节至最终所需体积。
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够帮助控制溶液酸碱性的化学物质,它可以通过接受或释放氢离子来防止溶液的pH值发生剧烈变化。
缓冲液在许多科学实验、生物学研究、工业生产以及医药领域中都有广泛应用。
常用的缓冲液配方包括以下几种:1.乙二胺四乙酸(EDTA)缓冲液:EDTA缓冲液是一种用来稳定金属离子浓度、防止金属离子的沉淀和垢痕形成的缓冲液。
其配方如下:-0.1MEDTA(乙二胺四乙酸)溶液10mL- 0.2 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0) 90 mL-蒸馏水900mL2.乙醇胺缓冲液:乙醇胺缓冲液通常用于DNA或RNA的电泳和杂交实验中。
其配方如下:-1M乙醇胺9mL-0.5MEDTA1mL-蒸馏水90mL将乙醇胺缓冲液通过添加适量的盐酸来调节pH值至所需的范围。
3.乙二醇缓冲液:乙二醇缓冲液常用于蛋白质的纯化和储存过程中。
其配方如下:-0.2M乙二醇10mL- 0.1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 7.0) 90 mL按需添加其他添加剂如蛋白酶抑制剂或抗菌剂。
4.磷酸盐缓冲液:磷酸盐缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,适用于酶反应、DNA/RNA杂交等实验。
常用的三种pH值的配方如下:-pH5.8:0.05MNa2HPO4溶液和0.05MNaH2PO4溶液的体积比为1:4-pH7.0:0.1MNa2HPO4溶液和0.1MNaH2PO4溶液的体积比为1:9-pH8.0:0.2MNa2HPO4溶液和0.2MNaH2PO4溶液的体积比为1:95.PBS缓冲液:PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,适用于细胞培养、免疫染色、蛋白质浸泡实验等。
其配方如下:-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-蒸馏水1L将以上成分溶解在蒸馏水中,调节pH至7.4这些缓冲液可以满足大多数实验和应用的需求,每种缓冲液的最佳使用范围可能略有不同。
在实验前应该仔细阅读相关文献,了解所使用缓冲液的特点和最适宜的pH范围。
常用缓冲溶液的配制
常用缓冲溶液的配制缓冲溶液是一种可以稳定溶液pH值的溶液,广泛应用于化学、生物学、药学等领域。
在实验研究和工业生产中,常用的缓冲溶液有磷酸盐缓冲溶液、醋酸缓冲溶液、碳酸氢盐缓冲溶液等。
本文将介绍这几种常用缓冲溶液的配制方法和相关注意事项。
一、磷酸盐缓冲溶液的配制磷酸盐缓冲溶液可通过调节磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例来控制溶液的pH值。
以下是磷酸盐缓冲溶液的配制方法:1. 磷酸盐缓冲液的配方:- 磷酸二氢盐(KH2PO4):用量根据所需pH值确定。
- 磷酸氢二盐(Na2HPO4):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例。
- 将磷酸二氢盐和磷酸氢二盐称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
二、醋酸缓冲溶液的配制醋酸缓冲溶液是一种酸性缓冲溶液,可以维持酸性环境下的稳定pH值。
以下是醋酸缓冲溶液的配制方法:1. 醋酸缓冲液的配方:- 醋酸(CH3COOH):用量根据所需pH值确定。
- 乙酸钠(CH3COONa):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的醋酸和乙酸钠的比例。
- 将醋酸和乙酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
三、碳酸氢盐缓冲溶液的配制碳酸氢盐缓冲溶液可用于调节中性或弱碱性环境下的溶液pH值。
以下是碳酸氢盐缓冲溶液的配制方法:1. 碳酸氢盐缓冲液的配方:- 碳酸氢钠(NaHCO3):用量根据所需pH值确定。
- 碳酸钠(Na2CO3):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的碳酸氢钠和碳酸钠的比例。
- 将碳酸氢钠和碳酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
注意事项:1. 在配制缓冲溶液过程中,应严格按照所需pH值确定各种缓冲盐的比例。
53种常见缓冲液配制方法(总结)
53种常见缓冲液配制方法(总结)
第一类:氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液:添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中,按需可加入一定量的氢氧化钠,并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L,即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液,其综合离子强度约为 0.150 mol/L。
2、硝酸缓冲液:将一定量的硝酸钾溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L,即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液,其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。
3、三甲基磺酰胺缓冲液:将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L,即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液,其综合离子约为 0.10 mol/L。
第二类:基态缓冲液
1、乙醇缓冲液:将一定量的乙醇溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L,即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液,其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。
2、氢氟酸缓冲液:将一定量的氢氟酸溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L,即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液,其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。
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常用缓冲液的配制(TBS,PBS)
科研探索2007-04-23 13:25:54 阅读728 评论0 字号:大中小订阅
这是各种缓冲液的配制方法
1. 0.01MPBS(PH7.2)液
NaCl 8g
Na2HPO4 1.15g
KH2PO4 0.2g (NaH2PO4)
加双蒸水至1000ml
2. 0.05MTBS(PH7.4)液
Tris(三羟甲基胺基甲烷) 12.1g
Nacl 17.5g
加双蒸水至1500ml
在搅拌下加浓HCL至PH7.4,再加双蒸水至2000ml。
3. 0.02MTBS(PH8.2)液
Tris 4.84g
Nacl 17.5g
BSA 2.0g
NaN3 1.0g
加双蒸水至1500ml
在搅拌下加浓HCL至PH8.2,再加双蒸水至2000ml。
(BSA—牛血清白蛋白;NaN3—叠氮钠,为防腐剂)。
4. 0.05MTB液(PH7.6)
先配制0.05MTB液:
Tris 60.75g
1N HCL 约420ml
双蒸水至1000ml
配制方法:先以少量双蒸水(300ml)溶解Tris,加入HCL后,再用1N HCL 或1N NaOH将PH值调至7.6,再加双蒸水至1000ml。
用时将0.5MTB稀释10倍,即为0.05MTB液(PH7.6)液
磷酸缓冲液(Gomori缓冲液)
最通用的磷酸盐缓冲液是以其发明者Gomori命名的。
该缓冲液是由单价磷酸二氢盐和双价磷酸一氢盐的混合物组成的。
通过变化每种盐的量,就可配制出pH 5.8至pH8.0之间缓冲液(见表A1-3A和A1-3。
磷酸盐有很高的缓冲能力,在水中高度可溶。
但是,它们也有不少潜在的缺点:
•磷酸盐缓冲液抑制许多酶促反应和步骤,而这些酶促反应和步骤恰恰是分子克隆的基础,其中包括许多限制酶对DNA的切割,DNA的连接和细菌转化等。
•因为磷酸盐在乙醇中沉淀,不能用于沉淀DNA和RNA。
•磷酸盐螯合像Ca2+和Mg2+这样的阳离子。
表A1-3A 25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制
pH 1 mol/L K2HP04的体积/mL 1 mol/L KH2PO4的体积/mL
5.8 8.5 91.5
6.0 13.2 86.8
6.2 19.2 80.8
6.4 2
7.8 72.2
6.6 38.1 61.9
6.8 49.7 50.3
7.0 61.5 38.5
7.2 71.7 28.3
7.4 80.2 19.8
7.6 86.6 13.4
7.8 90.8 9.2
8.0 94.0 6.0
注:根据Green(1933)的资料汇编。
用蒸馏水将混合的两种1mol/L的贮存液稀释至1000mL。
根据Henderson-Hasselbaleh方程计算其pH值:
pH=pK'+Log ,在此,pK'=6.86(25℃)
表A1-3B 25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制
pH 1mol/L Na2HPO4的体积/mL 1mol/L NaH2P04体积/mL
5.8 7.9 92.1
6.0 12.0 88.0
6.2 1
7.8 82.2
6.4 25.5 74.5
6.6 35.2 64.8
6.8 46.3 53.7
7.0 57.7 42.3
7.2 68.4 31.6
7.4 77.4 22.6
7.6 84.5 15.5
7.8 89.6 10.4
8.0 93.2 6.8
注:根据ISCO(1982)的资料汇编。