金黄色葡萄球菌的概况

金黄色葡萄球菌的概况

摘要：本文旨在讲述金黄色葡萄球菌的目前现状，以及其主要检测方法，代谢物肠毒素检测方法，耐药检测和幼儿园发病原因，这些对金葡菌的检测、治疗和预防起到了很好的帮助。关键词：金黄色葡萄球菌；检测；肠毒素；耐药；发病

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，SA）是食品卫生标准中规定不得检出的常见食物中毒致病菌，是食品卫生微生物常规检测项目之一[1]。SA是葡萄球菌属，革兰染色阳性，呈葡萄状排列。当衰老、死亡、被吞噬后常转为阴性。无鞭毛、无芽胞、体外培养一般不形成荚膜。在浓汁及液体培养基中常单个、成对、或短链状排列。在普通培养基上即可生长，当加入血液或其他营养物质生长的更好。需氧或兼性厌氧。最适pH7.4，最适温度28-38℃，致病菌在37℃生长最好。某些菌株耐盐性特强，在100-150g/L氯化钠培养基中都能生长。在某些影响细胞壁形成物质的作用下可形成L型。触酶试验阳性。多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气，致病菌株可分解甘露醇。SA能产生大量核酸酶，该酶可耐受100℃30min不破坏，降解DNA和RNA的能力较强。此酶对检测葡萄球菌的致病性与血浆凝固酶具有同等价值。

由于致病金黄葡萄球菌能分泌肠毒素，因此一旦细菌污染食品，并在合适的温度环境下，细菌可以大量繁殖并产生肠毒素，从而引起消费者食物中毒[2]。金黄色葡萄球菌是一种能引起食物中毒的重要细菌。根据美国疾病控制中心的一些报告，由SA引起的食物中毒居第二位，仅次于大肠杆菌，在细菌性食物中毒中的比例为33％。加拿大的发生率更高，占细菌性食物中毒的45％[3]。中国每年发生SA中毒事件也屡见不鲜，因此造成每年的经济损失相当惨重，目前世界各国都把SA定为重要的食品卫生法定检测项目。在1960年，人们将一种半合成的青霉素-甲氧西林第一次应用于临床，而且仅仅一年之后，在英国就发现了首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistance Staphylococcus aureus,MRSA），再后来，在世界范围内MRSA便以惊人的速度蔓延开去，继而发展成为医院内最最常见的微生物病原菌，与乙型肝炎、艾滋病同为当今世界三大感染顽疾[4]。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院内重要感染的致病菌，其发病率和病死率在世界各地均很高，美国疾病控制中心在2003年做了大量工作，根据统计了解，每年因为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染，大约有数十万人住院接受治疗，在医院内由SA引起耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染，其分离程度已经高达80%以上，而且呈向社区扩散的趋势[5]。1996年，日本报告了第一例对万古霉素敏感性下降的金葡菌[6] ，人们把万古霉素认为是治疗SA的最后防线，最为经济有效的药物，不过在20世纪90年代后期又出现了耐万古霉素的SA，开始表现为万古霉素中介金黄色葡萄球菌（vancomycin intermediate-susceptible staphylococcus aureus ，VISA），美国、英国、德国、意大利、韩国等相继报道检出了VISA[7]，；1997年美国分离了2例VISA[8]同期，在欧洲与亚洲多个国家均有类似报到[9]。

国内外对SA的检测方法，主要有传统分离培养及生化鉴定、显色培养基鉴定、酶联免疫(ELISA)、PCR、美国3M公司的petrifilm培养片等方法。现行国标检测食品中的SA主要是采用传统的分离培养之后进行生化鉴定，整个检测过程获得最终结果需时5天左右。而且免疫学的ELISA法所用的抗体基本上全部依赖国外进口，试剂也相对昂贵；但传统的PCR法却需要提取DNA，加大了人力、物力的消耗，成本提高。对于SA的检测，很多研究者都来检测致使其食物中毒的肠毒素基因[10]，尤其是用于食物中毒事故的调查，所以对于研发一种快速、便捷的检测方法是目前食品安全检测的当务之急。

SA的常规检验检验程序：检样处理→增菌→分离→分纯→溶血试验→革兰染色镜检→血浆凝固酶试验→肠毒素检验[11]。常规检验具有操作简便，所需设备简单，成本相对较低的优点，但其操作繁琐，检测时间较长，且灵敏度较低[12]。

SA的快速检测方法有很多，概括起来主要包括快速鉴别培养基、微型化生化试剂盒[13]、免疫学方法（抗原抗体的反应），以及以DNA为基础的分子生物学方法（PCR技术、实时荧光定量PCR、核酸探针技术、LAMP方法），微型化生化试剂盒具有的轻便、快速、简易的好处，是未来微生物检测，有发展前景的检测手段之一。MRSA的检测方法主要是用PCR法，但其存在外源性DNA污染、假阴性等问题[14]，PCR技术可以扩增任何期望的DNA片断和目的基因，并且具有快速性和特异性，所以PCR技术在食品检验领域中常常有重要的实际应用价值。核酸探针具有特异性强的优点，能在多种病原体上检测，但价格比较高，对于基因工程以及医学诊断将会得到广泛地应用。LAMP方法已经在很多领域得到应用，其具有高特异性、高灵敏性和简便、快速以及低成本的特点。优化设计几对以nuc基因为靶序列的LAMP引物，可以进一步提高LAMP法检测黄色葡萄球菌的灵敏度，可使得该方法得到更广泛的应用。各种方法有各自的优点，选择适当合适的方法才是最好的，这对于我们检验人员提高自己是必要的。

金黄色葡萄球菌是一种存在于自然界中重要的食源性致病菌。金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin．SE)是SA的代谢产物，肠毒素对于人体是相当不利的，常常引起食物中毒。中国每年发生此类中毒事件也非常多[15]。食物被金黄色葡萄球菌污染，也相应产生了大量肠毒素，主要富集在原料或在生产、包装和烹调过食物中，并在在适当条件下繁殖产生更多的肠毒素。如果食品和食品原料中污染有SA就有可能产生肠毒素，就有食物中毒的危险，所以，对于肠毒素的检测是必要的。我们对肠毒素的检测方法常用的是PCR试验检测。

随着产生第一例耐药的金黄色葡萄球菌后，对于MRSA的监测，以及了解MRSA的感染、耐药现状、感染的危险因素，和对预防和治疗MRSA就具有十分重要的意义。近年来随着抗菌种类的不断增加及临床上抗生素的广泛使用，金黄色葡萄球菌的耐药性也逐渐增加，尤其是以MRSA引起的严重感染，其发生率已越来越高，已然成为医院感染的重要致病菌之一。所以对于治疗和预防做好准备，特别是抗生素的使用，应严格得到控制。而MRSA几乎对所有D-内酰胺酶类抗菌药物耐药，甚至累及剑红霉素、左氟沙星和庆大霉素[16]。而且MRSA的传播途径广，致病性强，耐药性强，最容易导致医院内部暴发流行，已经成为临床上的治疗难点。

由于MRSA呈多重耐药，并常引起院内爆发流行，因此处理和用药方案上与MRSA截然不同，临床微生物实验室，应必须以快速准确的药敏试验对其进行鉴别并报告临床。如果发现MRSA感染的新病例，应及时进行隔离治疗，严格用消毒措施，改善病房的卫生环境等。因为手是传播MRSA的关键性媒介，所以对MRSA感染流行的病房进行加强消毒，特别是手至关重要，因此，在接触患者前后应认真洗手，不要细菌吸附在手上造成二次传染。

SA在医学上还有“嗜肉菌”的别称，SA常引起切口、创伤、疮、痈、败血症等局部性化脓感染，其肠毒素可引起食物中毒，表现为急性胃肠炎[17]。SA广泛存在于自然界，如大气、水、土壤、饲料和一些物品上，可以说有人的地方就有SA,所以也存在于人、动物的体表、鼻咽喉及肠道[18]。毛巾，纤维类织物，是极易沾染SA的物品。在幼儿园中，老师就常用毛巾给幼儿擦拭脸和手。而毛巾干净与否直接影响到幼儿园同学的健康安全。所以对于其消毒是至关重要的。幼儿园的毛巾质量常常不合格，主要原因是由于幼儿园的毛巾比较陈旧，清洗简单，常常有大量细菌吸附在上面。而且其表面常常附有大量的分泌物，汗液、皮屑。毛巾中不仅有金黄色葡萄球菌，还有沙眼衣原体，淋球菌、霉菌等多种微生物[19]，幼儿的免疫系统发育不成熟，免疫能力也低下，所以容易感染病原菌。因此管理人员就要按时对毛巾采用正确的消毒方法。还要进行一些预防措施，如毛巾使用3个月左右就要即时更换。在流感病毒流行的季节，有关部门加强对幼儿园的消毒指导和管理，用多晾晒、高温蒸煮等方式对毛巾进行处理。

现如今，金黄色葡萄球菌仍然是食品安全的隐患，是卫生行业一心想要消灭的病种。金