真菌βD葡聚糖检测与真菌感染诊断
(1,3)-β-D葡聚糖检测对侵袭性真菌感染的诊断意义
【 键 词】 （ ，）８Ｄ 葡聚 糖 ； 真 菌 ； 侵 袭性 感 染 关 １３ 一一 －
Ｄ１ １ ． ９ ９ ｊ ｉｓ ． ６ ２９ ５ ． ０ ０ １ ． ０ ０： ０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ —４ ５ ２ １ ． ７ ０ ６
李 军 ， 浚霁。 陈 伟 ， 王 ， 黎 敏 邓 少丽。 陈 呜。 １ 青海省 西 宁市解放 军 第四 医院 ， ， （． 检 验科 ８ ０ ０ ；． １ ０ ７ ２ 第三 军 医大学 大坪 检验科 ， 庆 重 ４０ ４ ） ０ ０ ２
【 要】 目的 摘
探 讨 血 浆 （ ， ） Ｄ 葡 聚 糖检 测 对侵 袭性 真 菌感 染 的诊 断 价 值 。 方 法 应 用 ＭＢ ８ １ ３一 －０微 生 物 动
ｗｅ ｅ ５ ｐ ｓ ｔ ｅ ｐ ｔ ｎ ｓ ｗｅ ｅ ｉ ｅ ｔ ｉｄ ｂ ｈ ｅ ｅ ｔｏ ｆ ｐａ ｍａ （ ， 一 － ｇ ｕ ａ ｗｉ ｈ ｏ ｉ ｖ ａ ｅ ｏ ｒ ｏ ｉｉ ａ ｉ ｔ ｒ ｄ ｎ ｉ ｅ ｙ ｔ ｅ ｄ ｔ ｃ ｉｎ ｏ ｌ ｓ ３ ｖ ｅ ｆ １ ３） ７Ｄ－ ｌ ｃ ｎ， ｔ ｔ ｅ ｐ ｓｔ ｅ ｒ ｔ ｆ ｈ ｉ
２． ａ ｎ Ｈ ｏｓ ｔ ｌ， Ｄ ｐｉ ｇ ｐｉａ Ｔｈｉｄ ｉｉａ ｙ Ｍ ｅ ｃ ｒ Ｍ ｌｔ ｒ ｄｉａｌＵｎｉ ｅ ｓ ｔ ， ｖ ｒ ｉｙ Ｃｈｏ ｇｑｉ ｇ ００ ｎ ｎ ４０ ４２， Ｃｈｉ ａ ｎ
［ ｓｒｃ］ Ｏｂ ｅｔ ｅ Ｔｏｅ ｐｏ ｅｔｅｄａ ｎ ｓｉ ａｕ ｆｐａｍａ（ ， ） Ｄ－ｌ ｃｎ ｉ ｈ ｅｅ ｔ ｎｏ ｖ ｓｖ Ａｂｔａ ｔ ｊｃｉ ｖ ｘ ｌｒ ｈ ｉｇ ｏ ｔｃｖ ｌｅｏ ｌｓ １ ３一 ｇｕ ａ ｎ ｔ ｅｄ ｔｃｉ ｆｉ ａ ｉｅ ｏ ｎ
血清（1-3）-β-d葡聚糖检测判断肺部侵袭性真菌感染的诊断价值
572014年2月第21卷第3期血清（1-3）-β-D 葡聚糖检测判断肺部侵袭性真菌感染的诊断价值谢 颖肺部侵袭性真菌感染（PIF I ）的诊断目前主要根据患者痰培养或肺组织活检，但操作复杂，尤其是肺组织活检，临床可操作性差，不易开展。
（1-3）-β-D 葡聚糖为一种多糖，普遍存在于真菌的细胞壁中，约占真菌细胞壁干重的50％。
笔者对我院送检痰标本患者的血清进行（1-3）-β-D 葡聚糖检测，评价其在PIFI 中的诊断价值。
1 资料与方法1.1 一般资料与分组 2008年6月至2012年11月，送检我科的支气管镜吸引痰标本及其患者血清各77份。
有广谱抗生素应用史41例（53.2%），糖皮质激素使用史31例（40.3%），体内置留导管22例（28.6%），恶性肿瘤史8例（10.4%）。
痰标本培养真菌阳性28例，设为感染组；阴性49例，设为非感染组。
1.2 血清（1-3）-β-D 葡聚糖检测 检测流程按试剂盒要求逐步进行。
① 将事先准备待检的静脉血2ml 置入离心管中以2900r /min 的转速离心6min ，然后吸取上层血清100μl 置入900μl 处理液中，振荡摇匀。
将其放置在恒温水浴箱中70℃孵育10min ，然后快速放置到冰水中。
② 将制备好的标本200μl 放入含有主反应试剂A 的管中，充分振荡混匀并移植标准玻璃反应管中，放入MB-80微生物快速动态检测系统中进行反应。
③ 反应1h 后进行结果判断。
1.3 统计分析 计量资料以（x-±s ）表示，组间比较用t 检验。
计数资料以百分数表示，组间比较采用χ2检验。
Stata 12.0统计绘制ROC 曲线，并根据敏感性和特异性的最佳组合判断血清（1-3）-β-D 葡聚糖的临界值，并给出相应的该临界值下的诊断PIF I 敏感性和特异性，计算曲线下面积，双侧P ＜0.05认为差异有统计学意义。
2 结果2.1 两组基本情况比较 年龄：感染组（66.8±9.2）岁，非感染组（67.4±11.1）岁，差异无统计学意义（t =0.24，P ＞0.05）。
血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养在诊断深部真菌感染的临床价值
做 真 菌 培 养 。 过 回顾 性 调 查 ， 通 了解 临 床 用 药 及 患 者 是 否 症 状 缓 解 作 为 临 床 诊 断标 准 ． 以此 为 标 准 比较 并 两 者 的 差异 。 结 果 １８例 患 者 中使 用 抗 真 菌药 物且 症 状 缓 解 ３ ０ ２例 ．使 用 抗 真 菌 药 物 症 状 未 缓 解 和未
ｔ ｍ ａｕｅ（— ）ｐ Ｄ ｇｕａ ｏ Ａ ｒ ｕｕｔ２ ０ ．１ ａ ｌｓ ｅｉｈｒｌ ｌ ｄ ｒｓ ｏ ｅｓｒ １ ３一 — —ｌｃｎｆ ｍ ｐ ｌｏＡ ｇｓ ０８ Ｉｅｓｍｐｅ ｒ ｅａ ｂｏ ，ｅ－ ｒ ｉｔ ， ｌ ｌ ｐ ｐ ｏ
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1—3—β—D葡聚糖动态检测在深部真菌感染抗真菌药物疗效评价中的应用
1—3—β—D葡聚糖动态检测在深部真菌感染抗真菌药物疗效评价中的应用目的：探讨血浆1-3-β-D葡聚糖（BG）动态检测在深部真菌感染抗真菌药物疗效评价中的应用价值。
方法：选取38例疑似深部真菌感染患者作为观察对象，应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒定量检测血浆1-3-β-D葡聚糖含量，并与真菌培养进行对照。
结果：BG动态检测法与真菌培养法检测阳性结果均为18例时，BG动态检测阳性而真菌培养为阴性共20例，也即当BG动态检测法均为阳性时，真菌培养法阳性检出率为47.4%。
38例患者中21例經抗真菌药物治疗后血浆BG呈下降趋势，降至健康水平（BG 值<10 pg/ml）。
结论：血浆1-3-β-D葡聚糖动态检测法较传统的真菌培养法更简便、快捷、阳性率高，可作为抗真菌药物疗效评价的重要指标。
标签：血浆1-3-β-D葡聚糖；深部真菌感染；抗真菌药物近年来，由于广谱抗菌药物、糖皮质激素的广泛应用，临床深部真菌感染的发病率和死亡率呈明显上升趋势，而传统的诊断方法，如真菌培养、病理组织性等方法由于耗时长、阳性率低、费用高而难以实现及早诊断及早治疗的目的。
基于此，本文笔者探讨了目前较为流行的血浆1-3-β-D葡聚糖动态检测法诊断深部真菌的可行性和效果，结果证实动态检测法可作为抗真菌药物疗效评价的重要参考指标。
现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2010年7月-2011年6月笔者所在医院收治的38例疑似深部真菌感染患者，血液检测血浆1-3-β-D葡聚糖动全部≥50 pg/ml。
以上38例患者均动态检测3次血浆1-3-β-D葡聚糖水平，取平均值，再对38例患者至少1次真菌培养。
1.2 方法1.2.1 仪器与试剂选用北京金山川科技公司提供的MB-80微生物动态快速检测系统、GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒，及附属的T01智能恒温仪、冰浴槽。
1.2.2 检测方法（1）取静脉血2 ml置入无热源肝素钠真空采血管，3000 r/min 离心，分离血浆；（2）提取上述血浆0.10 ml加入0.9 ml样品处理液D中，混匀后置于70 ℃恒温10 min，取出后迅速注入冷水浴中，并冷却至37 ℃以下，作为待测血浆样品；（3）取待测血浆样品0.2 ml加入酶反应主剂中（冻干粉），溶解后转移至无热原平底反应管中，插入MB-80微生物动态检测系统中进行反应，1 h后自动计算待测血浆中1-3-β-D葡聚糖含量。
血浆(1-3)-β-D-葡聚糖检测与真菌培养在侵袭性真菌感染诊断中的应用
析 １ ３ ８例 疑 似 侵 袭性 真 菌感 染 住 院患 者 的血 浆 （ １ — ３ ） 一 ８ 一 Ｄ － 葡 聚 糖检 测结 果 以及 不 同部 位 真 菌 培养 结果 ， 分 别 计 算
两种方法及联合检测的灵敏度 、 特异度 、 阳性 和 阴性 预 测 值 。结 果 １ ３ ８例 疑 似 侵 袭 性 真 菌感 染 的 患 者 中确 诊 患
杨 朵 ，马 冬 媛 ，何 欣 ，迟 珊
（ 首 都 医科 大学 附属 北 京 世 纪 坛 医 院临 床 检 验 中 心 ， 北京 １ ０ ０ ０ ３ ８ ）
摘 要 ：目的 评 价 血 浆 （ Ｉ － ３ ） 一 ８ 一 Ｄ － 葡 聚 糖 检 测 和 真 菌培 养 在 临床 侵 袭 性 真 菌 感 染诊 断 中 的意 义 。 方 法 回顾 性 分
ｐ ｌ ａ ｓ ｍａ（ １ － ３ ） 一 ｂ ｅ ｔ ａ — Ｄ－ ｇ ｌ ｕ ｃ ａ ｎ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ａ ｎ ｄ ｆ ｕ ｎ ｇ ａ ｌ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｏ ｆ １ ３ ８ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｉ ｚ ｅ ｄ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｉ ｔ ｈ ｓ ｕ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｖ ａ ｓ ｉ ｖ ｅ ｆ ｕ ｎ ｇ ａ ｌ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ． Ｔｈ ｅ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ａ ｌ ｃ ｕ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ， ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｆ ｉ ｃ ｉ ｔ ｙ，ａ ｎ ｄ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｎ ｄ ｎ ｅ ｇ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｐ ｒ ｅ ｄ ｉ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ｅ ｓ ．ＲＥＳ ＵＬＴ Ｓ Ｔｏ ｔ ａ ｌ ｌ ｙ ３ ５ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｌ ｙ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｅ ｄ ８ ｓ ｉ ｎ ｖ ａ ｓ ｉ ｖ ｅ ｆ ｕ ｎ ｇ ａ ｌ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ
血浆1—3-β-D葡聚糖检测对疑似肺部真菌感染患者诊断的临床应用价值探讨
实验 组 １ —３—１ ３一Ｄ 葡 聚 糖 含 量 明
高于对 照组 （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ， 痰培养 阳性 组 １ — ３一Ｂ—Ｄ葡聚糖水平明显高于痰培养
ｄ ｏ ｉ ．１ ０ ０ ７ —６ １ ４ ｘ ． ２ ０ １ ３
０５． ２ ４ ４
１— ３一Ｂ—Ｄ葡 聚 糖 含 量 检 测 ， 对 两种方
血浆 １—３一Ｂ—Ｄ葡聚糖 检测 对临 床肺 部真 菌感 染患 者的诊 断价值 ， 报告如下 。
资 料 与 方 法 ２ ０ １ ０年 １ ０月 ～２ ０ １ １年 ４月 收 治 疑
法 的阳性 检 出率 进 行 比较 ， 真 菌 培 养法 ３ ２例 阳性 ， 阳性 率 ４ ５ ． ０ ７ ％， 血浆 １— ３一 Ｂ—Ｄ 葡 聚 糖 检 测 法 阳性 ５ ７例 （ 以 ＞ ２ ０ Ｐ ｇ ／ ｍｌ 判为 阳性 ） ， 阳性率 ８ ０ ． ２ ８ ％ 经统
结 果
高， 将其用 于念珠菌 血症 的早期诊 断明显 优 于 传 统 的 培 养 法 和 血 清 学 诊 断 试
验 。 本 文 实 验 组 中 需 要 注 意 的 是 ， 检 测 １—３一Ｂ—Ｄ 葡 聚 糖 含 量 不 能 用 于 隐 球 菌 感 染 的 诊 断 。 因 为 隐 球 菌 具 有 荚 膜， １ —３一Ｂ—Ｄ葡 聚 糖 不 易 释 放 ， 故 该 成
阴性组 （ Ｐ ＜０ ． ０ １ ） 。 实 验 组 与 正 常 对 照 组 外 周 血 １— ３—１ ３ 一Ｄ葡 聚 糖 测 定 结 果 ，
见表 １ 。
分可能不宜作 为 隐球菌感 染 的早期诊 断 指标 。本文所有病例 中无 隐球菌感染者 ，
有 关 隐 球 菌 感 染 后 １—３一Ｂ—Ｄ 葡 聚 糖 的变 化 还 有 待 进 一 步 观察 。本 研 究 中 ， ３ ０ 例 正 常对 照 组 标 本 两 种 方 法 均 显示 阴 性 ，
1,3-β-D-葡聚糖(BG)检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析
1,3-β-D葡聚糖(BG)在检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析近20年来，由于大剂量广谱抗生素、抗肿瘤药物的长期应用，器官移植及造血干细胞移植等治疗方法的完善，各种导管在体内的介人以及恶性肿瘤、艾滋病等免疫功能低下患者的不断增加，侵袭性真菌感染的发病率明显上升。
侵袭性真菌感染（IFI）临床常无特异性，而真菌实验室诊断方法中镜检、培养、血清学诊断、组织病理学检查和分子生物学方法的检出率较低，G试验检测时间短其为非侵人手段在临床上广受关注。
目的及意义:分清1,3-β-D-葡聚糖检测（G试验）干扰因素，提高准确性。
G试验是及激活试剂中鲎变形细胞裂解物中的凝固酶（G因子），形成凝固蛋白，根据反应物的浓度变化对1,3-β-D葡聚糖浓度进行定量检测。
G试验是念珠菌感染的首选检查方法，检测速度快。
G试验是新的真菌抗原检测方法、念珠菌感染首选检查方法，在深部真菌感染早期诊断有重要意义，检查结果作为方法学评价标准，弥补了传统病理学及培养的不足，提高IFI检测率，缩短检查时间，早期治疗赢得时间为临床合理用药提供帮助。
G试验标准值：＜10pg/ml为阴性，10pg/ml-20pg/ml是观察，＞20pg/ml 阳性。
一般两次及以上G试验阳性及临床特征，并排除干扰因素就可以确定真菌感染。
BG升高原因：1，3-β-D葡聚糖(（1，3）-β-D-glucan,BG)广泛存在于多种真菌细胞壁中，是真菌的特有多糖成分，包括念珠菌、曲霉菌、镰刀菌及卡氏肺孢子菌．占其干质量的50％以上，细菌、人和病毒都不含该成分,真菌菌丝生长的过程中、进入人体体液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，1，3-β-D葡聚糖可从细胞壁中释放出来，使血液和体液(如尿、脑脊液，腹水，胸水等)中1，3-β-D葡聚糖含量升高，故检测血液中的BG可以协助侵袭性真菌感染（IFI）的诊断，当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清除 1,3-β-D-葡聚糖。
(1-3)-β-D葡聚糖检测与真菌培养联合检测对临床深部真菌感染的对比研究
(1-3)-β-D葡聚糖检测与真菌培养联合检测对临床深部真菌感染的对比研究摘要：目的: 评估血清(1-3)-β-D葡聚糖检测定量分析(G实验)与真菌培养联合检测对临床深部真菌感染的诊断意义。
所有真菌细胞膜上都含有(1-3)-β-D葡聚糖，而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分，因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D葡聚糖是诊断深部真菌感染的有效依据。
方法: 通过回顾性分析80例怀疑深部真菌感染住院患者的G实验和真菌培养结果,分别计算两种方法及联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。
结果: G 实验和真菌培养联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为88.0%、96.0%、91.7%和94.1%。
G实验的灵敏度和阳性预测值高,真菌培养的特异度高。
结论:血清(1-3)-β-D葡聚糖检测和真菌培养联合检测可提高实验的灵敏度,减少假阴性的发生,对早期诊断深部真菌感染有一定临床意义。
关键词：(1-3)-β-D葡聚糖；真菌培养；深部真菌感染【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602(2014)03-0210-01近年来随着广谱抗菌药物、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用，临床深部真菌感染率不断上升，已成为医院感染的主要原因之一。
一般来说,通常发生于危重患者,而且病情极易被原发病掩盖,从而导致误诊、漏诊[1]。
通过此研究的结果以便对危重病人深部真菌感染早发现、早治疗降低死亡率。
据统计,近30年深部真菌感染的发病率增加了3~5倍,真菌感染已成为艾滋病的重要死亡原因之一。
引起深部真菌感染的病原菌主要有念珠菌病、孢子丝菌病、隐球菌病、曲霉菌病、毛霉菌病、马尔尼菲青霉菌病、组织孢浆菌病以及球孢子、副球孢子菌病等临床病症。
由于传统的培养方法不能及时提供深部真菌感染的信息,目前一些快速诊断技术,如高分辨CT(HRCT)及检测真菌抗原和核酸的非培养诊断技术得到快速发展。
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断
真菌β-D-葡散糖检测取真菌熏染诊疗之阳早格格创做一、概括经钻研标明，(1-3)-β-D-葡散糖是一种广大存留于真菌细胞壁的抗本身分, 占其搞燥沉量的80%～90%，其余微死物、动物及人的细胞身分战细胞中液均没有含有.深部真菌熏染患者中血浆(1-3)-β-D-葡散糖含量删下,二者存留相闭性.当真菌加进人体血液或者深部构制后，经吞噬细胞的吞噬、消化代开后，（1-3）-β-D葡散糖可从胞壁中释搁出去，进而使血液或者其余体液中（1-3）-β-D葡散糖含量删下.当真菌正在体内含量缩小时，肌体免疫可赶快对于其扫除.而正在浅部真菌熏染中，（1-3）-β-D葡散糖已被释搁出去，故其正在体液中的量没有删下，它正在血液及无菌体液中的存留不妨很大程度上视为IFI（深部真菌熏染）的标记.二、深部真菌熏染的诊治连年去，由于制血搞细胞移植、真体器官移植的广大启展、下强度免疫压制剂战大剂量化疗药物的应用以及百般导管的体内介进、留置等，临床上侵蚀性真菌熏染(invasive fungal infections，IFI)的抱病率明隐降下.IFI也日益成为引导骨髓及器官移植受者、交受化疗的恶性血液病战恶性肿瘤患者、AIDS以及其余危沉病患者的宽沉并收症及要害牺牲本果之一.由于缺少灵验的早期诊疗脚法，深部真菌熏染病死率居下没有下.对于深部真菌熏染治疗成败的闭键正在于早期诊疗，趁早用药治疗.惯例病本教诊疗“微死物培植”可为临床提供直交的诊疗依据，但是其培植要领耗时少（4-7天），没有相宜用做早期诊疗.而且，随着光谱抗死素、抗菌药物的洪量应用，使得培植的阳性率极矮.时常使用的免疫教要领，也由于抗本抗体反应的特同性好，往往对于某一疑似真菌熏染患者要做多种真菌抗本或者抗体检测，既费时又没有经济，而且当所用药盒的抗本谱或者抗体谱没有齐时也极易制成漏诊.对于一些往常交触过相映真菌抗本的个体，做抗体检测时还会出现阳性反应，果而对于抗体的检测往往央供做动背瞅察才搞做出诊疗，期终属性较好.有钻研报导血浑葡散糖正在念珠菌血症时明隐降下，将其用于念珠菌血症的早期诊疗明隐劣于保守的培植法战血浑教诊疗考查.虽然检测（1-3）-β-D葡散糖只可提示有无真菌侵蚀性熏染，没有克没有及决定为何种真菌，但是也大概转移为一种劣势.果连年去，一些罕睹的条件致病真菌也可引起深部熏染，那便央供一种能赶快决定有无深部真菌熏染的要领.果系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，且没有果真菌种类而同，当检测到标本中的（1-3）-β-D葡散糖含量较下时，可赋给予系统制疗，没有必耗时等待审定出种属，可则会贻误最好治疗时机.果此，血浑（1-3）-β-D葡散糖含量检测没有得为一种真用的真菌熏染早期诊疗要领.而且，相闭钻研标明，（1-3）-β-D葡散糖火仄正在确诊IFI患者的血浑中出现持绝降下，而随着药物的使用，对于药物敏感者可很快出现（1-3）-β-D 葡散糖火仄下落及转阳，而药物治疗无效人群（1-3）-β-D 葡散糖值无明隐改变.果此，（1-3）-β-D葡散糖不妨用去推断药物的疗效，以协帮临床医师即时举止药物种类及剂量的安排.通过对于人体体液举止（1-3）-β-D葡散糖含量检测，可帮闲推断人体是可已被真菌熏染.对于下危患者的样本举止连绝分解，可为临床检测提供侵犯真菌的量值或者阳性预示值，为临床诊疗战治疗提供了一种赶快查看要领，对于普及病人治疗治愈率战指挥医死合理用药，以及促进尔国调理职业的死少具备要害意思.三、海内皮毛闭死少情况暂时，临床上诊疗侵蚀性真菌熏染(invasive fungal infections，IFI)的要领主要由宿主果素、临床个性、微死物教查看战构制病理教4部分组成.血液、收气管肺泡灌洗液中的百般真菌PCR测定，是诊疗IFI的微死物教的检测要领.但是保守真菌审定要领皆果周期少、血培植率矮而易于赶快诊疗.钻研者也渐渐将早期诊疗的注意力转背修坐血浑教要领去检测真菌菌体身分或者代开产品，如测定黑念珠菌的苦露散糖、烯醇化酶、D-阿推伯糖醇等.基于深部真菌熏染时，经吞噬细胞处理，菌胞壁落解身分洪量进血，90年代初，有教者修坐了以检测血浆或者血浑中真菌胞壁身分直霉半乳苦露散糖抗本(GM)战(1-3)-β-D葡散糖抗本[(1-3)-β-D-gluean，BG]的含量，用于早期诊疗深部真菌熏染具备较好敏捷度战特同性，且赶快、烦琐，并能提示抗真菌药物治疗.BG检测(也称G考查)是一种新的真菌抗本检测要领，主要由以下钻研机构启展，日本东京Wako杂化教钻研所，Seikagaku Kogyo公司，Ma-ruha公司战好国Cape Code协会.其中Cape Code协会研制的Fungitell试剂盒已被好国FDA 担当用于血液病、肿瘤等免疫受益的患者IFI的诊疗.BG是酵母战丝状真菌细胞壁的多散糖身分，动做真菌抗本具备较下的特同性，本核死物、病毒战人体细胞皆没有存留那种多散糖.果此，它正在血液及无菌体液中的存留不妨很大程度上视为IFI的标记.真菌细胞壁的主要身分BG的比色法检尝试剂盒已广大用于临床.好国FDA已于2003年担当该考查用于可疑IFI患者血浑定性检测.2008年欧洲肿瘤钻研治疗构制(EORTC)IFI合做组(IFICG)战国家过敏及熏染类徐病钻研(NIAID)真菌病钻研组(MSG)将G考查截止列为诊疗IFI的诊疗尺度，但是试剂盒必须是FDA认证的.海中多个钻研核心为评估该考查的个性已搞了洪量的回瞅性考察，证据其敏感度、特同度及临床普遍性均较好.编写： gaowei2010 根源：丁香园。
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌沾染诊断一.概述经研讨标明,(1-3)-β-D-葡聚糖是一种普遍消失于真菌细胞壁的抗原成分, 占其湿润重量的80%～90%,其它微生物.动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有.深部真菌沾染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者消失相干性.当真菌进入人体血液或深部组织后,经吞噬细胞的吞噬.消化代谢后,（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来,从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高.当真菌在体内含量削减时,机体免疫可敏捷对其消除.而在浅部真菌沾染中,（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来,故其在体液中的量不增高,它在血液及无菌体液中的消失可以很大程度上视为IFI（深部真菌沾染）的标记.二.深部真菌沾染的诊治近年来,因为造血干细胞移植.实体器官移植的普遍开展.高强度免疫克制剂和大剂量化疗药物的运用以及各类导管的体内介入.留置等,临床上侵袭性真菌沾染(invasive fungal infections,IFI)的患病率显著上升.IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者.接收化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者.AIDS以及其他危宿疾患者的轻微并发症及重要逝世亡原因之一.因为缺乏有用的早期诊断手腕,深部真菌沾染病逝世率居高不下.对深部真菌沾染治疗成败的症结在于早期诊断,及早用药治疗.通例病原学诊断“微生物造就”可为临床供给直接的诊断根据,但其造就办法耗时长（4-7天）,不合适用作早期诊断.并且,跟着光谱抗生素.抗菌药物的大量运用,使得造就的阳性率极低.经常运用的免疫学办法,也因为抗原抗体反响的特异性差,往往对某一疑似真菌沾染患者要作多种真菌抗原或抗体检测,既费时又不经济,并且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊.对一些以往接触过响应真菌抗原的个别,作抗体检测时还会消失阳性反响,因而反抗体的检测往往请求作动态不雅察才干作出诊断,期末属性较差.有研讨报导血清葡聚糖在念珠菌血症时显著升高,将其用于念珠菌血症的早期诊断显著优于传统的造就法和血清学诊断实验.固然检测（1-3）-β-D葡聚糖只能提醒有无真菌侵袭性沾染,不克不及肯定为何种真菌,但也可能转化为一种优势.因近年来,一些罕有的前提致病真菌也可引起深部沾染,这就请求一种能敏捷肯定有无深部真菌沾染的办法.因体系抗真菌药物种类较少,抗菌谱较广,且不因真菌种类而异,当检测到标本中的（1-3）-β-D葡聚糖含量较高时,可赐与以体系治疗,不必耗时等待判定出种属,不然会贻误最佳治疗机会.是以,血清（1-3）-β-D葡聚糖含量检测不掉为一种适用的真菌沾染早期诊断办法.并且,相干研讨标明,（1-3）-β-D葡聚糖程度在确诊IFI患者的血清中消失中断升高,而跟着药物的运用,对药物迟钝者可很快消失（1-3）-β-D葡聚糖程度降低及转阴,而药物治疗无效人群（1-3）-β-D葡聚糖值无显著转变.是以,（1-3）-β-D葡聚糖可以用来断定药物的疗效,以协助临床医师实时进行药物种类及剂量的调剂.经由过程对人体体液进行（1-3）-β-D葡聚糖含量检测,可帮忙断定人体是否已被真菌沾染.对高危患者的样本进行中断剖析,可为临床检测供给入侵真菌的量值或阴性预示值,为临床诊断和治疗供给了一种快速检讨办法,对进步病人治疗治愈率和指点大夫合理用药,以及促进我国医疗事业的成长具有重要意义.三.国表里相干成长情形今朝,临床上诊断侵袭性真菌沾染(invasive fungal infections,IFI)的办法重要由宿主身分.临床特点.微生物学检讨和组织病理学4部分构成.血液.支气管肺泡灌洗液中的各类真菌PCR测定,是诊断IFI的微生物学的检测办法.但传统真菌判定办法都因周期长.血造就率低而难于快速诊断.研讨者也逐渐将早期诊断的留意力转向树立血清学办法来检测真菌菌体成分或代谢产品,如测定白念珠菌的甘露聚糖.烯醇化酶.D-阿拉伯糖醇等.鉴于深部真菌沾染时,经吞噬细胞处理,菌胞壁降解成分大量入血,90年月初,有学者树立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成分曲霉半乳甘露聚糖抗原(GM)和(1-3)-β-D葡聚糖抗原[(1-3)-β-D-gluean,BG]的含量, 用于早期诊断深部真菌沾染具有较好敏锐度和特异性,且敏捷.轻便,并能提醒抗真菌药物治疗.BG检测(也称G实验)是一种新的真菌抗原检测办法,重要由以下研讨机构开展,日本东京Wako纯化学研讨所,Seikagaku Kogyo公司,Ma-ruha公司和美国Cape Code协会.个中Cape Code协会研制的Fungitell试剂盒已被美国FDA同意用于血液病.肿瘤等免疫受损的患者IFI的诊断.BG是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分,作为真菌抗原具有较高的特异性,原核生物.病毒和人体细胞都不消失这种多聚糖.是以,它在血液及无菌体液中的消失可以很大程度上视为IFI的标记.真菌细胞壁的重要成分BG的比色法检测试剂盒已普遍用于临床.美国FDA已于2003年同意该实验用于可疑IFI患者血清定性检测.2008年欧洲肿瘤研讨治疗组织(EORTC)IFI合作组(IFICG)和国度过敏及沾染类疾病研讨(NIAID)真菌病研讨组(MSG)将G实验成果列为诊断IFI的诊断尺度,但试剂盒必须是FDA认证的.国外多个研讨中间为评估该实验的特点已做了大量的回想性查询拜访,证实其迟钝度.特异度及临床一致性均较好.编辑： gaowei2010 起源：丁喷鼻园。
(1-3)-β-D-葡聚糖动态监测在测新生儿深部真菌感染诊断价值的评价
吉林医学2013年5月第34卷第15期· 2863 ·4 参考文献[1] 彭少华,顾剑,吴琼,等.老年患者耐亚胺培南铜绿假单胞菌医院感染的临床与耐药性研究[J].中华老年医学杂志,2005,24(11):845. [2] 王瑶,徐英春.2004年～2005年中国CHINET鲍曼不动杆菌耐药分析[J].中国感染与化疗杂志,2007,7(4):279.[3] 施金玲,蔡璇,孙端阳.不动杆菌医院内感染的耐药分析监测[J].中国现代医学杂志,2005,15(23):3660.[4] 孙景勇,倪语星.2005年上海瑞金医院细菌耐药监测[J].中国感染与化疗杂志,2007,7(4):244.[5] 胡付品,叶信予,吴培澄,等.2005年上海华山医院细菌耐药分析监测[J].中国感染与化疗杂志,2007,7(4):233.[6] 洪秀华.临床微生物学检验[M].北京:中国医药科技出版社,2004:222.[7] PENG Shao-hua,GU Jian,WU Qiong,et al.Nosocomial infection and antimicrobial resistance of imipenem resistant pseudomonas aeruginosa among geriatricspatients[J].Chinese Journal of Geriatrics,2005,24(11):845.[8] WANG Yao,XU Yimg-chun.CHINET surveillance of antimicrobial resistance among A baumannii isolates in China during 2004-2005[J]. Chinese Journal of Infection and Chemotherapy,2007,7(4):279. [9] SHI Jin-ling,CAI Xuan,SUN Duan-yang.Study for resistance ofacinetobacter sppinnosocomial infection[J].China Journal of Medicine,2005,15(23):3660.[10] SUN Jin-yong,NI Yu-xing.Surveillance of antibiotic resistance in bacterial isolates from Shanghai Ruijin Hospital in 2005[J].Chinese Journal of Infection and Chemotherapy,2007,7(4):244.[11] HU Fu-pin,YE Xin-yu,Wu Pei-chen,et al.Surveillance of antibiotic resistance in clinical iaolates from Shanghai Huashan Hospital in 2005[J].Chinese Journal of Infection and Chemotherapy,2007,7(4):233.[12] HONG Xiu-hua.Clinical microbiology laboratory[M]. Beijing:Chinese medicine and technology house,2004:222.[收稿日期：2013-03-11 编校：苏建东]（１-３）-β-Ｄ-葡聚糖动态监测在测新生儿深部真菌感染诊断价值的评价杨军，廖志勇（四川省成都市妇女儿童中心医院PICU，四川成都 610017）［摘 要］目的：探讨血清（1-3）-β-D-葡聚糖对新生儿深部真菌感染的诊断价值。
血浆1,3-β-D葡聚糖检测在诊断深部真菌感染的应用与研究
传统的检测真菌方法 ： ①直接方 法 ：是组 织或渗 出物中
可分离培养 出致病真菌。特点 ： 时长 ， 由于大量广谱 抗生 耗 并
诊断及 对症治疗 。 为临床提供 准确 的指导用药依 据 ， 评价选用 药物 的有效性。 以达到对危重 患者深部真菌感染的早发现 、 早 诊断 、 早治疗 ， 时挽救患者生命 ， 及 降低病死率 。
表１ ３ 种试验方 法对诊 断深部真菌感染的 比较
ห้องสมุดไป่ตู้
３ 讨
论
看 出， 与临床 符合 阳性 数 、 验灵敏度 、 试 特异性均为血浆葡 聚 糖检测法最 高。
由于 １３１Ｄ葡聚糖仅广 泛存在 于真 菌的细胞壁 中 ， ，－一 ３ 当
真 菌进入人体 血液或深部组 织后 ， 经吞 噬细胞 的吞噬 、 消化 等处理 后 ， ，－ ． １３１Ｄ葡聚糖可从胞壁中释放 出来 ， ３ 从而使血液
参 考 文 献
明显优于传统 的培养法和血清学诊断试萼 Ｉ１ 盒－。本研究通过探 ． ２
讨 比较这种新 的深部真菌感染检测方法与传统实验室 的培养
方法之间的关 系，评价血浆 １３１Ｄ葡聚糖 的检测对深部真 ，－一 ３ 菌感染诊断的临床意义。
１ 材 料 与 方 法
进行反应 ，反应结束 后 自动计算 出待测血浆 中 １３１Ｄ葡聚 ，－ ． ３
广东省佛 山市第一人民医院（２ ００ ５８ｏ ） 目前 ， 深部真菌感 染已成为免疫功能低下患者发病 和死 亡最常见的原因之一 。深部真菌感染治疗成败的关键在于早 期诊 断。传统 的微生物分离 、 培养与鉴定需要时间较长 ， 患者
在等待期间有可能病情加重 ， 甚至死亡 。有研究报 道葡聚糖 在念珠菌血症时 明显升 高 ， 将其用于念珠 菌血 症的早期诊断
1,3-β-D葡聚糖(BG)在检测侵袭性真菌感染诊断中的影响因素分析-改
[1]黄云昆,史玉芹,朱雯梅,王佳,姚瑶.血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测对深部真菌感染 诊断的临床评价[J].检验医学与临床,2013,10(5):520-521,523.
G试验相关影响因素
尽管目前BG检测已成为与真菌培养联合诊断IFI 的重要方法，但是BG检测用于诊断IFI仍存在很 多不能忽视的问题。
简单
2h
较高
分子生物学检测 (PCR技术)
一般
2h
高
血清学检测 (G/GM试验)
简单
2h
低
敏感性 低 <30%
高 低 高
高
特异性 一般
综合性评价 **
低
*
低
*
低
**
一般
***
早期、快速检测手段：G试验、GM试验、内毒素试验
11
G试验诊断标准
＜10pg/ml
＞20pg/ml
＞50pg/ml
阴性
阳性
阳性（特异性高）
的特有成分
几丁质
以1,3-β-D糖苷键连接的葡 麦 角 固 醇 萄糖残基骨架作为主链
以分支状1-6-β-D葡萄糖残 基作为侧链
B1，3 葡 聚 糖 合 成 酶
7
G试验临床意义
G试验定义
8
BG升高原因
真菌菌丝生长的过程中、进入人体体液或深部组 织后，经吞噬细胞的吞噬、消化等处理后，1，3β D葡聚糖可从细胞壁中释放出来，使血液和体液(如 尿、脑脊液，腹水，胸水等)
感 染（IFI）的诊断。
9
BG升高原因
当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速清 除1,3-β -D-葡聚糖。 在浅部真菌感染时1,3-β -D-葡聚糖未被释放出 来，故体液中不升高
1,3-β-D-葡聚糖的检验与临床总结
曲霉菌半乳甘露聚糖（GM）
Figure 1-10 Noncompetitive sandwich method of immunoassay
22
例1
1,3-β-D-葡聚糖与循环半乳甘露聚糖的检测比较： 用于治疗和监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病
中性粒细胞减少症患者40例 （发展为曲霉菌病的高危人群） 该研究选择1,3-β-D-葡聚糖（BG）和半乳甘露聚糖（GM）两个指标 用于监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病患者 BG和GM两项指标均可用于指导临床诊断和治疗真菌性疾病, 但BG可早于 GM升高. BG和GM联合检测用于曲霉菌病的诊疗, 其特异性和阳性率均为 100% .
R.Y.Hachem, D.P.Kontoyiannis, etc. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2009
32
侵袭性真菌感染或者GM和BG检测结果比较
33
例4
1,3-β-D-葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的IgG亚型 抗体用于系统性念珠菌感染诊疗
系统性念珠菌病患者 IgG亚型体液水平升高
6
真菌病实验室诊断主要内容
准确、快速检出真菌病原体 真菌镜检 真菌培养 组织病理 生理生化 血清学方法 分子生物学
7
镜检和培养方法
敏感性低
血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检 证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。
培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区 分定植和感染困难 培养时间长 有些标本采集困难
(a) 侵袭性曲霉菌病合并急性髓样白血病患者 给予两性霉素B和卡泊芬净用药 治疗过程中BG和GM变化情况
血清(1-3)-β-D葡聚糖检测判断肺部侵袭性真菌感染的诊断价值
４０
２ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
感染 组
非感染 组
图１ 两组 患者血 清 （ １ — ３ ）一 ｐ—Ｄ葡 聚糖分 布情 况
ｔ 检验 。计 数资料 以百分 数表示 ，组 间 比较 采用 ｘ 检验 。
Ｓ ｔ ａ ｔ ａ ｌ ２ ． ０统计绘 制 ＲＯＣ曲线 ，并根 据敏感性 和特 异性
２． ３ 血清 （ １ —３）一 ｐ—Ｄ 葡 聚糖 诊 断价 值
２ ０ ｎ ｇ ／ Ｌ 为 临 界 值 ，判 断 ＰＩ ＦＩ
但当出现真菌定植或浅表真菌感染 时，（ 卜３ ） 一 Ｄ Ｄ葡聚
（ １ —３）一 Ｄ —Ｄ 葡 聚 糖 判 断 ＰＩ ＦＩ的 ＲＯ Ｃ 曲 线 下 面
积 为 ０． ８ ８（ ９ ５％ＣＩ ： ０． ８ １ ～０． ９ ７） （ 图 ２） 。以 血 清
５ ７
中 国 乡 村 医 药 杂 志
咪＃
∞
（ １ ３）一 Ｂ —Ｄ 葡 聚 糖
２ Ｏ １ ４年 ２ 月第 ２ １ 卷第 ３ 期
血清 （ １ － ３ ）一 ｐ— Ｄ葡聚糖检测判断肺部侵袭性真菌感染
的诊断价值
谢 颖
【 摘要】 目的 评 价血 浆 （ １ —３ ）一 Ｄ— Ｄ 葡聚糖 检测在 肺部侵 袭性真 菌感染 （ ＰＩ ＦＩ ）中的诊 断价 值 。方法 将 ７ ７ ｐ—Ｄ
例气管镜 吸引痰标 本患者痰 真菌培养 阳性 的 ２ ８例设 为感染组 ，阴性的 ４ ９例设非感 染组 ，同时对 其血清 （ １ －３ ）
葡聚 糖进 行检 测 。比较 两组 患者 血 清 （ １ ３ ）一 ｐ —Ｄ葡 聚糖 水 平 ，并采用 ＲＯＣ 曲线 评价 其 在 ＰＩ Ｆ Ｉ中的诊 断价值 。
真菌β_D_葡聚糖检测与真菌感染诊断
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断一、概述经研究表明，(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%，其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有。
深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。
当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后，（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。
当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速对其清除。
而在浅部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI（深部真菌感染）的标志。
二、深部真菌感染的诊治近年来，由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的患病率明显上升。
IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。
由于缺少有效的早期诊断手段，深部真菌感染病死率居高不下。
对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断，及早用药治疗。
常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据，但其培养方法耗时长（4-7天），不适宜用作早期诊断。
并且，随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用，使得培养的阳性率极低。
常用的免疫学方法，也由于抗原抗体反应的特异性差，往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测，既费时又不经济，而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。
对一些以往接触过相应真菌抗原的个体，作抗体检测时还会出现阳性反应，因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断，期末属性较差。
有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高，将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验。
血清1,3—β—D—葡聚糖检测对深部真菌病诊断的研究
血清1，3—β—D—葡聚糖检测对深部真菌病诊断的研究目的探讨血清（1，3）-β-D-葡聚糖对深部真菌病的诊断价值。
方法将2014年2～6月天津市武警后勤学院附属医院110份数据（标本140份）分为侵袭性真菌病患者组33例和无侵袭性真菌病组77例，分析比较葡聚糖水平，并使用ROC曲线确定最佳临界值。
结果侵袭性真菌病患者组的葡聚糖水平（279.78±83.26）pg/mL，明显高于对照组（34.05±9.35）pg/mL（P＜0.001）；ROC 曲线下面积为0.946（95%的置信区间为0.904～0.988），当以95.20 pg/mL为临界值时，实验的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为84.8%、93.5%、80.0%和93.3%；临床符合率达到89.1%。
Kappa值0.784（P＜0.05）。
结论血清葡聚糖水平可以用于深部真菌感染的诊断，本研究中用北京金山川公司的GKT-1M Set动态真菌检测试剂盒检测血清葡聚糖水平，进行深部真菌感染诊断时的最佳临界值为95.20 pg/mL，当以此临界值对深部真菌感染进行诊断时，临床一致性较好。
[Abstract] Objective To investigate the diagnostic value of serum（1，3）-β-D-glucan for deep fungal disease. Methods 110 copies of data（140 specimens）of affiliated hospital of tianjin Armed Police logistics academy from February to June 2014 were divided into the invasive fungal disease group with 33 copies and the non-invasive fungal disease group with 77 copies. The glucan levels were analyzed and compared. The ROC curve was used to determine the optimal critical value. Results The glucan level of the invasive fungal disease group was （279.78±83.26）pg/mL，which was significantly higher than the（34.05±9.35）pg/mL of the control group（P＜0.001）. The ROC area under curve was 0.946（95% confidence interval was 0.904-0.988）；When 95.20 pg/mL was used as the critical value，the sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value of experiment were 84.8%，93.5%，80.0% and 93.3%. The clinical accordance rate reached 89.1%. The Kappa value was 0.784 （P＜0.05）. Conclusion The serum glucan level can be used for the diagnosis of deep fungal infection. This study uses the GKT-1M Set dynamic fungal detection kit of Beijing Jinshan Company to detect the serum glucan level. The optimal critical value for deep fungal infection diagnosis is 95.20 pg/mL and when this critical value is used for the diagnosis of deep fungal infection，the clinical consistency is better.[Key words] Deep fungal disease；Diagnosis；Serum 1，3-β-D-glucan；ROC curve现今，尽管存在有效的治疗方法，但是侵袭性真菌病（invasive fungal disease，IFD）仍然是免疫抑制患者发病和死亡的重要原因[1]。
血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染患者的诊断价值
１ ０卷
１３２ 测 定分析 ．．
取待测 血清样 品 ０ ．２ｍＬ直接 加入 酶反 应 主剂
中， 溶解 后移 液至 １ ｍ × ５ ｍ 标 准玻 璃 反 应 管 ０ｍ ７ ｍ
中（ 不要 产 生 气 泡 ） 插 入 Ｍ ２ ０微生 物 快 速 动 态 ， Ｂ８
检测 系统 中进行 反 应 ， １ｈ后 自动 计 算 待 测 血 清 中
中经 培养 证实存 在深部 真菌感 染者 ２ ８例 ， 染部 位 感
包 括呼 吸道 、 尿 道 、 液 及 静 脉插 管 引 起 的 系 统 泌 血
液都不 含 这种 成分 ，因此 在 机 体 的 体 液 中 检 测 到
（ —）１ Ｄ 葡 聚糖 是 诊 断 深 部 真 菌 感 染 的有 效 依 １３ －－ 一 ３
统 ， Ｇ ｒ ５ ｅ 动 态 真 菌 检 测试 剂盒 定量 检 测 血 清 中（ ）１Ｄ 葡 聚 糖 的 含 量 ， 而 统 计 出待 检 标 本 深部 真 菌 感 染 的 阳 及 Ｋｌ Ｍ Ｓ ｔ １ — １３ ．－ 一 ３ 从 性 率 。结果 ６ ０例 可 疑 深 部 真 菌感 染 患 者 ， 传 统 培 养 方 法诊 断 ２ 经 ８例 阳性 ，２例 阴性 ， ３ 阳性 率 为 ４ ． ％ ； 血 清 （ —）１Ｄ 葡 ６７ 经 １３ 一－ 一 ３ 聚 糖 检测 ３ ３例 阳 性 ，２例 为 可疑 感 染 ， 性率 为 ５ ． ％ ，０ 例健 康 对 照 组 均 为 阴 性 。说 明血 清 （ －）ＢＤ 葡 聚糖 检 测 较传 统 ｌ 阳 ５Ｏ ２ １３ 一—
深 部真菌 感染 提供 了新 的思路 和方 法 。
高 、 床诊 断 率 低 、 临 实验 室诊 断率 低 等 特 点 。欧 美
的尸检 资料表 明 ， 恶性 肿 瘤患 者死 亡 的原 因 ３ ％一 ０
血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测对真菌感染的诊断价值
【 要】 目 的 摘 探 讨 血 浆 （—） Ｄ 葡 聚糖 检 测 对 真 茵 感 染诊 断及 治 疗 的 临 床 意 义 。 方 法 应 用 Ｍ ８ １３一 Ｏ微 生
果 ９ 例 真 菌 培 养 阳性 且 结合 临床 诊 断 确 定 为 真 茵 感 染 患者 血 浆 （－ ）０Ｉ 葡 聚 糖 定 量 检 测 有 ９ ５ １３一一） ＿ Ｏ例 阳性 ， 性 率 阳
为 ９ ． ４ ， 浆（—） Ｉ＿ ４ ７ 血 １３ 一 ）葡聚糖含量为 （２ ２ ±２ ． ４ ｐ ／ ６ ．８ ２ ８ ） ｇ ｍＬ， 阴性对 照组 为（ ．９ ． ６ ｐ （ 。两组数 据经 ３ ７ 士１ ９ ） ｇ ｍＬ
ｔ 验 ， 异 具 有 统 计 学 意 义 （＝ ２ ． ， 检 差 ｆ ５ ４ Ｐｄ０ ０ ） ． ５ 。结 论
【 键 词 】 １３一 关 （—） Ｄ 葡聚 糖 ； 真 菌 感 染 ； 诊 断
Ｄ Ｉ １ ． ９ ９ Ｊ ｉ ｎ １ ７ － ４ ５ ２ １ ． ５ ０ ６ 文 献 标 志 码 ： 文 章 编 号 ： ６ ２ ９ ５ （ ０ ２ ０ — ５ ４０ Ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ２９ ５ ． ０ ２ ０ ． ２ ｓ Ａ １ ７—４ ５ ２ １ ） ５０ ６－２
Ｃｈｉ 口）
［ ｓｒｃ］ ０ｂ『 ｔ ｅ Ｔｏｓｕ ｙｔ ｅｃｉｉａ ｉｎｆ ａ ｃ ｆ ｌｓ Ａｂ ｔａ ｔ ｊ ｃｉ ｅ ｖ ｔ ｄ ｌ ｃ ｌ ｇ ｉｉ ｎ ｅｏ ａ ｍａ（ － ） ｂ ｔ— ｇｕ ａ ｉｇ ｏ ｉ ｎ ｎｔｒ ｈ ｎ ｓ ｃ ｐ １ ３ 一 ｅａＤ ｌｃ ｎｉ ｄａ ｎ ｓｓａ ｄｍｏ ｉ ｎ ｏ
真菌βD葡聚糖检测与真菌感染诊断
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断一、概述经研究表明,(1-3)-β-D-葡聚糖就是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%,其它微生物、动物及人的细胞成分与细胞外液均不含有。
深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。
当真菌进入人体血液或深部组织后,经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后,(1-3)-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来,从而使血液或其它体液中(1-3)-β-D葡聚糖含量增高。
当真菌在体内含量减少时,机体免疫可迅速对其清除。
而在浅部真菌感染中,(1-3)-β-D葡聚糖未被释放出来,故其在体液中的量不增高,它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI(深部真菌感染)的标志。
二、深部真菌感染的诊治近年来,由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂与大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等,临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)的患病率明显上升。
IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病与恶性肿瘤患者、AIDS以及其她危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。
由于缺少有效的早期诊断手段,深部真菌感染病死率居高不下。
对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断,及早用药治疗。
常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据,但其培养方法耗时长(4-7天),不适宜用作早期诊断。
并且,随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用,使得培养的阳性率极低。
常用的免疫学方法,也由于抗原抗体反应的特异性差,往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测,既费时又不经济,而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。
对一些以往接触过相应真菌抗原的个体,作抗体检测时还会出现阳性反应,因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断,期末属性较差。
有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高,将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法与血清学诊断试验。
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真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断
一、概述
经研究表明，(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%，其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有。
深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。
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当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后，（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。
当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速对其清除。
而在浅部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI（深部真菌感染）的标志。
二、深部真菌感染的诊治
近年来，由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的患病率明显上升。
IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。
由于缺少有效的早期诊断手段，深部真菌感染病死率居高不下。
对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断，及早用药治疗。
常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据，但其培养方法耗时长（4-7天），不适宜用作早期诊断。
并且，随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用，使得培养的阳性率极低。
常用的免疫学方法，也由于抗原抗体反应的特异性差，往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测，既费时又不经济，而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。
对一些以往接触过相应真菌抗原的个体，作抗体检测时还会出现阳性反应，因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断，期末属性较差。
有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高，将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验。
虽然检测（1-3）-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染，不能确定为何种真菌，但也可能转化为一种优势。
因近年来，一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法。
因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，且不因真菌种类而异，当检测到标本中的（1-3）-β-D葡聚糖含量较高时，可给予以系统治疗，不必耗时等待鉴定出种属，否则会贻误最佳治疗时机。
因此，血清（1-3）-β-D葡聚糖含量检测不失为一种实用的真菌感染早期诊断方法。
并且，相关研究表明，（1-3）-β-D葡聚糖水平在确诊IFI患者的血清中出现持续升高，而随着药物的使用，对药物敏感者可很快出现（1-3）-β-D葡聚糖水平下降及转阴，而药物治疗无效人群（1-3）-β-D葡聚糖值无明显改变。
因此，（1-3）-β-D葡聚糖可以用来判断药物的疗效，以协助临床医师及时进行药物种类及剂量的调整。
通过对人体体液进行（1-3）-β-D葡聚糖含量检测，可帮助判断人体是否已被真菌感染。
对高危患者的样本进行连续分析，可为临床检测提供入侵真菌的量值或阴性预示值，为临床诊断和
治疗提供了一种快速检查方法，对提高病人治疗治愈率和指导医生合理用药，以及促进我国医疗事业的发展具有重要意义。
三、国内外相关发展情况
目前，临床上诊断侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的方法主要由宿主因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学4部分组成。
血液、支气管肺泡灌洗液中的各种真菌PCR测定，是诊断IFI的微生物学的检测方法。
但传统真菌鉴定方法都因周期长、血培养率低而难于快速诊断。
研究者也逐渐将早期诊断的注意力转向建立血清学方法来检测真菌菌体成分或代谢产物，如测定白念珠菌的甘露聚糖、烯醇化酶、D-阿拉伯糖醇等。
鉴于深部真菌感染时，经吞噬细胞处理，菌胞壁降解成分大量入血，90年代初，有学者建立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成分曲霉半乳甘露聚糖抗原(GM)和(1-3)-β-D葡聚糖抗原
[(1-3)-β-D-gluean，BG]的含量，用于早期诊断深部真菌感染具有较好灵敏度和特异性，且迅速、简便，并能提示抗真菌药物治疗。
BG检测(也称G试验)是一种新的真菌抗原检测方法，主要由以下研究机构开展，日本东京Wako 纯化学研究所，Seikagaku Kogyo公司，Ma-ruha公司和美国Cape Code协会。
其中Cape Code 协会研制的Fungitell试剂盒已被美国FDA批准用于血液病、肿瘤等免疫受损的患者IFI的诊断。
BG是酵母和丝状真菌细胞壁的多聚糖成分，作为真菌抗原具有较高的特异性，原核生物、病毒和人体细胞都不存在这种多聚糖。
因此，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI的标志。
真菌细胞壁的主要成分BG的比色法检测试剂盒已广泛用于临床。
美国FDA已于2003年批准该试验用于可疑IFI患者血清定性检测。
2008年欧洲肿瘤研究治疗组织(EORTC)IFI合作组(IFICG)和国家过敏及感染类疾病研究(NIAID)真菌病研究组(MSG)将G试验结果列为诊断IFI的诊断标准，但试剂盒必须是FDA认证的。
国外多个研究中心为评估该试验的特性已做了大量的回顾性调查，证实其敏感度、特异度及临床一致性均较好。
编辑： gaowei2010 来源：。