浙江大学生物化学丙实验报告
导论 浙江大学生物化学及实验(丙)课件
Symbiotic system can now carry out aerobic catabolism. Some bacterial genes move to the nucleus, and the bacterial endosymbionts become mitochondria.
efficient because fuel is oxidized to CO2.
HH
H H C=C
/\
"J R—C ZCH
基团
Carbonyl (aldehyde)
Carbonyl (ketone)
R —C—R 2 0
Ether
R1—O—R2
Guanidinium
Ester Acetyl R
O H
OH
Imidazole Sulfhydryl
Anhydride (two
carboxylic acids)
A2
Amino (protonated)
H l + R—N—H
1H
Thioester
H
H
R—N—C—N/
JI ,
+N H / \ H H
R——C=CH
HN、 、夕
H
R— O
Carboxyl
R —C—O-o
R—C—N O
Hydroxyl R —O—H <(alcohol)
Enol
?—H,H
R—C=C
Imine N-Substituted
线粒体的进化
Anaerobic metabolism is inefficient because fuel is not completely oxidized.
生物氧化 浙江大学生物化学及实验(丙)课件
Interlocking gears (coupHng device)
Battery (two leal species of
different reduction
potential)
Motor (energy transducer)
(a)
Weight being lifted (mechanical work)
膜结构。外膜outer membrane可允许小分子 (Mr<5000)和离子自 由通过。内膜inner membrane只允许
在内膜上有特异通道的物质通过,对大部分的小分子及离 子不通透。
外膜
Outer membrane ---- Inner membrane
内膜
-Cristae -Matrix
基质
CH2
产—8。一
CO2
CH2
c—COOJ
o
II
a-Ketoglutarate
C—S-CoA
II
o
Succinyl-CoA
CoA-SH
CO2
④
Oxidative
decarboxylation
二、电子传递链:又称为呼吸链。是由存在于线粒体内膜上 的一系列能接受氢或电子的中间传递体组成。
•电子传递链的组成成分
Dehydrogenation
CH2—coo一
CH2
coo-
Succinate CoA-SH
succinyl-CoA synthetase
GTP (ATP)
⑥
Substrate-level phosphorylation
GDP (ADP)
+R
\a-ketoglutarate dehydrogenase \ complex CH2—COO~
浙江大学生物化学丙实验报告1
专业:农业资源与环境姓名:李佳怡 ____________学号:_J6 _______________日期: __________________ 地点:生物实验中心310课程名称:生物化学实验(丙)实验名称:蔗糖酶的提取一、实验目的和要求(必填)三、实验材料与试剂(必填)五、操作方法和实验步骤(必填)七、实验结果与分析(必填).指导老师:方祥年 成绩:_ _同组学生姓名:金宇尊、鲍其琛 二、实验内容和原理(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 六、实验数据记录和处理 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、 学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法;2、 巩固理论知识,学会学以致用并发现新问题。
二、实验内容和原理订 1、实验内容:线 蔗糖酶的提取、分离纯化2、实验原理:① 酵母细胞破碎液体剪切法―超声波法.机械搅拌法.高压匀浆法固体剪切法一压力和研磨 非机械法——> 物理法.化学渗透法.酶溶本实验采用研磨的方法。
通过固体剪切法(研磨)将酵母细胞破碎,把蔗糖酶从酵母细胞中提取岀来。
② 蔗糖酶的初步分离纯化蛋白酶常用的初步分离纯化方法有:盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。
本实验采用选择性变性(加热)、有机溶剂(乙醇)沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集 样品。
由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活,为了能获得尽可能高的产率和纯度,在提纯 操作中要始终保持酶的活性,如在低温下操作等,这样才能得到较好地分离提纯效果。
实验报告细胞破碎的常用方法三、实验材料与试剂1、实验材料市售干酵母粉10g/组(3〜4人)2、实验试剂石英砂,95%乙醇(-20*0,20mmol/L Tris-HCl 缓冲液。
四、实验器材与仪器电子天平(称量干酵母粉):研碎(每组一套):50ml高速离心管(4支/组、4孔50ml离心管架一个/组);托盘天平(离心管平衡用):高速冷冻离心机:恒温水浴箱(50°C);量筒(50ml)、微量移液枪(lOOOu 1)及枪头或移液管(1ml)、玻棒、滴管等;离心管(留样品I、II用)及离心管架:制冰机:一20°C冰箱。
生物化学实验(整理版)
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
2. 实验报告的要求:内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。
五、实验拓展1. 结合实验内容,查阅相关文献,了解生物化学领域的最新研究进展。
2. 尝试设计新的实验方案,对生物化学现象进行深入探究。
3. 参加学术讲座、研讨会等活动,拓宽生物化学知识面。
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
浙江大学生物化学丙实验报告3、4
实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:__________________ 实验名称: 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价同组学生姓名: 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法;②掌握分光光度法制作标准曲线,准确测定未知样品的蛋白质含量; ③掌握分光光度计的使用方法。
2、蔗糖酶活力测定——3.5-二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法; ②学习酶的比活力的计算。
二、实验内容和原理1、Folin-酚测定法Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。
甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成,在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用,生成紫红色络合物;乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成,在碱性条件下,铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基(酚基)和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂(乙试剂)产生深蓝色(钼蓝和钨蓝的混合物),其色泽深浅与蛋白质含量成正比。
可用500nm 波长比色测定,适于测定蛋白质含量0.05~0.5g/L 。
优点: 简单、迅速、灵敏度高;反应较稳定。
缺点: 该反应受多种因素的干扰。
2、蔗糖酶活力测定蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),是一种水解酶。
它能催化非还原性双糖(蔗糖)的1,2-糖苷键裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖(还原糖)。
因此,每水解1mol 蔗糖,就能生成2mol 还原糖。
还原糖的测定有多种方法,例如:纳尔逊-索模吉试剂比色法,斐林试剂法等。
2023年生物化学实验报告化学实验报告
2023年生物化学实验报告化学实验报告在当下这个社会中,报告的使用成为日常生活的常态,报告具有成文事后性的特点。
那么报告应该怎么制定才合适呢?下面我就给大家讲一讲优秀的报告文章怎么写,我们一起来了解一下吧。
生物化学实验报告化学实验报告篇一实验目的:1.熟悉清洗设备2.掌握清洗流程以及清洗前预准备实验设备:1.半导体兆声清洗机(sfq-1006t)-1;sc-2清洗的目的在于清除表面污染杂质,包括有机物和无机物。
这些杂质有的以原子状态或离子状态,有的以薄膜形式或颗粒形式存在于硅片表面。
有机污染包括光刻胶、有机溶剂残留物、合成蜡和人接触器件、工具、器皿带来的油脂或纤维。
无机污染包括重金属金、铜、铁、铬等,严重影响少数载流子寿命和表面电导;碱金属如钠等,引起严重漏电;颗粒污染包括硅渣、尘埃、细菌、微生物、有机胶体纤维等,会导致各种缺陷。
清除污染的方法有物理清洗和化学清洗两种。
我们这里所用的的是化学清洗。
清洗对于微米及深亚微米超大规模集成电路的良率有着极大的影响。
sc-1及sc-2对于清除颗粒及金属颗粒有着显著的作用。
仪器准备:①烧杯的清洗、干燥②清洗机的预准备:开总闸门、开空气压缩机;开旋转总电源(清洗设备照明自动开启);将急停按钮旋转拉出,按下旁边电源键;缓慢开启超纯水开关,角度小于45o;根据需要给1#、2#槽加热,正式试验前提前一小时加热,加热上限为200o。
本次实验中选用了80℃为反应温度。
③sc-1及sc-2的配置:我们配制体积比例是1:2:5,所以选取溶液体积为160ml,对sc-1 nh4oh:h2o2:h2o=20:40:100ml,对sc-2 hcl:h2o2:h2o=20:40:100ml。
① 1#号槽中放入装入1号液的烧杯,待温度与槽中一样后,放入硅片,加热10min,然后超纯水清洗。
② 2#号槽中放入装入2号液的烧杯,待温度与槽中一样后,放入硅片,加热10min,然后超纯水清洗。
浙江大学生物化学丙教学大纲
第一次:绪论;第一章蛋白质化学主要内容:绪论生物化学的概念;生物化学研究的范畴。
生命系统的基本特征:细胞是生命的基本单位;细胞的化学组成;生物大分子的结构特点。
第一章蛋白质化学蛋白质的发现;蛋白质的功能简介;蛋白质的元素组成;蛋白质的基本结构单位-氨基酸。
氨基酸:蛋白质氨基酸的一般结构特征;蛋白质氨基酸的分类和结构(名称,符号);非蛋白氨基酸的结构特点,意义。
氨基酸:蛋白质氨基酸的性质(两性解离和等电点)。
第二次:第一章蛋白质化学主要内容:氨基酸:蛋白质氨基酸的性质(主要的化学反应〈Edman反应;Sanger反应〉)。
肽:肽的概念;肽的结构;肽键;肽的命名;寡肽;多肽;N端;C端;肽的性质;天然多肽(谷胱甘肽)存在及意义。
蛋白质的一级结构:概念;蛋白质一级结构测定的大致步骤。
蛋白质的空间结构:构型和构象的概念;肽单位;肽平面;二面角;蛋白质的二级结构(α-螺旋;β-折叠;β-转角;维持二级结构的作用力);超二级结构;结构域;蛋白质的三级结构(概念;特点;维持蛋白质三级结构的作用力;肌红蛋白的结构);蛋白质的四级结构(概念;特点;血红蛋白的结构)。
蛋白质结构与功能的关系:一级结构决定高级结构;蛋白质一级结构与功能的关系(同源蛋白质的种属差异性;镰刀型细胞贫血症)。
第三次:第一章蛋白质化学;第二章酶主要内容:第一章蛋白质化学:蛋白质结构与功能的关系:蛋白质空间结构与功能的关系(蛋白质的别构效应;蛋白质的变性与复性)。
蛋白质的常用分离技术:色谱法(分子筛;离子交换;亲和层析);电泳(SDS-PAGE;等电聚焦;双相电泳)。
第二章酶酶的一般性质:酶的概念;酶催化作用的特点;酶的化学本质。
酶的分类和命名:习惯命名法;系统分类和系统命名法。
酶的组成分类(单纯酶;结合酶);单体酶;寡聚酶;多酶复合体。
酶的活性中心:概念;特点;胰凝乳蛋白酶的活性中心。
酶活力测定:酶活力;酶活力的大小;酶促反应初速度;酶活力单位;酶的比活力。
实验报告生物化学实验结果与分析
实验报告生物化学实验结果与分析实验报告:生物化学实验结果与分析本次实验旨在研究蛋白质的组成和功能。
通过对不同样本进行定性和定量分析,我们探索了不同蛋白质的特性和潜在应用。
以下是实验结果和分析。
1. 实验方法我们使用了多种技术和试剂来分析蛋白质样本。
首先,我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法,将不同样本中的蛋白质分离。
接着,我们使用染色剂对蛋白质进行染色,并通过分析染色带的迁移距离和颜色密度,评估蛋白质的相对含量。
最后,我们利用质谱技术,鉴定和分析蛋白质的序列和结构。
2. 实验结果与分析2.1 蛋白质组成分析在SDS-PAGE实验中,我们观察到每个样本中的多个蛋白质带。
根据迁移距离和颜色密度,我们可以初步判断不同样本中蛋白质的相对含量和分布情况。
通过与已知标准品进行比对,我们鉴定了几种主要蛋白质。
进一步的质谱分析结果显示,这些蛋白质具有不同的氨基酸序列和结构。
2.2 蛋白质功能分析针对不同样本中的蛋白质,我们通过文献研究和功能检测,评估了它们可能的功能和应用。
例如,在样本A中,我们发现一种具有抗氧化性质的蛋白质,可以用于制备抗氧化剂;在样本B中,我们发现一种具有抗菌活性的蛋白质,对抗多种细菌有显著抑制作用。
这些发现为进一步研究和应用这些蛋白质提供了潜在的方向。
2.3 蛋白质结构与功能关系通过蛋白质质谱分析和文献研究,我们尝试探究蛋白质结构与功能之间的关系。
通过比对不同样本中蛋白质的结构,我们发现不同结构和序列的蛋白质可能具有不同的功能和特性。
例如,在一些样本中,我们发现含有特定结构域的蛋白质对特定生物过程具有重要影响。
这一发现为进一步研究和改造蛋白质提供了理论基础。
3. 结论和展望通过本次实验,我们成功分析了不同样本中蛋白质的组成和功能。
我们发现不同样本中存在多种蛋白质,并且这些蛋白质具有不同的氨基酸序列、结构和功能。
这为进一步研究和应用蛋白质提供了基础和方向。
然而,本次实验还存在一些限制,如样本数量不足和分析深度有限等。
浙江大学生物化学丙实验报告
. .. . 实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 实验名称: 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习离子交换层析的基本原理;2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术;3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。
二、实验容和原理(1)实验原理 1、离子交换层析:以离子交换剂为固定相,液体为流动相进行。
离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。
这些过程都是可逆的。
在某一pH 值的溶液中,不同的蛋白质所带的电荷存在差异,因而与离子交换剂的亲和力就有区别。
当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时,使某一种蛋白质的电荷被中和,与离子交换剂的亲和力降低,不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来,达到分离的目的。
离子交换剂是由基质、电荷基团(或功能基团)和反离子构成。
基质 电荷基团 反离子 电荷基团反离子电荷基团反离子基质基质—+—++可逆交换可逆交换++溶液中的离子(交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖)— ——阳离阴离子交专业: 农业资源与环境姓名: 李佳怡学号: 3130100246 日期: 2015.5.19地点: 生物实验中心310 装订线由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中,粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷,因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。
2、酶活力检测(定性检测)蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),能催化非还原性双糖(蔗糖)裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。
本实验采用3.5-二硝基水酸法,其原理是3.5-二硝基水酸与还原糖共热(100℃)被还原成棕红色的氨基化合物,在一定围还原糖的量和反应液的颜色深度成正比,由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。
浙江大学生物化学丙实验报告5资料
实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:__________________实验名称:蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 检测分析及蛋白质相对分子质量测定 同组学生姓名: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的基本原理和操作方法2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 检测分析3、学习测定蛋白质相对分子质量(Mr)的方法二、实验内容和原理(1)实验内容1、SDS -PAGE 凝胶制作;2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 电泳分离;3、洗脱测定并计算相对分子质量。
(2)实验原理 1、电泳是带电颗粒在电场作用下,作定向运动即向着与其电荷相反的电极移动的现象。
2、电泳法分离、检测蛋白质混合样品主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所产生的电泳迁移率的差别。
3、区带电泳是样品物质在一惰性支持物上进行电泳,因电泳后,样品不同组分形成带状区间,故称区带电泳。
4、聚丙烯酰胺凝胶(PAG)由丙烯酰胺和交联试剂N,N ’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在有催化剂(如过硫酸铵或核黄素)和增速剂(如N,N,N ’,N ’-四甲基乙二胺,TEMED )的情况下聚合而成的。
5、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是在恒定的、非解离的缓冲系统中来分离蛋白质,这主要是由蛋白质样品所带的电荷和分子质量的差异性进行分离;在电泳过程中仍保持蛋白质的天然构象、亚基之间的相互作用及其生物活性。
6、聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为⑴连续系统凝胶缓冲液的pH值及凝胶浓度不变。
该电泳系统具有电荷效应、分子筛效应;⑵不连续系统凝胶缓冲离子成分、pH值、凝胶浓度、电位梯度不连续,由浓缩胶和分离胶组成。
浙江大学生物化学丙实验报告
. . . . 实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:实验名称: 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习离子交换层析的基本原理;2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术;3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。
二、实验容和原理(1)实验原理 1、离子交换层析:以离子交换剂为固定相,液体为流动相进行。
离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。
这些过程都是可逆的。
在某一pH 值的溶液中,不同的蛋白质所带的电荷存在差异,因而与离子交换剂的亲和力就有区别。
当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时,使某一种蛋白质的电荷被中和,与离子交换剂的亲和力降低,不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来,达到分离的目的。
离子交换剂是由基质、电荷基团(或功能基团)和反离子构成。
基质 电荷基团 反离子 电荷基团反离子电荷基团反离子基质基质—+—++可逆交换可逆交换++溶液中的离子(交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖)— ——阳离子交阴离子交换剂专业: 农业资源与环境姓名: 李佳怡学号: 3130100246 日期: 2015.5.19地点: 生物实验中心310装订线由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中,粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷,因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。
2、酶活力检测(定性检测)蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),能催化非还原性双糖(蔗糖)裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。
浙江大学生化实验报告
浙江大学生化实验报告1.引言1.1 概述概述部分:本实验旨在对浙江大学生化实验进行系统的记录与分析,通过实验结果展现实验的过程和成果,并对实验的意义和未来的发展进行展望。
该实验采用了一系列生化实验方法,旨在研究生物体内生化反应的机制和规律,为生物医学领域的研究和发展提供有力支持。
通过对实验背景、方法和结果的详细描述,本报告旨在为读者提供全面的实验信息,让读者更加深入地了解实验的过程和意义。
1.2 文章结构文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的章节安排和内容概要的介绍。
可以简要描述每个章节的主题和重点,以便读者可以更好地理解整篇文章的结构和内容安排。
例如:"文章结构部分将主要介绍本篇文章的整体结构和各个章节的主要内容,以便读者可以更好地理解全文的脉络。
引言部分将从概述、文章结构和目的三个方面介绍本篇文章的主题和写作目的。
正文部分将包括实验背景、实验方法和实验结果三个部分,分别介绍了实验的背景知识、实验的具体操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
结论部分将对实验结果进行深入分析和总结,并展望未来可能的研究方向和发展趋势。
通过整体的文章结构,读者将更清晰地了解本篇文章的内容安排和逻辑脉络。
"1.3 目的:本次实验旨在探究特定生化反应的机理和影响因素,通过实验的进行,旨在深入了解该生化反应的特性和规律,从而为相关领域的研究和应用提供理论和实验基础。
同时,通过实验的设计和操作,培养学生的实验操作能力和科学思维,提高他们的实践能力和动手能力。
通过实验结果的分析和总结,使学生们对生化实验有一个更深入的理解和认识,为未来的学习和研究打下坚实的基础。
2.正文2.1 实验背景本次实验旨在探究生化领域相关的实验内容,通过对生物组织、酶活性、代谢途径等方面进行深入研究,加深对生化学原理的理解和掌握。
生化实验既是理论知识的延伸,也是对知识的实践检验,对于培养学生的实验操作能力和科学研究能力具有重要意义。
实验背景包括对常见的生化实验技术和实验原理的介绍,例如酶活性检测方法、代谢途径的测定方法等。
蛋白质化学2 浙江大学生物化学及实验(丙)课件
1.同源蛋白质:在进化上关联的蛋白质,它们在不同的物种 中行使
相似的功能。
Mar-HSC70 C. virginica HSC70 D.meldziogagter HSC70
M.sexta HSC70 M.mutfculud HSC70
HSC70
MA KA?
nonpolar side chain
polar side chain
1.肽键的结构: (1)部分双键性质,反式构象
(2)刚性平面,肽平面
事实上,肽键的构象是受限制的
+180
air 120
60
s①
浇
<D
0
-60
-120
-180
0
Ramchandran 图 6 i degrees)
-180
+180
Mar-HSP70 C.vlrqlnica HSP70
HSP70 M.sexta HSP70 M.musculud HSP70 H.sapiens HSP7O
MASKGP
EiiDAAKNQVM
“IDAAKNQVAN EL.GDAAKNQVAN
IfWAAKNQVAN KlpDAAKNQVAN RL GDAAKNQVAN
hydrogen
4.多肽链主链上的每个肽键中的 羰
基氧原子都与其后的第四个氨 基酸
trogen
残基上的酰胺基形成氢键。 氢键的 方向与螺旋轴平行。
(2) 0-折登(0-sheet):是另种常见的二级结构。
反向平行
view
平行
view
(3)3-转角(p-turn):—种回转式的二级结构。
浙江大学化学实验报告模板
1 / 1 实验报告 课程名称: 指导老师: 成绩:
实验名称: 实验类型: 同组学生姓名:
一、实验目地和要求(必填) 三、主要仪器设备(必填) 五、实验数据记录和处理 七、讨论、心得
二、实验内容和原理(必填)
四、操作方法和实验步骤
六、实验结果与分析(必填)
一、实验目地和要求
二、实验内容和原理
三、主要仪器设备
实验名称: 姓名:
学号: 文档收集自网络,仅用于个人学习四、操作方法和实验步骤
实验名称: 姓名:
学号: 文档收集自网络,仅用于个人学习实验名称: 姓名:
学号: 文档收集自网络,仅用于个人学习四、操作方法和实验步骤
实验名称: 姓名:
学号: 文档收集自网络,仅用于个人学习四、操作方法和实验步骤。
生物化学实验报告格式范文
生物化学实验报告格式范文一、引言生物化学实验报告的引言部分是对所进行的实验和其背景知识的介绍。
在这部分中,需要简要概述实验的目的、意义以及研究的背景,并引用相关的文献以支持所做的假设或研究问题。
同时,还需要介绍所使用的方法、实验设计以及实验样品的来源。
二、材料与方法材料与方法部分需要详细描述实验中使用的试剂、设备和仪器,并说明其来源和规格。
同时,还需要准确地描述实验过程中所采取的步骤和方法,包括样品制备、试剂的配制、仪器和设备的操作等。
在描述过程中,应注意语句的简洁明确,使读者可以重现实验并得到相同的结果。
三、结果与讨论结果与讨论部分是对实验结果的描述和分析。
首先,需要将实验结果以表格、图表或图像的形式进行呈现,并附上必要的统计数据和误差分析。
随后,对实验结果进行详细分析,并与控制组进行比较。
在进行讨论时,应注意列出所有观察结果,并解释其可能的原因。
同时,还可以引用相关文献和实验结果来解释或支持自己的观点。
四、结论结论部分是对实验结果的总结。
在这部分中,需要简明扼要地回答实验的研究问题,并总结实验所得的主要结果。
同时,还可以进一步探讨实验结果对于相关领域研究的意义和影响,并提出可能的进一步研究方向。
五、参考文献参考文献部分是对所引用的文献进行列表,并根据一定的引用格式进行排版。
在列出文献时,需要按照作者、刊物名称、年份和页面等信息的顺序进行排列,并注意与正文中的引用相一致。
六、致谢致谢部分是对为实验提供支持和帮助的人或机构表示感谢。
在这部分中,可以感谢实验指导人员、实验室成员、提供实验材料或设备的企业或机构等。
七、附录附录部分是对实验中的原始数据、计算公式、实验注意事项等进行补充说明。
在附录中可以包含一些实验过程中的技术细节或其他相关信息,以便于读者进一步理解实验的过程和结果。
以上就是一篇生物化学实验报告的格式范文,包括引言、材料与方法、结果与讨论、结论、参考文献、致谢和附录等部分。
在撰写实验报告时,需要关注每个部分的内容和要求,力求准确描述实验的目的、方法、结果和结论,并注重实验结果的分析和讨论,以形成一篇完整且具有科学价值的报告。
生物化学实验报告怎么
生物化学实验报告怎么写一、引言生物化学实验报告是科研工作中不可或缺的一环,它不仅可以记录实验过程和结果,还可以帮助研究人员总结经验和发现问题。
本文将从实验目的、实验方法、结果分析和结论等方面探讨如何撰写一份优秀的生物化学实验报告。
二、实验目的在实验报告的开头,应明确实验的目的。
实验目的是指研究人员进行实验的目标和意义。
例如,我们可以设定实验目的为探究某种酶的催化作用机制,或者研究某种物质对细胞生长的影响。
明确实验目的有助于读者理解实验的背景和意义。
三、实验方法在实验方法部分,应详细描述实验的步骤和操作。
这些步骤应该清晰、简洁,并且能够被其他研究人员复制。
例如,我们可以描述实验所用的仪器、试剂和样本的来源,以及实验的操作流程。
在描述实验步骤时,可以使用时间顺序或者逻辑顺序,使读者能够清楚地理解实验的过程。
四、结果分析结果分析是实验报告的重要部分,它可以帮助读者理解实验结果的意义。
在结果分析部分,我们可以使用图表、数据和文字来展示实验结果。
例如,我们可以使用柱状图来比较不同实验组的数据,或者使用折线图来展示实验数据的趋势变化。
在结果分析时,应注重数据的解释和合理性,避免主观臆断。
五、讨论与结论讨论与结论部分是实验报告的总结和归纳。
在讨论部分,我们可以对实验结果进行解释,并与相关研究进行比较和讨论。
例如,我们可以讨论实验结果是否支持我们的假设,以及实验中可能存在的误差和不确定性。
在结论部分,我们可以对实验的结果进行总结,并提出进一步研究的建议。
六、实验报告的格式和规范除了内容的重要性外,实验报告的格式和规范也是不可忽视的。
在撰写实验报告时,应遵循学术论文的写作规范,使用清晰、准确的语言,注意段落的分割和过渡。
此外,应注意引用他人的研究成果和观点时,要注明出处,避免抄袭和侵权行为。
七、实验报告的补充部分除了上述内容之外,实验报告还可以包括一些补充部分,如实验数据的原始记录、实验中遇到的问题和解决方法等。
生化实验报告
生化实验报告一、实验目的本次生化实验的主要目的是探究酶的催化作用以及影响酶活性的因素,通过实验操作和数据观察,深入理解生物化学中的相关原理,并培养我们的实验操作技能和科学思维能力。
二、实验原理酶是生物体内具有催化作用的蛋白质,能够显著降低化学反应的活化能,从而加快反应速率。
本次实验中,我们以过氧化氢酶为例,研究其对过氧化氢分解反应的催化作用。
过氧化氢在自然条件下分解缓慢,但在过氧化氢酶的催化下会迅速分解产生氧气和水。
影响酶活性的因素主要包括温度、pH 值、底物浓度和酶浓度等。
在适宜的条件下,酶的活性最高,反应速率最快;当条件超出适宜范围时,酶的活性会受到抑制甚至失活。
三、实验材料与设备1、实验材料新鲜猪肝:用于提取过氧化氢酶。
3%过氧化氢溶液。
缓冲液(不同 pH 值)。
2、实验设备研钵、漏斗、纱布。
量筒、移液器。
恒温水浴锅。
试管、试管架。
四、实验步骤1、酶液的制备将新鲜猪肝剪成小块,放入研钵中研磨成匀浆。
用纱布过滤匀浆,收集滤液即为酶液。
2、温度对酶活性的影响取 4 支试管,分别标记为 1、2、3、4。
向每支试管中加入 2 mL 3%过氧化氢溶液和 1 mL 酶液。
将 1 号试管置于 0℃水浴中,2 号试管置于 37℃水浴中,3 号试管置于 60℃水浴中,4 号试管置于 100℃水浴中,保温 5 分钟。
观察并记录各试管中产生气泡的多少。
3、 pH 值对酶活性的影响取 5 支试管,分别标记为 5、6、7、8、9。
向每支试管中加入 2 mL 3%过氧化氢溶液和 1 mL 酶液。
向 5 号试管中加入 1 mL pH 为 3 的缓冲液,向 6 号试管中加入 1 mL pH 为 5 的缓冲液,向 7 号试管中加入 1 mL pH 为 7 的缓冲液,向8 号试管中加入 1 mL pH 为 9 的缓冲液,向 9 号试管中加入 1 mL pH 为 11 的缓冲液。
观察并记录各试管中产生气泡的多少。
4、底物浓度对酶活性的影响取 5 支试管,分别标记为 10、11、12、13、14。
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.实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:__________________实验名称: 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生姓名: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习离子交换层析的基本原理;2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术;3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。
二、实验内容和原理(1)实验原理 1、离子交换层析:以离子交换剂为固定相,液体为流动相进行。
离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。
这些过程都是可逆的。
在某一pH 值的溶液中,不同的蛋白质所带的电荷存在差异,因而与离子交换剂的亲和力就有区别。
当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时,使某一种蛋白质的电荷被中和,与离子交换剂的亲和力降低,不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来,达到分离的目的。
离子交换剂是由基质、电荷基团(或功能基团)和反离子构成。
基质 电荷基团 反离子 电荷基团反离子电荷基团反离子基质基质—+—+可逆交换可逆交换溶液中的离子(交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖)阳离阴离子交由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中,粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷,因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。
2、酶活力检测(定性检测)蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),能催化非还原性双糖(蔗糖)裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。
本实验采用 3.5-二硝基水杨酸法,其原理是 3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热(100℃)被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比,由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。
(2)实验内容1、离子层析分离纯化实验1中粗分离纯化的蔗糖酶样品Ⅲ;2、定性检测判断所提取的蔗糖酶纯化样品多少。
三、实验材料与试剂1、实验材料蔗糖酶粗分离纯化样品Ⅲ2、实验试剂① DEAE-Sepharose Fast Flow (弱碱性阴离子交换剂);②20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液;③20mmol/L Tris-HCl,(1mol/L NaCl) pH7.3缓冲液;④0.2mol/L乙酸缓冲液,pH4.5 ;⑤5%蔗糖溶液;⑥3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS试剂)。
附:3,5-二硝基水杨酸试剂配置方法甲液:溶解6.9g 结晶酚于15.2ml 10%NaOH溶液中,并用水稀释至69ml,在此溶液中加6.9g亚硫酸氢钠;乙液:称取255克酒石酸钾钠加到300ml 10%NaOH溶液中,再加入800ml 1%3,5-二硝基水杨酸溶液。
甲,乙二溶液相混合即得黄色试剂,贮于棕色瓶中备用,在室温放置7-10天以后使用。
四、实验器材与仪器1、高速冷冻离心机;2、层析柱(φ1.0×20㎝);3、恒流泵(流速0.8~1ml/min)(10rpm);4、梯度混合器(100ml梯度杯);5、核酸蛋白检测仪(灵敏度0.5A);6、记录仪(纸速:0.5mm/min;灵敏度:50mV);7、部分收集器及收集试管(4ml/管);8、铁架台、夹子(固定层析柱用);9、-20℃冰箱(保存样品用);10、微量移液枪 200ul、1000ul;11、1.5ml离心管(留样品Ⅲ和样品Ⅳ用);12、7ml离心管(留样品Ⅳ用);13、恒温水浴(100℃);14、试管、移液管、试管架等。
五、操作方法和实验步骤1、样品处理(实验1已经完成)①取其中体积较多一只离心管中保存溶液用作离子交换柱层析进一步分离纯化蔗糖酶;②剩余一只用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力的测定以及用于SDS-PAGE分析。
③本实验中取离心管中较多的一只离心管用于实验。
2、装柱、平衡:①检漏:在层析柱中装入水,观察其有无渗漏,如有渗漏,需进行更换;②连接纯化检测系统:按照示意图将系统连接;(梯度混合器在之后打开)③调流速:装柱前先调好流速0.8ml~1ml/min;④加固定相(离子交换剂):a将柱下端的出水口关闭;b加进5ml(约1/3柱床体积)20 mmol/L Tris-HClpH7.3的缓冲液;c将处理好的DEAE—Sepharose Fast Flow,轻轻搅匀沿玻棒靠近柱管壁慢慢连续加进柱内至层析柱上端。
注意事项:a凝胶不能太稀,也不能太稠,刚好呈流质状态;b加入过程不能带进气泡。
⑤调整、平衡:待凝胶自然沉积离柱管上端约1-3cm后松开层析柱出口,控制流速 0.8ml~1ml/min;待柱内凝胶沉降至稳定高度并分出水层后,吸去水层,用玻棒将沉降界面搅匀,再补加处理好的凝胶,直到凝胶沉降至稳定高度距层析柱上端约3cm处为止(注意保持凝胶柱面平整)。
用20 mmol/L Tris-HCl、pH7.3的缓冲液连通层析柱,进行柱平衡,直到流出液与缓冲液的pH一致。
3、加样:①关闭恒流泵:停止加入20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液。
待缓冲液液面与胶体表面相切时,恒流泵停止工作。
②加样品:用胶头滴管缓慢将蔗糖酶蛋白样品溶液(样品Ⅲ)加入层析柱中,注意顺着柱壁滴加,尽可能保持胶面平整。
注意事项:a加样过程中要缓慢,防止凝胶扬起;b在操作的过程中可以采取虎口加样的方法③进行洗脱:打开恒流泵,使样品溶液进入胶体,待样品溶液完全进入胶体后,用少量洗脱缓冲液将残余在层析柱壁上端样品洗下,并完全进入胶体后,再加洗脱缓冲液至一定高度。
4、洗脱(梯度洗脱法)①平衡:加样后,用20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液进行平衡,洗脱流速为0.8ml~1ml/min,洗去未被凝胶吸附的杂蛋白;②梯度洗脱:待层析柱流出液在核酸蛋白检测仪上绘出基线稳定,用20mmol/L Tris-HClpH7.3 缓冲液NaCl梯度洗脱(浓度为0-1mol/L NaCl )层析柱联上梯度混合器,混合器中分别为50ml 0.05mol/L Tris-HCl pH7.3缓冲液和50ml含1mol/LNaCl的0.05ml/L Tris-HCl pH7.3缓冲液。
洗脱流速为0.8~1ml/min,每4ml 接一管,洗脱至缓冲溶液流完为止。
5、酶活力检测①检测:跟踪测定峰值及两侧对应试管的蔗糖酶活力(用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖,从而测定酶活力)蔗糖酶活力检测②留样:将蔗糖酶活力高的若干管酶液集中,留样用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力测定、SDS-PAGE 分析、酶的基本性质实验和用于“用正交法测定几种因素对蔗糖酶活性的影响”(半自主性设计实验),样品低温-20℃保存。
六、实验数据记录和处理样品离心后:上层淡黄色,下层乳黄色。
柱层析图:七、实验结果与分析活力测定结果:根据水浴后各个试管内的颜色深浅判断,第11、12管颜色最深,判断其酶活力最高,与图谱波峰状况相吻合。
图谱分析:洗脱共有两个峰,第一个峰较高,为杂质峰,第二个峰才为洗脱峰。
但洗脱凤峰形并不好,没有明显的下降坡,峰拖的很长。
判断原因可能为:在加入蔗糖酶蛋白样品溶液时,由于样品量过多,分两次加入,前后两次之间有一定的时间差,导致洗脱峰出现后,下降缓慢,甚至有微微上升的趋势。
并且,杂质峰也有下降后重新上升的峰,由此推断洗脱峰峰形不好的原因为加入样品时的不当操作。
同时杂质峰很高,并且持续时间较长,表明杂质很多。
小结:蔗糖酶含量高而且活性强的时候,能在短时间内将大量的蔗糖水解成还原性糖,而3.5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热(100℃)被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比,可依此检验还原糖的量从而标定蔗糖酶的活力及含量。
据实验结果检验可知第一个峰为杂质蛋白,第二个峰为蔗糖酶蛋白。
实验收集的11、12管颜色最深,收集该两管酶液。
八、讨论、心得1、此次实验涉及了很多仪器的使用,由此也总结了一些使用要点和此类实验中的一些注意事项:①在进行凝胶的装填时需要一段时间等待沉降且在整个装填过程中决不能使凝胶暴露在空气里,一旦暴露,那么需要重新装填。
且要求填装得均匀,整齐,没有气泡。
本次试验我们小组就因为干胶而导致了实验的失败。
不仅浪费了很多时间,也表明我们的实验能力还有待提高。
②在使用浓度梯度时需要注意首先应该排出其中的气泡,用胶头滴管分别对准气孔吹吸已达到出去气泡的目的。
气泡的存在会影响盐溶液的浓度,从而影响实验的进行。
③在使用移液枪时应当注意不同的液体应当换取枪头,以免引起液体的污染。
④试管收集器有些时候不够灵敏,应当注意手动调节。
⑤在检测蔗糖酶时由于可以大致推测出现的试管号,在检测时可以有针对性的进行选取,比如可以按照1,3,5,6,7,8等这样的顺序检验。
⑥分离柱的螺帽在使用前应该清洗干净,防止堵塞。
同时应该检查长细管是否流畅,以保证实验的顺利进行。
⑦在进行实验前需检查分离柱是否是垂直的。
⑧打开浓度梯度仪时,当有气泡进入柱时,要求凝胶上方有液体则保证了实验的安全性。
⑨由于该实验较为耗费时间,三个人应该明确分工,有条不紊,这样才可以做到高效。
2、理论深化:①防凝胶干的目的:防气泡,使柱床压紧,减少死体积,从而避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层的问题,有利于分辨率的提高。
②柱平衡的原因:离子层析法使用前必须平衡至所需的pH和离子强度。
柱子装好后用起始缓冲液淋洗,直至达到充分平衡方可使用。
③为什么要洗脱加样?——层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用凝胶过滤达此目的。
④梯度洗脱优点:提高柱效,改善检测器的灵敏度⑤梯度洗脱原理:当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。
梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。
梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。
如图(两个图一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后者为洗脱装置和柱子之间隔离开来,是梯度洗脱的简易装置。
)两个容器放于同一水平上,两容器连通,B与柱相连,当溶液由B流入柱时,A中的溶液就会自动来补充,经搅拌与第一容器的溶液相混合,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。
3、实验体会这次试验整体感觉是混乱,主要原因是对实验过程和仪器操作的不熟悉以及思路的不清晰。
虽然课件上已经把实验讲述的十分清楚,但是我们小组三人在操作过程中对实验的注意事项不了解,导致了干胶之类的事情发生,应该在每一个环节前理解每个操作的意义,关注注意事项,防止实验失误。