生物材料溶血性标准化评价方法比较_溶血率法和氰化高铁血红蛋白法

生物材料溶血性标准化评价方法比较:溶血率法和

氰化高铁血红蛋白法

张伶俐　朱蔚精　谭言飞　屈树新　张兴栋△

(四川大学分析测试中心生物学评价实验室,生物材料工程研究中心,成都　610064)

摘要　采用游离血红蛋白直接测定法即溶血率测定法(根据ISO TR7405)和氰化高铁血红蛋白法(根据ISO 1099324)测定了羟基磷灰石(陶瓷)和胶原(高分子材料)的溶血性能,结果提示这两种方法的结论是一致的,且氰化高铁血红蛋白法较血红蛋白直接测定法有灵敏、稳定、可比性好等优点,值得推广应用。但它存在着一些标准中尚未明确规定的问题。作者在大量试验和不违背标准原则的基础上提出了一些改进意见,使它更具有可操作性,以便于标准化评价生物材料的溶血性能。

关键词　生物学评价　血液相容性　溶血试验

Com par ison between Hem olysis Percen tage M ea surem en t and Hem iglob i ncyan ide M ea surem en t for Standard iz i ng the Eva lua tion of

Hem olytic Properties of B ioma ter i a ls

Zhang L i ngl i　Zhu W e ij i ng　Tan Yanfe i　Qu Shux i n　Zhang X i ngdong∃

(B iolog ica l E va lua tion L aborota ry,A na ly sis and T esting Cen ter,E ng ineering R eseach Cen ter in B io m a teria ls,

S ichuan U n iversity,Cheng d u　610064,Ch ina)

Abstract　In th is study,tw o m ethods——the supernatant hemoglobin spectropho tom etry,i.e.hemo lysis percentage m easurem ent(acco rding to ISO TR7405)and the hem iglobincyanide m easurem ent(acco rding to ISO 1099324)——w ere used to assay the hemo lytic p roperties of hydroxyapatite(bi oceram ics)and co llagen(po lym er).

T he results show ed that the conclusi ons draw n from using the tw o m ethods w ere basically consistent,and the lat2 ter w as mo re sensitive,stable and comparable.How ever,som e of the p rocedures in the hem iglobincyanide m ethod w ere no t defined in details.So based on our experi m ents w e have offered som e suggesti ons and i m p rovem ents, w h ich do no t deviate from ISO and A STM standards,fo r h iher p racticability of usig it in standardizing the evalua2 ti on of the hemo lytic p roperties of bi om aterials.H em iglobincyanide m easurem ent is w o rthy of w ider app licati on.

Key words　B i o logical evaluati on H emocompatibility H emo lysis test

1　引　言

与血液直接或间接接触的生物材料必须评价它的血液相容性。溶血试验检测生物材料与红细胞的相互作用,是一项非常重要的血液相容性评价试验,也是一项重要的体外粗筛试验。目前国内外大多采用游离血红蛋白直接测定法即溶血率测定法评价生物材料的溶血性能[1～6],但国际标准化组织(In ter2 nati onal standard o rgan izati on,ISO)于2000年颁布了ISO D IS1099324:2000标准[7],重点推荐了氰化高铁血红蛋白法(hem iglob incyan ide,H i CN),并指

∃联系人。E2m ail:zhangxd@。T el:028*********明操作程序参考A STM F756293标准[8]。为了与国际接轨,我国正在准备出台相应的等同标准(GB T16886.42xxxx[9])。然而,无论是ISO D IS109932 4:2000还是A STM F756293都还有一些问题没有规定和说明,给这一标准的实施带来一定的困难。比如A STM F756标准要求用3只兔的血分别进行试验,而ISO D IS1099324:2000要求最好用人血,也可以用三只兔的混合稀释血代替人血,因为动物血中兔的溶血性能与人最接近。其次,A STM F756293和ISO D IS1099324:2000都没有规定无定形材料的检测用量,等等。本文对H i CN测定法进行了一些探索,重点分析了不同血液来源和不同材料的测定结果,比较了两种方法的优缺点,并且在不违背标准原则的基础上提出了一些建议,以便更好地贯彻实

生物医学工程学杂志

J B i om ed Eng　2004;21(1)∶111～114