小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
实验六 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
注意事项
1. 穿线系肠管时,速度要快,结扎牢固,应在温热台氏液中进 行。
2. 肠管勿牵拉过紧或过松,与张力换能器的连线必须垂直,不 得与浴槽管壁、通气塑料管接触,以免磨擦。 3. 浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度恒定。 4. 药物应滴在肠管附近,各药用量系参考剂量,若效果不明显, 可以增补加药,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。 5. 每次加药出现反应后,必须立即放掉含药液的台氏液,并冲 洗至少三次,以免引起不可逆反应。待肠管恢复稳定活动后, 再观察下一项目。
实验步骤
(第6张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成无钙台氏液
截图 并清 洗3 遍
台氏液
无钙台氏液
4.观察项目
5)观察温度对肠段收缩的影响 室温台式液
实验步骤
(第7张图)
先恢复相对正常的波形,在将 其中的台氏液换成液
4.观察项目
实验步骤
(第8张图)
6)观察酸碱度对肠段收缩的影响 盐酸后氢氧化钠 +HCl 不洗
外来神经
副交感神经
Ach(+)运动、分泌
激动M受体——兴奋肠道平滑肌收缩
实验动物
家兔 体重?Kg 雌/雄
实验材料
1. 器材
恒温平滑肌槽、BL-420N系统、张力换能器、手术剪、眼科剪、
眼科镊、小烧杯、污物杯、平皿、丝线
2.试剂和药品
台氏液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、 0.01%阿托品溶液、0.1%酚妥拉明溶液、0.01%盐酸溶液、
+NaOH
截图并 并存
实验结束 后将恒温 平滑肌槽 内的液体 倒掉并清 洗实验槽 三次以上
实验结果
要求:共截图8张,有图序和图题。 举例:
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察 (2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌生理特性及药物作用观察实验报告
一、实验目的:①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;
②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;
③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响
二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
㈤
图(五)
图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变化情况
由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为加入盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流减少,进而影响动作电位产生的频率;另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降,肌质网释放钙离子的量减少,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,所以小肠的平滑肌收缩显著减弱。当过几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常。
㈣
图(四)
图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况
由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
图三表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图三可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的m受体结合后可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道使大量的钙离子内流进而使动作电位产生的频率增加所以小肠加完乙site碱后的小肠平滑肌帧绻曲呂慝台氏液小肠平滑肌收缩曲线级完网托品旳秒后再加乙醍胆碱的小肠平滔肌收缩曲图四表示在正常38度台氏液先滴加阿托品三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情由图四可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上体抗结剂与m受体结合了在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜m受体结合就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应所以其收缩没什么明显改变
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,实验药品:台式液、%去甲肾上腺素溶液、%乙酰胆碱溶液、%阿托品溶液、%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420 生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1•恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入%勺阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入%勺乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入%勺去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%勺氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
实验五_离体小肠平滑肌的生理特性与药物作用的观察_(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
四、实验结果
1.0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱
2.0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液
3.1mlBaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明
2.小肠平滑肌的电生理特性
慢波电位小肠平滑肌在静息电位的基础上,自发地产生周期性的轻度去极化和复极化,由于其频率较慢,故称为慢波;因慢波频率对平滑肌的收缩节律起决定性作用,故又称基本电节律。消化道不同部位平滑肌的慢波频率不同,人的慢波频率在胃约每分钟3次,在十二指肠约每分钟12次,回肠末端为8~9次。慢波的幅度为10~15mV,持续时间由数秒至十几秒。
五、实验讨论
1.小肠平滑肌的一般生理特性
1)兴奋性较低,收缩缓慢
小肠平滑肌的兴奋性较骨骼肌低,收缩的潜伏期、收缩期和舒张期所占的时间均比骨骼肌长很多。
2)具有自律性
小肠平滑肌在离体后,置于适宜的人工环境内仍能自动进行节律性收缩和舒张,但其节律较慢,远不如心肌规则。
3)具有紧张性
小肠平滑肌经常保持在一种微弱的持续收缩状态,即ห้องสมุดไป่ตู้有一定的紧张性。平滑肌的紧张性能使消化道内经常保持一定的基础压力,有助于消化液向食物中渗透。平滑肌的各种收缩活动也都在紧张性的基础上进行。
5.加入药物观察并记录曲线
1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml,待收缩到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml,然后再加入同量的乙酰胆碱,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。
2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml,待收缩到最高点时,加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml,3min后再加入同量的磷酸组胺溶液,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,实验药品:台式液、%去甲肾上腺素溶液、%乙酰胆碱溶液、%阿托品溶液、%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
准备工作(加入台氏液,调节温度
长20一30cm) 4~6℃台氏液中 ⑤对电刺激不敏感,但对牵张、温度和化学刺激特别敏感。
2.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体小肠平滑肌的作用。
仪器连接 与设置
3.观察并分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
①兴奋性较低,收缩缓慢。
(两端用细线结扎, 消化道平滑肌的生理特性
每组取一段长3—4cm的肠管,置于4~6℃台氏液中
一端系于挂钩上,另 启动计算机 (4)加入HCL3~4滴,观察平滑肌收缩活动的改变。
观察肾上腺素能受体激动剂对肠段收缩的影响及阻断剂的作用
“实验”菜单中选择“消化”中“消化道平滑肌生理特性”项
标本制备
至38℃,加热,备用) 同(2)比较曲线有何不同。
至38℃,加热,备用)
准备工作(加入台氏液,调节温度
(取下十二指肠及 每组取一段长3— 2.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体小肠平滑肌的作用。
每组取一段长3—4cm的肠管,置于4~6℃台氏液中
物对离体小肠平滑肌的作用。 3.观察并分析平滑肌活动的某些生理特
性及理化环境改变对它的影响。
【实验对象】
【实验步骤】
1.学习一种离体组织器官实验方法。
(取下十二指肠及 其邻近 上段小肠 长20一30cm)
(取下十二指肠及 其邻近 上段小肠 长20一30cm)
【(观取察 下项十目二准】指肠备及 其工邻近作上(段小加肠 入长20台一30氏cm)液,调节温度
一端与张力换能器相 2.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体小肠平滑肌的作用。
实验四 家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察剖析
每组取一段长3—4cm 的肠管,置于温热台 氏液中
启动计算机
“实验”菜单中选择 “消化”中“消化 道平滑肌生理特性” 项
【观察项目】
1.自动节律收缩
2.观察胆碱能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影响 乙酰胆碱 ;阿托品后乙酰胆碱 3.观察肾上腺素能受体激动剂及其阻断剂对肠段收缩的影 响 去甲肾上腺素 ;酚妥拉明后去甲肾上腺素
7. 实验结果一共8张图,每张图要截取一段加药前的正常曲线作为 对照。
9
思考题
1.哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良
好状态需具备哪些基本灌流条件?
2.取肠时为什么采用击昏家兔而不在麻醉下进
行?
3.为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的
变化?其机理是什么?
10
11
12
1、把自己的实验桌面及仪器擦干!
实验六
离体小肠平滑肌生理特性 及药物作用的观察
药理学教研室
1
【实验目的】
1.学习一种离体组织器官实验方法。 2.观察并分析平滑肌活动的生理特性及理化环境 改变对它的影响。
3.观察乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)、阿托品 (atropine)、去甲肾上腺素(noradrenaline, NA)、 酚妥拉明(phentolamine)、无钙台氏液等对离体 小肠平滑肌的作用。
2
【实验原理】
消化道平滑肌的生理特性
①兴奋性较低,收缩缓慢。 ②自动节律性,但频率慢且节律不稳定。 ③紧张性。 ④较大伸展性。
⑤对电刺激不敏感,但对机械牵张、温度和
化学刺激特别敏感。
3
消化道的神经支配
肌间神经丛
控制消化道运动
内在神经
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。
实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。
平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。
2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。
而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。
3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。
而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。
实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。
组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。
2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。
a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用不雅察之羊若含玉创作一、实验目标: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记载剖析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用办法;③不雅察并记载传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管.三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞自己的自发迟缓放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理情况下,应用BL-410/420多媒体生物信号记载剖析系统和换能器系统分离研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响.四、实验记载与剖析㈠图(一)图(一)暗示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变更情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时显著削弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定规模内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会下降,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会削弱.㈡图(二)图(二)暗示在38度台氏液参加肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变更情况由图(二)可知参加肾上腺素后小肠平滑肌收缩显著削弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体联合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度削弱.㈢图(三)图(三)暗示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变更情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩显著增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体联合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强.㈣图(四)图(四)暗示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变更情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无显著的变更,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体联合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不克不及与小肠平滑肌肌膜上的M受体联合,就不克不及引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么显著转变.㈤图(五)图(五)为在正常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠收缩曲线变更情况由图(五)可知在滴加盐酸后小肠平滑肌收缩显著削弱,这是因为参加盐酸后,小肠所处情况的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子内流削减,进而影响动作电位产生的频率;别的氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白联合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、肌纤蛋白对钙离子的敏感性下降,肌质网释放钙离子的量削减,能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化进程,所以小肠的平滑肌收缩显著削弱.当过几秒后参加氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的情况恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常.。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察[目的]了解体外组织器官检测方法;观察离子组成、pH值、温度、乙酰胆碱肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律和很强的延展性,可以刺激化学物质、温度和拉伸较为敏感等生理特性。
将离体的组织、器官至于模拟的内环境中,可在一定时间内保持其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
[实验步骤]1.恒温浴槽的准备工作2.标本制备3.仪器连接与设置4.启动计算机开始记录[观察项目]1.自动节律收缩2.观察胆碱能受体激动剂对肠收缩的影响和阻断剂的影响(1)乙酰胆碱的影响(2)阿托品的影响3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)肾上腺素的作用(2)去甲肾上腺素的作用4.观察钙离子对肠断收缩的影响5.观察温度对肠断收缩的影响6.观察酸碱度对肠断收缩的影响[结果分析]1.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)乙酰胆碱的作用向浴中加入乙酰胆碱后,离体肠道的活性增强,范围增大。
目前认为乙酰胆碱能与肌膜上的M受体结合,开放两种通道:一种是潜在敏感的Ca2+专用通道,另一种是特异性受体激活的Ca2+专用通道。
第一类通道对乙酰胆碱敏感,小剂量乙酰胆碱引起开放;后一种通道对乙酰胆碱相对不敏感,只有高剂量乙酰胆碱能引起开放。
这两种通道的开放增加了肌浆中的Ca2+,然后激活肌原纤维-肌球蛋白ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
(2)阿托品的作用将阿托品溶液加入浴样管中,2分钟后加入乙酰胆碱(ACh)。
结果发现,小肠管的张力和收缩力没有显著变化。
原因是阿托品是一种乙酰胆碱阻滞剂,使乙酰胆碱的作用消失。
因此,添加乙酰胆碱后没有效果。
因此,当两者都加入时,曲线没有明显变化。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
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小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
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一、实验目的
1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。
2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。
3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。
二、实验材料
1.实验动物:豚鼠
2.器材:小肠平滑肌恒温水浴装置,球胆(气泵或氧气筒),张力换能器,烧杯,温度计,
注射器,注射针头,棉线,手术剪,培养皿,滴管。
3.药品:台式液,10-5mol/L乙酰胆碱,10-4mol/L苯海拉明,10-5mol/L磷酸组胺,10-
3mol/L硫酸阿托品,1%BaCl
2溶液。
三、实验方法和步骤
1.豚鼠离体肠平滑肌的制备
以手倒提豚鼠,用木槌猛击其头后部令其急死,立即剖开腹腔,轻轻剪取回肠,迅速
置于冷台式液中,除去肠系膜,并将肠管剪成数段,用台式液将肠内容物冲洗干净,
然后剪成小段备用。
注意操作应轻柔。
2.实验装置的准备
此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。
浴槽内水温由恒温装置控制在
37±0.5℃。
浴管与浴槽相连,以使浴管内营养液保持同样的恒温。
气源(充气气囊或
气泵等)与浴管相连,气流量以1~2个小气泡为宜。
浴管下端与排液管相连,其上
端管口处可随时充入新的恒温营养液。
3.标本连接及记录
轻取一段标本,一端用线系在装置的小钩上,对角线方向将另一端用与张力换能器相
连的小钩钩住,慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜,此时标本通过张力换能器与
计算机相连。
标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液,适应10~15min后,描记
一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。
4.如果环境适宜,标本存活,适应10~15min后,描记一段正常曲线,然后按如下步骤
给药。
5.加入药物观察并记录曲线
1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml,待收缩到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品
0.1ml,然后再加入同量的乙酰胆碱,观察结果。
实验完毕后冲洗浴管三次。
2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml,待收缩到最高点时,加入10-4mol/L苯海拉明
0.3ml,3min后再加入同量的磷酸组胺溶液,观察结果。
实验完毕后冲洗浴管三次。
3)加入1% BaCl2溶液1ml,作用达到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml,再
加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml,观察结果。
四、实验结果
1.0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱
2.0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液
3.1ml BaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明
五、实验讨论
1.小肠平滑肌的一般生理特性
1)兴奋性较低,收缩缓慢
小肠平滑肌的兴奋性较骨骼肌低,收缩的潜伏期、收缩期和舒张期所占的时间均比骨骼肌长很多。
2)具有自律性
小肠平滑肌在离体后,置于适宜的人工环境内仍能自动进行节律性收缩和舒张,但其节律较慢,远不如心肌规则。
3)具有紧张性
小肠平滑肌经常保持在一种微弱的持续收缩状态,即具有一定的紧张性。
平滑肌的紧张性能使消化道内经常保持一定的基础压力,有助于消化液向食物中渗
透。
平滑肌的各种收缩活动也都在紧张性的基础上进行。
2.小肠平滑肌的电生理特性
慢波电位小肠平滑肌在静息电位的基础上,自发地产生周期性的轻度去极化和复极化,由于其频率较慢,故称为慢波;因慢波频率对平滑肌的收缩节律起决定性作
用,故又称基本电节律。
消化道不同部位平滑肌的慢波频率不同,人的慢波频率在胃
约每分钟3次,在十二指肠约每分钟12次,回肠末端为8~9次。
慢波的幅度为10~
15mV,持续时间由数秒至十几秒。
图1. 消化道平滑肌的电活动与肌肉收缩的关系
上面的曲线为细胞内记录的细胞内电位下面的曲线为肌肉收缩
当慢波去极化达到或超过机械阈时,平滑肌细胞出现小幅度收缩;当慢波去极化达到或超过电阈时,可引发动作电位,平滑肌细胞收缩增强,慢波上出现的动作电位数目越多,平滑肌细胞收缩越强。
【1】
3.药物对小肠平滑肌的影响
1)小肠平滑肌受体及激活效应
α2,β2受体激动,胃肠道平滑肌松弛;M3受体激动,胃肠道平滑肌收缩;H1受
体激动,胃肠道平滑肌兴奋收缩。
【2】
2)乙酰胆碱的药理机制
乙酰胆碱Ach可直接激动M3受体,兴奋小肠平滑肌,使其收缩幅度、张力和蠕
动增加。
【2】
3)阿托品的药理机制
阿托品可竞争性拮抗M3受体,对对小肠平滑肌有松弛作用,尤其对活动过度或
痉挛的平滑肌作用更为显著。
可抑制胃肠道平滑肌痉挛,降低蠕动的幅度和频率。
【2】
4)组胺的药理机制
组胺激活H1受体,通过IP3、DAG等信使分子介导,产生支气管与胃肠道平滑肌
兴奋效应。
对多种动物胃肠道平滑肌都有兴奋作用,豚鼠回肠最为敏感。
【2】
5)苯海拉明的药理机制
与组胺竞争结合H1受体,对抗组胺引起的胃肠道平滑肌的收缩作用。
【2】
6)BaCl2的药理机制
Ba2+是Ca2+拮抗剂,经小肠平滑肌Ca2+通道直接进入胞浆,引起相对剧烈的肠管
痉挛。
4.药物曲线分析
1)0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱
初次加入Ach后,小肠平滑肌收缩力明显上升,并趋于稳定;加入阿托品后,
Ach作用被阻断,小肠平滑肌收缩力下降;再次加入等量Ach后小肠平滑肌张力
恢复稳定。
2)0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液
初次加入组胺后,小肠平滑肌收缩力明显上升,并趋于稳定;加入苯海拉明后,
组胺作用被阻断,小肠平滑肌收缩力下降;再次加入等量组胺后小肠平滑肌张力
恢复稳定。
3)1ml BaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明
加入BaCl2后小肠平滑肌张力不规则上升,不久便陷入的痉挛状态;加入阿托品
后,并无张力下降趋势,说明BaCl2作用与M3受体作用无关;加入苯海拉明,肌
张力略微下降,理论上BaCl2作用与H1受体亦无关,推测可能与上一组实验中浴
管内有少量残留组胺有关。
六、实验反思
本次实验中,前期使用第一段小肠进行实验未见到平稳的有节律的收缩图线,起初由于棉线牵拉过紧,使得平滑肌超出适宜的初长度难以收缩。
但当调整松紧程度后仍未见规律的波动起伏。
在使用取回的第二段小肠后,尤其注意在系线过程中,不用金属镊子操作,不在空气中过久暴露小肠,所有的步骤应轻柔完成避免对小肠造成不可逆性损伤,小肠要在水温为37±0.5℃且有通气的条件下才能正常进行收缩舒张运动。
参考目录
【1】朱大年, 王庭槐. 生理学.第8版[M]. 人民卫生出版社, 2013. PP187~188
【2】杨宝峰. 药理学.第8版[M]. 人民卫生出版社, 2013. PP52,66,285~286。