小肠平滑肌的生理特性和药物的影响

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小肠平滑肌的生理特性和药物的影响

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一、实验目的

1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。

2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。

3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。

二、实验材料

1.实验动物:豚鼠

2.器材:小肠平滑肌恒温水浴装置,球胆(气泵或氧气筒),张力换能器,烧杯,温度计,

注射器,注射针头,棉线,手术剪,培养皿,滴管。

3.药品:台式液,10-5mol/L乙酰胆碱,10-4mol/L苯海拉明,10-5mol/L磷酸组胺,10-

3mol/L硫酸阿托品,1%BaCl

2溶液。

三、实验方法和步骤

1.豚鼠离体肠平滑肌的制备

以手倒提豚鼠,用木槌猛击其头后部令其急死,立即剖开腹腔,轻轻剪取回肠,迅速

置于冷台式液中,除去肠系膜,并将肠管剪成数段,用台式液将肠内容物冲洗干净,

然后剪成小段备用。注意操作应轻柔。

2.实验装置的准备

此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。浴槽内水温由恒温装置控制在

37±0.5℃。浴管与浴槽相连,以使浴管内营养液保持同样的恒温。气源(充气气囊或

气泵等)与浴管相连,气流量以1~2个小气泡为宜。浴管下端与排液管相连,其上

端管口处可随时充入新的恒温营养液。

3.标本连接及记录

轻取一段标本,一端用线系在装置的小钩上,对角线方向将另一端用与张力换能器相

连的小钩钩住,慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜,此时标本通过张力换能器与

计算机相连。标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液,适应10~15min后,描记

一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。

4.如果环境适宜,标本存活,适应10~15min后,描记一段正常曲线,然后按如下步骤

给药。

5.加入药物观察并记录曲线

1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml,待收缩到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品

0.1ml,然后再加入同量的乙酰胆碱,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。

2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml,待收缩到最高点时,加入10-4mol/L苯海拉明

0.3ml,3min后再加入同量的磷酸组胺溶液,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。

3)加入1% BaCl2溶液1ml,作用达到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml,再

加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml,观察结果。

四、实验结果

1.0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱

2.0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液

3.1ml BaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明

五、实验讨论

1.小肠平滑肌的一般生理特性

1)兴奋性较低,收缩缓慢

小肠平滑肌的兴奋性较骨骼肌低,收缩的潜伏期、收缩期和舒张期所占的时间均比骨骼肌长很多。

2)具有自律性

小肠平滑肌在离体后,置于适宜的人工环境内仍能自动进行节律性收缩和舒张,但其节律较慢,远不如心肌规则。

3)具有紧张性

小肠平滑肌经常保持在一种微弱的持续收缩状态,即具有一定的紧张性。平滑肌的紧张性能使消化道内经常保持一定的基础压力,有助于消化液向食物中渗

透。平滑肌的各种收缩活动也都在紧张性的基础上进行。

2.小肠平滑肌的电生理特性

慢波电位小肠平滑肌在静息电位的基础上,自发地产生周期性的轻度去极化和复极化,由于其频率较慢,故称为慢波;因慢波频率对平滑肌的收缩节律起决定性作

用,故又称基本电节律。消化道不同部位平滑肌的慢波频率不同,人的慢波频率在胃

约每分钟3次,在十二指肠约每分钟12次,回肠末端为8~9次。慢波的幅度为10~

15mV,持续时间由数秒至十几秒。

图1. 消化道平滑肌的电活动与肌肉收缩的关系

上面的曲线为细胞内记录的细胞内电位下面的曲线为肌肉收缩

当慢波去极化达到或超过机械阈时,平滑肌细胞出现小幅度收缩;当慢波去极化达到或超过电阈时,可引发动作电位,平滑肌细胞收缩增强,慢波上出现的动作电位数目越多,平滑肌细胞收缩越强。【1】

3.药物对小肠平滑肌的影响

1)小肠平滑肌受体及激活效应

α2,β2受体激动,胃肠道平滑肌松弛;M3受体激动,胃肠道平滑肌收缩;H1受

体激动,胃肠道平滑肌兴奋收缩。【2】

2)乙酰胆碱的药理机制

乙酰胆碱Ach可直接激动M3受体,兴奋小肠平滑肌,使其收缩幅度、张力和蠕

动增加。【2】

3)阿托品的药理机制

阿托品可竞争性拮抗M3受体,对对小肠平滑肌有松弛作用,尤其对活动过度或

痉挛的平滑肌作用更为显著。可抑制胃肠道平滑肌痉挛,降低蠕动的幅度和频率。

【2】

4)组胺的药理机制

组胺激活H1受体,通过IP3、DAG等信使分子介导,产生支气管与胃肠道平滑肌

兴奋效应。对多种动物胃肠道平滑肌都有兴奋作用,豚鼠回肠最为敏感。【2】

5)苯海拉明的药理机制

与组胺竞争结合H1受体,对抗组胺引起的胃肠道平滑肌的收缩作用。【2】

6)BaCl2的药理机制

Ba2+是Ca2+拮抗剂,经小肠平滑肌Ca2+通道直接进入胞浆,引起相对剧烈的肠管

痉挛。

4.药物曲线分析

1)0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱

初次加入Ach后,小肠平滑肌收缩力明显上升,并趋于稳定;加入阿托品后,

Ach作用被阻断,小肠平滑肌收缩力下降;再次加入等量Ach后小肠平滑肌张力

恢复稳定。

2)0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液

初次加入组胺后,小肠平滑肌收缩力明显上升,并趋于稳定;加入苯海拉明后,

组胺作用被阻断,小肠平滑肌收缩力下降;再次加入等量组胺后小肠平滑肌张力

恢复稳定。

3)1ml BaCl2溶液-0.1ml硫酸阿托品-0.3ml苯海拉明

加入BaCl2后小肠平滑肌张力不规则上升,不久便陷入的痉挛状态;加入阿托品

后,并无张力下降趋势,说明BaCl2作用与M3受体作用无关;加入苯海拉明,肌

张力略微下降,理论上BaCl2作用与H1受体亦无关,推测可能与上一组实验中浴

管内有少量残留组胺有关。

六、实验反思

本次实验中,前期使用第一段小肠进行实验未见到平稳的有节律的收缩图线,起初由于棉线牵拉过紧,使得平滑肌超出适宜的初长度难以收缩。但当调整松紧程度后仍未见规律的波动起伏。

在使用取回的第二段小肠后,尤其注意在系线过程中,不用金属镊子操作,不在空气中过久暴露小肠,所有的步骤应轻柔完成避免对小肠造成不可逆性损伤,小肠要在水温为37±0.5℃且有通气的条件下才能正常进行收缩舒张运动。

参考目录

【1】朱大年, 王庭槐. 生理学.第8版[M]. 人民卫生出版社, 2013. PP187~188

【2】杨宝峰. 药理学.第8版[M]. 人民卫生出版社, 2013. PP52,66,285~286

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