细胞生物学复习资料

第二章细胞生物学实验技术

一、名词解释

1．显微分辨率（microscopic resolution）---在一定条件下利用显微镜所能看到的精细程度。

2．放射自显影技术（autoradiography）---用于整个细胞时，可以确定放射性标记物在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时，能鉴定出放射性的条带或菌落。

3．双向凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis）---根据分子质量及等电点的不同将复杂的蛋白质混合物分开。这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上千种蛋白质。

4．倒置显微镜（inverted microscope）---一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的活细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比，其光源、聚光镜和物镜的位置是倒置的，即光源在上，物镜在载物台的下方。另外，其聚光镜和物镜有较长的工作距离，以方便放置有一定厚度的培养瓶。

二、简答题

1．电子显微镜为何不能观察活标本？

因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件。

2．简述冷冻蚀刻术的原理和方法。

冷冻蚀刻（freeze－etching）技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的更

复杂的复型技术。如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的冰在真空

中升华，而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。当大量的冰升华之后，对浮雕表

面进行铂一碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料，复型经重蒸水多次清洗后，捞在载网上作电镜观察。

3．比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜。

答：都是用于放大与分辨微小结构，都是通过标本电子束的影响来探测标本

结构。

TEM：电子束穿过标本，聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切片

标本，有极高的分辨率，可给出细微的胞内结构。

SEM：电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于显像屏上。可以

反映未切片标本的的表面特征。

4．扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么？

扫描隧道显微镜（scanning tunneling microscope，STM）由Binnig等1981年发明，是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的。当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出，形成隧道电流。电流强度和针尖与样品间的距离有一指数关系，当探针沿物质表面按给定高度扫描时，因样品表面原子凹凸不平，使探针与物质表面间的距离不断发生改变，从而引起电流不断发生改变。将电流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态。扫描隧道显微镜的分辨率很高，横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。它的优点是三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察，而普通电镜只能观察制作好的固体标本。

优越性：1)高分辨率原子级分辨率，横向为1埃，纵向为0.1埃。2)可直接绘

出三维立体结构图像；3)可在常压、空气甚至溶液中探测样品，且可避免高能电子束的破坏作用；4)成像快；5)不需要任何透镜，体积小。

5．比较差速离心和密度梯度离心。

都是利用离心力对细胞匀浆悬浮物中的颗粒进行分离的技术。差速离心通常用于分离细胞器和较大的细胞碎片，分离的对象都比介质密度大。密度梯度离心也可分离较大颗粒和细胞器，但更多用于分离小颗粒和大分子物质。介质形成一个密度梯度，所分离的物质密度小于介质底物的密度。

6．在进行细胞组分的分离时，实验方案设计的一般原则是什么？

根据所分离的物质具有一定的体积和密度，通过离心力场的作用加以分离，根据这两个因素可设计速度离心、等密度离心(蔗糖CsCl)。

7．用细菌质粒和噬菌体基因组克隆真核生物的DNA有什么不同？

都是储存和扩增真核生物DNA片段的技术，当克隆DNA数目为几十到几百个碱基时细菌质粒是合适的载体。对于较长的DNA分子，病毒载体更合适。在长满菌苔的平板上可聚集成百上千的噬菌斑，每个都可以用于筛选目的基因。

第三章细胞的结构与起源

一、名词解释

1．模板组装（template assembly）-----指由模板指导，在一系列酶的作用下，合成新的、与模板完全相同的分子。这是细胞内一种极其重要的组装方式，DNA和RNA 的分子组装就属于此类。

2．酶效应组装（enzumatic assembly）---相同的单体分子在不同的酶系作用下，生成不同的产物。

3．自体组装（self assembly）---生物大分子借助本身的力量自行装配成高级结构，现代的概念应理解为不需要模板和酶系的催化，以别于模板组装和酶效应组装。4．细胞社会学（cell sociology）---细胞社会学是从系统论的观点出发，研究细胞整体个细胞群体中细胞间的社会行为（包括细胞间识别、通讯、集合和相互作用等），以及整体和细胞群对细胞的生长、分化和死亡等活动的调节控制。

二、简答题

1．举例说明内膜系统的形成对真核生物细胞是有利的。

如吞入一些物质象食物颗粒，把它们隔离起来而独自享用。而原核细菌无法

捕食大块食物，而是通过输入物质在环境中分解食物，一起分享。

2．真核生物和原核生物细胞的共同点有哪些？

重点是四点：1)有DNA；2)有核糖体；3)分裂法增殖；4)都有质膜。

3．真核生物和原核生物细胞的区别有哪些？

区别原核细胞真核细胞大小1~10μm10~100μm

细胞核无核膜有双层的核膜

染色体形状环状DNA分子线性DNA分子

数目一个基因连锁群2个以上基因连锁群

组成DNA裸露或结合少量蛋白质DNA同组蛋白和非组蛋白结合

DNA序列无或很少有重复序列有重复序列

基因表达RNA和蛋白质在同一区间合成RNA在核中合成和加工；蛋白质在细胞质

中合成

细胞分裂二分或出芽有丝分裂和减数分裂，少数出芽生殖。