液相色谱仪日常维护及常见故障解决
液相色谱仪的维护与常见故障
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进样器
停机前一定冲洗洁净进样 器内残留旳样品或缓冲盐,预 防样品和无机盐沉积造成进样 阀转子面磨损或堵塞。
注射器最佳使用仪器自配 尖头、平头针,不要用其他仪 器旳。
1、储液器
▪ 储液器或流动相被污染
产生有规则旳噪声; 基线上升,梯度洗脱出鬼峰; 原因:
溶剂质量差(含杂质多); 配流动相旳玻璃器皿不合格,微生物 影响; 配制流动相旳操作不当(过滤、脱 气、搅拌).
2、输液泵
▪ 单向阀
a.球和阀座粘在一起,堵死,打不出 溶剂,(缓冲盐流动相) 用高质量旳溶剂冲洗,不同极性溶 剂冲洗,如水、甲醇、异丙醇、二 氯甲烷…,更换新单向阀。
健合相流失
▪
保存值变化、峰 形差、N下降
样品堵塞 压力高
强吸收样品
▪
N下降、保存值 小
▪ 处理方法 倒柱冲洗或换过滤 片 修补柱头
换柱
▪ 用能溶解样品旳 溶剂冲洗
强溶剂反冲
5、检测器
紫外—可见光检测器
a.灯故障:基线噪声大,敏捷度低, 氘灯寿命:1000h 汞灯和钨灯寿命:2023h 一般使用6个月以上可能接近寿
液相色谱仪旳日常维护 与常见故障排除
一 液相色谱仪旳 日常维护
储液器
使用HPLC试剂/溶剂,含缓 冲盐旳流动相过0.45μm膜除去 微粒物质;更换流动相时,应彻底 清洗,预防交叉污染。
定时清洁储液器及附件,预 防长微生物。
输液泵
密封垫易损坏引起故障,每天试验结 束一定要仔细冲洗泵,注意预防堵塞,使用 缓冲盐流动相时,更要小心。
液相色谱仪日常维护及常见故障解决精品PPT课件
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管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测,如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测,如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后,会造成灵敏度下降、 噪声加大,应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机(在线) 3 泵(单元、二元、四元) 4 进样器(手动、自动) 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长(nm) 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时,应使用一个廉价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
液相色谱仪的维护保养和注意事项
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液相色谱仪的维护保养和注意事项
一、日常维护保养
1.清洗和清理仪器内部定期清洗和清理液相色谱仪的内部,包括流动相管道、检测器、色谱柱等
部分,以防止堵塞和污染。
使用专用的清洗液清洗仪器,并根据仪器说明书进行正确的操作。
2.检查泵密封和柱塞杆定期检查液相色谱仪的泵密封和柱塞杆,确保其正常运转。
若发现密封圈
磨损或柱塞杆有异物堵塞,应及时更换或清理。
3.更换过期或损坏的零件随着使用时间的增长,液相色谱仪的一些零件可能会过期或损坏,如流
动相过滤器、单向阀等。
发现这些零件出现问题时,应及时更换,以保证仪器的正常运转。
4.校准仪器为保证液相色谱仪的准确性和稳定性,应定期进行仪器校准。
根据仪器说明书的要求,按照操作规程进行校准,并记录校准结果。
二、使用注意事项
1.防止压力过高或过低液相色谱仪的正常运转需要稳定的压力。
在使用过程中,应避免压力过高
或过低,以免对仪器造成损害。
若发现压力异常,应及时检查泵、流路和检测器等部分,并采取相
应措施。
2.避免使用不适当的流动相流动相是液相色谱仪的重要组成部分,使用不适当的流动相可能会影
响分离效果和仪器寿命。
在使用流动相时,应注意其纯度、极性和组成等参数,并根据实验要求选
择合适的流动相。
3.定期检查泵密封和柱塞杆液相色谱仪的泵密封和柱塞杆是仪器的重要部件,若出现故障可能会
影响仪器的正常运行。
在使用过程中,应定期检查泵密封和柱塞杆的状态,如有异常应及时更换或
维修。
液相色谱仪的日常维护和故障排除
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液相色谱仪的日常维护和故障排除封跃鹏邱赫男(国家环保总局标准样品研究所,北京,100029)来源:«分析仪器»1日常维护1.1 泵泵是液相色谱仪的心脏,须精心维护和保养。
处于良好工作状态的泵,其基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。
要使泵具备良好的操作性能,应该保持泵系统的清洁。
具体做法如下:(1)要选择优质的容剂和试剂,在进入仪器前用0。
45um膜过滤,并进行脱气处理。
(2)泵开始使用时,一定要用合适的流动相彻底清洗干净。
(3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈,并经常清洗进液处的微孔滤头。
(4)改变流动相时,应避免沉淀产生,以防止泵堵塞。
1.2 色谱柱色谱柱是化合物分离的关键。
保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数,且仪器基线平稳。
色谱柱比较娇气,在平时的工作中须注意以下事项:(1)色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时,一定要保证阀件或管路的清洁。
(2)流动相在使用前必须进行脱气处理,尽量不使用或少使用高粘度的流动相。
(3)在满足灵敏度的情况下,尽可能使用小进样量。
如果样品比较“脏”,要进行净化或提纯处理。
(4)分析结束语后,要清洗掉进样阀中残留的样品,并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。
(5)如色谱柱长期不用,应该用适当的有机溶剂保存并封闭或定期给柱子补充合适的流动相。
1.3 检测器对于紫外检测器,在分析柱平衡的差不多时,开启检测器;在分析完成后,马上关闭检测器。
1.4 进样器分析结束后,应反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染或堵塞。
2 常见故障的分析与排除既使日常精心维护的液相色谱仪,随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。
现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下:2.1 保留时间变化保留时间的变化有三中情况:波动、缩短、延长。
保留时间出现波动时,应检查柱温是否处于恒温状态,如果设置为室温,气温的变化会引起保留时间的波动,应该设置为恒定温度;等度和梯度间还没有充分达到平衡状态时,应该用十倍以上柱体积的流动相去平衡色谱柱;缓冲液浓度太低时,应换用>25mmol/L的缓冲液;色谱柱被污染或已经接近柱寿命时,应更换保护柱或换新色谱柱。
高效液相色谱仪常见故障及解决方法
![高效液相色谱仪常见故障及解决方法](https://img.taocdn.com/s3/m/beb03e9227fff705cc1755270722192e45365884.png)
高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象:泵无法正常启动或启动后无法正常停止。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧。
2. 故障现象:泵的流量不稳定或无法调节。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧;检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏,如损坏,更换密封圈。
二、流动相跑空1. 故障现象:流动相液位下降至最低液位以下,导致无法正常进样。
解决方法:检查流动相的储液瓶是否已空,如已空,重新更换储液瓶;检查流动相的流速设置是否正确,如不正确,重新设置流速;检查管路是否有泄漏点,如存在泄漏点,修复泄漏点。
2. 故障现象:流动相液位迅速下降,导致无法正常进样。
解决方法:检查废液瓶是否已满,如已满,倾倒废液;检查管路是否有堵塞或弯折,如有,更换管路或调整管路布局。
三、峰面积重复性差1. 故障现象:同一色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查进样针的清洗是否彻底,如不彻底,加强清洗;检查样品前处理的稳定性是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:不同色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查流动相的组成是否恒定,如不恒定,重新配制流动相;检查色谱柱的稳定性是否可靠,如不可靠,更换色谱柱;检查检测器的波长是否准确,如不准确,重新调整波长。
四、峰丢失1. 故障现象:在色谱图中看不到预期的峰。
解决方法:检查进样针是否堵塞或断裂,如堵塞或断裂,更换进样针;检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查样品前处理是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:在流动相中添加了某种物质后,出现了预期之外的峰。
解决方法:检查流动相中添加的物质是否稳定,如不稳定,重新配制流动相;检查检测器的灵敏度是否足够高,如不够高,调整灵敏度;检查色谱柱的类型是否正确,如不正确,更换色谱柱。
液相色谱分析常见故障及解决方法 液相色谱维修保养
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液相色谱分析常见故障及解决方法液相色谱维修保养液相色谱作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确方式操作的话,就容易导致一些棘手的小问题。
其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。
对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。
常见问题及解决方法一、柱压问题柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。
压力过高、过低都属于柱压问题。
1压力过高这是液相在使用中常见的问题,指的是压力突然升高,1、一般都是由于流路中有堵塞的原因。
此时,我们应该分段进行检查。
(1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。
处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。
如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查;(2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。
处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。
如果压力降至100PSI以下,过滤白头正常,在检查;(3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。
处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。
如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。
这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。
问题无法解决可考虑更换色谱柱。
液相色谱仪常见故障分析及解决要点
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液相色谱仪常见故障分析及解决要点液相色谱仪作为一种常用的分析仪器,经常会遇到一些故障。
以下是液相色谱仪常见故障的分析及解决要点:1.噪声增加:可能原因:进样器泄漏、柱床固定不良、柱床老化、流体系统不稳定等。
解决方法:检查进样器和柱床的连接,更换柱床,检查流体系统并重新校准。
2.峰形畸变:可能原因:柱床老化、进样器问题、流体系统堵塞等。
解决方法:更换柱床、清洗进样器、检查流体系统并进行维护。
3.基线漂移:可能原因:溶剂质量不纯、流体系统不稳定、进样器问题等。
解决方法:更换纯净溶剂、检查流体系统并重新校准、清洗进样器。
4.压力异常:可能原因:流体系统堵塞、泵的柱床老化、柱床压力限制等。
解决方法:清洗流体系统、更换柱床、检查柱床的压力限制。
5.进样器问题:可能原因:进样器泄漏、进样器柱床老化、进样器阀门不灵活等。
解决方法:检查进样器的连接,更换进样器柱床,润滑进样器阀门。
6.柱温控制问题:可能原因:柱温控制器故障、柱床老化、温度传感器问题等。
解决方法:更换柱温控制器、更换柱床、校准温度传感器。
7.柱床老化:可能原因:使用时间过长、样品残留、溶剂残留等。
解决方法:更换柱床、进行柱床维护、清洗柱床。
8.溶剂选择错误:可能原因:溶剂质量不纯、溶剂选择不适合分析物等。
解决方法:更换纯净溶剂、重新选择合适的溶剂。
9.柱床堵塞:可能原因:样品残留、溶剂残留、柱床老化等。
解决方法:清洗柱床、更换柱床、进行柱床维护。
10.柱床压力限制:可能原因:柱床老化、流量设置不合理等。
解决方法:更换柱床、重新设置流量。
在解决液相色谱仪常见故障时,需要注意以下要点:确定故障现象,并记录下来,有助于分析和解决问题。
了解仪器的正常工作原理,对比故障现象,定位故障的可能原因。
逐一排除故障可能原因,一步一步进行检查和测试,从最简单的可能原因开始排除。
如果无法解决故障,及时向仪器供应商或相关专家咨询,并提供详细的故障描述和测试结果。
定期进行仪器的维护和保养,包括清洗柱床、更换柱床、校准流量和温度等。
液相色谱仪常见故障处理 液相色谱维护和修理保养
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液相色谱仪常见故障处理液相色谱维护和修理保养Agilent液相色谱仪的常见故障处理Agilent液相色谱仪12901、Agilent液相色谱仪—出峰不佳,峰分叉(1)色谱柱被污染;(2)柱头填料塌陷。
处理对于这种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
如冲洗后仍旧出峰不佳,则考虑第二种情况。
对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。
去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。
柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。
2、Agilent液相色谱仪—既无压力指示,又无液体流过(1)泵密封垫圈磨损;(2)大量气泡进入泵体。
处理对于这种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮忙抽出空气。
3、Agilent液相色谱仪—柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。
处理对于这种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压渐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
4、Agilent液相色谱仪—气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。
液相色谱仪日常维护及常见故障解决.
![液相色谱仪日常维护及常见故障解决.](https://img.taocdn.com/s3/m/73c35d92f524ccbff021840a.png)
1.从部件的运转情况推测,如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测,如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的 管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
RT 重现性好, 但峰面积重现性不好 - *进样量-选用定量管进样时,进样 体积应大于3倍定量管容积; *样品, 气泡; *样品在流动相各组份中不能充分 溶解(通常伴随有柱压逐渐升高 且经反冲后,柱压会恢复正常之现 象); *基线噪声的影响; *积分处理的影响;
无样品峰
未进样 泵未工作 漏液 流动相或样品的问题 柱子或保护柱的问题 数据采集装置的问题或其与检测器连线的问题
最简单快捷的检查 - 泵是否工作, 系统是否漏液, 进一针丙酮溶液检查检测 器读数及数据单元是否有响应
负峰 组份的ABS值小于溶剂的ABS值 气泡通过了检测池
对RI检测器不一定是有了问题,很可能是正常的
丙酮 乙醛
醋酸 乙酰胺 乙烯 乙炔 乙睛 硝基甲烷
271 293
271 208 193 173 <160 271
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的 最大吸收峰的强度和位置。
溶剂过滤
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能。 遵从下列建议可以提高性能,延长溶剂过滤器的寿命:
2 脱气机
目的
排除溶解在流动相中的氧气和 氮气
液相色谱仪5种常见故障及处理方法
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液相色谱仪5种常见故障及处理方法液相色谱仪是一种常见的分析仪器,在实验室中广泛运用。
但在实验中容易出现各种故障,严重影响实验结果的稳定性和准确性。
本文将介绍液相色谱仪的常见故障及其相应的处理方法,帮助实验人员提高实验效率和结果准确性。
故障1:峰缺失在进行液相色谱分析时,有时会发现某些峰的积分值明显偏低,或者甚至完全缺失。
这可能是由于以下几个原因导致的:可能原因:•柱子老化:液相色谱柱子长时间使用后,固定相可能流失或减少,导致结果出现峰缺失现象。
•进样量过大:进样量过大会使筛选柱中固定相与溶剂质量比例失衡,固定相与溶剂的分配不均匀,导致出现峰缺失现象。
•混杂:在样品制备时,不同的物质可能相互混合,导致某些组分不能被分离出来。
•溶剂挥发:极性溶剂如甲醇、乙醇等挥发性高,可能存在液相进样器进入柱子后被挥发掉的情况,影响分离。
处理方法:•柱子检测和维护:长时间使用后,液相色谱柱子的使用寿命会有所下降,建议定期检测和维护柱子。
•调节进样量:对进样量大小进行合理的调整,保证样品与固定相之间的比例均匀。
•加强样品制备:对样品进行充分的制备和清洁,避免溶剂挥发和不同组分混杂而导致结果不准确。
故障2:峰畸变峰畸变是指在分离的过程中,某些峰出现形状异常的变化。
峰畸变可能由以下原因导致:可能原因:•溶剂流速过快:溶剂流速过快,使柱子温度在某些区域过高或过低,导致峰的畸变。
•浓度不均:样品中各种组分的浓度不同,会使分离出的峰形状偏移或发生变化。
•柱子填充不均:柱子填充不均匀,导致分离出的峰形状不正常。
•流量不均:液相色谱仪内流体发生过快或过慢,可能会导致峰的畸变。
处理方法:•调节流速:合理地调整溶剂流速,使柱子内的流体分布均匀,以避免在特定点出现温度异常。
•调整样品浓度:避免样品中某种组分过多或过少,导致分离出的峰的畸变。
•检查柱子的填充和维护:检查液相色谱柱子的填充情况和保养,确保柱子填充均匀、表面光滑,避免填充物团聚、不均匀等情况。
液相色谱仪常见故障解决方法
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液相色谱仪常见故障解决方法液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。
液相色谱仪通过溶液在固定相中的流动和分配,实现化合物的分离和纯化,是一个高效、准确、灵敏的分析工具。
然而,在液相色谱仪的使用过程中,可能会出现一些常见的故障,影响仪器的正常运行。
本文将介绍液相色谱仪常见故障的解决方法。
一、柱塞堵塞、压力过高柱塞是液相色谱仪中一个比较容易出现问题的部件,主要是由于样品太脏或柱填充物不匹配所致。
当柱塞堵塞时,会使得柱塞处于压力过高的状态,出现警报或故障状态。
解决方法有:1.更换柱:首先确认柱是否会造成高压或警报。
如果是这种情况,就需要更换柱。
在更换柱时要检查柱塞的清洁程度,以防止新柱被污染。
2.更改柱滤器:柱滤器通常在气体泼射器前面,更改柱滤器通常可以解决高压问题。
当柱滤器过滤器堵塞,会导致高压或警告。
3.清洗柱塞:如果柱没有问题,那么应该清洗柱塞。
柱塞清洗包括两个步骤:首先使用80%甲醇/水溶液清洗柱塞,然后使用水清洗纯化液。
清洗后需要重新平衡柱塞,并验证分离效果。
二、信号弱或无信号当液相色谱仪中出现信号弱或无信号情况,可能是由于以下原因:1.流量不足:检查流量计是否准确,检查连接管路是否有循环截止阀、波纹管等机件体积。
2.泵的密封件受损:泵的密封件受损将会泵送溶液失去压力。
检查密封件是否需要替换。
3.针尖堵塞:当针尖堵塞时,样品不能够流入柱塞,因此需要检查针尖是否堵塞,并清洗一些碎屑或沉淀。
4.液路或电缆确保连接紧密:在液相色谱仪使用前,确保所有线路都连接稳固,所有阀门和接口都紧密。
三、色谱峰变形或基线波动当色谱峰变形或基线波动时,可能是由于:1.采样瓶子不干净:检查采样瓶子是否清洁,以便去除可能影响样品质量的异物。
最好在使用前进行喷洒以杀灭微生物。
2.针头未彻底清洗:尽量使用精细的过滤器进行液体过滤。
【干货】液相色谱仪常见故障及维修方法
![【干货】液相色谱仪常见故障及维修方法](https://img.taocdn.com/s3/m/3d91b5ca227916888586d719.png)
故障现象一:泵不能正常运行故障描述:开泵后,仪器报错,显示主位置错误,泵不能正常运行。
故障原因及解决方法:以LC-20AT为例,泵报错HOME POS,代表传感器无法检测到电动机的原始位置,电动机不能运行,或是空转。
原因可能是泵体缺机油,椭轮、连接轮磨损,导致电机不能带动椭轮;皮带松动,使电机不能正常传动到椭轮;位置传感器脏,不能正确感应电机初始位置。
解决方法:将仪器断电,打开仪器上盖板与泵体盖板,可以看到泵体内部构造。
观察泵体内部有无锈渍,用手前后转动皮带观察椭轮与连接轮之间运动是否流畅,及时清理泵体内部的锈渍及杂质,并在椭轮和连接轮上加机油,直到海绵上的机油饱和(固定螺丝的槽内也应适当加一点机油);用手前后转动皮带感觉皮带松紧及皮带有无变形,如有问题应调整或更换皮带,使皮带与齿轮之间的摩擦力变大;检查位置传感器上是否有浮灰并及时清理。
故障即可排除。
故障现象二:漏液报警故障描述:打开仪器后,仪器显示漏液报警。
故障原因及解决方法:首先检查仪器各连接管路是否有漏液,如有漏液可通过拧紧或更换各连接部件解决。
若没有检查到有漏液现象,可通过面板VP按键进入到校正支持组CALIBRATION,检查漏液阀值是否设置过低。
LEAK THR显示当前设置值(当实际检测值超过此值时报警),ActLv显示当前实际值(指当前在传感器周围的溶剂蒸气浓度),重新调整设置值,故障即可排除(适用于泵、检测器等带有漏液传感器的各个仪器组成单元)。
故障现象三:器基线漂移故障描述:仪器运行后,检测器基线长时间漂移,不能平衡,有时候噪音很大。
故障原因及解决方法:首先,检查泵压是否稳定。
若泵压不稳,单向阀内可能有异物或气泡;预柱、色谱柱、手动进样器、在线过滤片或者管路堵塞。
解决方法:将单向阀拆下用超声波清洗,根据样品分析时使用的不同流动相(如有机溶剂、无机溶剂、含盐溶剂),可以判断选择清洗液。
清洗完单向阀并重新装上后,为防止在单向阀内产生气泡,可以先用甲醇做流动相赶一下气泡,再根据分析时使用的不同流动相选择不同的置换液(注意:在置换甲醇时不要把气泡带入管路中);更换色谱柱或者用阻尼管代替色谱柱,看压力有无变化,判断色谱柱是否堵塞。
液相色谱仪常见故障的处理方法
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液相色谱仪常见故障的处理方法液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于制药、化工、环境等领域。
然而,液相色谱仪在运行中难免会遇到故障,这些故障如果不及时处理,将会影响分析结果的准确性和可靠性。
下面就介绍一些液相色谱仪常见故障的处理方法。
一、泵系统故障1.1 压力稳定性差当液相色谱仪中的某一个压力降较大时,其稳定性会变差。
此时可以尝试根据实际情况适当调整流速或空气泡数量,并检查泵的活塞是否顺畅,是否需要更换。
1.2 漏气在进行某些特殊的分析时,需要使用无气泡溶剂,如果出现漏气,可能会使得分离柱床压缩,导致分离效应减弱。
此时需要及时检查泵的密封性,并根据实际情况更换密封圈或换泵头。
二、检测器故障2.1 检测器响应不稳定液相色谱仪的检测器响应不稳定可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
一些常见的影响因素包括:灯丝寿命、流量计的稳定性、载气的纯度等。
针对这些因素,可以通过更换灯丝、清洁流量计和更换或加入更纯的载气来解决。
2.2 信号噪声过大如果检测器的信号噪声过大,可能会干扰峰的分析,导致分析结果不准确。
这时可以尝试调整检测器的增益、检测器和信号放大器的设置,或者更换检测器的灯丝和各种电子元器件。
三、自动取样器故障3.1 管道堵塞当自动取样器采样管道出现堵塞时,会使得样品无法正常进入分析系统,从而导致分析结果的不准确。
此时可以尝试使用针筒或吸头进行清洗,注意不要损坏管道,或者更换采样针头。
3.2 移液量不准确液相色谱仪的自动取样器需要能够准确地移液,否则可能会影响分析结果的可重复性。
一些常见的影响因素包括:采样针头的污染、吸头容量的错误等。
这时可以尝试更换采样针头,或者重新校正吸头容量。
四、其他故障4.1 通道阻塞当液相色谱仪中的通道出现阻塞时,会使得分离效应不理想,从而影响分析结果。
此时可以尝试使用清洗溶液进行清洗,或者更换分析柱。
4.2 控制系统故障液相色谱仪的控制系统故障可能会影响仪器的正常运行。
对于这种情况,可以尝试重启控制系统,检查控制系统的电源和通信线路。
高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障处理方法
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高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障处理方法摘要:高效液相色谱是以高压液体为流动相,采用经典液相色谱法的色谱过程。
高效液相色谱作为一种高灵敏度、高选择性的快速分离色谱,在医疗保健、食品安全、环境化学等领域得到了广泛的应用。
仪器在使用过程中不可避免地会遇到一系列问题,影响仪器的正常工作。
保证仪器的正常运行,保证分析人员能够准确可靠地分析数据。
仪器操作人员如果能够按时进行日常维护工作,了解常见故障的预防和排除方法,就能最大限度地发挥仪器的性能。
根据实践经验和有关资料,本文简要介绍了高效液相色谱仪的科学维护和故障排除。
关键词:高效液相色谱;故障诊断;排除;方法1、高效液相色谱概述高效液相色谱是19世纪60年代末发展起来的一种分析方法。
近年来被广泛应用于活性成分、营养强化剂和保健食品中。
高效液相色谱法可用于分析世界上大约80%的有机物。
高效液相色谱由输液系统(含储液罐、高压泵等)、分离系统(含采样器、高压泵等)、色谱柱、检测系统(含试验等)、采集系统(含馏分采集器、,自动采集装置)等,这些系统就象人的脉络一样相互依赖,每个环节的故障都会影响检测结果的可靠性和真实性。
因此,液相色谱仪的故障排除和日常维护对延长色谱仪的使用寿命至关重要。
2、高效液相色谱仪常见故障及处理方法2.1输液泵常见故障及处理2.1.1止回阀的故障及处理球阀和阀座的密封不严密,即使球阀和阀座粘在一起,也会导致液体回流和压力不稳定。
处理方式,应当立即打开排气阀,用高流速溶液冲洗泵,直到排放呈线性。
如果泵进口处有气泡,也可以排出泵头上的气泡,具体方法是:用扳手握住进气泡的泵头,松开出口管的压力盖,用手泵送液体,然后将看到气泡从孔中挤出,直到气泡流出并拧紧压力盖。
如果压力仍然不稳定,可以认为止回阀磨损,球体不光滑,需要更换零件。
2.1.2泵垫圈故障泵密封的常见问题是系统密封泄漏和污染。
严禁采用强酸和强碱溶液进行冲洗,溶液的pH值一般调整为中性。
液相色谱仪的维修保养
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液相色谱仪的维修保养液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物等领域的分离、鉴定和定量分析。
为了保证仪器的正常工作和准确性,需要进行定期的维修保养。
本文将介绍液相色谱仪的常见故障及其维修保养方法。
常见故障及维修保养方法1. 柱床泄漏柱床泄漏可能会导致样品无法分离和检测结果失真。
其主要原因是柱床底部的垫圈、螺丝等零部件磨损或损坏。
维修保养方法如下:•检查柱床底部的垫圈和螺丝是否磨损或松动,如有问题及时更换或紧固。
•定期清洗柱床表面,避免灰尘和杂质产生磨损。
2. 洗脱液泵失灵洗脱液泵失灵会导致洗脱液无法流动,从而影响柱床内样品的洗脱和分离。
其主要原因是洗脱液管路堵塞或洗脱液泵的柱塞和密封件磨损。
维修保养方法如下:•定期清洗洗脱液管路,避免杂质和沉淀物积累。
•定期更换洗脱液泵的柱塞和密封件,避免磨损。
3. 柱温控制不准柱温控制不准可能会导致柱床温度波动,影响样品的分离度和保留时间。
其主要原因是温控器、热敏电阻等零部件故障。
维修保养方法如下:•定期检查温控器和热敏电阻等零部件是否损坏或老化,及时更换。
•定期清洗柱温控制系统,避免沉淀物和杂质产生故障。
4. 检测器信号异常检测器信号异常可能会导致检测结果不准确或完全无法检测。
其主要原因是检测器光路堵塞、光电池老化或检测器本身故障。
维修保养方法如下:•定期清洗检测器的光路和光电池,避免灰尘和杂质堵塞或污染。
•定期检查检测器本身是否故障,及时更换或修复。
5. 液体泵噪音大液体泵噪音大可能会影响仪器的正常运行,并且说明液体泵可能已经损坏或老化。
维修保养方法如下:•定期检查液体泵是否存在异响或噪音,如有问题及时更换或修复。
•定期清洗液体泵表面,避免灰尘和污垢积累。
维修保养注意事项除了以上常见故障及其维修保养方法外,维修保养液相色谱仪还需要注意以下几点:•仪器维修保养应由专业的技术人员进行,避免不正确的操作造成仪器的二次损坏。
•维修保养期间需要严格遵守安全操作规程,避免对个人和设备造成损害。
液相色谱仪的维护与维修
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液相色谱仪的维护与维修一、常见故障与排除方法1、泵①单向阀现象:柱压波动范围很大。
原因:单元向阀污染或阀内进入气泡引起。
污染使得球与阀座密封不严,液流倒流,压力不稳,或球与阀座粘在一起阻死。
气泡进入阀中会紧贴在阀体的一侧,使球难以返回到阀座,引起倒流,使压力和流速变化范围大,有时甚至为零。
措施:对于污染用不同极性的一系列溶剂冲洗有可能解决问题,如用25mL水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷依次冲洗。
或拆下进出单向阀放在10%的硝酸液内超声清洗30~60min,若仍不解决问题则要更换单元向阀。
对于阀内进入气泡不必弄清气泡存在何处,只要打开泄液阀大流速冲洗就可解决问题,在冲洗泵时可用扳手迅速打开泵头上的输出管路,以促进气泡排出。
②塞杆密封垫现象:在高压下压力不稳定,从泵头渗漏流动相液体,反映在分析结果上是样品保留时间的改变。
原因:垫圈与运动着的柱塞杆紧紧接触,是液相色谱系统中最易磨损的部件。
缓冲液或其它含盐的流动相更加速垫圈的磨损。
垫圈磨损是不可避免的。
措施:一旦垫圈损坏只有进行更换。
更换时注意要将柱塞杆缩至最后,松开泵头的两根收紧螺钉,操作时处处以平衡的动作进行,切不可摇动或上下摆动泵头,否则柱塞杆极易折断。
③塞杆现象:无流动相流出,压力波动,更换新的垫圈后仍渗漏。
原因:一旦出现以上现象,只有更换柱塞杆。
更换进要用专用工具,由于此项操作比较复杂困难,故需请专业维修工程师来解决。
也可自行按说明书的指导仔细进行。
2、进样系统当测量样品的面积,峰高数据不重复时,则要考虑进样系统的问题。
①手动进样器首先检查手动进样器是否有渗漏,一般是由于污染使转子磨损或用尖头的针扎进手动进样器,划伤了转子。
因此在定期清洗进样器,使用缓冲液后,要用水进行充分的冲洗,以防沉积结晶盐,磨损转子。
如确定转子已磨损,则要更换转子。
若有进样器管路部分阻塞,可分段检查,将阻塞的管路拆下,反装在泵出口处进行反冲。
②自动进样品A、针密封垫损坏。
此时出现渗漏。
液相色谱仪几种常见故障解决方案
![液相色谱仪几种常见故障解决方案](https://img.taocdn.com/s3/m/b186f3760a4c2e3f5727a5e9856a561252d32188.png)
液相色谱仪几种常见故障解决方案液相色谱仪是一种用于分离和分析混合物的仪器。
它主要由溶液供给系统、色谱柱系统、检测器、数据处理和控制系统组成。
液相色谱仪在实验室中得到广泛应用,但是在使用过程中也难免会出现一些故障。
本文将介绍液相色谱仪的几种常见故障及其解决方案。
色谱柱跑峰色谱柱跑峰是液相色谱仪中最常见的问题之一。
出现这种故障可能是因为色谱柱缺少填料、填料老化、填料堆积不均匀等原因引起的。
针对色谱柱跑峰的解决方案如下:1.更换填料:如果填料过老或者填料堆积不均匀,可以通过更换新的填料来解决这个问题。
2.调节流速:调节流速以达到更合适的分离效果。
3.检查前处理:在进行分离前,检查前处理的步骤是否严谨。
否则的话,可能会影响分离结果。
色谱柱背压过高色谱柱背压过高往往意味着某些问题需要解决,例如填料堵塞、流动阻力增大等等。
针对此故障,有以下解决方案:1.清洗色谱柱:定期清洗色谱柱以防止填料过于堵塞。
2.检查前处理步骤:与跑峰一样,良好的前处理也有助于防止后续某个阶段的系统堵塞。
3.调节流速:降低流速可以减轻柱的背压。
检测器信号异常如果检测器的信号异常,则可能是检测器本身的问题或者某些环境因素所致。
解决此故障的方案如下:1.清洗检测器:定期清洗检测器以确保它保持良好的工作状态。
2.更换检测器:如果清洗或者调节无法恢复检测器的信号,则可能需要更换检测器。
3.检查柱系统:异常信号也可能与色谱柱系统相关,检查柱并修复可能的问题。
4.调整移液管:检查移液管的状态,更换或调整它们以改善液相分析。
溶剂混合错误液相色谱仪是根据不同的化学性质来分离混合物,而这也意味着液相色谱仪需要运行具有不同性质的溶剂。
因此,溶剂混合错误可能对分析结果产生负面影响。
解决此故障的方案如下:1.检查溶剂混合比例:确保比例的准确性,这样可以获得更好的分离效果。
2.检查溶剂质量:再次检查您使用的溶剂质量以确保准确性。
3.检查柱温:高温或低温可能会影响柱内混合液相除密度以外的其他因素。
液相色谱的常见故障及解决方法及维护和修理保养
![液相色谱的常见故障及解决方法及维护和修理保养](https://img.taocdn.com/s3/m/4263421ae3bd960590c69ec3d5bbfd0a7956d597.png)
液相色谱的常见故障及解决方法及维护和修理保养导读:液相色谱仪是一种常用的专业检验检测仪器,在使用过程中难免会碰到一些故障,这需要相应的方法来解决。
液相色谱的常见故障及解决方法液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的调配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分别成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
1、HPLC灵敏度不够的紧要原因及解决方法是什么?①样品量不足,解决方法为加添样品量②样品未从柱子中流出。
可依据样品的化学性质更改流动相或柱子③样品与检测器不匹配。
依据样品化学性质调整波长或改换检测器④检测器衰减太多。
调整衰减即可。
⑤检测器时间常数太大。
解决方法为降低时间参数⑥检测器池窗污染。
解决方法为清洗池窗。
⑦检测池中有气泡。
解决方法为排气。
⑧记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
⑨流动相流量不合适。
调整流速即可。
⑩检测器与记录仪超出校正曲线。
解决方法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
2、液相色谱中峰显现拖尾或显现双峰的原因是什么?①筛板堵塞或柱失效,解决方法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
②存在干扰峰,解决方法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子③可能柱超载,削减进样量。
3、为何显现峰展宽?①样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%②在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散③数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点④检测器时间常数过大设定时间常数为感喜好*峰半宽的10%⑤流动相粘度过高加添柱温,接受低粘度流动相⑥检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器⑦保留时间过长等度洗脱时加添强溶剂含量,也可用梯度洗脱⑧柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小⑨样品过载进小浓度小体积样品4、如何简单判定比例阀是否内漏?设定泵使用一个单独通路(A),打开Purge阀,流速5mL/min,提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面,察看这些通路(B、C、D)内的溶剂是否随着流动,正常时均不应流动。
液相色谱仪日常维护和故障排除
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色谱柱被污染
溶剂中有杂质
使用色谱纯的溶剂 流动相和溶解样品的溶剂不互溶 尽可能用流动相溶解样品 三氟乙酸被氧化 流动相尽量每天新配;使用三氟乙酸时,应 使用抗氧剂
解决问题
出现肩峰或前延峰
可能原因 预柱被污染或选用了不合适的预柱 柱头“塌陷”造成死体积或是 柱子内部有短流出现 溶解样品的溶剂选择错误 解决办法 更换预柱 更换色谱柱
解决问题
保留时间缩短
可能原因 流速升高 色谱柱过载 解决办法 检查泵;检查流速 降低样品的浓度或进样体积
键合相流失
流动相的pH值保持在2.0-8.0 范围内
检查泵;检查滤网; 防止流动相的挥发或降解 使用色谱柱恒温箱
流动相组成发 生变化
温度升高 更换色谱柱;使用预柱
色谱柱老化
解决问题
保留时间无规则改变
可能原因 上一针样品中没有完全 流出的物质 解决办法
待样品中的组分尽可能完全流出后才进下一个样品; 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱; 改进样品的预处理;组分复杂的样品尽可能使用 梯度解吸的方法
改进样品的预处理 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱; 改进样品的预处理
样品中未知的组分
杂质在柱子中的富集
利用强极性的溶剂冲洗色谱柱
冲洗色谱柱;改进和提高样品的预处理; 使用液相色谱纯的溶剂
检测器或色谱柱的温度差异
系统有气泡
使用色谱柱恒温箱
流动相脱气;使用反压调节器
检测器氘灯需更换
电压不稳造成干扰
更换氘灯(氘灯使用寿命一般为1000小时)
使用稳压电源;检查供电系统
解决问题
出现“鬼峰”
可能原因 流速发生变化 解决办法 检查是否有漏; 更换泵的密封; 排净气泡 至少用10倍柱体积的流动相平衡色谱柱; 使用的缓冲溶液浓度应保持在 20mM至50mM之间
高效液相色谱仪器故障的诊断及其维修
![高效液相色谱仪器故障的诊断及其维修](https://img.taocdn.com/s3/m/e09c02cb70fe910ef12d2af90242a8956aecaa6f.png)
高效液相色谱仪器故障的诊断及其维修液相色谱仪器是一种广泛应用于化学、生物和医药等领域的分离和分析仪器。
然而,由于长期使用或操作不当等原因,液相色谱仪器可能会出现故障。
本文将介绍一些常见的液相色谱仪器故障,并提供诊断和维修方法。
1. 压力异常当液相色谱仪器出现压力异常时,可能是由于柱堵塞或柱压力不足等原因引起的。
首先,可以检查柱是否堵塞,可以通过更换柱或者清洗柱来解决。
另外,也需要检查柱前的过滤器是否堵塞,如果是,则需要更换过滤器。
2. 泵故障液相色谱仪器的泵可能会出现泵头堵塞或密封件损坏等故障。
当出现这种情况时,需要检查泵头是否堵塞,并清洗或更换泵头。
另外,也需要检查泵的密封件是否完好,如果密封件损坏,则需要更换密封件。
3. 检测器信号异常检测器信号异常可能是由于检测器灯管老化或污染、检测器电路故障等原因引起的。
当出现这种情况时,可以先清洗检测器灯管或更换灯管;同时,也需要检查检测器电路是否正常,如果电路故障,则需要修复或更换电路。
总的来说,液相色谱仪器的故障诊断和维修需要具备一定的专业知识和技能。
在进行维修前,建议先查阅液相色谱仪器的使用说明书,了解其工作原理和结构,以便更好地诊断和解决故障。
同时,定期对液相色谱仪器进行维护和保养,可以有效地减少故障的发生,延长仪器的使用寿命。
液相色谱仪器(HPLC)是一种高效、精确的分析仪器,在化学、生物、药学等领域都有着广泛的应用。
然而,由于长期使用、操作不当或者设备老化等原因,液相色谱仪器也会出现各种故障。
在这种情况下,对仪器进行准确的故障诊断,并采取适当的维修措施,是保障仪器正常运行的关键之一。
4. 色谱柱问题液相色谱仪器中的色谱柱是重要的部件,若出现问题则会导致分离效果下降。
柱子可能会发生堵塞、损坏或老化,而影响分离效果。
如果怀疑柱子的问题导致了色谱仪器的故障,第一步就是检查柱子的状态。
可以通过更换柱子或者清洗柱子来解决这一问题。
此外,也要检查柱前的过滤器是否正常运行,如果过滤器故障,也会影响色谱仪器的运行。
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四元泵:
四元泵多通道比例阀 MCGV使用时注意,缓 冲溶液要放在下面通道, 以避免盐颗粒析出。 二元泵: 设置压缩因子补偿, 以达到最佳比例效果。
4 进样器
过滤样品,确保样品中不含固体颗粒 用流动相或比流动相弱的溶剂溶解样品
进样量尽量小
样品完全溶解在流动相中
样品没有完全溶解
六通阀
手动进样器
手动进样阀 - 六通阀
色谱柱坏了- * PH < 2 或 >8 会破坏柱子内的填料 * 流速变化率太大- 操作上应注意
系统性能:重复性差
两个要点- 峰保留时间(RT)重现性, 峰面积重现性
RT重现性不好 - 无规律变化 : *流量不稳 - 气泡, 漏液, 泵 *温度影响
有规律的变化, 且逐渐趋于稳定 : 系统未充分平衡
2 脱气机
目的
排除溶解在流动相中的氧气和 氮气
脱气方法: 氦气脱气 回流加热脱气 真空脱气 超声脱气
在线真空脱气机
12 ml Solenoid valve
为保证脱气机的良好使用性能, 在下述情况下需要用注射器抽 洗脱气机管路,每个通道使用 不低于30ml的异丙醇。 1,新的脱气机或新的管路; 2,更换了溶剂,尤其是缓冲盐与 有机相之间、两个不相容流动 相之间的互换时; 3,输液泵关闭了一段时间,或使 用挥发性溶剂混合物。 4,完成上述操作后,打开清洗阀, 用大流量冲洗,5ml/min。
3泵
出口球阀BOV 阻尼器/压力传感器
主动输入阀AV
梯度比例阀
清洗阀Purge Valve
柱塞杆Piston
溶剂瓶
泵驱动
二元泵工作原理
Purge valve
Damper
Mixer
Waste Inlet valve
Outlet valve Inlet valve
Outlet valve
A
B
泵的注意事项
能引起HPLC发生问题的潜在因素: 工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置 电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
逻辑判断及处理 问题
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
*清洁程度
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
溶剂信息
避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂:
卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。 高浓度的无机酸例如:硝酸和硫酸。 能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。 含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。 在有机溶剂中的有机酸溶液。 含有强络合剂的溶液。 四氯化碳和异丙醇或THF混合液。
所有峰都是负峰 - 可能是检测器输出与数据单元连线 极性接反
峰形不好 - 如峰拖尾, 峰分叉, 出肩膀
在线过滤器(IN LINE FILTER)污染 (通常会伴随有系统压力升高之现象)
色谱柱污染
系统有不正常的死体积- 检查管路连接是否正确- 内径, 接头 保护柱(GUARD COLUMN)污染 溶剂不好或使用不对 样品不好
丙酮 乙醛
醋酸 乙酰胺 乙烯 乙炔 乙睛 硝基甲烷
271 293
271 208 193 173 <160 271
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的 最大吸收峰的强度和位置。
溶剂过滤
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能。 遵从下列建议可以提高性能,延长溶剂过滤器的寿命:
使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。 用滤膜过滤溶剂去除微生物。
每两天更换或过滤溶剂。
避免溶剂瓶直接日照。 向溶剂中加入0.0001-0.001M的叠氮化钠。
选择合适的滤膜
聚四氟乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐,并无任何可溶物。 醋酸纤维滤膜:适用于水基溶剂,不适用于有机溶剂,推荐用于蛋 白质和其相关的样品。 尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可用于强酸、 70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜:具有蛋白质吸收低,同样适用于水溶性样品和有 机溶剂。 注意:1,每张滤膜只能用一次。 2,水相和有机相不要搞混。
基线周期性噪声
绝大多数情况下是来源于泵的问题 泵头内有气泡 - 流动相脱气 ,泵头排气(注意正确的排气方法) 泵进出口阀有问题 - 更换阀组件 柱塞杆有问题 - 更换柱塞杆及其密封圈 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源
非周期性噪声 气泡 - 流动相脱气 检测池内有气泡 - 流动相脱气, 检测池后加适当反压 系统有漏液之处 - 检漏并处理 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源
色谱柱保护
过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器在使用完毕,要冲洗整个系统,移走系统中的缓冲液。 柱子在不使用时,两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的pH值使用范围
不要高压冲洗柱子
不要高温下过长时间使用硅胶键合相
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时,应使用一个廉价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。 色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法: 极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生: 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水** 非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水 0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱 注意: 在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此 应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M 稀硫酸冲洗非常有效。
无样品峰
未进样 泵未工作 漏液 流动相或样品的问题 柱子或保护柱的问题 数据采集装置的问题或其与检测器连线的问题
最简单快捷的检查 - 泵是否工作, 系统是否漏液, 进一针丙酮溶液检查检测 器读数及数据单元是否有响应
负峰 组份的ABS值小于溶剂的ABS值 气泡通过了检测池
对RI检测器不一定是有了问题,很可能是正常的
溶剂截止波长
溶 剂
乙 水 环 己 烷 睛
UV截止波长(nm)
190 190 195 在使用紫外检测器时,所 用波长与所用溶剂的截止 波长接近(或低于截止波 长)时,容易产生噪音干 扰,从而影响检测结果。
己
甲 乙 乙
烷
醇 醇 醚
200
210 210 220 220 240 265 280(220)
二氯甲烷 氯 仿
1,溶剂的过滤、脱气; 2,避免使用腐蚀性溶剂; 3,在满足分析的前提下,尽可能使用较 低的流速—较低的系统压力。 4,更换过滤白头; 5,考虑溶剂的相容性; 6,尽可能使用新鲜的水; 7,使用0.01M以上浓度的缓冲溶液要选配 柱塞清洗组件,清洗液不能干涸。 8,使用正相溶剂比如环己烷时,建议使 用聚乙烯密封垫,在0—200Bar下使用 聚乙烯密封垫比标准密封垫更耐磨损。
Байду номын сангаас
柱塞清洗附件Seal Wash
HPLC使用缓冲溶液Buffer时,由于缓冲盐溶液存在高压 盐析现象,析出的细小盐粒会损伤蓝宝石柱塞杆和密封 垫,从而造成漏液等故障现象,因而建议选配柱塞清洗 附件Seal Wash。 缓冲盐浓度大于0.01mol时,强烈建议选配在线的柱塞 清洗附件Seal Wash。 清洗液配置:90%水+10%异丙醇溶液,流速为2-3滴 /min。该混合液可抑制菌类生长和降低水的表面张力。 清洗液虹吸流出,不能干涸。
液相色谱仪日常维护及常见故障分析
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机(在线) 3 泵(单元、二元、四元)
4 进样器(手动、自动)
5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
所用溶剂应为HPLC级,水应为二次超纯水; 所用溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜,过滤有机相应使用有 机相滤膜,不能混用,也不要用错。每一张滤膜只能用一次,不能重 复使用。 如果没有在线脱气机,所用溶剂应经过超声脱气。 水易滋生藻类,避免直接照射,过滤后的水最好使用不要超过两天。 如果条件允许可向溶剂中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。 注意溶剂的相容性,避免使用不相容的溶剂。 避免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂。 在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞,必要时小心拿下用强酸(35% 硝酸)浸泡1小时,用水冲洗,但不要使用超声处理。
RT 重现性好, 但峰面积重现性不好 - *进样量-选用定量管进样时,进样 体积应大于3倍定量管容积; *样品, 气泡; *样品在流动相各组份中不能充分 溶解(通常伴随有柱压逐渐升高 且经反冲后,柱压会恢复正常之现 象); *基线噪声的影响; *积分处理的影响;
1.从部件的运转情况推测,如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测,如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的 管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
反压变化 - 溶剂和样品过滤. 注意黏度过大的样品