实验1 显微镜使用及形态观察
实验一 普通光学显微镜的使用和细菌形态观察
实验一普通光学显微镜的使用和细菌形态观察一、实验目的1．了解普通光学显微镜的构造和原理。
2．学习并掌握普通光学显微镜——油镜的使用方法。
3．利用油镜观察细菌的形态和构造。
二、实验原理微生物学研究用的普通光学显微镜通常有低倍物镜（16mm，10×）高倍物镜（4mm，40-45×）和油镜（1.8mm，95-100×）三种。
油镜常标有黑圈或红圈（或白圈），它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了（图Ⅰ-1）。
图Ⅰ-1油镜的原理图Ⅰ-2 镜口角利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA=nsinθ数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。
可分辨两点之间的最小距离=λ/2NA＝λ/2nsinθ式中λ：所用光源波长；θ：为物镜镜口角的半数，取决于物镜的直径和工作距离。
n：玻片与物镜间介质的折射率，空气（n=1.0）、水（n=1.33）、香柏油（n=1.52）、玻璃（n=1.52）等。
nSinθ：数值孔径（NA），是决定物镜性能的最重要指标。
由上述可知若n值和α角越大则NA越大或光波波长越短，则显微镜的分辨力越大（图Ⅰ-2）。
三、实验器材1．仪器：显微镜。
2．材料：标本片（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、炭菌杆菌的芽孢和荚膜、细菌三形涂片），香柏油，二甲苯，擦镜纸等。
实验1 显微镜使用及形态观察
实验一. 显微镜使用及细菌三型观察
一.目的要求
p41
学习并掌握油镜的使用方法 观察细菌的三种形态
二.油镜的使用基本原理
镜头简介
物镜在显微镜的光学系统中，物镜是最重要 的部件，物镜的放大倍数有10×(低倍)、 20×(中倍)、40～65×(高倍)和100×(油镜) 几种。在使用低倍、中倍、高倍物镜进行标 本观察时，物镜与载玻片之间的折光介质为 空气，这些物镜统称为干燥系物镜，而放大 倍为100的油镜在使用时须在玻片上滴加香柏 油，将油镜浸入到油滴中，使物镜与载玻片 之间的折光介质为油，故油镜被称为油浸系 物镜
3.显微镜用毕后的处理：
上升镜筒，取下载玻片; 擦镜纸先擦去油，再用擦镜纸蘸取擦镜
液擦残留油迹，最后再用干净的擦镜纸 擦试； 清洁其他部件； 各部分还原。
10x细菌三型观察观察
40x细菌三型观察
100x细菌三型观察
100x观察
100x大肠杆菌
100x葡萄球菌
作业p46－47
绘细菌三形图 思考题:用油镜观察时应注意哪些问题？
在载玻片和镜头之间滴加香柏油有什么 作用？
无菌操作过程
实验一显微镜使用及细菌三型观察 实验二原核微生物的形态观察及染色 实验三真核微生物形态观察 实验四 培养基的制备 实验五 培养基的使用特点和微生物接种方法 实验六 细菌的快速生化鉴定、水中大肠菌群的测定 实验七 细菌的药敏实验、水中大肠菌群的测定 实验八 污水中噬菌体的分离与效价测定 实验九 质粒提取与电泳 实验十病毒的分离与培养 实验十一 病毒的血凝和血凝抑制 实验十二 ELISA
结语
谢谢大家！
三.操作步骤
1.显微镜使用的一般规则: 焦距:由粗调到细调 镜头:由低倍到高倍 视野:低倍寻找,高倍固定
实验一显微镜的使用及微生物形态的观察
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果 • 实验总结
01 实验目的
掌握显微镜的使用方法
掌握显微镜的基本操作
包括调整焦距、照明调节、移动载玻片等。
了解显微镜的保养和清洁
定期清洁显微镜，保持其良好的工作状态。
熟悉不同倍率下的观察效果
04
原生动物属于真核生物，根据形态和运动方式可分为鞭毛虫、变形虫、 纤毛虫等。
微生物在自然界中的作用和意义
分解有机物
微生物在自然界中起到分解有机物的作用，将动 植物残体和排泄物等有机物分解成简单的无机物 ，如二氧化碳和水，为其他生物提供营养。
促进植物生长
一些微生物能够促进植物的生长和发育，如根瘤 菌能够与豆科植物共生形成根瘤，为植物提供氮 素营养；菌根真菌能够与植物根系形成共生关系 ，为植物提供磷素营养等。
03 实验步骤
显微镜的准备
01
02
03
清洁显微镜
使用柔软的湿布擦拭显微 镜的表面，确保显微镜干 净无尘。
检查显微镜部件
确保显微镜的目镜、物镜、 载物台等部件完好无损， 没有损坏或松动。
调整光源
打开显微镜的光源，确保 光源亮度适中，没有闪烁。
样本的制备
选择样本
选择要观察的微生物样本，如细菌、藻类、原生 动物等。
详细地观察。
观察和记录微生物形态
观察记录
在观察过程中，注意记录不同微生物的形态特征，并 绘制简单的显微镜图像或使用相机拍摄记录。
分析结果
根据观察记录，分析微生物的种类、数量和分布情况， 并得出实验结论。
整理器材
实验结束后，清洁并整理好显微镜和相关器材，以便 下次使用。
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用引言：细胞是生命的基本单位，具有复杂的结构和功能。
观察细胞的形态结构对于深入了解生命的本质和进行生物学研究至关重要。
本实验的主要目的是通过使用普通光学显微镜观察和学习细胞形态结构的观察方法。
一、实验方法1.收集样本：从鲜植物叶片中切取小型组织样本，并将其放入显微片中。
2.准备显微片：在显微片上滴加一滴蒸馏水，然后放置样本在蒸馏水上。
3.制备盖片：将一个玻璃盖片轻轻放置在样本上方。
4.准备显微镜：打开普通光学显微镜，并将显微镜调整到最佳聚焦状态。
5.放置显微片：将显微片放入显微镜的样本托盘中，并将其轻轻固定。
6.观察样本：通过调节目镜的焦距和光源的亮度，观察样本并记录所见。
7.绘制图表：根据观察结果，绘制细胞形态结构图表。
二、实验结果1.观察细胞膜：通过放大镜镜头观察细胞膜，可以看到细胞膜呈现出一个薄膜状的结构。
细胞膜起着维持细胞形态和保护细胞内部结构的作用。
2.观察细胞核：通过调整镜头的焦距和光源的亮度，可以清晰地观察到细胞核在细胞质中的位置。
细胞核通常呈圆形或卵圆形，具有较深的染色质和一个明亮的核仁。
3.观察细胞质：细胞质是细胞核周围的液体，其中包含着细胞器如线粒体、内质网、高尔基体等。
通过调整显微镜的焦距和光源的亮度，可以清楚地看到这些细胞器。
4.观察细胞壁：在观察植物细胞时，可以通过增加显微镜的放大倍数来观察到细胞壁。
细胞壁是细胞外的一个多层结构，可以提供细胞的支持和保护。
三、实验讨论1.细胞形态结构的观察需要适当的样本处理：使用新鲜的样本可以提供更清晰的显微观察结果，因此，在进行实验前最好收集到新鲜的细胞样本。
2.调整显微镜的焦距和光源亮度是关键：观察细胞结构需要将显微镜调整到最佳的聚焦状态，并调节光源的亮度，以确保能够看到细胞结构的细节。
3.多个角度观察样本可以提供更全面的结果：在实验中，可以从不同的角度观察样本，以获得更全面的细胞形态结构信息。
微生物学 实验1 普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察
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8、业余生活要有意义，不要越轨。20 20年12 月11日 星期五 2时53 分37秒0 2:53:37 11 December 2020
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9、一个人即使已登上顶峰，也仍要自 强不息 。上午 2时53 分37秒 上午2时 53分02 :53:372 0.12.11
• 10、你要做多大的事情，就该承受多大的压力。12/11/
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谢 谢 大 家 2020 2:53 AM12/11/2020 2:53 AM20.12.1120.12.11
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值日要求：每四人一组，包括物品归位、 黑板、地面、台面等，值日结 束后经老师同意方可离开。
2020/12/11
一、实验目的
ß 了解显微镜的构造和各部分的作用，掌握 显微镜的使用方法 ß 学习并掌握油镜的原理和使用方法 ß 了解并观察细菌的三种基本形态
一、普通光学显微镜的基本结构
机械部分和光学部分 普通光学显微镜的构造可分为两部分：
高倍镜的操作
1. 转换物镜。旋动转换器将低倍镜换成高倍镜（注意： 在转换物镜时要从侧面观察，以防镜头与标本片相撞， 如果高倍镜触及标本片，应立即停止旋转，并重新用 低倍镜调焦）；
2. 调焦。调节光圈，使光线亮度合适，再调节细准焦螺 旋直至目的物清晰；
3. 观察。移动推动器，找到合适的目的物，并移至视野 的中心进行观察。
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6、意志坚强的人能把世界放在手中像 泥块一 样任意 揉捏。 2020年 12月11 日星期 五上午 2时53 分37秒0 2:53:37 20.12.1 1
实验一、细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用
DIC显微镜下的射电子显微镜
莱卡超薄切片机
JEM-1011透射电子显微镜
内质网透射电镜图（伪彩色） 内质网透射电镜图（伪彩色）
冰冻蚀刻电镜照片
10. 扫描电子显微镜
JEOL扫描电子显微镜 JEOL扫描电子显微镜
人类血细胞SEM照片
11. 显微操作技术
2. 显微镜的调节
瞳距调节
屈光度调节
调节
粗调松紧调节旋钮
聚光镜中心调节
②10X物 10X物 镜 ①标 本
③ 孔径 光栏 ⑤ 光轴中心调节 螺钉 ④ 聚光镜升降 旋钮 ③ 视场 光栏
孔径光栏调节
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物 = 0 6 8
孔径光栏开度与图象
100%
70%
30%
孔径光栏的运用
四. 注意事项 1.低 高倍镜的使用。 1.低、高倍镜的使用。 2.合轴调节。 2.合轴调节。 合轴调节
五. 实验结果 1.描绘一个兔肝细胞的基本形态结构。 1.描绘一个兔肝细胞的基本形态结构。 描绘一个兔肝细胞的基本形态结构 2.熟练显微镜的调节。 2.熟练显微镜的调节。 熟练显微镜的调节
六. 思考题 比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别。 比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别。
实验一 细胞形态结构观察和光学显微镜的使用
一. 实验原理 细胞是生物体的基本结构单位。 细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞 是多种多样的。要对细胞进行研究， 是多种多样的。要对细胞进行研究，首先要从其形态结构 人手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理， 人手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理，在显微镜 才能观察到细胞的基本形态结构。 下，才能观察到细胞的基本形态结构。 二.试剂与器械 普通光学显微镜，兔肝细胞玻片标本， 普通光学显微镜，兔肝细胞玻片标本，草履虫玻片标 本。
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察PPT课件
对未来学习的展望
01
深入学习微生物学
本次实验让我对微生物学产生了浓厚的兴趣，未来我将深入学习微生物
学的相关知识，了解更多关于细菌、病毒等微生物的特性、分类和应用。
02
探索微生物在自然界中的作用
微生物在自然界中发挥着重要作用，未来我将进一步探索微生物在生态
系统中的作用和意义，了解其在环境保护、生物防治等方面的应用。
分析并记录观察结果。
02
CHAPTER
普通光学显微镜的使用
显微镜的基本结构
物镜
将观察物象放大，同样有多种 倍率可选，如4X、10X、40X 等。
聚光镜
常有5X、 10X、40X等倍率选择。
载物台
放置和固定观察样本。
调焦旋钮
调节焦距，使物象清晰。
显微镜的操作方法
显微镜应存放在干燥、通风的 地方，避免阳光直射和高温。
03
CHAPTER
细菌三形的观察
细菌的形态分类
01
02
03
球菌
呈球形或近似球形，直径 一般在1μm左右。
杆菌
呈杆状或近似杆状，长度 一般在2-3μm，宽度在 0.5-1μm。
螺旋菌
呈弯曲的杆状或螺旋状， 长度一般在2-6μm，宽度 在0.3-0.6μm。
细菌的染色与观察
染色原理
利用染料与细菌细胞壁结 合，使细菌着色，以便在 显微镜下观察。
常用染色法
革兰氏染色、抗酸染色等。
观察方法
将染色后的细菌涂布在载 玻片上，盖上盖玻片，用 显微镜观察其形态和染色 情况。
细菌三形的观察实例
球菌
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等。
杆菌
大肠杆菌、结核分枝杆菌等。
实验一显微镜的使用及细菌形态观察
03
实验时间安排不够合理
本次实验时间安排较为紧张，导致部分同学在规定时间内未能完成实验。
建议合理安排实验时间，确保同学有足够的时间进行实验操作和观察。
对未来实验的展望与计划
拓展观察对象
了解细菌的基本形态
学习识别不同种类的细菌，了解其基 本形态特征，如球形、杆形、螺旋形 等。
通过观察不同细菌的形态，理解其在 生物学和医学领域的应用价值。
学习细菌的观察与识别
掌握细菌的染色和观察方法， 了解常用的染色技术和原理。
学习使用显微镜观察细菌的形 态、大小、排列等特征，提高 实验操作技能和观察能力。
04
革兰氏阳性菌
在显微镜下观察到革兰氏阳性 菌呈圆形或椭圆形的外观，细
胞壁厚，表面光滑。
革兰氏阴性菌
革兰氏阴性菌呈杆状或球状， 细胞壁薄，表面粗糙。
大肠杆菌
大肠杆菌呈杆状，两端钝圆， 无芽孢和鞭毛。
葡萄球菌
葡萄球菌呈葡萄串状排列，无 芽孢和鞭毛。
细菌形态特征的描述与分类
根据革兰氏染色结果，可以将细 菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴
性菌两类。
根据细菌的形状、大小、排列方 式等特征，可以初步判断细菌的
种类。
不同种类的细菌具有不同的形态 特征，如球菌、杆菌、螺旋菌等。
实验结论的总结与归纳
通过观察显微镜下细菌的形态特 征，可以初步判断细菌的种类。
革兰氏染色是区分革兰氏阳性菌 和革兰氏阴性菌的重要方法。
了解不同种类细菌的形态特征对 于临床诊断和治疗具有重要意义。
增强团队合作意识
在实验过程中，我与同学们相互协作， 共同完成实验任务，增强了团队合作 意识。
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告一、引言显微镜是一种用来观察微小物体的仪器，它可以放大物体的细节，使我们能够看到肉眼无法观察到的细节。
在生物学中，显微镜被广泛应用于研究细胞和微生物等微小生物体的结构和功能。
本报告将介绍显微镜的使用方法以及如何观察细菌形态结构。
二、材料和方法1. 显微镜：本次实验使用的是光学显微镜。
2. 细菌样本：从实验室中获取了多种不同类型的细菌样本。
3. 玻片和盖玻片：用于制作样品载玻片。
4. 意式染色剂：用于染色处理，增强对细菌形态结构的观察。
三、显微镜使用方法1. 调整光源：打开显微镜后，在透明底座上放置一个白色纸片，调整光源位置和亮度，使得纸片上呈现均匀明亮的白色。
2. 调整目镜：将目镜对准眼睛，调节焦距，使得目视舒适且清晰。
3. 调整物镜：选择合适的物镜，将其转至位置，并调节焦距，使得样品清晰可见。
4. 调整聚光镜：根据需要调整聚光镜的大小和位置，以增强样品的亮度和对比度。
四、细菌形态结构观察方法1. 制作载玻片：在干净的玻片上挤出一滴细菌悬液，在另一个玻片上盖上一张盖玻片，轻轻压紧。
2. 意式染色处理：将制作好的载玻片浸泡在意式染色剂中，静置5-10分钟。
3. 洗涤处理：用蒸馏水洗涤载玻片数次，直到洗涤后水不再有颜色。
4. 干燥处理：将载玻片放置在通风处晾干。
五、结果与讨论1. 观察细胞形态结构：通过显微镜观察，可以看到不同类型的细菌具有不同的形态结构。
如球菌呈圆形或半球形，链状菌呈长条状等等。
通过染色处理后观察可以更加清晰地看到这些形态特征。
2. 观察细胞大小：通过显微镜观察，可以测量细菌的大小。
不同类型的细菌大小也不同，如球菌直径一般在0.5-1微米之间，链状菌长度则在数十到数百微米之间。
3. 观察细胞结构：通过显微镜观察，可以看到一些特殊的结构，如某些细菌具有鞭毛、纤毛或胞外多聚物等附属结构。
这些结构对于细菌的运动和生长有着重要的作用。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
3-2
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第15页
3．革兰氏染色法：
革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞 壁结构和组成不一样而决定。用结晶紫初染后，全部细菌都 染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘 复合物，增强了染料与菌体结协力。用乙醇脱色处理时，两 类细菌脱色效果是不一样。G＋细菌细胞壁主要由肽聚糖形 成网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细 胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫— 碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染依然 保持初染剂蓝紫色。G-细菌则不一样，因为其细胞壁肽聚糖 层较薄，类脂含量高，所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解， 细胞壁通透性增大，使结晶紫—碘复合物比较轻易被洗脱出 来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂颜色。
总菌数 A 16104 B 32000A B（个 / ml） 5
4-3
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第24页
2. 区分酵母菌死活细胞基础原理 美蓝是一个无毒性染料，它氧化型呈蓝色，
还原型是无色。用美蓝对酵母菌活细胞进行染 色时，因为细胞新陈代谢作用，细胞内含有较 强还原能力，能使美蓝由蓝色氧化型变成无色 还原型。所以，含有还原能力酵母活细胞是无 色或淡蓝色，而死细胞或代谢作用衰老细胞则 呈蓝色，借此即可对酵母菌死细胞和活细胞进 行判别。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
第25页
四. 试验内容
1. 酵母菌形态观察及死活细胞判别 (1) 在载玻片上加半滴美蓝染液，在染液上 滴一滴菌液。取一块盖玻片，先将一边与菌液 接触，然后慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用 高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况，并依据颜
环境微生物学-环境微生物学-实验一 显微镜使用及微生物观察
实验一：显微镜的使用及菌体形态观察一、实验目的1、掌握光学显微镜的结构、原理，学习光学显微镜的操作方法和保养。
2、观察细菌、放线菌、真核微生物的个体形态及真菌孢子类型，学习生物图的绘制。
3、学习用压滴法制作标本片。
二、实验仪器和材料显微镜、载玻片、盖玻片，75%二甲苯、吸管、烧杯，香柏油，擦镜纸、吸水纸、浮游生物网示范片：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、放线菌、酵母菌、青霉、曲霉、根霉、梨头霉、毛霉。
三、实验原理（一）显微镜的结构和光学原理显微镜分机械装置和光学系统两部分。
1、机械装置（1）镜筒：镜筒上端装目镜，下端接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种。
单筒有直立式和后倾斜式（倾角为45o）。
双筒都是倾斜式的，并有屈光度调节装置，以备视力不同者调节使用。
两筒之间可调距离，以适应两眼宽度不同者调节使用。
（2）转换器：转换器装在镜筒的下方，其上有三个孔或四个孔。
不同规格的物镜旋转安装在各孔上，在显微镜不使用时，旋下物镜，用护盖盖住。
（3）载物台：载物台为方形（多数）或圆形的平台，中间有一光孔，孔的两侧各装一个夹片，右端夹片固定，左端夹片可旋转，载物台上还有移动器（其上有刻度标尺，用以标记玻片的位置），可纵向和横向移动，移动器的作用是夹住和移动标本片。
（4）镜臂：镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。
镜臂有固定式和活动式（可改变倾斜度）两种。
有弧形和折形两种。
移动显微镜时用手握住镜臂进行移动。
（5）镜座：镜座为马蹄形和方形，具有一定的质量，支撑整台显微镜，马蹄形的镜座在其上有一可旋转的反光镜。
（6）调节器：调节器包括粗螺旋调节器和细螺旋调节器。
可调节物镜与所需观察的物体之间的距离。
2、光学系统及其光学原理显微镜的总放大倍数为物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。
（1）目镜目镜一般有10×、16×两种，高级的显微镜还有5×和20×。
目镜上标有：N.A.1.25、100×、“OI”、160/0.17、0.16等字样，其中：N.A.1.25为数值孔径，100×为放大倍数，“OI”（即Oil immersion ）表示油镜、160表示镜筒长，0.17表示要求盖波片的厚度，0.16为工作距离。
微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察
结果分析和报告撰写
分析实验结果
对观察到的微生物形态特征进行详细 记录和分析，确定其分类和鉴别结果 。
撰写实验报告
根据实验结果和分析，撰写实验报告 ，包括实验目的、实验过程、结果分 析等内容。
05
注意事项
显微镜的保养与维护
01
02
03
04
清洁
每次使用后，应用软布轻轻擦 拭显微镜表面，以防止灰尘和 污垢积累。
放大倍数较高，可观察微生物的超微结构，但操作复杂且成本较 高。
载玻片
• 用于放置显微镜观察的样品，通常为透明无色的玻璃片。
盖玻片
• 用于覆盖样品，防止样品移动或干燥，同时起到一定的放大作用。
细菌或真菌样品
细菌
常见的肠道细菌、病原菌等。
真菌
酵母菌、霉菌等。
染色剂（如美蓝、结晶紫等）
美蓝
用于染色细菌细胞壁，使其易于 观察。
逐渐调高倍数，仔细观察微生物的形态特征，如形状 、大小、颜色、细胞结构等。
记录观察结果，绘制微生物形态图谱，以便后续分析 。
04
结果分析
微生物形态特征的识别
80%
识别微生物的形状
通过显微镜观察，可以识别出微 生物的形状，如球形、杆形、螺 旋形等。
100%
识别微生物的大小
通过测量显微镜下观察到的微生 物，可以得出其大小，通常以微 米（μm）为单位。
结晶紫
常用于染色革兰氏阳性菌，使其 呈现紫色。
03
实验步骤
显微镜的使用
打开显微镜电源，调整光源亮度，确保光源稳 定。
01
打开显微镜的载物台，放置待观察的样本 。
03
02
放置显微镜于平坦的台面上，调整显微镜的 高度和角度，确保观察舒适。
实验一显微镜的使用及细菌形态观察
人眼的分辨能力在0.2 mm左右，因此光学显微 镜的最大有效放大倍数（使用油镜）是1,000×到 1,500×。
奥林巴聚光器)升至最高 ②光圈打至最大 2.在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区
域，然后将油镜转到工作位置。 3.在待观察的样品区域滴加香柏油，从侧面 注视，用粗调节器使油镜浸在镜油中并几 乎与标本相接。
用显微镜油镜观察操作方法
香柏油
乙醚乙醇 混合液
用显微镜油镜观察操作方法
4.然后用细调节器调节，在目镜下找到最合 适的观察点进行观察。 5.油镜使用后：上升镜筒，取下标本片。本 组同学都观察完毕后，用吸水纸将标本片 上的香柏油擦拭干净。
显微镜油镜观察操作方法
6.油镜观察完毕后要“三擦”： 首先用擦镜纸擦掉油镜头上的香柏油； 用擦镜纸蘸取少许乙醇乙醚混合液拭去油镜头 上的油渍； 再用擦镜纸拭净镜头上的乙醇乙醚混合液； 7.最后在载玻片上先滴上醇醚混合液，再用吸水 纸将香柏油、醇醚混合液擦拭干净。
画图注意事项
1.以圆圈表示视野； 2.注意菌体大小比例合适； 3.标出菌体颜色，显示典型排列方式； 4.特殊结构标出菌体和特殊结构所在位置。
大肠杆菌 （革兰氏阴性菌）
葡萄球菌（革兰氏阳性）
油镜使用的原理
油镜，即油浸接物镜。当光线由反光 镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空 气与玻片的密度不同，使光线受到曲折， 发生散射，降低了视野的照明度。若中间 的介质是一层油（其折射率与玻片的相 近），则几乎不发生折射，增加了视野的 进光量，从而使物象更加清晰。
油镜使用的原理
香柏油与玻璃的折射率相近。很多原 来由于在透镜及载片表面的反射和折射而 损失的光线可以进入物镜，使照明亮度提 高，改善观察效果。
若中间的介质是一层油其折射率与玻片的相近其折射率与玻片的相近则几乎不发生折射增加了视野的进光量从而使物象更加清晰
实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察
实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察本次实验主要介绍了显微镜油镜的使用以及细菌形态的观察。
显微镜是生物科学中最基本最必要的仪器，也被称为生命科学研究的窗口。
而观察细菌形态则是微生物学重要的研究内容之一，对于深入了解微生物的特性和分类十分关键。
一、显微镜油镜的使用1、准备工作在使用显微镜前，需要对仪器做一些准备工作，具体如下：（1）检查显微镜是否清洁干净。
使用棉花棒和无水酒精擦拭镜头和接口。
（2）插入镜片，拧紧螺丝。
注意，平光镜的凹面朝上。
（3）透镜的高度应调整至最高点，油镜周围涂上润滑油。
（4）在准备好玻片后，使用无菌针将样本划到玻片上。
2、操作步骤（1）将玻片插入载置物台。
调整光源，使其在镜片下方成圆形状。
（2）使用低倍放大的物镜，在载置物台下调整样本位置，然后转动焦点，调整到最清晰的位置。
（3）切换到高倍物镜。
在不移动载置物台的情况下，调整焦距直至视野内的细胞详细可见。
（4）将油镜轻轻接触载置物台上的镜片，调节光源以得到最佳观察效果。
（5）旋转调节管，使细胞从上到下等比例进入视野，观察细菌的形态、大小、数量等。
二、细菌形态的观察1、细菌分类根据细菌的细胞形态、大小、结构和移动方式等特征，可以将细菌分为不同的分类。
细菌形态既包含单细胞长条状物、圆球体等基本形态，又包括复杂的细胞、菌株组成的群体等。
常见的细菌形态有以下几种：（1）球菌（cocci）：球形或椭圆形的细胞。
（2）杆菌（bacilli）：棒状或柱状的细胞。
在实验过程中，使用显微镜观察样本，发现细菌形态上虽然存在一定的差异，但一般表现为以下情况：（1）球菌或细圆菌：呈球形，直径一般在0.5-2μm之间。
（3）螺旋菌：呈螺旋形，长度几乎无限制，直径0.5-1μm左右。
然而，即使细菌大小、形态有所不同，它们的细微结构也存在着明显的相似性，这种结构相似性在分类学上具有相当的意义。
细菌形态的观察是微生物学中非常重要的基础工作，通过观察细菌的形态、大小、数量等，能够更好地了解微生物的生长繁殖规律，对于深入研究微生物的特性、分类以及对环境的影响等方面具有非常重要的价值。
试验一显微镜的使用及微生物形态的观察
三、实验步骤
(一)显微镜的结构和各部分的作用 机械部分主要包括:
1.镜筒 2.载物台 3.调节器
光学部分主要包括:
1.接目镜 2.接目镜 3.集光器 4.反光镜
显微镜的结构
三、实验步骤
(二)显微镜的使用和保护方法 1.低倍镜的使用方法 2.高倍镜的使用方法
三、实验步骤
3.显微镜的保护法
一、实验目的
了解活性污泥或生物膜中微生物及微型动物 的数量及生长状况。
二、材料与器皿
(一)显微镜、载玻片、盖玻片、微型动物计数板； (二)活性污泥(或生物膜)样品。
三、方法与步骤
(一)压片标本的制备 1. 取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净 的载玻片中央(如混合液中污泥较少，可待其沉淀 后，取沉淀的活性污泥一小滴放在载玻片上；如 混合液中污泥较多，则应稀释后进行观察)。
实验一 显微镜的使用及微生物 形态的观察
一、实验目的
1.学习普通光学显微镜的使用方法。 2.结合生物滤池生物膜及曝气池活性污泥的观
察,认识原生动物、菌胶团等微生物的形态,并 学习测量微生物大小的方法。
二、实验器材
1.生物滤池滤料、活性污泥法曝气池混合液。 2.显微镜、目测微尺、物测微尺、载玻片、
(1)显微镜应放置在干燥的地方,使用时避免 强烈的日光照射。
(2)接物镜或接目镜不清洁时,应当用擦镜纸 或软绸揩擦。
(3)用完显微镜后,应当立即放到镜匣中。
三、实验步骤
(三)活性污泥和生物膜的观察
1.标本的制备
(1)活性污泥
取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放 在洁净的载玻片的中央(如混合液中污泥较 少，可待其沉淀后,去沉淀污泥一小滴加到 载玻片上；如混合液中污泥较多，则应稀 释后进行观察)显微镜的使用及微生物形态 的观察。
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法一、显微镜的使用普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。
因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。
（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。
（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
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1。穿工作服，不得乱放个人物品，不得吃食物
2。未经老师同意，不要随意开启实验室的仪器设备
作业
1。使用正规实验报告纸
2。按实验名称－实验目的和要求－实验原理－实验 步骤－实验结果－讨论（心得）的顺序
3。上次实验报告必须在下次实验时提交 考试、成绩 将安排实验操作考试。实验报告及操作和考试各50％
实验一. 显微镜使用及细菌三型观察
一.目的要求
p41
学习并掌握油镜的使用方法 观察细菌的三种形态
二.油镜的使用基本原理
镜头简介Βιβλιοθήκη 物镜在显微镜的光学系统中，物镜是最重要 的部件，物镜的放大倍数有10×(低倍)、 20×(中倍)、40～65×(高倍)和100×(油镜) 几种。在使用低倍、中倍、高倍物镜进行标 本观察时，物镜与载玻片之间的折光介质为 空气，这些物镜统称为干燥系物镜，而放大 倍为100的油镜在使用时须在玻片上滴加香柏 油，将油镜浸入到油滴中，使物镜与载玻片 之间的折光介质为油，故油镜被称为油浸系 物镜
3.显微镜用毕后的处理：
上升镜筒，取下载玻片; 擦镜纸先擦去油，再用擦镜纸蘸取擦镜 液擦残留油迹，最后再用干净的擦镜纸 擦试； 清洁其他部件； 各部分还原。
10x细菌三型观察观察
40x细菌三型观察
100x细菌三型观察
100x观察
100x大肠杆菌
100x葡萄球菌
作业p46－47
绘细菌三形图 思考题:用油镜观察时应注意哪些问题？ 在载玻片和镜头之间滴加香柏油有什么 作用？
无菌操作过程
实验一显微镜使用及细菌三型观察 实验二原核微生物的形态观察及染色 实验三真核微生物形态观察 实验四 培养基的制备 实验五 培养基的使用特点和微生物接种方法 实验六 细菌的快速生化鉴定、水中大肠菌群的测定 实验七 细菌的药敏实验、水中大肠菌群的测定 实验八 污水中噬菌体的分离与效价测定 实验九 质粒提取与电泳 实验十病毒的分离与培养 实验十一 病毒的血凝和血凝抑制 实验十二 ELISA
三.操作步骤
1.显微镜使用的一般规则: 焦距:由粗调到细调 镜头:由低倍到高倍 视野:低倍寻找,高倍固定
2.显微观察：
显微镜准备工作：显微镜安置；光源调节(电力 充足) 低倍镜观察：标本玻片置于载物台，用玻片夹推 进器移动. 高倍镜观察：转换至高倍镜. 油镜镜观察：不移动目标，转离高倍镜，在样品 区滴加一滴香柏油，升高镜筒，侧面观察，降 下油镜镜筒，浸油中，几乎与标本相接。微调 观察提升镜筒。