离子对色谱法
离子对色谱法的原理
离子对色谱法的原理
离子对色谱法是一种基于溶液中的阳离子和阴离子之间形成稳定络合物的原理进行分离及分析的方法。
其原理主要包括样品溶液中的离子和离子对试剂之间的化学反应和络合物的稳定性。
在离子对色谱法中，通常使用正离子对试剂与样品中的阴离子形成稳定的络合物。
正离子对试剂可以是有机胺、季铵盐或金属络合物等化合物。
当正离子对试剂与样品中的阴离子结合形成络合物后，这些带电的络合物会在色谱柱中进行分离。
分离过程中，离子对络合物的迁移速度受到许多因素的影响，包括络合物的结构、柱填料的性质以及运行条件等。
离子对色谱法最常用的方法是反相离子对色谱法。
在反相离子对色谱法中，色谱柱填料通常具有亲水性，即带有极性的官能团。
这种填料可以吸附和保持离子对络合物，从而实现它们的分离。
分离过程通常通过使用含有盐溶液的流动相来进行，盐的存在可以影响吸附和解吸过程，改变离子对络合物的保持时间和分离效果。
离子对色谱法具有广泛的应用领域，包括环境监测、药物分析、生物分析以及食品分析等。
该方法可以用于分离并测定许多阴离子，如无机阴离子、有机酸、氨基酸和药物等。
离子对色谱法具有高分辨率、准确性和灵敏度，适用于复杂混合物的分析，是一种常用的分离和定量分析方法。
离子对色谱法测定组氨酸的含量
离子对色谱法测定组氨酸的含量摘要目的：建立采用高效液相色谱法测定组氨酸含量的方法。
方法：选用Copsil C18色谱柱，流动相：乙腈-阴离子型离子对试剂；流速：1.0 ml/min，进样体积：20μl，柱温：30℃，检测波长：205nm。
结果：线性相关系数为0.99986，定量限0.8ng，检测限0.08ng，回收率在98 %～102 %之间。
结论：方法简便快速，结果准确可靠，可用于组氨酸的含量测定。
关键词：组氨酸，离子对色谱法，含量测定组氨酸是组成蛋白质的基本单元，具有极其重要的生理功能。
被认为是一种人类必需的氨基酸，主要是对于儿童。
其含量测定方法有电位滴定法、茚三酮比色法、高效液相色谱法、氨基酸分析仪等。
目前，高效液相色谱法使用最为广泛，但由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应，需要对样品进行衍生处理将其转化为有紫外吸收和荧光的物质，所以此方法操作复杂，用时长。
因此在需要建立一种简便可行的检测方法。
组氨酸含有咪唑基，在紫外光末端有吸收，且属弱碱性氨基酸，可采用离子对高效液相色谱法直接测定其含量。
本方法使用十八烷基硅烷键合硅胶填充柱为分析柱，乙腈-阴离子型离子对试剂为流动相的离子对色谱法测定组氨酸的含量。
1 实验部分1 主要仪器和试剂1.1 仪器高效液相色谱仪（Agilent 1200）、色谱柱、电子分析天平、酸度计1.2 试剂组氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸均为(工作标准品,Sigma-Aldrich),腺嘌呤、胞嘧啶、胞苷均为(试剂,Sigma-Aldrich)，乙腈、磷酸为色谱纯，辛烷磺酸钠（离子对试剂，麦克林)、三乙胺（分析纯，广州化学试剂厂)，水为超纯水2 实验步聚2.1 含量测定色谱条件和系统适用性试验色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶(Sagix：Copsil C18，规格5 µm×4.6 mm×250mm)，流动相：称取辛烷磺酸钠2.16g，硫酸铵4.4g，加水900ml溶解，加入三乙胺2ml，用磷酸调pH至3.0，经0.22μm水系滤膜过滤，取滤液与乙腈以90∶10（V/V）混匀。
离子色谱测试方法
离子色谱法是一种采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱柱对可解离物质进行分离测定的色谱方法。
离子色谱法常用于无机阴离子、无机阳离子、有机酸、糖醇类、氨基糖类、氨基酸、蛋白质、糖蛋白等物质的定性和定量分析。
今天程诚小编就给大家简单介绍下离子色谱法这种常用的分析方法。
简单来说，离子色谱法就是将注入的供试品由洗脱液带入色谱柱内进行分离后，进入检测器（必要时经过抑制器或衍生系统），由积分仪或数据处理系统记录并处理色谱信号。
它的分离机理主要为离子交换，即基于离子交换色谱固定相上的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换；离子色谱法的其他分离机理还有形成离子对、离子排阻等。
1、对仪器的一般要求离子色谱仪器中所有与洗脱液或供试品接触的管道、器件均应使用惰性材料，如聚醚醚酮（PEEK）等。
也可使用一般的高效液相色谱仪，只要其部件能与洗脱液和供试品溶液相适应。
仪器应定期检定并符合有关规定。
（1）色谱柱：离子交换色谱的色谱柱填充剂有两种，分别是有机聚合物载体填充剂和无机载体填充剂。
有机聚合物载体填充剂最为常用，填充剂的载体一般为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、乙基乙烯基苯-二乙烯基苯共聚物、聚甲基丙烯酸酯或聚乙烯聚合物等有机聚合物；无机载体填充剂一般以硅胶为载体，硅胶载体填充剂在pH2～8的洗脱液中稳定，一般适用于阳离子样品的分离。
（2）洗脱液：离子色谱对复杂样品的分离主要依赖于色谱柱中的填充剂，而洗脱液相对较为简单。
分离阴离子常采用稀碱溶液、碳酸盐缓冲液等作为洗脱液；分离阳离子常采用稀甲烷磺酸溶液等作为洗脱液。
通过调节洗脱液pH值或离子强度可提高或降低洗脱液的洗脱能力；在洗脱液内加入适当比例的有机改性剂，如甲醇、乙腈等可改善色谱峰峰形。
制备洗脱液的水应经过纯化处理，电阻率大于18MΩ·cm。
使用的洗脱液需经脱气处理，常采用氦气等惰性气体在线脱气的方法，也可采用超声、减压过滤或冷冻的方式进行离线脱气。
离子色谱法
Conductivity ～ ～
(700µS)
Retention time
NaF
Conductivity Conductivity ～ ～
NaCl
Nround： Na2CO3 / NaHCO3
(700µS)
试剂
淋洗液保存： 淋洗液保存： 使用聚丙烯 左右. 使用聚丙烯(PP)瓶，保存在暗处及 4 ℃左右 （ 通常 瓶 保存在暗处 可以保存6个月 个月） 可以保存 个月） 淋洗液要经常更换 淋洗液要经常更换
22
戴安中国有限公司（DIONEX） /
戴安公司成立于1975年 戴安公司成立于1975年，位于美国硅谷Sunnyvale。 成立于1975 1975年推出了世界第一台商品化的离子色谱， 1975年推出了世界第一台商品化的离子色谱，该项 年推出了世界第一台商品化的离子色谱 革命性的分析技术使得全球化学工作者能够从混合 物中快速分离鉴别出各项离子成分。 物中快速分离鉴别出各项离子成分。 到目前为止戴安各项成熟技术已被大大扩展， 到目前为止戴安各项成熟技术已被大大扩展，包括 离子色谱仪IC 高效液相色谱HPLC IC， HPLC包括毛细管和微 离子色谱仪IC，高效液相色谱HPLC包括毛细管和微 流量液相色谱Nano LC，氨基酸直接分析仪AAA NanoAAA流量液相色谱Nano-LC，氨基酸直接分析仪AAADirect，快速溶剂萃取仪ASE和固相萃取仪Autotrace ASE和固相萃取仪 Direct，快速溶剂萃取仪ASE和固相萃取仪Autotrace 及在线分析仪器等。
泵
检测器
泵液
分离 进样
检测
记录
19
与前面提到的高效液相色谱仪器不同 的是： 的是： 离子色谱用的泵是匹克（PEEK,聚醚醚 离子色谱用的泵是匹克（PEEK,聚醚醚 材料衬里的不锈钢泵。 酮 ）材料衬里的不锈钢泵。 离子色谱的流动相一般是缓冲溶液或 者含有少量的有机试剂， 者含有少量的有机试剂，一般称为淋 洗液。 洗液。 离子色谱有抑制器和电导检测器
反相离子对色谱法
反相离子对色谱法
反相离子对色谱法（Reversed-Phase Ion Pair Chromatography, RP-IPC）是一种液相色谱法，常用于对带正电或负电的离子类化合物进行分离和定量分析。
该方法的原理是在一定的流动相条件下，使用一种含正离子对剂的有机溶剂作为移动相，使得样品中的离子类化合物与正离子对剂形成离子对的结合，在反相色谱柱上进行分离。
正离子对剂通常是醇胺类、季铵盐类或草酸钠等。
其中带正电的离子类化合物与正离子对剂形成胶束结构，经过反相液相色谱柱后分离，负电的离子类化合物与正离子对剂发生离子对结合，再经柱分离。
与传统的反相色谱相比，反相离子对色谱法的优势在于可以分离和定量测定带电离子类化合物，如药物类、生物活性物质、蛋白质和核酸等。
同时，由于离子对剂的存在，可以提高某些带电离子类化合物的保留率和分离度，增强色谱法的选择性和灵敏度。
反相离子对色谱法在药物分析、环境分析、食品安全等领域有广泛的应用。
它可以用于测定药物中杂质的含量、药物代谢产物的分离和定量、食品中添加剂的检测等。
同时，该方法还可以与其他色谱技术（如气相色谱、离子色谱等）或质谱联用，进一步提高分析的选择性和灵敏度。
离子对色谱法
离子对色谱法20世纪60年代初，Schill等人对两个相反电荷的离子相互作用形成一个中性化合物的现象进行了 系统研究，并把它引入到液相色谱中，这是最早的离子对色谱法。
20 世纪 70 年代初，发展起来了现代 离子对色谱法，早期的反相离子对色谱主要用于液—液分配色谱（固定液涂渍与载体上）。
20世纪70年 代中后期随着化学键和固定相的发展，离子对色谱不再使用涂渍型填料，而使用现在最常用的反相离子 对色谱。
离子对色谱主要分为两类：正相离子对色谱和反相离子对色谱。
因为正相离子对色谱法现在已 经很少使用，故只介绍反相离子对色谱法。
一、离子对色谱法的基本概念离子对色谱法（ion—pair chromatography，IPC）是用正相或反相色谱柱分离离子型化合物和可解 化合物的方法（counterion）与离子化的样品组分形成离子对，这种离子对同中性或非极性分子一样，可 采用分配色谱的方法进行分离。
二、反相离子对色谱法反相离子对色谱法是把离子对试剂添加到极性流动相中，被分析的样品离子在流动相中与离子对 试剂（反离子）生成不带电的中性离子对，从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，是分离系 数增加，改善分离效果。
（一） 反相离子对色谱的原理在阐述离子对色谱的保留机制时，有多种模型理论，主要理论有离子对模型和动态离子交换模型， 本书介绍离子对模型。
离子对模型认为，在反相离子对色谱中，固定相为疏水性的键合相（如ODS），被分离的离子和反 离子同时存在于强机型的流动相中两者生成的中性离子对在流动相和键合相之间进行分配，可采用分配 色谱的方法进行分离。
对于碱性化合物（B），一般用各种烷基磺酸盐（R—SO3 Na）作离子对试剂，流动相和固定相之 间的反应如图11—1所示。
流动相 固定相B+H +«BH +RSO3Na«RSO3 +Na +BH + +RSO3 «BH + .RSO3 «[BH + .RSO3 ]图11—1 碱性化合物形成离子对示意图对于酸性化合物（RCOOH），一般用各种季铵盐，如四丁基铵类（TBA + X ）,作离子对试剂，流动 相和固定相之间的反应如图112所示。
11-1-其他类型HPLC色谱法-离子对
第十一章其他类型高效液相色谱法
离子对色谱法
（ion-pair chromatography，IPC）
一、概述
分析对象：
有机酸、碱、两性化合物、盐、强极性化合物
二、分离原理
定义：在色谱体系中加入合适的与样品离子电荷（A+）相反的离子（B-，称为反离子，counterion)，使其与样品离子结合生成弱极性的离子对（呈中性），进而进行分离的一种色谱分离分析技术。
离子对形成与两相间分配示意图
碱性化合物
酸性化合物
吴春勇
Inertsil C18色谱柱（5μm，4.6
mm×150 mm）；
甲醇－5 mmol/L磷酸二氢钾溶
10 mmol/L
液（含有十二烷基磺
酸钠，用磷酸调节pH至
3.5±0.05），（64∶36）为
流动相；
流速：1.0 ml/min；
10ml/min
紫外检测波长：330 nm；
柱温：室温
吴春勇
三聚氰胺极性强，其溶解性决定其不可能使用正相色谱柱进行分离，选
较好
V 乙腈∶V 缓冲液为8∶92的分离度和峰形为较好。
2）流动相pH的确定
考察范围：pH 2.5～4
16.672 min。
16.672min。
《离子色谱分析法》课件
分离
样品在色谱柱中进行分离，不同 的离子根据其特性被分离出来。
离子色谱仪的维护与保养
定期清洗色谱柱
根据使用情况，定期清洗色谱柱，以保持其分离效果和使用寿命。
定期校准检测器
为了保证检测结果的准确性，应定期对检测器进行校准。
保持仪器清洁
定期清洁仪器表面和内部部件，防止污染和堵塞。
建立维护档案
记录仪器的使用和维护情况，方便管理和追踪。
食品工业
用于检测食品中的添加剂、农药残留等，保 障食品安全。
生物医学
用于研究生物体内离子的变化，辅助疾病诊 断和治疗。
工业生产
在化工、制药等领域，用于产品质量控制和 生产过程监控。
提高离子色谱分析法的准确度和灵敏度的方法
01
优化样品前处理
采用先进的样品前处理技术，如 固相萃取、膜过滤等，降低基质 干扰，提高待测离子的提取率。
废水处理
在废水处理过程中，离子色谱分析法可用于检测 废水中的有害离子，如重金属离子和硫化物等， 确保废水达标排放。
大气污染监测
离子色谱分析法可用于监测大气中的气溶胶和气 体中的阴阳离子，了解大气污染状况和来源。
在食品检测中的应用
食品添加剂检测
01
离子色谱分析法可用于检测食品中的添加剂，如甜味剂、防腐
离子色谱分析法的应用领域
环境监测
用于检测水、土壤、空气等环境样品中 的阴阳离子，如硝酸根、硫酸根、氯离
子等。
制药
用于药物的分离和纯化，以及药物中 杂质的检测和控制。
食品分析
用于检测食品中的无机离子和有机酸 ，如水果、蔬菜、饮料等中的硝酸根 、硫酸根、磷酸根等。
其他领域
样品准备
根据分析目的和样品类型，进行 适当的样品处理，如稀释、过滤
离子对色谱法
2. 组分溶于水，可用： 组分溶于水，可用： 1）非离子型化合物用反相色谱 SP: -C18, C8等 MP：水或缓冲溶液，甲醇，乙腈， THF的混合液 2) 可离子化化合物用反相离子对色谱 SP：-C18, C8等 MP：水或缓冲溶液（含离子对试剂），甲醇，乙 腈， THF的混合液 3）离子型化合物可用离子交换色谱 或采用反相离子对色谱 SP: -SO3H, -NR3Cl型离子交换剂 MP：缓冲液
1．离子对模型 ．
以有机碱（B）为例。调节流动相pH，使碱 转变为正离子BH+形式，则BH+与流动相中 离子对试剂（烷基磺酸盐）的反离子RSO3生成不荷电的中性离子对，此中性离子对在 固定相和流动相间达到分配平衡。 B + H+ BH+ RSO3Na RSO3- + Na+ BH+ + RSO3- (BH+ RSO3-)m (BH+ RSO3-)s
九．HPLC分析方法 分析方法
（一）定性分析方法 定性分析方法 1．色谱鉴定法：只能对范围已知的化合物定性。 定性原理：同一物质在相同色谱条件下保留时间 （或保留体积或相对保留值）相同。 2．化学鉴定法 收集色谱馏分，在利用化学反应进行鉴定。 3. 两谱联用鉴定法： 离线： 制备HPLC获得纯组分，用UV, IR, MS NMR鉴定； 在线：联用仪
(二）分子量大于1000的组分 二 分子量大于 的组分 采用凝胶色谱法 1. 组分溶于水： 凝胶过滤色谱 SP：水溶性凝胶 MP：水溶液 2. 组分溶于有机溶剂 凝胶渗透色谱 SP：有机凝胶 MP：有机溶剂
Ai f i ms = mi = As f s
Ai f i ms As
fs =1
该法实际为内标一点法
离子色谱分析法
阳极 阳离子交换膜
二、高效离子排斥色谱（HPIEC）
分离是基于固定相和被分析物 之间三种不同的作用-Donnan 排斥、空间排斥和吸附作用。
1、分离原理
典型的离子排斥色谱柱是全磺化高交换容量的 H+ 型阳离 子交换剂，其功能基为磺酸根阴离子(SO3-)，树脂表面的 这一负电荷层对负离子具有排斥作用，即所谓的 Donnan
第三章
离子色谱分析法
一、离子色谱法原理 二、离子色谱仪
一、离子色谱法原理
离子色谱法（IC) :以离子型化合物为分析 对象的液相色谱法。 通常使用离子交换剂固定相和电导检测器 。
离子型物质 : 在水溶液中电离，具有 + 或 –
电荷的元素
无机阴离子（Ｃｌ－，ＮＯ2－，ＳＯ４２－，ＣｒＯ４２－）和
污染雨水河水大气污水雨水中离子城市用水自来水水源自来水中消毒副产物样品应用化学品设备提取物聚合物环氧类粘合剂中的阴离子电子半导体高纯水晶片冲洗水高纯水中的离子型杂质金属钢材表面处理液镀冷却水电镀槽中的抗坏血酸高效离子排斥色谱hpiec分离机理高效离子交换色谱法hpic是离子色谱法中应用最为广泛的固定相是一种具有可交换离子的聚合电解质能参与溶液中离子的交换作用而不改变本身一般物理特性
/
R
欧姆定律 R = V Resistance Voltage (Ohm) (Volt)
/
I Current (Ampere)
欧姆定律表明电阻等于电压与电流的比值。电导为 电阻的倒数，直接与溶液的浓度有关。
电极
电导检测器定量原理
电导
G =
1
G = 1
. ห้องสมุดไป่ตู้i
/
ci λi
R
离子对色谱法
A
水相
+B
+ 水相
A B
+ 有机相
A- —待测离
由于离子对A-B+具有疏水性,可被非极性 固定相提取.其它待测离子A1,A2, A3……..因与B离子间的成对能力不同,而 形成不同疏水性的离子对,它们在柱内的 保留值不同,从而达到各组分离子相互分 离的目的. (2)动态离子交换 认为离子对试剂的疏水部分,吸附到固定相并 形成动态的离子交换表面,待测离子被保留在 这个动态的离子交换表面上.
分子量 水溶性 >2000
方法
流动相 水
可溶或不溶 排阻色谱
<2000 可溶但不离 酚,醚,胺等:化学键合相色谱 各种 解 分子量较大的:排阻色谱 水 可溶且离解 酸或阴离子:阴离子交换色谱 缓冲液 碱或阳离子:阳离子交换色谱 不溶 多官能团化合物,异构体,稳定 各种 化合物:液固吸附色谱.如脂溶 性维生素,酚,醇 不稳定化合物,同系物:化学键 各种 合相色谱. 相对分子量较大且尺寸不同的化 各种 合物:排阻色谱(如增塑剂)
5,金属含氧酸的测定(电镀液等) 6,有机化合物分析 7,食品,饮料中的有机酸,酸味剂,防腐剂,风 添加剂等 8,有机胺类化合物; 9,药物和农药(特别是无紫外吸收的化合物) 10,表面活性剂 11,过渡金属离子的分析
五.排阻色谱法 Steric exclusion chromatography(SEC)
K SEC
[C s ] V R V 0 = = [C m ] Vi
尺寸排阻色谱中任何组分的分配系数应符合: 0 ≤ KSEC ≤ 1 大于排阻极限的分子,KSEC=0 , VR = V0 小于排阻极限的分子,KSEC=1.0 , V R = V0 + V i
离子交换色谱法分析化学
离子交换色谱法分析化学离子交换色谱法是一种常用的分离和分析方法，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
该方法基于离子交换剂与样品中离子之间的相互作用，实现对目标化合物的分离和分析。
本文将介绍离子交换色谱法的基本原理、实验操作步骤以及在化学分析中的应用。
一、离子交换色谱法的基本原理离子交换色谱法利用离子交换剂作为固定相，通过与样品中离子之间的相互作用，实现分离目标化合物。
离子交换剂是一种具有交换基团的功能性材料，通过基团与样品中离子进行交换，从而实现对目标化合物的分离。
根据不同的交换基团和固定相材料，离子交换色谱法可应用于不同类型化合物的分离和分析。
二、实验操作步骤1、准备实验仪器和试剂，包括色谱柱、流动相、样品溶液等。
2、将离子交换剂填充至色谱柱中，制成固定相。
3、将样品溶液注入进样器中。
4、开启泵，使流动相通过色谱柱，将样品中的离子与固定相中的交换基团进行交换。
5、通过检测器对分离后的离子进行分析和检测。
6、根据峰高、峰面积等参数计算目标化合物的含量。
三、离子交换色谱法在化学分析中的应用1、有机酸和碱的分离和分析：离子交换色谱法可用于分离和测定有机酸和碱的含量，如乳酸、柠檬酸、苯胺等。
通过选择合适的离子交换剂和流动相，可实现高分辨率分离和准确测定。
2、金属离子的分离和分析：离子交换色谱法可用于分离和测定金属离子，如钠、钾、钙、镁等。
通过选择含有适当功能基团的固定相，可实现对不同金属离子的分离和分析。
3、环境样品的分离和分析：离子交换色谱法可用于分离和测定环境样品中的阴、阳离子，如水样、土壤样品的分离和分析。
通过优化实验条件，可实现高分辨率分离和准确测定。
4、生物样品的分离和分析：离子交换色谱法可用于分离和测定生物样品中的离子，如氨基酸、多肽等。
通过选择合适的固定相和流动相，可实现高分辨率分离和准确测定。
5、其他领域的应用：离子交换色谱法还可应用于化学合成、药物分析、食品分析等领域。
通过选择合适的固定相和流动相，可实现对不同类型化合物的分离和分析。
反相离子对高效液相色谱法
反相离子对高效液相色谱法
反相离子对高效液相色谱法（RPLC-IP）是液相色谱法中常用的一种分
离方法。
下文将从定义、原理、应用和前景等角度来详细介绍。
一、定义
反相离子对高效液相色谱法，是指在一组特别选择的固定相条件下，
采用封闭式液相色谱法，使样品离子依靠排斥作用与离子对反向溶剂
流动相相互作用，通过色谱柱实现离子特定的分离。
该方法基于反相
液相色谱法（RPLC）与离子对高效液相色谱法（IP-HPLC）的结合，
可以分离相似结构和极性的化合物，具有较高的选择性、分离度和灵
敏度。
二、原理
反相离子对高效液相色谱法的分离机理主要是固定相货架上的离子对，而流动相中的阴离子或阳离子与货架上对应的离子对之间的静电吸引
作用，从而发生交换反应，分离出各自的化合物。
货架的选择对分离
效果有很大的影响，如采用C18货架，可实现极性化合物的分离，而
采用硅胶货架，可实现酸性或碱性化合物的分离。
三、应用
反相离子对高效液相色谱法广泛应用于化学、生物和药物等领域的样品分离和分析。
具体应用包括但不限于：
1. 分析食品中的有机酸、氨基酸和多肽等化合物
2. 分析环保领域中的重金属离子、有机污染物和水中微量元素等
3. 分析药品中的药物代谢物、生物大分子和天然产物等
四、前景
随着科技的不断进步，反相离子对高效液相色谱法将越来越具有应用前景。
未来，将进一步开发出更高效、更优质的固定相货架和流动相体系，以满足更加严苛的分离要求。
此外，该技术还将伴随着精准检测技术和数据处理软件等辅助应用，为科学研究提供更加完整且全面的方式与手段。
第八章 高效液相色谱各种方法(离子色谱等)
离子色谱是20世纪70年代发展起来的一项 新的液相色谱技术，是离子交换色谱的一种特 殊形式。 以无机、特别是无机阴离子混合物为 主要分析对象, 固定相：离子交换树脂 流动相：电解质溶液 检测器：一般为电导检测器
（1） 双柱离子色谱 淋洗液→泵→进样器→分离柱→抑制柱→电 导检测器→记录仪 通过抑制柱除去流动相的电解质背景，只有被检 离子在检测器上产生讯号。
例：以阴离子交换树脂为分离柱，阳离子交换 树 脂 为 抑 制 柱 ， NaHCO3 为 流 动 相 ， 分 离 F- 、Cl-混合液。
NaF 2R-HCO3 + 交换： NaCl R-F +2NaHCO3 R-Cl
凝胶过滤
{
固定相：亲水性凝胶 （如葡聚糖、凝胶）
流动相：水系溶剂
（如缓冲溶液，水等）
应用：分离聚合电解质，多肽等。
凝胶渗透
{
固定相：疏水性凝胶 （聚苯乙烯等） 流动相：非水系有机溶剂 （如四氢呋喃）
应用：测定聚合物的分子量分布。
讨论： ① B以下分子随溶剂流出，其他均在此 之前，不会残留 ② 不能进行梯度洗脱 ③ 严格按分子大小顺序流出，易定性 ④ 柱容量有限，大小过于接近者 （<10%)不能分离 ⑤ 谱带宽度大致相等
原理: 采用交换容量非常低的特制离子交换树脂 为固定相， 在分离柱后，用另外一支抑制柱来消除淋 洗液的高本底电导; 采用电导检测器检测流出组分。快速分离 分析微量无机离子混合物; 各种抑制装置及无抑制方法的出现，发展 迅速.
离子色谱具有以下优点：
分析速度快：
可在数分钟内完成一个试样的分析；
离子对色谱法名词解释
离子对色谱法名词解释
嘿，咱今儿个就来好好唠唠离子对色谱法！离子对色谱法啊，就像
是一个魔法盒子，它能把那些原本很难分开的离子们给巧妙地分离开来。
比如说吧，就好像一群调皮的小孩子在一块儿玩耍，离子对色谱
法就是那个厉害的老师，能把他们一个个准确地安排到自己该在的位
置上。
它的原理呢，其实也不难理解。
就是通过加入一种与目标离子能形
成离子对的试剂，让这些离子变得更容易被分离。
这就好比是给那些
离子穿上了一件特别的外套，让它们变得与众不同，从而能在色谱柱
中乖乖地按照规定路线前进。
在实际应用中，离子对色谱法可牛了！比如在药物分析里，它能帮
我们准确地检测出药物中的各种离子成分，确保药物的质量和安全性。
这不就像是一个超级侦探，能把那些隐藏的秘密都给挖出来嘛！再比
如在环境监测中，它能检测出水中的各种污染物离子，让我们及时了
解环境状况。
哎呀呀，这可真是太重要啦！
咱再想想，要是没有离子对色谱法，那得有多少难题解决不了呀！
好多复杂的混合物都没法准确分析了，那得多让人头疼啊！所以说呀，离子对色谱法真的是太厉害啦，它就像一把神奇的钥匙，能打开好多
知识和技术的大门。
我觉得离子对色谱法就是化学分析领域里的一颗璀璨明星，不可或缺，超级重要！它让我们对各种离子的研究和分析变得更加简单、高效，为我们的生活和科学研究都带来了巨大的帮助。
咱可得好好感谢它呀！。
离子对色谱法原理
离子对色谱法原理
离子对色谱法是一种基于离子对形成和离子对与溶液中离子的相互作用的色谱技术。
该方法利用离子对试剂与被检测离子之间形成稳定的离子对络合物，从而在色谱柱中实现了离子的分离和测定。
离子对色谱法的原理可以简述如下：首先，在流动相中加入特定的离子对试剂，这些试剂通常是带电的有机离子，例如四氟硼酸根、四丁基铵等。
离子对试剂会与被检测溶液中的离子发生络合反应，形成稳定的离子对络合物。
然后，将混合物以流动相的形式通过色谱柱。
色谱柱通常是由离子交换树脂制成，具有良好的离子交换性质。
在色谱柱中，离子对络合物与色谱柱中离子交换位点上的其他离子发生竞争吸附和解析。
各种离子对络合物将会以不同的速度通过色谱柱，从而实现了被检测离子的分离。
最后，在检测器上对分离的离子进行测定。
检测器通常采用电导检测器或紫外-可见光谱仪等，可以通过测量离子对络合物
的信号强度来确定被检测离子的浓度。
离子对色谱法在实际应用中具有广泛的适用性，可以用于分析水样中的无机阳离子、有机酸、氨基酸、糖类等。
其具有分离效果好、对离子选择性强、操作简便等优点。
同时，离子对色谱法也可用于分析环境样品、生物样品和药物分析等领域。
离子对色谱法
离子对色谱法
，
离子对色谱法指的是以离子的不同吸附强度作为离子分离的依据，采用具有不
同吸附性质的离子柱，以中和和流变力作用下的逆运动和非挥发性分离技术，将两种以上物质混合在一起进行分离研究。
离子对色谱法通常需要一个电离阵列，一个电极和电分析仪，这些都是必不可
少的，其中最重要的是离子柱，离子柱是分离离子的一种材料，根据其不同的性质，可以进行分离。
离子柱的常见材料有丙烯酸钠，甲基苯磺酰亚胺，哌啶二磺酰亚胺等。
离子柱的材料运作机理在于电离小分子在柱中分离，由大分子和小分子的不同吸附性对离子进行分离，因此在这门技术中，离子柱的选择是至关重要的。
离子对色谱法可以应用到许多不同的领域，应用最广泛的是在生物数据分析中。
通过它，生物系统中存在的特定染料，其机制细节是能够以离子之间不同的吸附强度作为离子分离的依据，能够快速识别、定量，用于检测疾病的标志物以及生物学分析中的重要酶反应，如蛋白质谱、研究基因表达，也可用于药物药效评价。
离子对色谱法不仅可以用来分离物质，还可以查明离子浓度，科学家可以结合
离子和染料来分析生物样品，细化生物系统如基因、蛋白质等。
它是一种准确、快速、经济广泛应用于生物学研究的技术，因此被广泛采用。
离子对色谱法可以带给我们极大的收获，让人们通过分析而研究到科学的信息，离子对色谱法应用的空间很大，继续发挥作用，未来它必将为科学技术发展作出更多贡献。
离子对反相高效液相色谱法原理
离子对反相高效液相色谱法原理一、概述高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
离子对反相高效液相色谱法（IP-RP-HPLC）是HPLC的一种变种，在分析离子化合物的研究中具有重要的地位。
本文将介绍IP-RP-HPLC的原理及其应用。
二、离子对反相高效液相色谱法原理1. 反相色谱反相色谱是HPLC分析中常用的一种分离方法。
在反相色谱柱中，填料是由亲水性的羟基矽胶和疏水性的碳链组成，样品在柱内由于亲水性和疏水性的差异而发生分离。
通常，极性物质在反相色谱柱中被快速洗脱，而非极性物质则被慢慢洗脱。
2. 离子对反相色谱在IP-RP-HPLC中，离子对试剂（例如磺酸盐、磺酰胺盐）被加入到流动相中，形成离子对复合物。
这些离子对复合物可以与离子化合物中的离子结合，使其变成中性物质，从而改变了其在反相色谱柱上的保留行为。
3. 原理离子对复合物的形成可以产生静电作用，改变了离子化合物在反相色谱柱上的分布。
这种作用不仅限于离子对复合物与离子化合物之间的相互作用，还包括离子对复合物与填料表面及样品分子之间的相互作用。
离子对反相色谱法可以提高对离子化合物的灵敏度和选择性。
4. 应用IP-RP-HPLC广泛应用于离子化合物的分析中，例如有机酸、无机阴离子、阳离子等。
尤其在环境监测和食品安全领域，各种离子对试剂的不断发展使得离子对反相色谱法成为分析离子化合物的重要手段之一。
三、总结离子对反相高效液相色谱法通过引入离子对试剂，改变了样品在反相色谱柱中的分布规律，增强了对离子化合物的分析能力。
随着离子对试剂的不断发展和完善，IP-RP-HPLC在离子化合物分离分析中的应用前景将更加广阔。
4. 分析方法的优势离子对反相高效液相色谱法具有许多优势，使其成为分析离子化合物的首选方法之一。
该方法可以提高对离子化合物的灵敏度和选择性。
通过引入离子对试剂，可以形成离子对复合物，使得离子化合物的分析变得更加精确和可靠。
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高效液相色谱法中离子对色谱法、离子交换色谱法及离子色谱法原理的研究及应用
1308102-06余胜
摘要：本文主要讨论正相离子对色谱法、反相离子对色谱法、离子交换色谱发及离子色谱法的原理，以及在应用上的特征与区别。
关键词：正相离子对色谱法；反相离子对色谱法；离子交换色谱法；离子色谱法高效液相色谱法是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离技术。
液相色谱法是指流动相为液体的色谱技术。
在经典的液体柱色谱法的基础上引入气相色谱法的理论，在技术上采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分析速度快，分离效率高和操作自动化。
他可分为离子对色谱法、离子交换色谱法及离子色谱法等，其应用非常广泛。
且具有高压、高速、高效以及高灵敏度等这几个突出的特点。
1.离子对色谱法
离子对色谱法是将一种(或多种)与溶质分子电荷相反的离子(称为对离子或反离子)加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。
用于阴离子的对离子是烷基铵类，如氢氧化四丁基胺等；用于阳离子的对离子是烷基磺酸类，如己烷磺酸钠等。
近年来有，贺霞,史朝晖等[1]通过用反相离子对色谱法测定了复方维生素片中的维生素B1、维生素B2、维生素B 6这3种水溶性维生素含量，他们以己烷磺酸钠作为离子对试剂，采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5µm)柱，同时测定这三种维生素，具有好的相关性，此种方法可用于这三种物质含量的测定及质量控制研究。
随后有李小兵，王勇军等[2]用离子对色谱法检测阿德福韦酯中降解产物的含量。
采用Welch Materials XB-C8 柱(250 mm ×4.6 mm,5µ m) ，以0.05 mol ·L-1的磷酸氢二钾和0．01 mol ·L-1四丁基硫酸氢铵缓冲溶液(磷酸调pH至3.0)乙-腈(65:35)为流动相。
成功将阿德福韦酯主峰与临近杂质峰可达到基线分离，且主要降解产物阿德福韦、阿德福韦单特戊酸甲酯及9-(2 -二乙氧基膦酰甲氧基乙基)腺嘌呤分离度度均在2.0以上。
故正相离子对色谱法适用于阿德福韦酯的有关物质检查及质量控制。
2.离子交换色谱法
离子交换色谱法是基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质
进行可逆交换，根据这些离子对交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。
凡是在溶剂中能够解离的物质通常都可以用离子色谱法进行分离。
被分析物质解离后产生的离子与树脂带相同电荷的离子(反离子)进行交换而达到平衡。
不管对于阳离子交换亦或是阴离子交换，若其分配系数D值越大，表示溶质的离子与离子交换剂的相互作用能力越强,亲和力高，在柱中的保留值也就愈大。
据报道，李雪辉，段红丽等[3]通过用离子交换色谱法检测离子液体中的阴离子。
他们利用离子色谱仪，建立了阴离子的分析方法，此法可用于分析离子液体样品中杂阴离子及监控离子液体合成中反应与纯化过程。
3.离子色谱法
离子色谱法是在离子交换色谱法的基础上发展起来的液相色谱法，且迅速的发展成为水溶液中阴离子分析的最佳方法。
此法利用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相。
通常以电导检测器为通用检测器，为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱。
经典双柱型离子色谱仪，式样组分在分离柱和抑制柱上的原理与离子交换色谱法相同。
离子色谱法是离子型化合物的阴离子分析的唯一快速、灵敏(µg·L-1级)和准确的多组分分析的方法。
张建平，黄朝章等[4]通过离子色谱法以氢氧化钾为洗脱液、阴离子交换柱分离、电导检测器检测，同时测定了烟草中的硝酸盐和亚硝酸盐。
然而黎涛等[5]用离子色谱法测定脱硫石膏粉中硫酸钙含量。
通过测定硫酸根的含量，来换算成硫酸钙的质量分数。
且此实验的重复性好，灵敏度高。
4.结论
离子对色谱法在对于有机酸、有机碱的分离分析中对于离子交换色谱具有优越性。
而离子交换色谱法选择性较好。
离子色谱法对于离子型化合物阴离子的分析具有其他分析方法无可比拟的优越性。
参考文献
[1]贺霞,史朝晖,刘慧,张小岭,闫笑笑,周晓星,王东凯.反相离子对色谱法测定复方维生素片中
3种水溶性维生素的含量[J].中国新药杂志.2012(22):2697-2700.
[2]李小兵,王勇军,蒋飞英,朱峰,毛白杨,陈再新.离子对色谱法检测阿德福韦酯中降解产物的
含量[J].药物分析杂志.2013(06):192-194.
[3]李雪辉,段红丽,潘锦添,王乐夫.离子交换色谱法检测离子液体中阴离子[J].分析化学.
2006(S1):1007-1011.
[4]张建平,黄朝章,邓其馨,苏明亮,谢卫,许寒春,刘泽春,吴清辉.离子色谱法同时测定烟草中的
硝酸盐与亚硝酸盐[J].中国烟草学报.2013(06):25-33.
[5]黎涛,于亮,宋文吉,张建军,冯自平.离子色谱法测定脱硫石膏粉中硫酸钙含量[J]. 理化检验
(化学分册). 2014(01):89-。