梅毒实验室检测及分析
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梅毒实验室检验PPT
确保样本标记清晰，记录受检者的基本信息，如姓名、年龄 、性别等。
样本处理
将采集的血液样本进行离心，分离出血清，用于后续的实验 检测。
实验操作步骤
抗原检测
利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或化学发光法等检测血清中的梅毒螺旋体抗原。
抗体检测
通过检测血清中的特异性抗体来判断是否感染梅毒，常用方法包括快速血浆反应素试验（RPR） 和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。
血清学检测
总结词
血清学检测是通过检测患者血清中的特异性抗体，用于诊断和监测梅毒的方法。
详细描述
血清学检测包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验。非螺旋体抗原试验包括快速血浆反应素试验（RPR）等， 用于初筛和疗效观察；螺旋体抗原试验包括梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等，用于确诊和滴度测定。血清 学检测具有较高的敏感性和特异性，适用于大多数梅毒病例的检测。
$number {01} 汇报人：可编辑
2024-01-11
梅毒实验室检验
目录
• 梅毒概述 • 梅毒实验室检验方法 • 实验室检验流程 • 实验室检验注意事项 • 实验室检验的应用与价值
01 梅毒概述
总结词
梅毒是一种由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性系统性性传播疾病，主要通过性接触 传播。
详细描述
鉴别诊断
与其他性传播疾病的鉴别 诊断，如淋病、尖锐湿疣 等。
在流行病学调查中的应用
流行病学调查
通过大规模的实验室检验，了解 梅毒的流行趋势和传播情况。
追踪传染源
通过检验患者的血液样本，追踪 传染源，防止疾病进一步传播。
在预防控制中的作用与价值
预防控制策略制定
基于实验室检验的数据， 制定和调整预防控制策略 。
样本处理
将采集的血液样本进行离心，分离出血清，用于后续的实验 检测。
实验操作步骤
抗原检测
利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或化学发光法等检测血清中的梅毒螺旋体抗原。
抗体检测
通过检测血清中的特异性抗体来判断是否感染梅毒，常用方法包括快速血浆反应素试验（RPR） 和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。
血清学检测
总结词
血清学检测是通过检测患者血清中的特异性抗体，用于诊断和监测梅毒的方法。
详细描述
血清学检测包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验。非螺旋体抗原试验包括快速血浆反应素试验（RPR）等， 用于初筛和疗效观察；螺旋体抗原试验包括梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等，用于确诊和滴度测定。血清 学检测具有较高的敏感性和特异性，适用于大多数梅毒病例的检测。
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梅毒实验室检验
目录
• 梅毒概述 • 梅毒实验室检验方法 • 实验室检验流程 • 实验室检验注意事项 • 实验室检验的应用与价值
01 梅毒概述
总结词
梅毒是一种由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性系统性性传播疾病，主要通过性接触 传播。
详细描述
鉴别诊断
与其他性传播疾病的鉴别 诊断，如淋病、尖锐湿疣 等。
在流行病学调查中的应用
流行病学调查
通过大规模的实验室检验，了解 梅毒的流行趋势和传播情况。
追踪传染源
通过检验患者的血液样本，追踪 传染源，防止疾病进一步传播。
在预防控制中的作用与价值
预防控制策略制定
基于实验室检验的数据， 制定和调整预防控制策略 。
梅毒实验室检测及分析
青岛大学附属医院
TPPA/TPHA原理
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同 – TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒
– TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞
特点 – 梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
青岛大学附属医院
青岛大学附属医院
TP-ELISA
原理 – 用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒
青岛大学附属医院
梅毒的分期
青岛大学附属医院
梅毒的诊断
梅毒的诊断 – 早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期
梅毒（三期和晚期隐性梅毒）
– 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析
梅毒的实验室检查 – 结果对诊断有决定性意义
青岛大学附属医院
常用梅毒实验室检测方法
病原学检测
血清学检测
血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合
物与酶标记物结合，用酶标仪判定试验阳性反应 。
特点 – 本法可用于大规模血清检测。
青岛大学附属医院
免疫层析
青岛大学附属医院
青岛大学附属医院
临床应用
梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验， 以TPPA/T阳性反应是真阳 性还是假阳性。
青岛大学附属医院
梅毒螺旋体
青岛大学附属医院
传播途径
性接触是主要的传染途径 – 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 – 随着病期的延长，传染性越来越小 – 到感染后2年，通过性接触一般无传染性 母婴传播 – 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 –病期越长，传染性越小; 输血传染 间接传播：日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径（接触 部位附有梅毒螺旋体） 。
梅毒的实验室检测与技术规范课件
实验过程中产生的废弃物应按照医疗废物管理规 定进行处理，防止交叉污染。
事故处理
如发生意外事故，应立即报告实验室负责人，采 取相应的处理措施，如清洗伤口、消毒环境等。
CHAPTER 05
梅毒实验室检测结果分析与 解读
检测结果判定原则
明确检测原理
01
了解和掌握梅毒检测的基本原理和方法，包括抗原抗体反应、
梅毒的实验室检测与 技术规范课件
目录
• 概述 • 梅毒的实验室检测技术 • 梅毒实验室规范化操作流程 • 梅毒实验室技术规范与标准操作规程 • 梅毒实验室检测结果分析与解读 • 梅毒实验室检测新技术与发展趋势
CHAPTER 01
概述
定义与背景
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢 性传染病，可累及全身器官。
基于免疫学技术的检测方法改进与创新
化学发光免疫分析
该技术结合了化学发光和免疫分 析的优点，具有高灵敏度、宽线 性范围和良好的稳定性，已广泛 应用于梅毒血清学检测。
酶联免疫吸附试验
该技术利用酶催化底物反应产生 光信号，从而实现对梅毒抗体的 定量检测，具有操作简便、成本 低等优点。
基于生物信息学在梅毒诊断中的应用前景
合理布局实验室空间，设置独立 的阳性血清和脑脊液检测区域，
以避免交叉污染。
实验器材
使用一次性实验器材，如注射器 、吸管、离心管等，避免交叉感
染。
实验人员
实验人员应接受专业培训，熟悉 梅毒检测的原理、操作流程和质
量控制要求。
标准操作规程
1 2
样本采集
采集血液样本时，应使用真空采血管，避免直接 接触血液。采集脑脊液样本时，应使用无菌穿刺 技术。
血清学筛查
血清学确证
使用酶联免疫吸附试验（ELISA）等血清学 方法筛查患者血清中的梅毒抗体。
事故处理
如发生意外事故，应立即报告实验室负责人，采 取相应的处理措施，如清洗伤口、消毒环境等。
CHAPTER 05
梅毒实验室检测结果分析与 解读
检测结果判定原则
明确检测原理
01
了解和掌握梅毒检测的基本原理和方法，包括抗原抗体反应、
梅毒的实验室检测与 技术规范课件
目录
• 概述 • 梅毒的实验室检测技术 • 梅毒实验室规范化操作流程 • 梅毒实验室技术规范与标准操作规程 • 梅毒实验室检测结果分析与解读 • 梅毒实验室检测新技术与发展趋势
CHAPTER 01
概述
定义与背景
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢 性传染病，可累及全身器官。
基于免疫学技术的检测方法改进与创新
化学发光免疫分析
该技术结合了化学发光和免疫分 析的优点，具有高灵敏度、宽线 性范围和良好的稳定性，已广泛 应用于梅毒血清学检测。
酶联免疫吸附试验
该技术利用酶催化底物反应产生 光信号，从而实现对梅毒抗体的 定量检测，具有操作简便、成本 低等优点。
基于生物信息学在梅毒诊断中的应用前景
合理布局实验室空间，设置独立 的阳性血清和脑脊液检测区域，
以避免交叉污染。
实验器材
使用一次性实验器材，如注射器 、吸管、离心管等，避免交叉感
染。
实验人员
实验人员应接受专业培训，熟悉 梅毒检测的原理、操作流程和质
量控制要求。
标准操作规程
1 2
样本采集
采集血液样本时，应使用真空采血管，避免直接 接触血液。采集脑脊液样本时，应使用无菌穿刺 技术。
血清学筛查
血清学确证
使用酶联免疫吸附试验（ELISA）等血清学 方法筛查患者血清中的梅毒抗体。
梅毒螺旋体实验室检测方法比较分析
梅毒 （ ｓ ｙ ｐ ｈ ｉ ｌ ｉ ｓ ）是由苍 白密螺 旋体的苍 白亚 种即梅毒 螺旋体（ Ｔ ｒ ｅ ｐ ｏ ｎ ｅ ｍ ａ ｐ ａ ｌ ｌ ｉ ｄ ｕ ｍ ， Ｔ Ｐ ） 所引起 的是一种慢 性全身性性传播疾病。早期主要侵犯皮肤 黏 膜， 晚期可累及心血管及中枢神经系统等器官Ｉ 】 】 。自然情况下人是梅毒唯一的 传染源， 主要通过性接触传播， 也可通过胎盘垂直传播， 或可经输血感染。人 体感染梅毒螺旋体后可产生多种抗体。主姜有特异性抗螺旋体抗体（ Ｉ ｇ Ｍ、 Ｉ ｇ Ｇ 】 和非特异性抗体又称反应紊， 是由螺旋体破坏的组织细胞所释放的类脂样物 质， 能与广泛分布于生物组织 中的类脂抗原发生非特异性反应 。近年来 ， 我国
确。 操 作简 便， 可分批或单人 份检测， 结果易保存， 故可以 替代 雠 Ｉ Ａ 作为快速 梅毒血清确诊试验 ｆ １ ３ １ 。 但当血清或血浆中 特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低
时， 梅毒螺旋体抗体判断。
２ ． ５梅毒螺旋体 免疫 印迹试验（ ｗ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ｂ ２ １ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ）梅毒螺旋体 免疫印迹试验是 ２ ０ 世纪 舳 年代发展起来的一种检测技术。 它结合了免疫学 和分子生物学的特点， 敏感性高 ， 特异性强。 该试验是通过电泳转移硝酸纤维膜
梅毒的感染率呈现大幅度上升趋势 ， 它与艾滋病的传播途径是高度一致 。 危害性大， 是我国重点防治的传染病疾病之一， 由于梅毒病程长、 危害大、 ｌ 临床
表现 复杂 ， ｛ 基 容易漏诊和误诊 ， 因此选择简单 、 快速、 高敏感性 和特异性 诊断方 法， 对梅毒早期发现、 早期诊断 、 早期预 防和治疗 ， 对控制梅毒 的传播具有重要 意义， 本文对当前梅毒螺旋体的检测方法作一综述 。
确。 操 作简 便， 可分批或单人 份检测， 结果易保存， 故可以 替代 雠 Ｉ Ａ 作为快速 梅毒血清确诊试验 ｆ １ ３ １ 。 但当血清或血浆中 特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低
时， 梅毒螺旋体抗体判断。
２ ． ５梅毒螺旋体 免疫 印迹试验（ ｗ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ｂ ２ １ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ）梅毒螺旋体 免疫印迹试验是 ２ ０ 世纪 舳 年代发展起来的一种检测技术。 它结合了免疫学 和分子生物学的特点， 敏感性高 ， 特异性强。 该试验是通过电泳转移硝酸纤维膜
梅毒的感染率呈现大幅度上升趋势 ， 它与艾滋病的传播途径是高度一致 。 危害性大， 是我国重点防治的传染病疾病之一， 由于梅毒病程长、 危害大、 ｌ 临床
表现 复杂 ， ｛ 基 容易漏诊和误诊 ， 因此选择简单 、 快速、 高敏感性 和特异性 诊断方 法， 对梅毒早期发现、 早期诊断 、 早期预 防和治疗 ， 对控制梅毒 的传播具有重要 意义， 本文对当前梅毒螺旋体的检测方法作一综述 。
关于梅毒的实验室检测
关于梅毒的实验室检测成都商报在2007年5月9日第5版中有这样一篇文章—“是梅毒，是没‘毒’女大学生考警蹊跷被刷”。
讲的是小梅在淮南市第一人民医院进行考警体检中被误诊（或是错诊）为梅毒的事。
其报道中对梅毒的实验室检查部份的叙述存在一定程度的误导，因此我们针对梅毒的病原体、实验室检查及检验方法等相关内容进行了组稿。
来进一步加深对梅毒实验室诊断的认识。
一、螺旋体的分类、寄生部位螺旋体的分类及传播方式二、生物学特性梅毒螺旋体即苍白密螺旋体的苍白亚种，人是其唯一宿主。
直径0.1—0.15μm，全长7--8μm。
在电镜下可见有细胞壁和细胞膜。
新鲜标本在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式。
梅毒螺旋体主要有两种抗原：1、密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面的特异抗原，与雅司、地方性梅毒、品他病等3种密螺旋体有共同抗原，可交叉反应。
2、非螺旋体抗原即磷脂类抗原，可刺激机体产生反应素，其与牛心肌的心脂质抗原发生反应，此法敏感性高，但有假阳性。
梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱，离体后1—2小时即死亡，对热和干燥特别敏感，在体外干燥环境下1—2小时或加1.5℃经1小即死亡。
血液中4℃放置3天可死亡，因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。
对肥皂水和常用化学消毒剂亦敏感，1%--2%石炭酸内数分钟就死亡。
梅毒的免疫属感染性免疫，有梅毒螺旋体感染时才有免疫力，一旦螺旋体被杀灭，其免疫力随之消失。
机体对梅毒螺旋体感染可产生细胞免疫和体液免疫反应，体液免疫中有两种抗体：一种是梅毒特异性抗体，主要是IgG、IgM，对螺旋体有制动作用，当有补体存在时，可将其杀死和溶解，对机体的再感染有保护作用。
另一种是抗脂质抗体的反应素，为IgG和IgM的混合物，对机体无保护作用。
三、送检标本和检验方法Ⅰ期梅毒病人取硬下疳渗出液，Ⅱ期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。
对Ⅰ期梅毒末期以后（大约感染3—4周以后）的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。
梅毒实验室检测技术课件
晚期良性梅毒、神经梅毒、眼梅毒、心血管梅毒 隐性梅毒（潜伏梅毒）：无任何梅毒性的临床表现，可分为早期隐性
梅毒和晚期隐性梅毒。 胎传梅毒（先天梅毒）：早期胎传梅毒（2岁以内发病，类似于获得性
二期梅毒）、晚期胎传梅毒（2岁以后发病，类似于获得性三期梅毒）、 隐性胎传梅毒（无临床症状）
梅毒血清学试验的临床意义
合要求、在有效期内使用。 光线较好的环境 实验环境温度 ➢ 可能造成假阴性（漏检）风险。建议配备空调等恒温设施。 在规定的时间内判定结果 ➢ 反应时间不宜过短，一般不少于15分钟，不超过试剂说明要求最长时
间。 必须出现质控带才可判定结果 仔细观察检测线位置是否出现反应线 ➢ 主观因素影响：对有疑问的结果建议多人判读 符合生物安全要求 ➢ 应配备生物安全柜，建立健康监护档案。重视个人防护和污物处理。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ梅毒
梅毒是苍白密螺旋体苍白亚种（treponema pallidum，梅毒螺旋体） 感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，可引起人体多系统 多器官的损害，产生多种临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至 危及生命。（WS273-2018)
感染梅毒的妊娠期妇女可发生流产、死胎、早产，以及分娩先天梅毒 患儿。
煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂如双氧水、酒精等 很容易将其杀灭
梅毒分期
一期梅毒：外生殖器硬下疳（潜伏期2～4周，平均3周） 腹股沟淋巴结肿大。
二期梅毒：全身多形性梅毒疹 全身浅表淋巴结可肿大
可出现梅毒性骨关节损害、眼损害、神经系统及其他内脏损害等。 三期梅毒：可有一、二期梅毒史，病期2年以上。
基本流程：
用一次性滴管或移液器滴加一定量待检标本(全血、血清或血 浆)于加样孔中；
立即在加样孔中加入一定量的缓冲液； 置室温反应 15 min～20 min。
梅毒和晚期隐性梅毒。 胎传梅毒（先天梅毒）：早期胎传梅毒（2岁以内发病，类似于获得性
二期梅毒）、晚期胎传梅毒（2岁以后发病，类似于获得性三期梅毒）、 隐性胎传梅毒（无临床症状）
梅毒血清学试验的临床意义
合要求、在有效期内使用。 光线较好的环境 实验环境温度 ➢ 可能造成假阴性（漏检）风险。建议配备空调等恒温设施。 在规定的时间内判定结果 ➢ 反应时间不宜过短，一般不少于15分钟，不超过试剂说明要求最长时
间。 必须出现质控带才可判定结果 仔细观察检测线位置是否出现反应线 ➢ 主观因素影响：对有疑问的结果建议多人判读 符合生物安全要求 ➢ 应配备生物安全柜，建立健康监护档案。重视个人防护和污物处理。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ梅毒
梅毒是苍白密螺旋体苍白亚种（treponema pallidum，梅毒螺旋体） 感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，可引起人体多系统 多器官的损害，产生多种临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至 危及生命。（WS273-2018)
感染梅毒的妊娠期妇女可发生流产、死胎、早产，以及分娩先天梅毒 患儿。
煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂如双氧水、酒精等 很容易将其杀灭
梅毒分期
一期梅毒：外生殖器硬下疳（潜伏期2～4周，平均3周） 腹股沟淋巴结肿大。
二期梅毒：全身多形性梅毒疹 全身浅表淋巴结可肿大
可出现梅毒性骨关节损害、眼损害、神经系统及其他内脏损害等。 三期梅毒：可有一、二期梅毒史，病期2年以上。
基本流程：
用一次性滴管或移液器滴加一定量待检标本(全血、血清或血 浆)于加样孔中；
立即在加样孔中加入一定量的缓冲液； 置室温反应 15 min～20 min。
梅毒的实验室检查
梅毒的实验室检查
2014-10-8
梅毒（TP）生物学特性
1、小而纤细的螺旋状微生物，长5～20um,粗细﹤0.2um
2、有6～12个规则的螺旋基本结构为一原生质的圆柱体， 为两层膜所围绕。 3、螺旋整齐、数目固定、折光性强，较其他螺旋体亮， 运动缓慢而有规律，有三种运动方式：围绕其长轴旋 转运动；伸缩其螺旋间距离移动；弯曲扭动如蛇行。 4、人是梅毒螺旋体的唯一自然宿主，梅毒螺旋体不能在 体外培养繁殖，最适生存温度是37℃，离开人体很快 死亡，煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂如双氧 水、酒精等很容易将其杀灭。
微生物形态 规则螺旋体 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 在暗视野显微镜下运动活泼 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色
3
• 形态与 染色
暗视野显微镜下观察
4
梅 毒 螺 旋 体
Histopathology showing Treponema pallidum spirochetes in testis of experimentally infected rabbit. Modified Steiner silver stain.
CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1@cdc .gov epe1@cdc.
梅毒螺旋体，Fontana镀银染色
5
传播途径
• 梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体，未患 病者在与梅毒患者的性接触中， 皮肤或粘膜若 有细微破损则可得病。 • 获得性梅毒 （后天）早期梅毒病人是传染源， 95%是通过不洁性交传染，少数通过接吻， 握 手、输血、接触污染的内衣湿毛巾、茶杯、烟 斗、哺乳、尿布等传染。 • 胎儿梅毒（先天 ）：孕妇体内螺旋体，一般在 妊娠3—4月通过胎盘感染婴儿。A3（TPຫໍສະໝຸດ A）梅 毒 检 测 流 程 图
2014-10-8
梅毒（TP）生物学特性
1、小而纤细的螺旋状微生物，长5～20um,粗细﹤0.2um
2、有6～12个规则的螺旋基本结构为一原生质的圆柱体， 为两层膜所围绕。 3、螺旋整齐、数目固定、折光性强，较其他螺旋体亮， 运动缓慢而有规律，有三种运动方式：围绕其长轴旋 转运动；伸缩其螺旋间距离移动；弯曲扭动如蛇行。 4、人是梅毒螺旋体的唯一自然宿主，梅毒螺旋体不能在 体外培养繁殖，最适生存温度是37℃，离开人体很快 死亡，煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂如双氧 水、酒精等很容易将其杀灭。
微生物形态 规则螺旋体 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 在暗视野显微镜下运动活泼 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色
3
• 形态与 染色
暗视野显微镜下观察
4
梅 毒 螺 旋 体
Histopathology showing Treponema pallidum spirochetes in testis of experimentally infected rabbit. Modified Steiner silver stain.
CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1@cdc .gov epe1@cdc.
梅毒螺旋体，Fontana镀银染色
5
传播途径
• 梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体，未患 病者在与梅毒患者的性接触中， 皮肤或粘膜若 有细微破损则可得病。 • 获得性梅毒 （后天）早期梅毒病人是传染源， 95%是通过不洁性交传染，少数通过接吻， 握 手、输血、接触污染的内衣湿毛巾、茶杯、烟 斗、哺乳、尿布等传染。 • 胎儿梅毒（先天 ）：孕妇体内螺旋体，一般在 妊娠3—4月通过胎盘感染婴儿。A3（TPຫໍສະໝຸດ A）梅 毒 检 测 流 程 图
梅毒检测PPT
排除梅毒感染
实验室梅毒检验结果分析
新生儿血清RPR和TPPA检测为阳性，不能 诊断为胎传梅毒。
实验室梅毒检验结果分析
胎传梅毒的实验诊断
具有下列实验室四个指标之一，可确诊为胎 传梅毒： 暗视野检查梅毒螺旋体阳性； 患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升； 患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母 亲高2个稀释度（4倍），(低于或等于该值 并不排除胎传梅毒)； 患儿检出19（s）-IgM
仪器材料
1.试剂：梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）试 剂盒（日本富士100人份），内有： “A”溶解用液； “B”血清稀释液； “C”致敏颗粒（冻干）； “D” 非致敏颗粒（冻干）； “E”阳性质控血清（液体）。
仪器材料
“C”致敏颗粒（冻干） “D” 非致敏颗粒（冻干) 试验前30分钟按说明书规定量加“A”溶液混匀。
操作步骤
加“D” 非致敏颗粒：第3孔加D液25uL，第4
孔加“C” 致敏颗粒25uL。
混合：将反应板置震荡器震荡30秒。 反应：放湿盒内，室温孵育2小时后观察结果。
结果判定：
试验结果未致敏颗粒不出现凝集者， 才可做出结果判定。如果孔内标本非致 敏和致敏颗粒均产生凝集者，标本需做 重吸收试验。
做最后确定。
实验室梅毒检验结果分析
梅毒的诊断：必须依靠病史、临床症状、实 验检查进行综合分析。
实验室检查结果对诊断梅毒起决定性意义。
实验室梅毒检验结果分析
RPR＋、 TPPA-
RPR假阳性
RPR＋、 TPPA + 现症梅毒
RPR－、 TPPA+ 既往感染，极早期梅毒
RPR－、 TPPA-
加样：吸取50ul血清(浆)分别与各圈中盐水作 稀释度后，然后涂布整个圈内。
梅毒螺旋体特异性抗体检验
步骤
包括样本采集、加胶体金标记的抗原、温育、洗 涤、观察结果等。
缺点
灵敏度相对较低，需要使用大量的样本，且不能 用于定量检测。
04
检验结果分析和解读
定性检测结果解读
阳性
如果定性检测结果为阳性，表示患者可能感染了梅毒螺旋体。
阴性
如果定性检测结果为阴性，表示患者没有感染梅毒螺旋体。
定量检测结果解读
低浓度
如果定量检测结果为低浓度，表示患者可能处于梅毒感染的早期或者病情已经缓解。
高浓度
如果定量检测结果为高浓度，表示患者可能处于梅毒感染的活动期。
检测结果误差分析和处理
误差来源
检测结果的误差可能来源于实验操作、试剂质量、仪器误差等。
误差处理
为了减少误差，需要进行质量控制，包括定期校准仪器、检查试剂有效期等。如果发现误差较大，需 要重新进行检测。
器材
准备好实验所需的器材，如酶标仪、洗板机、加样器、离心机等。
实验室环境要求
实验室清洁
保持实验室清洁，避免灰 尘、污染物等污染样品和 试剂。
实验室温度和湿度
控制实验室温度和湿度在 适宜的范围内，以保证实 验结果的准确性。
实验室安全
使用实验室器材时要注意 安全，避免受伤或感染。
03
检验步骤和方法
免疫吸附法
检验方法概述
检验方法
采用酶联免疫吸附法（ELISA） 或化学发光法（CLIA）等免疫
学方法进行检测。
原理
基于抗原-抗体反应的特异性， 将梅毒螺旋体特异性抗原固定 在固相载体上，与样本中的抗 体结合，通过显色或发光反应
判断抗体是否存在。
优缺点
免疫学方法具有灵敏度高、特 异性强、操作简便等优点，但 也存在假阳性或交叉反应的风
梅毒实验室诊断(刘利洪)
暗视野检查法
临床意义 1、检测阳性，在临床上可确证梅毒； 2、如未能发现梅毒螺旋体，不能排除诊断； 3、无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步 进行血清学检测。
镀银染色检查
检测原理 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色， 可以从普通高倍显微镜下观察到梅毒螺旋体。
镀银染色检查
仪器器材 1、普通显微镜 2、加拿大树胶 3、罗吉固定液 4、鞣酸媒染剂 5、Fontana银溶液 6、无水乙醇 7、无菌纱布等取材用品
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定性试验 （1）试剂准备：复室温30分钟 （2）加标本：样本量50ul； （3）加抗原：抗原量（60±1滴/ml，约17ul/滴） （4）反应：反应时间8min （5）读取结果
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定量试验
抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴
如何就目前高发的性病，尤其是对梅毒进行有效监测 和控制？ 如何对高危人群及潜在易感人群进行筛查，主动发现 无症状的性病感染者？ 如何确定感染的病原体种类？
——需要完善的实验室检测工作，包括检测能力建设 和质量控制
性病防治工作的重点 两个系统 疫情监测系统 实验室检测系统-实验室检测能力和质量控制 一个服务 规范化医疗服务
注意：应把每一份样本当作强阳性样本来处置和对待！！
பைடு நூலகம்
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
仪器：水平旋转仪（要求？） 试剂盒： （1）含有活性碳的抗原悬液； （2）一个标定的9号针头（0.9mm）； （3）压印有18mm直径圆圈的封塑环状卡 片； （4）内部对照； 为了保证试验结果的可靠性，以及 每批试剂间的可比性，应制备外部对照 血清 （5）50ul量程移液器和吸头 （6）0.9%无菌生理盐水
梅毒
康氏试验是又称类脂质抗原起沉淀反应。
指梅毒的血清测试。
使用酒精浸泡牛心粉，提取磷脂部分做为抗原，加入胆固醇以增加灵敏度，与待测血清中抗体(反应素)，在电解质作用下，抗原抗体形成可见的沉淀反应，称为康氏沉淀反应，简称康氏反应。
不过，现在康氏试验（Kahn'stest）已被更敏感更特异的方法所替代。
用于梅毒筛查。
（血梅毒实验室检测方法按目标不同课分为三类1 检测梅毒病原体及抗原 2 检测梅毒“非特异性抗体”浆反应素、非梅毒螺旋体抗原试验）3 检测梅毒特异性抗体（梅毒螺旋体抗原试验）。
目前一般医疗单位第二类中的一种作为初筛实验，将第三类中的一种作为确证实验检测梅毒“非特异性抗体”血浆反应素的方法：VDRL、USR、RPR、TRUST；②检测梅毒特异性抗体方法：TP-ELISA、TP-GICA、TPHA、TPPA。
目前我国一般医疗卫生单位常用的梅毒初筛血清学试验为费用低廉、方法简便的RPR、TRUST、TP-ELISA、TP-GICA。
试验的阳性检出有赖于被检者体内抗脂质抗体和抗密螺旋体抗体的存在。
综合文献报道，初筛方法选择以TP-ELISA主，辅以ＲＰＲ／ＴＲＵＳＴ方法较好。
在梅毒螺旋体定性试验阳性的情况下，必须进行确诊试验，若阳性可肯定梅毒的诊断。
确诊试验灵敏度高，特异性强，不受药物治疗的影响。
特异性抗体可持续数年甚至终生。
梅毒螺旋体血凝试验(treponema pallidum hemagglutination assay，TPTA)和荧光螺旋体抗体吸收试验(fluoresent treponemal antibody-absorption test，FTA-ABS)梅毒目前主要是初筛RPR（查抗原检查同trust）和确诊TPPA（查抗体）,RPR是梅毒初筛试验,TPPA 是梅毒确诊试验VDRL（Venereal DiseaseResearch Laboratory）性病研究实验室抗原当抗原与梅毒血清抗体(免疫球蛋白IgG、IgM)混合时，后者即粘附在胶体微粒的周围，形成疏水性薄膜。
梅毒的实验室检测与技术规范
毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
TPPA结果解释示意图
梅毒血清学试验结果解释
梅毒检测技术规范简介
全国梅毒检测技术规范
第一章 梅毒检测样品的采集和处理 第二章 梅毒血清学检测 第三章 梅毒病原体显微镜检测 第四章 梅毒病原体核酸检测 第五章 实验室生物安全 第六章 梅毒检测实验室质量管理
临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
所有非梅毒螺旋体抗原血清试验的抗原基本成分都是一样 方法包括： （1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
效观察、判愈、复发或再感染的指征。
• 为什么要做定量检测？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
一期梅毒1年后转为阴性
二期梅毒2年后转为阴性。
晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年
后约50%病人血清反应仍为阳性。
TRUST结果解释示意图
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
梅毒的实验室检查与技术规范
朱穗兰
2013年3月2日
主要内容
梅毒概述 梅毒血清学检测方法 梅毒检测技术规范
梅毒概述（一）
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后2年，通过性接触一般无传染性 母婴传播 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者， 虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿, 病期越长，传染性越小;
梅毒的实验室检查
梅毒血清反应的假阴性
• 1． 一期梅毒硬下疳：一般硬下疳 出现2-3周，机体才出现反应素，故 早期血清反应常呈阴性。
• 2． 感染梅毒立即治疗或晚期梅毒： 由于血清反应素低，出现阴性。
• 3． 二期梅毒假阴性；不到1%的二 期梅毒患者其未稀释的血清VDRL试 验呈阴性或弱阳性反应，而在高度 稀释后反而为阳性，即前带现象 （Prozone phenomenon），这是血 清中抗心磷脂抗体过多，抑制阳性 反应的结果。 • 4． 技术操作或抗原敏感性低出现 血清试验阴性。
• TP-ELISA利用酶的放大系统，提高 了检测灵敏度，甚至可以比TPPA能 更早地检测出梅毒螺旋体特异性抗 体。在梅毒螺旋体特异性抗体和非 特异性抗体中，特异性IgM抗体最早 出现，感染梅毒螺旋体后，机体启 动体液免疫即可产生；抗心磷脂抗 体是当组织被破坏释放心磷脂后才 产生。
• 梅毒螺旋体特异性IgG抗体出现时间 较晚，可终身存在，因此，TPELISA或TPPA阳性无法判断是初次感 染还是既往感染。抗心磷脂抗体可 在梅毒治愈后消失，用TRUST能判断 是新近感染还是既往感染。
• 感染梅毒后，心磷脂抗体出现晚于 特异性螺旋体抗体，晚期梅毒时此 类抗体又部分转阴。有报道，三期 梅毒病人非梅毒螺旋体抗原试验仅 有71%仍为阳性，而梅毒螺旋体抗体 检测几乎均为阳性。 • 因此，非梅毒螺旋体抗原试验不适 于诊断一、三期梅毒，潜伏期梅毒 也不敏感，而且有急慢性的生物学 假阳性和假阴性反应。
• 血清学试验用作先天性梅毒的辅助诊 断，其首要问题是将无症状感染婴儿 从非感染婴儿区别开来，这些婴儿的 母亲梅毒血清试验阳性，困难在于不 能将母亲体液免疫反应同婴儿的抗体 反应相区别，因为母亲的IgG可传递 给胎儿。另外由于IgG终身存在，所 以很难评价治疗结果。血清学诊断常 常又存在着假阳性。
梅毒检测及策略
胺红，稳定、颗粒均匀，生产批间差小，结果易观 察
2020/6/13
4
2020/6/13
5
梅毒螺旋体抗原血清试验
用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原 测定抗螺旋体抗体
敏感性和特异性均高，一般用作确证试验 检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者
经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不 消失，血清反应仍持续存在阳性，不能用于 观察疗效
2020/6/13
16
文献报道
昆明医科大学附属第一医院（2013） 326例患者和200例健康体检者 ELISA法、TPPA 法和RPR 法的灵敏度分别为95.1、
96.3和83.4，特异性分别为96.0、 98.0和88.0。结 论 ELISA法是门诊、住院患者初筛梅毒的理想方法； TPPA法为目前公认最好的梅毒血清学确证试验； RPR滴度试验对评价梅毒疗效和判断是否再感染等 有重要临床价值。
4．由于采用EIA法，梅毒治愈多年后仍能检测到梅 毒 IgG 。因此，对确证活动性梅毒，监测疗法，发 现治疗失败的病例和再感染方面使用RPR是有必要 的。
2020/6/13
14
6．曾经治疗过梅毒的妇女在怀孕期间，RPR检测 效价通常增长1或2倍。由此提出需要对这类孕妇进 行治疗或再治疗。
7．新生儿梅毒筛查：在没有确定母亲梅毒血清检 测结果前，新生儿应该留院。因为存在假阴性和假 阳性，不能只做筛查检测（ RPR ）。梅毒IgG检测 阳性不能确定新生儿感染梅毒，因为母体抗体可以 通过胎盘被动传播，同时满足RPR和IgG检测阳性 因此新生儿梅毒阳性必须。新生儿和母亲必须采用 相同的检测方法，以保证两者效价结果可比性。
WHO推荐同时采用非梅毒螺旋体和梅毒螺 旋体抗原血清试验用于筛查和诊断
2020/6/13
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梅毒螺旋体抗原血清试验
用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原 测定抗螺旋体抗体
敏感性和特异性均高，一般用作确证试验 检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者
经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不 消失，血清反应仍持续存在阳性，不能用于 观察疗效
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文献报道
昆明医科大学附属第一医院（2013） 326例患者和200例健康体检者 ELISA法、TPPA 法和RPR 法的灵敏度分别为95.1、
96.3和83.4，特异性分别为96.0、 98.0和88.0。结 论 ELISA法是门诊、住院患者初筛梅毒的理想方法； TPPA法为目前公认最好的梅毒血清学确证试验； RPR滴度试验对评价梅毒疗效和判断是否再感染等 有重要临床价值。
4．由于采用EIA法，梅毒治愈多年后仍能检测到梅 毒 IgG 。因此，对确证活动性梅毒，监测疗法，发 现治疗失败的病例和再感染方面使用RPR是有必要 的。
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6．曾经治疗过梅毒的妇女在怀孕期间，RPR检测 效价通常增长1或2倍。由此提出需要对这类孕妇进 行治疗或再治疗。
7．新生儿梅毒筛查：在没有确定母亲梅毒血清检 测结果前，新生儿应该留院。因为存在假阴性和假 阳性，不能只做筛查检测（ RPR ）。梅毒IgG检测 阳性不能确定新生儿感染梅毒，因为母体抗体可以 通过胎盘被动传播，同时满足RPR和IgG检测阳性 因此新生儿梅毒阳性必须。新生儿和母亲必须采用 相同的检测方法，以保证两者效价结果可比性。
WHO推荐同时采用非梅毒螺旋体和梅毒螺 旋体抗原血清试验用于筛查和诊断
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病原学检测 血清学检测
病原学检查
取材方法
一期、二期梅毒时 ，取硬下疳、扁平 湿疣、黏膜斑等皮 损部位组织液或淋 巴结穿刺术得到的 组织液
暗视野显微镜
镀银染色
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅 毒，且具有快速、方便、易操作的特点。
螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患 者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都 有十分重要的意义。
特点 – 本法可用于大规模血清检测。
免疫层析
临床应用
梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验， 以TPPA/TPHA的特异性和敏感性最高。
它们可以帮助确定非梅毒螺旋体试验阳性反应是真阳 性还是假阳性。
一旦这些试验呈阳性，则患者终身阳性。
方法特点
特异性强，敏感性高 – 很少出现假阳性。据统计，在普通人群中，有1%的 生物学假阳性发生。 ① 如系统性红斑狼疮患者血清可使试验呈假阳性反应， 但大多数病例中螺旋体呈串株状荧光。 ② 传染性单核细胞增多症，可能由于嗜异性抗体所致， 可使TPHA呈假阳性。 ③麻风患者也可使特异试验呈阳性。
方法包括： –快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) –不加热血清反应素(USR) –甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） –性病研究实验室试验(VDRL)等。
RPR定量试验
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明确凝块但很 小的为弱阳性（圈2和3）颗粒均匀分布（圈1,5,8-10 ）或稍粗糙（圈6）为阴性
如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。
梅毒血清学检测方法
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）
梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验
原理（抗心磷脂抗体）： – 人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一种类脂 成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体产生类脂质抗 体（反应素）。 – 主要是IgM和IgG混合抗体。
痊愈、复发或再感染的指征。
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
–由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试 剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。
②生物学假阳性 –是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使 梅毒血清试验出现阳性
急性生物学假阳性反应的疾病
➢ 风疹 ➢ 水痘 ➢ 传染性单核细胞增多症 ➢ 传染性肝炎 ➢ 上呼吸道感染 ➢ 肺炎球菌性肺炎 ➢ 病毒性肺炎 ➢ 牛痘疹
慢性生物学假阳性反应的疾病
系统性红斑狼疮
风湿性心脏病
自身免疫性溶血性贫血 干燥综合征
盘状红斑狼疮
毒品瘾者
结节性多动脉炎
慢性肾炎
类风湿性关节炎
肝硬化
桥本氏甲状腺炎
老年
麻风 (是唯一产生慢性生
物学假阳性的感染性疾病)
特异性梅毒螺旋体抗体试验原理
检测血中以梅毒螺旋体特异蛋白为抗原的抗体（ IgG 和IgM ）。
TRUST试验结果
临床意义
早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，梅 毒抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 – 一期梅毒1年后转为阴性 – 二期梅毒2年后转为阴性。 – 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血 清反应仍为阳性
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判断
TPPA/TPHA原理
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同 – TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒 – TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞
特点 – 梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
TP-ELISA
原理 – 用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒 血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合 物与酶标记物结合，用酶标仪判定试验阳性反应 。
特异性IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测 出。
Hale Waihona Puke 实验方法梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
梅毒螺旋体
梅毒是一种性传播疾病，病原体为梅毒螺旋体，属于
密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema
pallidum subspecies pallidum)
苍白亚种 梅毒
苍白螺旋体
地方亚种 地方性梅毒
密螺旋体属
极细亚种 雅司病
品他螺旋体
品他病
青岛大学附属医院
梅毒螺旋体的生物学特性
1、直径 0.10~0.15μm，有8~14个致密而规则的小螺旋 ，两 端尖直。 2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛，故运动活跃，运动 方式多样。 3、G-，但不易着色，镀银染色呈棕褐色。 4、在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。 5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉素、四环素 、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一 般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。
输血传染
间接传播：日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径（接触 部位附有梅毒螺旋体） 。
梅毒的分期
梅毒的诊断
梅毒的诊断 – 早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期 梅毒（三期和晚期隐性梅毒） – 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析
梅毒的实验室检查 – 结果对诊断有决定性意义
常用梅毒实验室检测方法
梅毒螺旋体
传播途径
性接触是主要的传染途径 – 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 – 随着病期的延长，传染性越来越小 – 到感染后2年，通过性接触一般无传染性
母婴传播 – 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 –病期越长，传染性越小;
抗体产生时间 – 感染3周-4周，硬下疳出现1周-2周
抗体作用 – 无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反应素可 长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。
原理和方法
反应原理 –抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见
抗原基本成分 –心磷脂、卵磷脂和胆固醇
病原学检查
取材方法
一期、二期梅毒时 ，取硬下疳、扁平 湿疣、黏膜斑等皮 损部位组织液或淋 巴结穿刺术得到的 组织液
暗视野显微镜
镀银染色
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅 毒，且具有快速、方便、易操作的特点。
螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患 者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都 有十分重要的意义。
特点 – 本法可用于大规模血清检测。
免疫层析
临床应用
梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验， 以TPPA/TPHA的特异性和敏感性最高。
它们可以帮助确定非梅毒螺旋体试验阳性反应是真阳 性还是假阳性。
一旦这些试验呈阳性，则患者终身阳性。
方法特点
特异性强，敏感性高 – 很少出现假阳性。据统计，在普通人群中，有1%的 生物学假阳性发生。 ① 如系统性红斑狼疮患者血清可使试验呈假阳性反应， 但大多数病例中螺旋体呈串株状荧光。 ② 传染性单核细胞增多症，可能由于嗜异性抗体所致， 可使TPHA呈假阳性。 ③麻风患者也可使特异试验呈阳性。
方法包括： –快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) –不加热血清反应素(USR) –甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） –性病研究实验室试验(VDRL)等。
RPR定量试验
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明确凝块但很 小的为弱阳性（圈2和3）颗粒均匀分布（圈1,5,8-10 ）或稍粗糙（圈6）为阴性
如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。
梅毒血清学检测方法
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）
梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验
原理（抗心磷脂抗体）： – 人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一种类脂 成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体产生类脂质抗 体（反应素）。 – 主要是IgM和IgG混合抗体。
痊愈、复发或再感染的指征。
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
–由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试 剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。
②生物学假阳性 –是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使 梅毒血清试验出现阳性
急性生物学假阳性反应的疾病
➢ 风疹 ➢ 水痘 ➢ 传染性单核细胞增多症 ➢ 传染性肝炎 ➢ 上呼吸道感染 ➢ 肺炎球菌性肺炎 ➢ 病毒性肺炎 ➢ 牛痘疹
慢性生物学假阳性反应的疾病
系统性红斑狼疮
风湿性心脏病
自身免疫性溶血性贫血 干燥综合征
盘状红斑狼疮
毒品瘾者
结节性多动脉炎
慢性肾炎
类风湿性关节炎
肝硬化
桥本氏甲状腺炎
老年
麻风 (是唯一产生慢性生
物学假阳性的感染性疾病)
特异性梅毒螺旋体抗体试验原理
检测血中以梅毒螺旋体特异蛋白为抗原的抗体（ IgG 和IgM ）。
TRUST试验结果
临床意义
早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，梅 毒抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 – 一期梅毒1年后转为阴性 – 二期梅毒2年后转为阴性。 – 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血 清反应仍为阳性
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判断
TPPA/TPHA原理
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同 – TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒 – TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞
特点 – 梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
TP-ELISA
原理 – 用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒 血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合 物与酶标记物结合，用酶标仪判定试验阳性反应 。
特异性IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测 出。
Hale Waihona Puke 实验方法梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
梅毒螺旋体
梅毒是一种性传播疾病，病原体为梅毒螺旋体，属于
密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema
pallidum subspecies pallidum)
苍白亚种 梅毒
苍白螺旋体
地方亚种 地方性梅毒
密螺旋体属
极细亚种 雅司病
品他螺旋体
品他病
青岛大学附属医院
梅毒螺旋体的生物学特性
1、直径 0.10~0.15μm，有8~14个致密而规则的小螺旋 ，两 端尖直。 2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛，故运动活跃，运动 方式多样。 3、G-，但不易着色，镀银染色呈棕褐色。 4、在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。 5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉素、四环素 、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一 般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。
输血传染
间接传播：日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径（接触 部位附有梅毒螺旋体） 。
梅毒的分期
梅毒的诊断
梅毒的诊断 – 早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期 梅毒（三期和晚期隐性梅毒） – 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析
梅毒的实验室检查 – 结果对诊断有决定性意义
常用梅毒实验室检测方法
梅毒螺旋体
传播途径
性接触是主要的传染途径 – 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 – 随着病期的延长，传染性越来越小 – 到感染后2年，通过性接触一般无传染性
母婴传播 – 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 –病期越长，传染性越小;
抗体产生时间 – 感染3周-4周，硬下疳出现1周-2周
抗体作用 – 无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反应素可 长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。
原理和方法
反应原理 –抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见
抗原基本成分 –心磷脂、卵磷脂和胆固醇