梅毒实验室检测及分析

慢性生物学假阳性反应的疾病
系统性红斑狼疮
风湿性心脏病
自身免疫性溶血性贫血 干燥综合征
盘状红斑狼疮
毒品瘾者
结节性多动脉炎
慢性肾炎
类风湿性关节炎
肝硬化
桥本氏甲状腺炎
老年
麻风 (是唯一产生慢性生
物学假阳性的感染性疾病)
特异Hale Waihona Puke Baidu梅毒螺旋体抗体试验原理
检测血中以梅毒螺旋体特异蛋白为抗原的抗体（ IgG 和IgM ）。
梅毒螺旋体
传播途径
性接触是主要的传染途径 – 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 – 随着病期的延长，传染性越来越小 – 到感染后2年，通过性接触一般无传染性
母婴传播 – 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 –病期越长，传染性越小;
方法包括： –快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) –不加热血清反应素(USR) –甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） –性病研究实验室试验(VDRL)等。
RPR定量试验
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明确凝块但很 小的为弱阳性（圈2和3）颗粒均匀分布（圈1,5,8-10 ）或稍粗糙（圈6）为阴性
病原学检测 血清学检测
病原学检查
取材方法
一期、二期梅毒时 ，取硬下疳、扁平 湿疣、黏膜斑等皮 损部位组织液或淋 巴结穿刺术得到的 组织液
暗视野显微镜
镀银染色
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅 毒，且具有快速、方便、易操作的特点。
螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患 者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都 有十分重要的意义。
痊愈、复发或再感染的指征。
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
–由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试 剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。
②生物学假阳性 –是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使 梅毒血清试验出现阳性
急性生物学假阳性反应的疾病
➢ 风疹 ➢ 水痘 ➢ 传染性单核细胞增多症 ➢ 传染性肝炎 ➢ 上呼吸道感染 ➢ 肺炎球菌性肺炎 ➢ 病毒性肺炎 ➢ 牛痘疹
特异性IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测 出。
实验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。
梅毒血清学检测方法
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）
梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验
原理（抗心磷脂抗体）： – 人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一种类脂 成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体产生类脂质抗 体（反应素）。 – 主要是IgM和IgG混合抗体。
TRUST试验结果
临床意义
早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，梅 毒抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 – 一期梅毒1年后转为阴性 – 二期梅毒2年后转为阴性。 – 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血 清反应仍为阳性
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判断
TPPA/TPHA原理
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同 – TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒 – TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞
特点 – 梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
TP-ELISA
原理 – 用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒 血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合 物与酶标记物结合，用酶标仪判定试验阳性反应 。
抗体产生时间 – 感染3周-4周，硬下疳出现1周-2周
抗体作用 – 无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反应素可 长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。
原理和方法
反应原理 –抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见
抗原基本成分 –心磷脂、卵磷脂和胆固醇
输血传染
间接传播：日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径（接触 部位附有梅毒螺旋体） 。
梅毒的分期
梅毒的诊断
梅毒的诊断 – 早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期 梅毒（三期和晚期隐性梅毒） – 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析
梅毒的实验室检查 – 结果对诊断有决定性意义
常用梅毒实验室检测方法
特点 – 本法可用于大规模血清检测。
免疫层析
临床应用
梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验， 以TPPA/TPHA的特异性和敏感性最高。
它们可以帮助确定非梅毒螺旋体试验阳性反应是真阳 性还是假阳性。
一旦这些试验呈阳性，则患者终身阳性。
方法特点
特异性强，敏感性高 – 很少出现假阳性。据统计，在普通人群中，有1%的 生物学假阳性发生。 ① 如系统性红斑狼疮患者血清可使试验呈假阳性反应， 但大多数病例中螺旋体呈串株状荧光。 ② 传染性单核细胞增多症，可能由于嗜异性抗体所致， 可使TPHA呈假阳性。 ③麻风患者也可使特异试验呈阳性。
梅毒螺旋体
梅毒是一种性传播疾病，病原体为梅毒螺旋体，属于
密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema
pallidum subspecies pallidum)
苍白亚种 梅毒
苍白螺旋体
地方亚种 地方性梅毒
密螺旋体属
极细亚种 雅司病
品他螺旋体
品他病
青岛大学附属医院
梅毒螺旋体的生物学特性
1、直径 0.10~0.15μm，有8~14个致密而规则的小螺旋 ，两 端尖直。 2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛，故运动活跃，运动 方式多样。 3、G-，但不易着色，镀银染色呈棕褐色。 4、在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。 5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉素、四环素 、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一 般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。