设计性实验报告

正负离子表面活性剂混合体系双水

相性质的测定

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正负离子表面活性剂混合体系双水相性质的测定

一、实验目的

1.掌握表面活性剂的基本性质，了解其前沿研究动态

2.学会运用称量法配置三元相行为中的特定样品，运用恒

温法得到双水相；运用分光度法测定双水相两相中被萃取物质的浓度，并学会萃取效率和分配系数的计算方法。

3.将无机化学、分析化学、有机化学、物理化学的有关理

论进行综合，强化各课程之间的依托性，培养学生综合运用各种学科知识的能力，重点实现理论课-实验课-科学研究的转化。

二、实验原理

表面活性剂是一类有机化合物，其分子特点是具有不对称，并且具有两亲性。其按极性基团的解离性质分类，可分为：阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性离子表面活性剂和非离子表面活性剂。在适当的条件下，正负离子表面活性剂可以混合使用，并且在混合溶液中存在电性相反的表面活性离子静电作用及其疏水性碳链间的相互作用。

双水相体系（aque two phase systems，简称ATPS）是指某些物质的水溶液在一定条件下自发分离形成两个互相不相容的水相系统。正负离子表面活性剂混合体系的水溶液在适当的

条件下能形成双水相。由于表面活性剂溶液中的胶束结构在不同的条件下组装形式不同,这使得表面活性剂双水相系统对物质萃取的选择性具有可调节性。利用该系统萃取生物大分子物质如牛血清蛋白、胰蛋白酶等的研究已有报道。

本实验通过研究十二烷基硫酸钠（SDS）/十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）/水（H2O）混合体系在硫酸钠（Na2SO4）溶液中的相行为、双水相分相时间以及双水相对罗丹明B的萃取作用，揭示影响物质在正负离子表面活性剂双水相中分配系数的主要因素，进而讨论影响正负离子表面活性剂双水相萃取作用的主要因素。

三、仪器与试剂

仪器：电子天平；磁力加热搅拌器；721型分光光度计；厚度规格0.5cm、1.0cm比色皿若干；干燥器；恒温水浴箱；塑料保鲜膜；剪刀；橡皮筋12个；圆柱形玻璃小瓶12个；玻璃棒4根；长吸管一支；注射器2支；100ml烧杯14个；250ml烧杯2个；100ml容量瓶2个；500ml容量瓶1个；5ml移液管一支；10ml移液管2支；刻度尺1把；洗耳球1个。

试剂：SDS（分析纯，99%）；CTAB（分析纯，99%）；Na2SO4（分析纯，99%）罗丹明B(分析纯)；蒸馏水。

四、实验步骤

将12个100mL的小烧杯、两支注射器、比色皿洗涤干净后，放入干燥箱中干燥，备用。

1.配制0.2mol/L Na2SO4的溶液

用电子天平准确称取14.243gNa2SO4固体，于100ml烧杯中加入一定量蒸馏水溶解，将磁子放入，放在磁力加热搅拌器上加热搅拌，使其充分溶解后转移至500mL容量瓶中，加蒸馏水定容、摇匀，得到0.2mol/l的Na2SO4溶液。

2.配制0.2mol/L的SDS溶液

用电子天平准确称取5.768gSDS粉末，取配好的0.2mol/l

的Na2SO4溶液50-70ml倒入100ml烧杯中，并将烧杯置于磁力加热搅拌器上加热搅拌。缓慢加入SDS，使其溶解。全部溶解后转移至100mL容量瓶中，并将容量瓶置于40℃恒温水浴中定容，摇匀后用洗耳球吹去溶液表面的泡沫，得0.2mol/L的SDS溶液。继续恒温备用。

3.配制0.2mol/L的CTAB溶液

准确称取7.290gCTAB粉末，按步骤2配制溶液。

4.配制双水相

（1）SDS和CTAB均40度恒温满15min后，用移液管移取

2.1mLSDS和7.9mLCTAB于100mL小烧杯中，再滴加5滴罗丹明B。

用玻璃棒快速搅匀，立即倒入圆柱形小瓶中，用塑料保鲜膜及橡皮筋封口，记录样品现象。

（2）迅速将圆柱形小瓶放入恒温箱中恒温2h。

（3）按照步骤1、2依下表比例移取溶液，配制其他11组混合液。并放入40℃恒温箱中恒温。

表1 ＳＤＳ／ＣＴＡＢ体积表

（4）观察双水相形成过程，2h后双水相达到平衡，记录下各个小瓶样品现象。

5.测定吸光度

（1）取出1个出现双水相的圆柱形小瓶，用直尺测量上下相高度，记作h1、h2，然后放入恒温水浴中恒温。

（2）调节分光光度计。打开仪器开关，预热20min。将灵敏度调至1档，波长为553nm，将暗箱盖打开，调节透光率为0。将盛有蒸馏水的比色皿放入暗箱，盖上箱盖，调节透光率为100。再打开箱盖调0，再盖上箱盖调100。反复调节。

（3）用注射器吸取上相溶液，若溶液颜色很浅，直接放入比色皿中，测其吸光度；若溶液颜色深，较粘稠，则先称量100mL

小烧杯中质量，去皮。再将溶液放入，记下质量m1。加一定量蒸馏水稀释，再记下质量m2。将稀释后溶液倒入比色皿中，测其吸光度A1。吸光度在0.2-0.8之间即可，若吸光度大于0.8，继续稀释至吸光度在0.2-0.8范围内，记录吸光度值，算出稀释倍数记作n1。

（4）按步骤4测下相吸光度A2，稀释倍数n2并记录。

（5）将所有出现双水相的体系按照步骤4、5测出并记录它们的吸光度。

（6）关闭电源，整理仪器。

参考文献

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