细胞生物学课件PDF 细胞生物学技术
2024版瞿中和细胞生物学pdf
02 细胞的基Leabharlann 结构 与功能细胞膜的结构与功能
01 细胞膜主要由脂质和蛋白质组成,具有流 动性。
02 细胞膜具有选择透过性,能够控制物质进 出细胞。
03
细胞膜上的受体能够识别外界信号并作出 响应。
04
细胞膜参与细胞间的信息交流和物质运输。
细胞质的结构与功能
细胞质包括细胞质基质和 细胞器,是细胞进行新陈 代谢的主要场所。
细胞信号转导的基本概念与途径
信号分子
01
包括激素、神经递质、生长因子等,能够传递信息并引起细胞
反应。
受体
02
位于细胞膜上或细胞内,能够特异性识别并结合信号分子。
信号转导途径
03
包括G蛋白偶联受体途径、酶联受体途径、核受体途径等,能够
将信号从细胞膜传递到细胞核,引起细胞反应。
细胞信号转导的调控机制
瞿中和细胞生物学pdf
目录
• 细胞生物学概述 • 细胞的基本结构与功能 • 细胞的物质运输与信号转导 • 细胞的能量转换与代谢 • 细胞的增殖与分化 • 细胞衰老、凋亡与疾病
01 细胞生物学概述
细胞生物学的定义与研究对象
定义
细胞生物学是研究细胞结构、功能、 生长、分裂、分化以及与外界环境相 互作用的科学。
神经调控
神经系统通过神经递质与靶细胞表面的受体结合,影响细胞内的代 谢过程,从而实现对生物体各部位生理功能的精确调控。
05 细胞的增殖与分 化
细胞周期的基本概念与调控
01
细胞周期定义
指连续分裂的细胞从一次有丝分 裂结束到下一次有丝分裂结束所 经历的整个过程。
02
细胞周期阶段
03
细胞周期调控
包括间期和分裂期,其中间期又 分为DNA合成前期、DNA合成 期和DNA合成后期。
细胞生物学课件第三章细胞技术ppt文档
– 其中λ为入射光线波长;N.A.为镜口率 =nsinα/2,
n=介质折射率;α=镜口角(样品对物镜镜口的张角) 。
• 如何提高显微镜的分辨能力?
表一、几种介质的折射率
介质 空气 水 香柏油 α 溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66
• 显微镜的几个光学特点:
透射电子显微镜
表二、不同光线的波长
名 称 可见光 紫外光 X 射线 α 射线
电子束
0.1Kv 10Kv
波长(nm) 390~760 13~390 0.05~13 0.005~1 0.123 0.0122
2、制样技术
1)超薄切片 • 电子束穿透力很弱,用于电镜观察的标本须制成厚度仅
50nm的超薄切片,用超薄切片机(ultramicrotome)制 作。 • 通常以锇酸和戊二醛固定样品,丙酮逐级脱水,环氧树脂 包埋,以热膨胀或螺旋推进的方式切片,重金属(铀、铅) 盐染色。
简单的比较显微镜可由两台普通显微镜加一个 可共享两台显微镜物镜的目镜系统(比较桥)组成。
专业的比较显微镜采用一体化结构,光学系统、 载物台等依照特殊需求进行专门设计,功能十分强 大。
• 比较显微镜是刑侦技术、检 察技术和法医鉴定的主要科 学技术手段之一,在比较显 微镜里,一颗子弹的两截可 以在同样的镜头下连成一体, 使得观察者可以借两者的异 常靠近来比较分析每颗子弹 上的痕迹。近年来在化学、 物理、冶金、医药、材料、 环境、微电子研究等方面也 有广泛应用。
• 物镜与照明系统颠倒,前 者在载物台之下,后者在 载物台之上,用于观察培 养的活细胞,通常具有相 差物镜,有的还具有荧光 装置。
(九)比较显微镜
属特种显微镜:用一组目镜同时观察到左右两 个光学系统物方物体的像。并通过对接、切割、重 叠、旋转等手段,对两个或两个以上物体进行宏观 或微观上的比较,以检查、分析和鉴别它们的微小 差别:形式、组织、结构、色彩或材料。
细胞生物学技术[PPT课件]
优 点:
细胞生物学技术
—流式细胞仪
❖ 1、具有操作简便,只要将染色的单个细胞推入仪器 中,就会得出数据。
❖ 2、具有较高的灵敏度及测定速度,而且每次可测出 许多数据,一般情况下,每秒可测5000个细胞,能 迅速分析和记数大量细胞,并能准确统计群体中荧 光标记细胞的比例。
❖ 3、应用广泛,即可用于测定细胞活力、繁殖周期和 细胞定型分析,也可区别死亡细胞、分裂细胞和静 止细胞群,既可测定DNA和RNA、测凋亡峰 ,又可 测蛋白含量,特别是胞浆蛋白。
-
Charged Plates
中;其它液体被当作废
液抽吸掉,某些类型的
仪器也有采用捕获管来
进行分选的。
Single cells sorted
into test tubes
FALS Sensor
Fluorescence detector
+
细胞生物学技术
—流式细胞仪
单参数直方图(Histogram)
数据处理原理:FCM的 数据处理主要包括数据 的显示和分析,至于对 仪器给出的结果如何解 释则随所要解决的具体 问题而定。
细胞生物学技术
—流式细胞仪 应 用:
❖ 目前流式细胞仪(FCM)已在各学科中获得应 用。
❖ 细胞生物学:定量分析细胞周期并分选不同 细胞周期时相的细胞;分析生物大分子如 DNA、RNA、抗原、癌基因表达产物等物质 与细胞增殖周期的关系,进行染色体核型分 析,并可纯化X或Y染色体,等等。
细胞生物学技术
细胞生物学技术
—流式细胞仪
工作原理
流式细胞仪技术,主要是测 量群体中单个细胞经适当染 色后其成分所发出的散射光 和荧光,经染色的细胞在悬 液中以单行流过高强度光源 的焦点,当每个细胞经过焦 点时,发出一束散射光/或荧 光。它们经过过滤及光镜系 统收集到达一个光电检测器 (光电倍增管或一个固态装 置),光检测器把散射光定量 转化成电信号,经数字转换 器进行数字化后而成整数, 然后进行电子存储,以后数 据可以调出显示和进行分析。 如左图所示。
《细胞生物学技术》PPT课件
1.可以直接观察和分辨单离子通道电流及其 开闭时程,使细胞信号的跨膜转导和细胞 分泌机制的研究更加直接。 2.能够区分离子通道的离子选择性,可以借 此技术发现新的离子通道。极大的推动了 细胞生物学的发展。 3.可以应用与药物开发和药理分析推动医学 进一步发展。
电泳技术
概念:电泳是指混悬于溶液中的样品电荷颗粒,在 电场影响下向着与自身带相反电荷的电极移动的 现象。 原理:一些基团在溶液中能吸收或者给出氢离子, 从而成为电荷粒子;又由于电荷粒子的多少不等 以及具有相同电荷的分子又有大小之分,所以在 不同的介质中,在电场影响下,它们移动的速度 也不相同了。人们利用这种特性,用电泳的方法 对上述物质进行定性及定量分析,或者将一定的 混合物分离成。它是一项生物学研究中常用的技 术。
细胞生物学技术
——08生科3班刘涛
膜片钳技术 电泳技术 单克隆抗体技术
膜片钳技术
概念:膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的 离子电流来反映细胞膜单一或多个离子通道活动 的技术。 原理:通过用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通 道、面积为几个平方微米的细胞膜通过吸引紧密 封接起来,由于电极尖端下的细胞膜与其他部分 从电学上隔离,所以这一部分膜内的离子通道开 放时所产生的电流就会流进玻璃吸管,此时用一 个高度敏感的电流监视器测量此电流的强度,就 可以反映出该离子通道电流及刑 侦方面的应用广,具有准确操作简单等优 点。 在农业中应用于鉴别假冒伪劣种子,比之 传统的生态法鉴种,具有速度快,可靠性 强,成本少,不受环境影响等优点。
2024版细胞生物学电子版PPT课件
分为前期、中期、后期和末期,主要完成染色体的分离和细胞质的分裂。
间期
细胞周期的大部分时间处于间期,包括G1期、S期和G2期,主要进行DNA复制和相关蛋白质合成。
细胞周期
指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程,包括间期和分裂期。
细胞周期与有丝分裂
减数分裂与遗传规律
胚胎发育过程中的细胞分化
组织器官的形成
在胚胎发育过程中,各种组织器官的形成是细胞分化的结果,需要多种类型细胞的协同作用。
组织的再生与修复
当组织受到损伤时,机体可以通过再生和修复机制来恢复组织的结构和功能,其中涉及到干细胞的激活、增殖和分化等过程。
再生医学的应用
再生医学利用干细胞和其他生物技术手段来促进组织的再生和修复,为治疗多种疾病提供了新的思路和方法。
减数分裂
生物细胞中染色体数目减半的分裂方式,性细胞分裂时,染色体只复制一次,细胞连续分裂两次。
遗传规律
主要包括分离定律、自由组合定律和连锁互换定律,是生物遗传的基本规律。
分离定律
在杂种后代中,一对相对性状的显隐性状会分开,各自独立地遗传给后代。
自由组合定律
控制两对或两对以上相对性状的基因在遗传给下一代时,各自独立分配,互不干扰。
位于细胞膜或细胞内,能够特异性识别并结合信号分子的蛋白质或糖蛋白。
受体
信号分子通过受体介导的一系列生物化学反应,将信号从细胞外传递到细胞内,并调节细胞的功能和代谢。
信号转导途径
细胞信号转导的基本概念
参与视觉、嗅觉、味觉等多种生理功能的调节。
G蛋白偶联受体信号转导途径
通过酶促反应将信号放大并传递到细胞内,调节细胞的生长、分化和代谢。
细胞分化的意义
细胞生物学ppt课件(2024)
信号转导与疾病预防
通过调节饮食、生活方式等,可以影响细胞信号转导过程,从而预防疾 病的发生。例如,适量运动可以促进细胞信号转导的正常进行,降低心 血管疾病的风险。
05
细胞的增殖与分化
细胞周期与有丝分裂
细胞周期的定义与阶段
细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的全过程, 包括间期和分裂期两个阶段。
间期的特点与功能
间期是细胞生长和DNA复制的时期,包括G1期、S期和 G2期三个阶段,为细胞分裂准备物质基础。
有丝分裂的过程与意义
有丝分裂是真核细胞进行细胞分裂的主要方式,包括前期 、中期、后期和末期四个阶段,确保遗传物质平均分配到 两个子细胞中。
主动运输
需要消耗能量,物质逆浓度梯度进 行运输,包括原发性主动转运和继 发性主动转运。
膜泡运输
通过膜包裹、膜融合、膜分离等步 骤,实现大分子和颗粒物质的跨膜 运输,包括胞吞作用和胞吐作用。
细胞信号转导的基本过程
信号分子识别
细胞通过表面受体识别信号分子,启动 信号转导过程。
信号跨膜转导
信号分子与受体结合后,通过激活或抑 制膜内信号转导蛋白,将信号跨膜传递 。
04
细胞的能量转换与代谢
细胞的能量转换过程
1 2
ATP的合成与分解
细胞通过ATP的合成和分解来实现能量的转换和 储存,其中ATP的合成主要在线粒体中进行,而 分解则发生在细胞质中。
氧化磷酸化
在线粒体中,通过氧化磷酸化过程将NADH和 FADH2中的能量转化为ATP中的高能磷酸键。
3
光合作用
细胞生物学(电子版)PPT课件
研究对象
细胞生物学的定义与研究对象
从17世纪列文虎克发现细胞到20世纪分子生物学的兴起,细胞生物学经历了漫长的发展历程。
随着现代科学技术的进步,细胞生物学已经从描述性学科向实验性学科转变,成为生命科学领域最活跃的分支之一。
细胞生物学的发展历史与现状
与细胞的有丝分裂密切相关,形成纺锤丝并牵引染色体分离
高尔基体
溶酶体
液泡
中心体
03
CHAPTER
细胞的代谢与能量转换
包括糖酵解、糖异生和三羧酸循环等过程,是细胞获取能量的主要途径。
糖代谢
脂代谢
蛋白质代谢
代谢调控
涉及脂肪酸的合成与分解,以及胆固醇的代谢等,与细胞膜的构成和信号传导密切相关。
包括蛋白质的合成与分解,以及氨基酸的代谢等,对细胞生长和分裂至关重要。
细胞生物学的研究涉及到生命科学领域的多个前沿问题,如细胞命运决定、细胞间通讯等。
02
CHAPTER
细胞的基本结构与功能
03
细胞膜的功能
物质运输、信息传递、能量转换等
01
细胞膜的主要成分
磷脂双分子层、蛋白质、糖类等
02
细胞膜的结构特点
流动性、选择透过性
细胞膜的结构与功能
细胞质的主要成分
水、无机盐、有机物等
光合作用
在叶绿体中,通过光合作用将光能转化为化学能,并储存于ATP和NADPH中,是植物细胞特有的能量转换方式。
1
2
3
细胞通过膜受体接收外界信号分子,如激素、神经递质等,进而引发细胞内一系列生化反应。
受体介导的信号传导
包括第二信使系统、蛋白激酶级联反应等,将膜受体的信号传递至细胞核内,调控基因表达。
细胞生物学技术课件
2、应用科学研究任务(从已有的贡献论之)
创新物种,用于生产实践。 (杂交细胞株、基因重组细胞株、转基因生物、 克隆动物等) 把新技术引入医学和农、林、牧、渔业。 (诊断、治疗、预防疾病、提高产量) 开发生物制品产业。 (生物药、营养品等)
三、从生命科学的发展趋势谈细胞生物学 p1
1、从宏观向微观:细胞生物学是实验科学,是 在细胞和分子生物学技术迅速发展推动下,产 生的新兴学科。 2、从分析到综合,多学科交叉融合:细胞生物 学不是研究单的研究成果,是综合性基础学科。 3、由解释生命到改造生命:细胞生物学是充满 创新活力与生产实践紧密结合的前沿学科。
2、细胞是生命体演绎各种生命现象的基本结 构单位和功能单位
生命现象 细胞生命活动 新陈代谢 细胞呼吸 细胞物质能量代谢 生长发育 细胞分裂、分化、细胞凋亡 繁殖 细胞减数分裂、受精作用 遗传变异 细胞基因组传递、表达、突变 衰老、死亡 细胞损伤与衰亡 疾病 细胞病理变化 ∴生命体的一切生命现象都可到细胞中寻找答案。
医学生的专业知识结构
临床医学各分支学科 基础医学各分支学科 生命科学基础前沿学科 依据专业特点: 精学 掌握 了解
细胞生物学 分子生物学 生物信息学
教学参考文献
1、王培林:医学细胞生物学 2005 年 人民卫生出版社 2、鄂征:组织培养和分子细胞学技术 2001年 北京出版社 3、各种中英文版:细胞生物学杂志和专著
四、细胞生物学实验技术体系p2
1、细胞离体培养技术 2、细胞形态结构观察技术 3、细胞内化学组分鉴定、分析技术 4、细胞各种生命现象研究技术 5、细胞工程技术 6、细胞分子生物学技术 (参教材目录)
五、细胞生物学与医学教育
Medical Cell Biology 是基础医学各分支学科的理论基础 是临床医学各分支学科的理论基础 是医疗新技术发展的先导 是生物医药产业发展的技术动力
细胞生物学全套完整版PPT文档(2024)
推动生物工程进步
细胞生物学的研究也为生物工程领域提供了重要的理论和 技术支持,例如通过细胞工程可以生产具有特定功能的细 胞和组织工程产品。
2024/1/29
探索未知领域
随着研究的深入,细胞生物学将不断揭示新的未知领域和 生命现象,为人类探索生命奥秘提供更多的线索和启示。
6
02 细胞的基本结构 与功能
细胞质内含有各种细胞器,如线粒体、叶绿体、 内质网、高尔基体等,参与细胞的代谢和合成。
细胞质还承担着细胞内物质运输和能量转换的功 能。
2024/1/29
10
细胞核的结构与功能
01
细胞核是细胞的遗传信息库,由 核膜、核仁和染色质组成。
02
核膜将细胞核与细胞质分开,核 膜上有核孔,控制物质进出细胞
核。
2024/1/29
7
细胞的形态与大小
动物细胞形态多样,一般呈圆形、椭圆形或不规则形;植物细胞形态较规则,多为 长方形、正方形或多边形。
细胞大小差异很大,最小的细菌细胞直径仅0.2微米,最大的卵细胞直径可达200微 米以上。
2024/1/29
细胞的大小与生物体的复杂程度有关,一般来说,高等生物细胞较大,低等生物细 胞较小。
激光共聚焦显微镜
利用激光束扫描样品并收集荧光信号,实现 高分辨率的三维成像。
2024/1/29
电子显微镜
利用电子束代替光束,实现更高分辨率的细 胞结构观察。
33
细胞分离与培养技术
2024/1/29
细胞分离技术
包括机械法、酶消化法、免疫磁珠法等,用于从组织或血液中分 离出特定类型的细胞。
细胞培养技术
代谢组学技术
研究细胞内代谢产物的种 类、含量和变化,揭示细 胞代谢状态和调控机制。
09782_细胞生物学全套ppt课件
如病毒感染、细菌感染等,细胞凋亡和自噬在宿主细胞防御病原体入 侵和清除感染源中发挥重要作用。
30
感谢您的观看
THANKS
2024/1/26
31
2024/1/26
29
细胞凋亡和自噬在疾病中的作用
2024/1/26
肿瘤
细胞凋亡和自噬在肿瘤发生、发展和治疗中具有重要作用。肿瘤细胞 通过逃避凋亡和自噬的监控,实现无限增殖和侵袭转移。
神经退行性疾病
如阿尔茨海默病、帕金森病等,神经元细胞的凋亡和自噬异常导致神 经元死亡和功能障碍。
心血管疾病
如心肌缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化等,细胞凋亡和自噬参与血管 内皮细胞损伤和炎症反应。
包括前期、中期、后期和末期四个阶段,主要特点是DNA复制一次,细胞分裂一次,形成两个与母细胞相同的子 细胞。
减数分裂的过程
包括第一次减数分裂和第二次减数分裂两个阶段,主要特点是DNA复制一次,细胞连续分裂两次,形成四个与母 细胞不同的子细胞。减数分裂是生物体进行有性生殖的基础,对于维持物种的遗传多样性和适应性具有重要意义 。
细胞骨架由微管、微丝和中间纤维构 成,维持细胞形态,保持细胞内部结 构的有序性,参与细胞运动、分裂和 分化等过程。
2024/1/26
12
线粒体与能量转换
2024/1/26
线粒体的结构与功能
线粒体由外膜、内膜和基质组成,内膜上附有大量的酶,是有氧呼吸的主要场所,为细胞 提供能量。
ATP的合成与分解
在线粒体中,通过氧化磷酸化过程合成ATP,为细胞提供能量;同时,细胞也可以通过 ATP的分解来释放能量。
细胞生物学的定义
研究细胞结构、功能、生长、分 裂、分化、代谢、遗传与变异的 科学。
2024版细胞生物学第五版翟中和pdf
细胞生物学第五版翟中和pdf•细胞生物学概述•细胞的结构与功能•细胞的代谢与调控•细胞的生长、分裂与分化•细胞的遗传、变异与进化•细胞生物学的研究方法与技术01细胞生物学概述细胞生物学的定义与研究对象细胞生物学的定义研究对象细胞生物学的发展历史与现状发展历史现状细胞生物学的研究意义与价值揭示生命活动的规律为医学提供理论基础推动生物技术的发展02细胞的结构与功能细胞膜的主要成分细胞膜的结构细胞膜的功能细胞质的主要成分01细胞质的结构02细胞质的功能031 2 3细胞核的主要成分细胞核的结构细胞核的功能高尔基体由扁平囊和小泡组成,单层膜结构。
功能是对蛋白质进行加工、分类和包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。
线粒体由双层膜包被,内膜向内折叠形成嵴,嵴上有基粒;基质中含有与有氧呼吸有关的酶。
功能是进行有氧呼吸的主要场所,为细胞代谢提供能量。
叶绿体由双层膜包被,内部有许多基粒,基粒与基粒之间充满基质。
功能是进行光合作用的场所,将光能转化为化学能并储存在有机物中。
内质网由单层膜连接而成的网状结构,分为粗面内质网和光面内质网两种。
功能是蛋白质合成和加工以及脂质合成的车间。
细胞器的结构与功能03细胞的代谢与调控ATP的合成与分解释放能量供细胞使用。
呼吸作用光合作用蛋白质代谢脂质代谢糖类代谢01 02 03受体介导的信号传导细胞内信号传导通路细胞周期与细胞生长的调控细胞的信号传导与调控04细胞的生长、分裂与分化细胞生长的概念细胞增殖的方式细胞周期030201细胞的生长与增殖无丝分裂真核细胞的一种分裂方式,过程简单,无纺锤丝和染色体的出现。
有丝分裂真核细胞分裂的主要方式,包括前期、中期、后期和末期,确保遗传物质的平均分配。
减数分裂生殖细胞的分裂方式,包括两次连续的细胞分裂,最终产生遗传物质减半的配子。
细胞的分裂方式及过程030201细胞分化的概念同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程。
细胞生物学(电子版)PPT课件
四川大学生命科学学院 北京大学生命科学学院 复旦大学生命科学学院
C
第一章 第二章 第三章 第四章 第五章 第六章 第七章 第八章 第九章 第十章 第十一章 第十二章 第十三章
绪论 细胞基本知识概要 细胞生物学研究方法 细胞质膜与细胞表面 物质跨膜运输与信号传递 细胞质基质与内膜系统 细胞的能量转换 细胞核与染色体 核糖体 细胞骨架 细胞增殖及其调控 细胞分化与基因表达调控 细胞衰老与凋亡
细胞生物学教材主编: 翟中和 王喜忠 丁明孝
细胞生物学电子版教材策划、编写及制作人员: 王喜忠 陈建国 丁明孝 乔守怡 翟中和
邹方东 张咏梅 彭 勇 卢智刚 孙玉慧
感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络, 如有侵权请及时联系我们删除,
《细胞生物学技巧》课件
细胞工程:通过基因工程改造细胞,使其产生特定药物
生物制药:利用生物技术生产药物,如疫苗、抗体等
药物生产:通过细胞工程生产药物,如胰岛素、生长激素等
药物应用:在医疗、科研等领域广泛应用,如治疗糖尿病、癌症等疾病
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汇报人:PPT
微丝:细胞骨架的另一主要成分,参与细胞运动、细胞分裂等过程
细胞骨架与细胞信号传导:细胞骨架在细胞信号传导中的作用,如细胞分裂、细胞迁移等过程
细胞核与基因表达
细胞核是细胞遗传信息的储存和调控中心
基因表达受细胞核内多种因素的调控,如转录因子、DNA甲基化等
基因表达异常可能导致疾病,如癌症、遗传病等
基因表达是指基因在细胞中的转录和翻译过程
细胞传代:定期更换培养基,去除老化细胞
细胞冻存:将细胞冷冻保存,以备后续使用
基因工程与转基因技术
基因工程:通过基因重组技术,改变生物的遗传特性
转基因技术:将外源基因导入生物体内,改变其遗传特性
应用领域:医学、农业、环境等领域
技术难点:基因导入、表达调控、生物安全性等
基因敲除与敲入技术
基因编辑技术:包括CRISPR/Cas9、TALEN、ZFN等
应用领域:生物医学、农业、环境科学等
基因敲除:通过基因编辑技术,将目标基因从基因组中删除,以研究该基因的功能
基因敲入:通过基因编辑技术,将目标基因插入到基因组中,以研究该基因的功能
基因编辑与基因治疗
添加标题
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基因治疗:基因编辑、基因沉默、基因替代等
基因编辑技术:CRISPR/Cas9、TALEN等
细胞生物学技巧
汇报人:PPT
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戊二醛 CH2
C
O
H
包埋剂: 环氧树脂(万能胶)
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首页
不使用超薄切片的
透射电镜技术
负染法和投影法
负染法是在将颗粒和纤
维样品分散在具有亲水性支 撑膜的载网上以后,滴加磷 钨酸或醋酸双氧铀等染料, 并随即吸去多余的染液。样 品干燥后残余染料将沉积在 样品的周围以及样品的凹陷、 空隙处,而样品本身反而呈 浅色,故称为负染。
把放射性前体(例如3H-胸苷、14C-尿苷和
3H-亮氨酸分别是DNA、RNA和蛋白质合成的前
体)加到细胞中,使放射性前体与已存在的前体
分子混合,因为它们原子之间仅是原子核重量
不同,而化学性质相同,这样,细胞就以同样
方式对其产生反应。
蛋白质
3H-亮氨酸
细胞
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首页
2.3.3. 放射自显影技术
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首页 用超速离心机分离细胞器和大分子
用制备超速离心机可从细胞匀浆的混合物中分 离出细胞的各种组分。
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首页 离心级段
图解表示如何用递增的速 度反复离心、分离纯化细胞提 取液较小的细胞组分一般要求 巨大的离心力速度才能沉淀。 图中备个离心级段的典型数值:
低 速: 1000g l 0分钟 中 速: 2000g 20分钟 高 速: 80000g 1小时 超高速:150000g 3小时
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首页 复型和冷冻蚀刻技术
升华后,细胞内外
凡空隙处或含游离水较 多的地方将下陷,从而 除上述膜的脂质面外, 其他一些结构也被显示 出来,并进一步增强了 断面的浮雕效果。
细胞核 细胞质 小泡
对这一断面进行铂碳复型,在腐蚀性溶液 中除去生物材料后,即 可上电镜观察。
线粒体
质膜
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首页
细胞融合 杂种细胞
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首页 2.4.1. 单克隆抗体
单克隆抗体技术的基本原理:
A.获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞。
B.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞 二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。
这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具 有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞 能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融 合细胞培养增殖的细胞群,可制备抗一种抗原决定簇 的特异单克隆抗体。
{ B电子显微镜:
---高压电镜(100WV)
扫描式电镜---普通扫描电镜(SEM)
---隧道扫描电镜(STM)
首页
2.1.1光学显微镜
2.1 显微镜技术
光学显微镜的最小分辨距离是0.2微 米。实际上,大约0.5微米大小的细菌 和线粒体 ,是光学显微镜能清晰看到 的最小物体。由于光的衍射作用,看不 清更小的物体。
显微放射自显影图
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用3H-TdR (氚-胸苷) 标记3T3细胞20分钟,洗 去放射同位素,涂布核乳 胶,在暗处(4℃)曝光, 再进行显影、定影处理。 掺人3H -TdR的细胞(正 在进行DNA合成的细胞) 的核中有黑色银粒。细胞 经吉姆萨染色
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首页 2.4. 细胞及其组份的分离和纯化
最高级尖端的细胞分离技术是用荧光染料偶联的 抗体标记细胞,再用流式分选计来分选出标记或未被 标记的细胞。
显微镜的种类
★用光源不同分:A光学显微镜:用普通光源(包括可见光、
{
紫外光、激光)
B电子显微镜:用电子束代替光源 ★用途不同分:
{ A光学显微镜:普通光学显微镜,又称复式显微镜 特殊用途光学显微镜:相差显微镜 荧光显微镜 暗视野显微镜 倒置显微镜 激光共聚焦扫描显微镜
透射式电镜---普通透射电镜(TEM)
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流式细胞分选计
流式细胞分选计的图解
当水滴通过高压偏转板 时,带电荷的水滴偏转, 这样就达到了细胞分选的 目的。仪器可给水滴充正 或负电荷。所以可同时分 选出二种不同类型的细胞。
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应用范围 流式细胞技术在细胞
生物学研究以及基础和临床 医学研究工作中都有广泛的 应用,如增殖细胞群体的细 胞周期分析、细胞分化、细 胞凋亡的检测、细胞免疫表 型的分析、各种免疫细胞活 化的检测、外周血淋巴细胞 表型分析、白血病细胞免疫 诊断和造血干细胞分析等。
一固体物的边缘时,在高倍放大情况下所观察到的 干涉效应
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首页 2.1.1光学显微镜
1. 用有机染料对不同细胞组分进行选择性染色能 显示出细胞中特殊部分如核或膜。
原核细胞
植物核细胞
真核细胞
变形虫
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首页 2.1.1光学显微镜
2.细胞荧光技术:用荧光显微镜可观察细胞中的 荧光。细胞荧光技术在现代生物学中已被广泛 应用。
激光扫描共焦显微镜
普通光学显微镜
摇蚊的多线染色体
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首页 2.1.4 电子显微镜
透射电子显微镜 与电镜相关的技术
扫描电子显微镜
超薄切片技术 负染法和投影法 复型和冷冻蚀刻技术
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透射电子显微镜
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与电镜相关的技术
超负 薄染 切法 片和 技投 术影
法
复 固型 定和 技冷 术冻
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2.1.2.2 细胞数字图像处理技术
Cells Division
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2.2细胞化学技术
一、酶细胞化学技术
(一)、固定 根据实验要求和组化反应,选择最佳的固
定方法和固定剂
(二)、显示方法 1. 金属沉淀法:利用金属化合物在反应
过程中生成有色沉淀,借以辨认所检查 的物质或酶活性。有色沉淀,而显示出 酶活性。 2. 脂溶染色法:借苏丹染料溶于脂类而 使脂类显色。 3. 茚三酮反应:显示蛋白质。 等等
NIH 3T3 cells labeled with the green-fluorescent
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3.用相差显微镜和微分干涉差显微镜可直接从 显微中观察未经固定和染色的活细胞。
通暗过视活野细显胞微的镜光: 照的明相的位 发光生线了直变接化光,线相不差能和进微入分物干镜, 涉只差有显散微射镜光可进使入光物相镜位,变这化样 转就变观为察振到幅暗变背化景,中产发生亮高的反 差细影胞像结。构。
图解说明如何用抗体定位样品中的特殊分子,以便用显微镜观察
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利用抗体示踪细胞分子
用荧光标记的抗管蛋白 抗体进行免疫荧光染色
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绿色荧光标记示染色体随体
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2.3.利用放射性同位素和抗体示踪细胞分子
2.3.1 放射性原子能被高灵敏地检测出来
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2.3.2 利用放射性同位素示踪细胞和有机体中的分子
首页 第二章 细胞生物学的研究方法
细胞生物学的许多进展,尤其是近年来振奋人心的 发展,都是由于引入新研究方法的结果。
2.1 显微镜技术 2.2 细胞化学 2.3 细胞及其组份的分离和纯化 2.4 细胞培养技术
2.5分子生物学方法
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首页 2.1 显微镜技术
一个典型的动物细胞,直径为10~20µ m, 比人肉眼能见到的最小颗粒还小5倍。
经负染的肌动蛋白丝
超薄切片技术
复型和冷冻蚀刻技术
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首页 负染法和投影法
分离的质粒
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投影法是把分散有样品的
载网置于真空罩中,使铂或钯 等重金属受热蒸发。金属颗粒 以一个倾斜角度直进地落到样
品表面。这样,随着样品的起 伏,各处的重金属呈现不同的 密度,造成一个反映立体形貌 的像。
超薄切片技术
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首页 2.1.1光学显微镜
50µ m
用4种不同的光学显微镜技术所观察到的培养中的成纤维细胞
(A)光直接通过细胞所呈的影像。 (B)相差显微术
(C)微分干涉差显微术
(D)暗视野显微术。
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2.1.3激光扫描共焦显微术
(Laser scanning confocal microscope, LSCM)
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首页 2.3. 细胞培养
用培养细胞所进行的实验,通常称为in vitro (即在玻璃容器中)。
细胞系
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杂种细胞
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常用的细胞系
细胞系 细胞类型及来源
细胞系 细胞类型及来源
3T3 成纤维细胞(小鼠)
PTKl 上皮细胞(袋鼠)
BHK-21 成纤维细胞(叙利亚仓鼠) L6
成肌细胞(大鼠)
扫描电子显微镜
Skin-scanning
蛙内耳毛细胞扫描电镜投影图
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扫描电子显微镜
Skin-scanning
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2.1.2 细胞的电子影像技术
2.1.2.1 视频反差增强显微技术 (Vido enhancemed contrast microscopy, VEC)