免疫--案例分析
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初诊
• 患者3个月前乘船到湖南农村,由于天气炎热多次在河里 洗澡,当时手脚及身体皮肤米粒大小的红色丘疹出现、发 痒,有时有分诊块。符合①湖南为血吸虫病流行地带②血 吸虫感染方式为接触疫水,尾蚴侵入人体,初步诊断为尾 蚴所致的尾蚴性皮炎;又根据几天后出现咳痰、发热、食 欲减退腹部稍膨胀,肝剑突下3cm有压痛,脾可触及白细 胞升高,嗜酸性粒细胞增多,判断为急性血吸虫病;一个 月前患者又出现发热、腹泻、腹血便3~4次/天,上腹部疼 痛、消瘦、到当地医院给予抗生素治疗失效,则疑为急性 血吸虫病转变为慢性血吸虫病。
病原学检查:
①痰液检查: ⒈ 直接涂片法:取生理盐水1~2滴于玻片并加入痰液, 盖上盖玻片进行镜检,若未见虫卵,但见夏科—雷 登结晶或嗜酸性粒细胞则须改用消化沉淀法。 ⒉消化沉淀法:此法检出率较高,但较耗时。 ② 粪便检查: ⒈ 重力沉淀法:⑴取粪便标本20~30g放入烧杯杯内,加 入 10~20倍的清水冲充分混匀后静置20~30分钟; ⑵缓慢倾去上清液,重新加满水,静置10~15分钟, 倾去上清液,连续2~3次;⑶取沉渣直接涂片镜检 ⒉离心沉淀法
2பைடு நூலகம்12年06月26日
血清A1、B2为阳性标本;血清A2、B1为阴性标本(A为血 吸虫标本,B为肺吸虫标本)
2、免疫学诊断:
①胶体金试验:㈠将反应板平放于实验台面上,于小孔内滴加待测 血清标本1~2滴,待完全渗入;㈡于小孔内滴加金标血吸虫抗体 试剂1~2滴,待完全渗入;㈢于小孔内滴加洗涤液2~3滴,待完全 渗入;㈣判断结果 在膜中央有清晰的淡红色斑点显示者判为阳 性反应;反之则为阴性反应。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强 度。 ②环卵沉淀试验(COPT):此法操作简便、快速、敏感性高、特异 性强,是目前日本血吸虫病的重要辅助诊断技术之一。常用于流 行病学调查,疫情监测及疗效考核。常规方法为在载玻片上加待 测者血清2滴,用针尖挑取血吸虫新鲜虫卵或冻干虫卵约10~150 个至血清,混匀。覆盖24mm ×24mm盖玻片,石蜡封盖玻片四 周,置37 ℃温箱48h,低倍镜观察结果。 此外,免疫学诊断方法还包括:ELISA
⑴取粪便标本20~30g放入烧杯内,加入 10~20倍的清水充分混匀后静置20~30分钟; ⑵缓慢倾去上清液,重新加满水,静置 10~15分钟,再倾去上清液,连续2~3次; ⑶取沉渣直接涂片镜检
病例二
• 患者张某,男性,46岁,浙江人。近1月来发热,咳 嗽,咳痰,痰中带血,伴胸痛、乏力、皮疹、消瘦, 曾在当地医院对症治疗无效。因发现右上腹部肿块, 前来就诊。询问病史,有食“醉蟹”史。 • 体检:一般情况可,心肺无异常,无肝脾肿大。右 上腹部肿块,大小约为2.5×3cm,质中等硬度,无压 痛,时有移行。 • 实验室检查:白细胞11×10∧9/L,嗜酸性粒细胞 直接计数2.84×10∧9,。痰抗酸杆菌(-)。 • 胸片:肺纹理增粗,有小囊样及隧道样改变
初诊
实验室检查:痰抗酸杆菌阴性排除肺结核病。白 细胞数增多,嗜酸性粒细胞明显增多,又根据 其食“醉蟹”病史及伴有发热、咳嗽、咯痰、 痰中带血、胸痛、乏力、皮疹等症状,疑为急 性肺吸虫病。 胸片检查:肺纹理增粗,有血红样及隧道样改变, 疑为急性肺吸虫病开始转为慢性脓肿期胸肺型 肺吸虫病。体检见右上腹部肿块时有移行且无 压痛,此为童虫移行所致,须及时治疗,否则 易发生异位寄生累及肝脏。
①金标试验中试剂的用量以及标本中抗原的含 量和实验者的观察、肉眼的结果判定,均可造 成结果不准确出现假性。 ②在重力沉淀法操作过程中上清的倾去这一过程 十分关键,若过度倾去会导致虫卵的丢失,导 致显微镜检出现假阴性。 ③在生理盐水直接涂片法过程中,涂片的厚薄均 匀程度以及实验者观察部位的选择,均可影响 镜检的准确性出现漏检。 ④同时亦受检验者的细心程度及观察力的影响。
今天我们进行了长达2个多小时的讨论,我觉得一个研究的方法 和思路是非常重要的。从教材理论,到课堂实践,然后在一步一 步地发现问题,解决问题,在解决的过程中不断推进。讨论是个 研究的好方法,尤其是和比你智慧的人讨论对于人来说更是有着 很大的意义。本组的讨论常常是欲罢不能,几乎每次都是所有组 中最晚结束的,过程中也很少有冷场的状况,我想与老师要求我 們每個人都要准备所有的內容有关。其他组分配大纲轮流报告的 形式,大部分的人只会对自己负责的部分下工夫,如此便失去了 「讨论」的意义,況且这样子得到的资料或结论容易有偏差,同 学也沒有思考的机会,等于跟大课堂差別不大。我們在课前的准 备虽然比较辛苦,但相对地在课堂上每一分钟都可以全神貫注, 对別人报告的观点或內容自己都有涉猎,才能找出他這段話有道 理或值得反驳之处,如此一來才算达到讨论的基本元素。 在试验操作的过程中,我们合理的分工合作,是试验达到事半 功倍的效果。也是通过这次的试验使我们明白了团体合作的重要 性。每一个人想到的和考虑的是事情总是不全面的只有在团体的 合作下,才能使我们的试验方案不断的完善。
2010年6月26日
实训前期准备
病例一
• 患者李某,男,32岁,江苏人。因发热,腹痛,拍脓血便 1个月余就诊。患者3个月前乘船到湖南农村,由于天气炎 热多次在河里洗澡,当时手脚及身体皮肤有米粒大小的红 色丘疹出现,发痒,有时有风疹块,未予重视,几天后出 现咳嗽、发热、食欲减退,给予感冒片治疗好转。1个月 前患者又出现发热、腹泻、脓血便,3~4次/d,上腹部疼 痛,消瘦,到当地医院给予抗生素治疗无效。 • 体检:T39.2℃,消瘦面容,神志清,心肺(-),腹部稍膨 胀,肝剑突下3cm,有压痛,脾可触及。 • 血常规:白细胞升高,嗜酸性粒细胞增多。 • 胸片:正常
1、病原学检查:
⑴粪便检查
①直接涂片法:主要只用于急性血吸虫病患者,此法操 作简单,但检出率低,取粘液血便可提高检出率。 ②自然沉淀法:操作麻烦,检出率较高。 ③尼龙袋集卵法:此法比较自然沉淀法简单,检出率相 近或稍高,适用于大规模普查,但尼龙袋要严格清洗 干净,防止交叉污染,用孔径略大或小于日本血吸虫 卵的两个尼龙筛率除粪便中的粪渣,能较快、较好地 收集血吸虫卵。
免疫学诊断:
⒈胶体金试验:㈠将反应板平放于实验台面上, 于小孔内滴加待测血清标本1~2滴,待完全渗 入;㈡于小孔内滴加金标肺吸虫抗体试剂1~2 滴,待完全渗入;㈢于小孔内滴加洗涤液2~3 滴,待完全渗入;㈣判断结果 在膜中央有清 晰的淡红色斑点显示者判为阳性反应;反之则 为阴性反应。斑点呈色的深浅相应地提示阳性 强度。 ⒉ELISA、间接血凝试验等