植物脱毒技术(PPT)

二、植物脱毒的意义
1、能够有效地保持优良品种的特性
任何一种优良品种均需有一个稳 定地保存其遗传性状的繁殖方法。
离Biblioteka Baidu无性繁殖可以很好地保持品 种的优良特性，是无性繁殖品种繁 育的理想途径。
2、快速繁殖品种，使优良品种迅速应用
◆离体繁殖周期短 ◆不受季节限制 ◆繁殖系数高 ◆繁殖速度是任何其
他方法所不能比的 又称之为快繁
5、便于运输
常规的块根、块茎等，体细胞大、 含水量高，包装、运输十分不便。
离体繁殖的种苗体积小，易携带， 运输十分方便。
以马铃薯为例：
按一亩地4000株计算，常规薯4000个重 200kg（每个50g），若用试管薯4000个则只有 2kg（每个0.5g）。
三、植物脱毒的原理和方法
（一）植物脱毒原理：
2、植物脱毒的原理和方法。。
病毒对寄主植物可造成毁灭性危害，导致大幅 度减产，甚至全株死亡。
潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的慢性危 害，不易被发现，尤其危险。
国内外解决作物病虫害的有效途径是培育无病 毒苗，实施农作物无病毒化栽培。
无病毒苗
是指不含该种植物的主要 危害病毒，即经检测主要病毒 在植物内的存在表现阴性反应 的苗木。
3）前处理：切取茎尖之前，植物材料如经过预处理，如 热水或热空气处理、低温处理、药物处理，均可大大提高 脱毒效率。
4）培养条件：同一般茎尖培养 5）外植体生理状态：由活跃生长的芽上切取
优缺点：
茎尖越小，去病毒机会 越大，脱毒效果就越好，但 同时因为其含营养及水量太 低，故培养时对培养基的要 求就越高，对剥离技术要求 也越高。
4）在茎尖存在高水平内源生长素，也可能抑制病 毒的增殖 。
（二）植物脱病毒方法
物理方法
化学方法
生物方法
高温处理
珠心培养
愈伤脱毒
热处理脱毒 茎尖培养
微体嫁接
1.热处理脱毒法
✓热处理脱毒原理
病毒DNA分子进入细胞后随植物细胞DNA一起复制。 热处理并不能杀死病毒，只能钝化病毒活性，使病毒在 植物体内增殖减缓或增殖停止，失去传染能力。 作为一种物理效应可以加速植物细胞的分裂，使植物细 胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。
➢其它效果
• 香石竹（康乃馨）在38℃～40℃下经两个 月处理可除去全部病毒。
马铃薯在37℃下处理10～20天能除去卷叶 病毒。
2.组织培养脱毒法 包括微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱
毒、珠心组织培养脱毒。
（1）微茎尖培养脱毒法 脱毒效果好 后代遗传稳定 使用最广泛的一种方法
1）原理及依据 病毒在植物体内分布不均，茎尖处含量最少 病毒DNA分子与细胞分裂蛋白质合成竞争
2）操作程序 外植体经表面消毒灭菌后，在解剖镜下，经无菌
操作切取小茎尖，接种到备用培养基上，放入培养室 内进行培养，并及时观察和记录培养结果。
茎尖培养
1）茎尖大小：一般以带1-2片叶原基为好，大小为0.20.3毫米为宜，超过0.5毫米时，脱毒效果差。（外植体过 小茎尖存活率低）
2）培养基：能使茎尖快速生长、分化的培养基均适于脱 毒。
一.病毒在植物体内的危害及分布
2.分布
在植物体内的分布具有不均匀性，随植株不同部位 和年龄而异。 – 老叶和成熟组织及器官中病毒含量较高 – 根尖、茎尖生长点约0.1~1mm区域内，几乎不含 病毒。（原因？） (原因：分生组织细胞分裂和生长速度快，而病毒 在植物体细胞内繁殖速度相对较慢；另外，病毒 是通过筛管组织或胞间联丝传播至其他组织细胞 的，而茎尖分生组织无分化，没有维管组织。)
➢热处理方法
（1）愈伤组织热处理
离体培养
愈伤组织
热处理继
代
分化培养。
常用温度及时间：低温37—38℃处理2周、
4周或8周；高温50℃处理3—5min。
（2）热空气处理脱毒法
试验母株在高温生长室中生长一段时 间，其顶端分生组织比次生分生组织生长 迅速，后切取其茎尖分生组织进行离体培 养。
生长室温度35-40℃ 光照3000—10000 lx
植物脱毒技术
教学内容
一.病毒在植物体内的分布及危害； 二.植物脱毒的意义 三.植物脱毒的原理和方法； 四.植物脱毒苗的鉴定； 五.植物脱毒苗保存、应用与繁殖
目的与要求：
了解：1、病毒在植物体内的分布及危害。
理解：1、脱毒苗的意义；
2、植物脱毒苗的鉴定、保存、应用与繁殖。
掌握：1、无病毒苗概念；
1）植物病毒本身不具有主动转移 的能力。
在一个植物体内，病毒易于通过维管 系统而移动，但在分生组织中不存在维 管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞 间连丝，速度很慢，难赶上活跃生长的 茎尖；
2）在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性高，竞争 抑制了病毒的复制；
3）在植物体内，可能存在着病毒钝化系统，它在 分生组织中比其他任何区域具有更高的活性。
➢热处理的优缺点
优点: 方法简单，效果明显。
缺点:
1)具有局限性，不能去除所有病毒。只对圆形病毒（苹果花 叶病毒），或对线状病毒（马铃薯卷叶病毒）有效；而对 杆状病毒（千日红病毒）无效。
2)热处理后只有小部分植株能够存活。极易使植物材料受热 枯死，造成损失
3）延长热处理时间，病毒钝化效果好，同时也可能会钝化 植物组织中的抗性因子而降低处理效果。
3、生产无病毒种苗，防止品种退化
受病毒危害严重的作物： 大田作物：马铃薯、甘薯、甘蔗、烟草 蔬菜：白菜、大蒜、葱、番茄、箩卜 果树：柑橘、苹果、草莓、香蕉 花卉：香石竹、各种菊花、天竺葵、紫罗兰
4、节约耕地，提高农产品的商品率
块根、块茎、鳞茎为繁殖器官的作物， 每年产品用留作种的比例：
◆大蒜：留种量占产量的五到八分之一 ◆马铃薯：留种量占产量的十分之一 ◆贝母：留种量占产量的三分之一 (贝母：多年生草本植物,其鳞茎供药用,有止咳化痰、清热 散结之功。产于四川、云南、陕西秦巴山区，甘肃等地)
脱毒后的马铃薯苗
一.病毒在植物体内的危害及分布
1.危害: 绝大多数植物都可以无性繁殖的, 容易受到多种病原
菌的侵染, 体内积累浓度相当高的病毒。 在无性繁殖的种类中，由于病毒通过营养体进行传
递，在母株内逐代积累，危害日趋严重。 病原菌的侵染不一定会造成植物的死亡, 却会大大降
低植物的生长发育及产量和质量,从而影响其栽培的 经济效益。 因此, 脱除病毒及其他病原菌对植物栽培生产是非常 必要的。