动物的克隆----动物的细胞融合技术及其应用

第二章克隆技术

第三节动物的克隆----动物的细胞融合技术及其应用

【学习目标】

1.说出动物细胞融合技术的概念、原理及方法。

2.辨别细胞融合与细胞杂交。

3.简述单克隆抗体的制备过程。

【学习重难点】

1.重点：动物细胞融合技术的概念、原理及方法；辨别细胞融合与细胞杂交；单克隆抗体的制备过程。

2.难点：辨别细胞融合与细胞杂交；单克隆抗体的制备过程。

【课前导忆】

写下植物体细胞杂交（原生质体融合）的原理和诱导方法。

动物细胞克隆培养的方法和要求。

【课堂任务】

任务一：

请阅读p31，完成以下问题

细胞融合的概念：

细胞杂交的概念：

细胞融合的诱导方法：

选择下列材料，为制备针对肝癌细胞的单克隆抗体提供思路

原理：

动物细胞的融合物理：

诱导方法化学：

生物：

应用：

【课堂练习】

1、人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗

HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回

答：

(1)制备单克隆抗体过程中要用到_________和__________技术。

(2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于________，使小鼠产生分泌相应

________的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的______________免疫。

(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存

在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①．利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_________ 成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②．最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是___________________。

(4)此过程生产的单克隆抗体可以与______________特异性结合，从而诊断早孕。