猪蓝耳病同源组织灭活苗的临床疗效试验
新型猪蓝耳病基因工程活疫苗(PC株)的研究及应用
猪繁殖与呼吸综合征（PorcineReproductive and Respiratory Syndrome ，PRRS ），又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Po r c i n e Reproductive and Respiratory Syndrome Virus ，PRRSV ）引起的一种高度传染性疾病，其主要临床特征表现为母猪繁殖障碍和仔猪、育肥猪的呼吸困难。
自1987年在美国发现以来，该病已在全世界范围内流行。
在美国，每年因PRRS 造成的损失高达5.6亿～6.6亿美元[1-2]。
我国自1996年证实了PRRS 的存在以来，特别是发生于2006年春的“无名高热”（即高致病性猪蓝耳病），给我国养猪业造成了巨大的经济损失。
1 PRRSV 的基本结构PRRSV 是有囊膜的单股正链RNA 病毒，根据其基因组和抗原性的差异，可分为欧洲型（基因1型）和美洲型（基因2型）。
虽然欧洲型和美洲型的基因序列的同源性在63%左右[3]，但二者具有几乎相同的基因组合方式和致病机理。
PRRSV 基因组包含至少10个开放阅读框（Open Reading Frames ，ORFs ），分别是ORF1a ，ORF1b 和ORF2～ORF7，每个ORF 编码的蛋白也各不相同（见表1和表2）[4]。
2 PRRSV 中各蛋白的功能及在免疫学方面的作用由于PRRSV 的基因组相对复杂，其编码的非结构蛋白（Non-structural protein ，Nsp ）和结构蛋白数量较多，每一种蛋白质在病毒感染、入侵细胞、病毒复制、诱导细胞凋亡、新型猪蓝耳病基因工程活疫苗(PC 株)的研究及应用李文生，孙志勇，范 娟，宋庆庆（金宇生物技术股份有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030）宿主免疫等方面各自发挥着不同的作用，下表是关于猪蓝耳病病毒蛋白结构及功能（表1和表2）[5-16]。
从以上信息可知，猪蓝耳病病毒无论是非结构蛋白或结构蛋白均可能存在免疫功能。
猪蓝耳病疫苗概述及免疫效果评估
1 国内猪蓝耳病现状猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcine Re-productive and Respiration Syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种高度传染性疾病，临床上以母猪发热、厌食、早产、流产、木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖障碍及各种年龄的猪的呼吸困难和仔猪的高死亡率为特征。
从2013年开始，在中国分离到具有与NADC30株相同基因特征的PRRSV变异株，猪群感染后临床表现为高热、咳嗽、厌食、怀孕母猪流产、产死胎等症状，致死率达30%～50%。
这些分离株的NSP2上具有与NADC30株一致的非连续缺失，因此归类于NADC-like PRRSV。
接着，至少有8个省份有关于NADC-like毒株在猪群中暴发的报道，并且感染发病率逐年提高。
有研究发现，NADC-like毒株与当前使用的疫苗株相似性较低，基因序列相似性为84%～87.6%，氨基酸序列相似性为82%～88.6%，因此，对于当前疫苗株是否对NADC-like 毒株感染猪群获得有效保护要引起关注，要警惕高致病性重组毒株的出现。
2 国内猪蓝耳病疫苗现状猪繁殖与呼吸障碍综合征的防控是一个系统过程包括：疫苗免疫、清群/建群、多点饲养和全进全出的饲养方式和生物安全等，疫苗接种是猪繁殖与呼吸障碍综合征的主要预防手段。
当前我国猪蓝耳病疫苗主要分为弱毒活疫苗和灭活疫苗两大类。
弱毒活疫苗包括经典毒株弱毒活疫苗和高致病性弱毒活疫苗两种。
经典株包含CH-1R毒株、VR-2332毒株及R98毒株；高致病性毒株包含JXA1-R 毒株、HuN4-F112毒株、TJM-F92毒株及GDr180毒株。
灭活疫苗主要包括CH-1a毒株和NVDC-JXA1毒株。
由此来看，我国商品化的猪蓝耳病疫苗（获得批文）有9种，其中减毒活疫苗7种，灭活疫苗2种。
正是由于猪蓝耳病疫苗种类多样，也给猪场选择猪蓝耳病疫苗造成了困难，突出的问题主要体现在猪场是否要免疫猪蓝耳病疫苗、猪场应该选择经典毒株疫苗还是高致病性毒株疫苗、经典毒株与高致病性毒株之间的交叉保护力如何、高致病性疫苗毒株的安全性如何、猪蓝耳病疫苗使用后如何评估免疫效果等。
蓝耳病活疫苗jxa1-r株的临床应用
（2）试验期间增重。观察试验
试剂盒购自北京世纪元亨动物防疫技 1。试验过程中，免疫组与对照组隔离 期间猪只的增重情况，在试验开始和
表1 试验猪只分组
项目
实验Ⅰ组
实验Ⅱ组
猪只头数（头） 5
免疫
F1（2毫升/头，≥106.0TCID50/毫升）
注：TCID50指半数组织培养感染剂量
5 F17（2毫升/头，≥106.0TCID50/毫升）
和良好的临床免疫效果，越来越得到养
猪场的青睐。本研究对高致病性猪蓝耳
病活疫苗JXA1-R株进行猪只的免疫接
种，从免疫后猪只临床反应、体重增
长、散毒情况和血清抗体水平等方面进
行研究分析，拟为广大同行对JXA1-R
Байду номын сангаас株的选择及应用提供参考。
一、材料与方法
1.试验材料。高致病性猪蓝耳病活
疫苗JXA1-R株种毒，来自中国动物疫病
的免疫抑制。猪蓝耳病的发展形势不
容乐观，发病率高、范围广，目前主
要依靠疫苗免疫为防疫手段。市场上
主要有灭活苗和弱毒活疫苗两种类型 蓝耳病疫苗，灭活疫苗在蓝耳病防控
◎图1 免疫后试验猪只体温观察（℃）
进程上有很大贡献，但其达不到预期
的抗体水平、保护率不高、需要多次
免疫等原因而不被养殖户所选择；弱
毒活疫苗因其产生的高滴度特异性抗体
2/5
1/5
果为以后JXA1-R疫苗株的优化和改
0/5
良提供一定的参考。
53
猪繁殖与呼吸系统综合征ELISA 免疫任何厂家蓝耳病疫苗，PRRSV抗 期间，每日观察猪只的临床症状（精
试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技 原、抗体检测均为阴性。
河南某规模猪场一例蓝耳病的临床剖检及实验室诊断
河南某规模猪场一例蓝耳病的临床剖检及实验室诊断展开全文一、猪蓝耳病的概述猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种免疫抑制性病，以成年猪生殖障碍、早产、流产和死胎，以及仔猪呼吸异常为特征的传染病。
高致病性蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致病性传染病。
仔猪发病率可达100%，死亡率可达50%，母猪流产率可达30%，育肥猪也可发病死亡。
二、规模猪场猪蓝耳病的流行特点本病呈地方性流行，传播迅速。
不同年龄、性别、品种猪均感染。
易感性有一定差异，母猪、仔猪症状较严重，仔猪致死率可达80%～100%。
病猪和带毒猪是本病主要传染源，感染猪能大量排毒，如鼻分泌物、粪便、尿液中均含有病毒;耐过猪可长期带毒且长期向体外排毒。
传播途径主要是呼吸道与消化道传播——水平传播。
垂直传播发现的病例较少。
当健康猪与病猪接触时，如果饲养密度过大、圈舍潮湿、空气不流通、寒冷、阳光不足、频繁调运、天气突变等都容易导致本病的发生与流行;特别是大型养猪场该病发生较多，传播快，舍外散养传播速度慢。
母猪产前一周发生早产、流产或生产成绩下降，环境越差，感染越快，1～3个月后重复发生，呈持续感染，流行期一般70～100天，最长4～6个月。
病初呈大流行性传播，有明显“跳跃式”传播，无明显季节性，春季多发，仔猪冬季严重，母猪常年发病。
继发细菌及支原体等感染使症状加剧，死亡率增高。
三、规模猪场猪蓝耳病的临床症状母猪发病首先表现为精神倦怠、厌食和发热。
妊娠后期易发生早产、流产、死胎、木乃伊胎及弱仔，持续一段时间后出现重新发情现象，往往引起母猪不育和产奶量下降;少数猪耳部发紫，皮下出现一过性血斑。
有些发病母猪后期出现后躯无力、不能站立或共济失调等神经症状，母猪流产率可达30%以上。
2～28 日龄仔猪最易感，症状明显，发病率可达l0%。
死亡率高达80%，早产仔猪在出生时或几天内死亡。
高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）安全性与免疫效力试验
高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）安全性与免疫效力试验邓永强;陈斌;秦学远;裴超信;邢坤;张东【摘要】通过对高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）的安全性试验,表明该苗在高倍剂量免疫下,仅个别猪只出现发烧、食欲减退、腹泻等症状,免疫副反应较小,临床使用较安全;免疫效力试验表明该苗抗体产生较快,抗体转阳率较高,免疫效果较好。
%This experiment focused on the security and immune efficacy of the strains） about highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome. The except individual swine appeared fevers, anorexia and diarrhea, the vaccine was vaccine （ JXA1-R results【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2011(038)007【总页数】2页(P24-25)【关键词】高致病性猪蓝耳病;活疫苗;免疫【作者】邓永强;陈斌;秦学远;裴超信;邢坤;张东【作者单位】四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041;四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041;四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041;四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041;四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041;四川省动物疫病预防控制中心,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】S852.52猪繁殖与呼吸综合征（PRRS，又称猪蓝耳病）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种猪高度接触性传染病。
目前防治该病的主要措施是疫苗接种预防。
在我国大部分地区，主要用高致病性猪蓝耳病灭活疫苗进行接种预防。
为了更好地防控高致病性猪蓝耳病，国家已批准生产高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗，为了解该疫苗的临床应用效果，我们开展了疫苗安全性试验和免疫效力试验。
不同猪蓝耳病疫苗对仔猪免疫效果对比试验
每 年投放 １ ｏ ０ ０只 美 姑 山羊 种 公 羊 在 规 划 区 内 开 展 级 进 杂 交改 良本 地 山 羊 ，不 断增 加 群 体 规 模 。
３ ． ４ 强 化 美姑 山 羊保 护 措 施
一
是 任 何 单 位 和 个 人 在 未 经 县 畜 牧 行 政 主管 部 门 批 准 的
严格 按 照 猪 繁 殖 与 呼 吸综 合 症 病 毒 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 抗 体 检 测 试 剂
盒 说 明 书进 行 操 作 。
※ 本 文 得 到 了 临夏 州科 技 计 划 项 目 “ 永靖 县 动 物 防 疫 整 村推 进模 式研 究与 示 范” 和 “ 规 模 养 殖 场 疫病 防控 关键 技 术 及 监 管 模 式 研 究 与 示 范 ” 的
病 主要 造 成 妊 娠 母 猪 流 产 、死 胎 等 繁殖 障 碍 和 仔 猪 呼 吸 道 疾 病 ，导 致 仔 猪 死 亡 率 升 高 ，生 长 发 育受 阻 。 目前 ，针 对 该 病 的 防控 ，疫 苗 免 疫 注 射 仍 然 是 一 个 主要 的途 径 之 一 。 为 探 讨
采 自永 靖 县 玉 丰 养 殖 有 限 责任 公 司 养 猪 场 。 前 腔 静 脉 采 血 ，析 出 血清 ，无 溶 血 ，一 ２ ０ ℃保 存 ，备 用 。 １ ． １ ． ４ 仪 器 酶标 仪 、移 液 枪 、枪 头 。
管 理 条 例 》 的 有 关 规 定 ； 四是 县 人 民政 府 对 保 护 区 内美 姑 山 羊 品 种 资 源 的 普 查 、鉴 定 、保 护 、 培 育 、利 用 给 予 大 力 支 持 ；五 是 将 美 姑 山 羊 遗 传 资 源 保 护 Ｔ 作 经 费 由县 畜 牧 行 政 主 管 部 门 编 制 出 专 项 预 算 ， 由 县 财 政 审 查 批 准 后 列 入 财 政 预 算 ；六是 在美 姑 山 羊 品 种 资 源 保 护 、培 育 和科 研 生 产 中做 ｍ 显 著 贡 献 的 单 位 和个 人 ． 由县 人 民政 府 或 者 畜 牧 行 政 主 管 部 门 给 予 奖励 ；七 是 鼓 励 单 位 和 个 人 在 保 护 区 内建 美 姑 山 羊 资 源保 护 场 、保 种 大 户 ，并 给 予 政 策 和 资 金 支 持 ；同 时 在 各 乡
猪蓝耳病灭活苗的临床使用效果评估
猪业科学猪场兽医VETERINARY 70 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2018年35卷第09期遗传改良GENETIC IMPROVEMENT北京顺鑫农业小店种猪分公司协办【海利专栏】猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引起的以怀孕母猪繁殖障碍以及各年龄段猪呼吸道疾病为主要特征的传染病。
因该病毒变异速度快，常有新毒株出现。
临床上主要导致妊娠后期母猪出现流产、早产、死胎、木乃伊胎、弱仔多现象；生长猪只出现咳嗽、喘气、腹式呼吸等呼吸道症状；并且猪场常伴有其他的病原感染（常见副猪嗜血杆菌、链球菌等）。
由于病毒的独特变异性，部分猪场可能会存在多种流行毒株共存的现象，导致了该病毒致病性的增强。
临床上猪蓝耳病疫苗有弱毒活疫苗和灭活疫苗两类，大部分猪场使用猪蓝耳病活疫苗免疫。
近年来，猪场对猪蓝耳病及猪蓝耳病疫苗的认识不断深入，猪蓝耳病灭活疫苗的作用及合理应用被提上日程。
本研究是针对猪蓝耳病灭活疫苗在临床上合理应用的免疫效果进行系统的评估，旨在为防控猪蓝耳病提供参考依据。
1 材料与方法1.1 试验对象和疫苗在辽宁选定A、B 两个试验猪场 ，经猪蓝耳病流行病学调查及实时荧光RT-PCR 检测确定试验场的育肥群存在PRRSV 并明显影响到生产成绩。
在不影响猪场生产条件下，各试验场选择35～40日龄的断奶仔猪60头。
疫苗选择：蓝异净（猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗NVDC-JXA1株），100 ml/瓶，批号：171106；由上海海利生物技术股份有限公司提供。
1.2 试验分组2个猪场按照猪场正常生产管理进行操作，各场区随机选取35～40日龄的仔猪60头进行试验分组；随机分为2组，每组30头保育猪，分别为试验组和对照组；试验组在40日龄进行猪蓝耳病灭活疫苗2 ml/头的肌肉注射免疫；对照组不免疫灭活疫苗（详细分组见表1）。
其中猪场A 在15日龄免疫猪高致病性蓝耳活疫苗1头份，猪场B 仔猪不免疫猪蓝耳病活疫苗。
融水县猪瘟、猪O型口蹄疫灭活苗、高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果试验分析
（ ２ ）口蹄疫抗体情 况 ： 从试验 Ａ、 Ｂ两组 结果来看 ， 用猪 瘟与 口蹄疫 的同时分点二次注射后 ， 再进行高致病性猪繁殖
与呼吸综合征疫苗 （ Ｔ Ｊ Ｍ— Ｆ ９ ２株 ） 免疫 的方法 ， 对 口蹄疫 的免 疫效果还是有一定 的影响 ，虽然 在试 验 Ａ、 Ｂ两组 的前期采
４ ． ２ 免疫抑 制 试 验 Ａ组猪群没 发生 明显 性特征 的疾病 ， 未使用过任何药物进行疾病治疗 ，试验 Ｂ组猪群个别有 咳、 喘气 现象 、 使用过 氟苯 尼考等药物治疗。虽然试验 Ａ、 Ｂ组猪
１ ０份 。（ 见表 ２ ）
２ ． ３ 样品检测
采用 正向间接血凝（ Ｉ Ｈ Ａ） 、 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试剂盒进
（ １ ） 猪瘟抗体 情况 ： 从试验 Ａ、 Ｂ两组结 果来看 ， 用 猪瘟 与 口蹄疫的同时分 点二 次注射后 ， 再进行高致病性猪繁殖与
行检测 免疫 抗体检测 ， 操作 方法按照说 明书进行 ， 结果判 断
免疫效果 还是 良好 的 ， 均能达 到 ７ ０ ％， 也说 明 了在免疫 高致 病性 猪繁殖 与呼 吸综合 征疫苗 （ Ｔ Ｊ Ｍ — Ｆ ９ ２株 ） 后 ２ ７ ３ ５ ｄ ， 口 蹄疫免疫抗体还是 比较稳 定 、 免疫效果还是有保 障的。
４ ． ３ 遗传 因素
动物 机体 对接种抗原 的免疫应答 在一定程
１ 材 料
Ａ、 Ｂ组免疫后不 同 １ ３龄采样检测效果见下表 ３和表 ４ 。
表３ Ａ 组检 测 结 果
１ ． １ 试验用疫苗 （ 见表 １ ） 高致病性猪繁殖与 呼吸综合征
弱毒苗（ Ｔ Ｊ Ｍ — Ｆ ９ ２株 ） 新疆天康 ２ ０ １ ２ ０ １ ６耳根后肌 肉注射 ， 每头 １ ． ５头份 ２ － ８ ￣ Ｃ 避光保存 。 １ ． ２ 试验时间 ２ ０ １ ２ 年 ８月 ７ １ ３ 至２ ０ １ ２年 １ １ 月 １ ７ ３。 １ １ ． ３ 试验 猪场 选 取 ２个 猪场进行本 次疫苗评估 试验 ， 分 别为 Ａ组及 Ｂ组 。Ａ组存栏猪 １ ５ ０头（ 其 中母猪 １ ０头 、 哺乳 仔猪 ２ ０头、 断奶仔猪 ５ Ｏ头 、 育肥猪 ７ ０头 ） 。Ｂ组存栏猪 ４ ５ ０ 头（ 其中母猪 ４ ０头 、 哺乳仔猪 １ ０ ０头 、 断奶仔猪 １ ５ ０头 、 育肥
不同猪蓝耳病疫苗对仔猪免疫效果比较试验
同免疫程序进行分组试验。详见表１ 。 自２ ０ 年高 致病性猪 蓝耳病 被列为 国家强制免 疫疫病 以 ０７
表１不同免疫程序及分组
来 ，农 六师 所有养 猪场 高致病性 猪蓝 耳病 防疫 使用 猪繁殖 与 呼吸综 合征灭 活疫 苗 ，但 ２ １年 以来 ，国家 逐步开 始使用 高 ０ １ 致病 性猪繁 殖与 呼吸综合 征活 疫苗免 疫 。为探讨不 同类型 猪 蓝耳 病疫 苗对仔猪 免疫效 果 ，笔者对 高致病性 猪繁 殖与 呼吸 综合 征活疫 苗与灭 活苗免 疫效果 进行 了对 比试 验 。现将试 验
４ ％～ ５ ％。 Ｏ Ｏ
猪繁殖与 呼吸障碍综合症 （ Ｒ Ｓ 俗 称猪蓝耳病 ） 由 １ ２ ２ 判 定标 准 ＰＲ， 是 ．．
在 酶标 仪上 测各孔 ０ 值 。试验 成立 Ｄ
猪 繁殖 与呼 吸综合征 病毒 （ Ｒ Ｓ Ｐ Ｒ Ｖ）引起 的急性传 染病 。该 条件是 阳性血清对 照孔平均 Ｏ 值 ≥０７ Ｄ ．，阴性对 照孔平均
报告如下 ：
１ 材 料与方法
１ １ 材 料 ． １ １ １ 疫苗 猪繁殖 与呼吸综合征灭 活疫苗 （ ． ． 以下简称 “ 灭 ２ 结 果 及 分析 活 苗 ” ），厂 家 ：洛 阳 普莱 柯 生物 工 程有 限公 司 ，批 号 ： ２ １ 首免后抗体检 测结果及分析 ． Ｉ ８ 龄采用 灭活 苗免疫 ，在６ 日 组２ 日 ０ 龄进行 免疫抗体 检 １ １２ ；高致 病性 猪 繁殖 与 呼 吸综 合征 活 疫苗 （ ０ ２ １ 以下 简 称 测 ，２头猪 Ｏ 平均值为 ０ ０ ； Ⅱ 、Ⅲ组 ２ 日 ０ Ｄ ．３ ２ 组 ８ 龄采用 活 苗免疫 ，在６ 日龄进行免疫抗体检测 ，４ 头猪Ｏ 啪 平均值为 ０ ０ Ｄ １ １ ２ 检 测试 剂 猪繁 殖 与呼 吸综 合症 Ｅ Ｉ Ａ 体 检测 试 ０２ ２ ．． ＬＳ 抗 ．４ 。由表２ 可知 ，首 次免疫 不论用灭 活苗 还是用 活苗 ，抗 剂盒 （ 家 ：武 汉科前 动物生 物制 品有 限责任公 司 ，批 号 ： 厂 体 阳性率 均为０ ％；首免活苗平均ｓ 值 比 活苗 高 ，但是差异 ／ Ｐ 灭
高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)安全性与免疫效力试验
Ｔｈ ｅ ｕ ｉｙ ａ ｄ ｉ ｍ ｕ ｅ ｅ ｃ ｃ ｆ ｈ ｇ ｌ ａ ｈ ｇ ｎ ｃ ｐ ｒ ｉ ｅ ｒ ｐ ｏ ｕ ｔ ｅ ｅ ｓ ｃ ｒｔ ｎ ｍ ｎ ｆ ａ ｙ ｏ ｉｈ ｙ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｏ ｃｎ ｅ ｒ ｄ ｃｉ ｉ ｖ
Ａｂ ｔａ ｔ ｈｓ ｅ ｐ ｒ ｎ ｏｕ ｅ ｎ ｔｅ ｓｃ ｒｙ ａ ｄ ｉ ｕ ｅ ｅｆ ａ ｙ ｏ ｈ ａ ｃｎ （Ｘ Ｒ ｓｒ ｃ ：Ｔ ｉ ｘ ｅ ｍｅ ｔｆｃ ｓｄ ｏ ｈ ｅ ｕ ｔ ｎ ｍｍ ｎ ｆｃ ｃ ｆｔｅ ｖｃ ｉｅ Ｊ Ａ１ ｉ ｉ ｉ 一
商致病性猪蓝耳病活疫苗免疫后不 同时间的抗体水平 时间 ０ ｄ １ｄ ４ ２ｄ ８ ４ｄ ２ ５ｄ ６
疫苗 （ｘ １ Ｒ株 ）批号 ：９ ７ ０ 。 ＪＡ 一 ， ０ ０ ０ ６
１１ 检测试 剂盒 ．． ３
主要 从 事 动 物 疫病 检 测诊 断 工作
Ｅ－ ｉ： ｙ ｈ ｌ １ ６ ｔ ｍ ｍａｌ ｄ ｑ ｘ＠ ２ ．ｏ
繁殖与呼吸综合征病毒抗体 ， 结果都呈阴性。
四川 畜牧兽廉 ＂０ ・ ２１ ７期・ １ 总第 ２９ ４ 期
１１ 试验疫 苗 ．２ ．
高 致病性猪 繁殖与 呼吸综 合征活
裹２
文 献标 识码 ： Ｂ
文章 编号 ：０ １ ８ ６ ［０ １ ０ — ０ ４ ０ １ ０ — ９ ４ ２ １ ）７ ０ ２ － ２
摘要： 通过对高致病性猪蓝耳病活疫苗（ Ａ一 Ｊ １Ｒ株） Ｘ 的毒全性试验， 表明该苗在高 倍剂量免疫下， 仅
个 别猪 只 出现 发 烧 、 食欲 减 退 、 泻等 症 状 ， 疫 副 反 应 较 小 ， 床使 用较 安 全 ； 疫 效 力 试验 表 明该 苗 腹 免 临 免
新型猪蓝耳病基因工程活疫苗(PC株)的研究及应用
猪繁殖与呼吸综合征（PorcineReproductive and Respiratory Syndrome ，PRRS ），又称猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Po r c i n e Reproductive and Respiratory Syndrome Virus ，PRRSV ）引起的一种高度传染性疾病，其主要临床特征表现为母猪繁殖障碍和仔猪、育肥猪的呼吸困难。
自1987年在美国发现以来，该病已在全世界范围内流行。
在美国，每年因PRRS 造成的损失高达5.6亿～6.6亿美元[1-2]。
我国自1996年证实了PRRS 的存在以来，特别是发生于2006年春的“无名高热”（即高致病性猪蓝耳病），给我国养猪业造成了巨大的经济损失。
1 PRRSV 的基本结构PRRSV 是有囊膜的单股正链RNA 病毒，根据其基因组和抗原性的差异，可分为欧洲型（基因1型）和美洲型（基因2型）。
虽然欧洲型和美洲型的基因序列的同源性在63%左右[3]，但二者具有几乎相同的基因组合方式和致病机理。
PRRSV 基因组包含至少10个开放阅读框（Open Reading Frames ，ORFs ），分别是ORF1a ，ORF1b 和ORF2～ORF7，每个ORF 编码的蛋白也各不相同（见表1和表2）[4]。
2 PRRSV 中各蛋白的功能及在免疫学方面的作用由于PRRSV 的基因组相对复杂，其编码的非结构蛋白（Non-structural protein ，Nsp ）和结构蛋白数量较多，每一种蛋白质在病毒感染、入侵细胞、病毒复制、诱导细胞凋亡、新型猪蓝耳病基因工程活疫苗(PC 株)的研究及应用李文生，孙志勇，范 娟，宋庆庆（金宇生物技术股份有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030）宿主免疫等方面各自发挥着不同的作用，下表是关于猪蓝耳病病毒蛋白结构及功能（表1和表2）[5-16]。
从以上信息可知，猪蓝耳病病毒无论是非结构蛋白或结构蛋白均可能存在免疫功能。
猪药抗蓝耳病试验设计方案
猪药抗蓝耳病试验设计方案
试验目的：
研究猪药对蓝耳病的抗病效果。
试验材料：
实验猪500头，健康状况良好，无蓝耳病感染史。
试验设计：
1. 将实验猪随机分为5组，每组100头。
2. 每组实验猪接种不同剂量的蓝耳病病毒悬液，使其感染蓝耳病。
3. 在感染后不同时间点给予不同剂量的猪药治疗，观察病程及病情变化。
治疗方案：
1. 第一组为对照组，不给予任何猪药治疗，仅接种蓝耳病病毒悬液。
2. 第二组给予低剂量的猪药治疗，观察治疗效果。
3. 第三组给予中剂量的猪药治疗，观察治疗效果。
4. 第四组给予高剂量的猪药治疗，观察治疗效果。
5. 第五组给予猪药组合治疗，观察治疗效果。
观察指标：
1. 每组实验猪的生长状况，包括体重增长、食欲变化等生理指标。
2. 每组实验猪的临床表现，包括咳嗽、呼吸困难、鼻流涕等症状。
3. 每组实验猪的病程，包括病程持续时间、病情严重程度等。
4. 每组实验猪的死亡情况及死亡率。
统计分析：
使用适当的统计分析方法（如方差分析、生存分析等）比较各组之间的差异，并计算有效的疗效率。
安全考虑：
在试验过程中，保障实验猪的饲养条件、饮食卫生条件，严格按照动物伦理学要求进行操作，确保实验过程不对实验猪造成额外的伤害或不适。
转移因子对猪瘟和猪蓝耳病疫苗免疫增强效果试验
由 成 都 乾 坤 动 物 药 业 有 限 公 司 实 验 猪场提 供 。
值 ＜０ ２ ． 为抗体阴性 ，０ ２～ ０４为 照 组 的 抗 体 水 平 均 转 为 阳 性 （ Ｄ ． ． Ｏ
数据 采 用 Ｓ Ｓ Ｐ Ｓ软 件 作 Ｔ 检 验 ，进
（ 二）实验药品及试剂 猪瘟病毒 可疑 ，＞ ０４时为 抗体 阳性 ，试验 值 ＞ ０ ４） ． ，位 于 临 界 保 护 力 之 上 ， ．
ＩＧ抗 体检测 试剂盒 （ ｇ 批号 ：０ ６ ５ 、 ８１ ）
说 明 猪 瘟 疫 苗 免 疫 成 功 ， 其 中 试
验 组 的 抗 体 ０Ｄ 值 比 对 照 组 提 高
猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 ＩＧ抗 体 ｇ 检 测试 剂 盒 （ 批号 ：０６０ ，均 由深 ８２ ）
不 显 著 （＝０． ０ ｔ ２ ４，Ｐ＞０． ５ ， 此 ０）
（ ）实验动 物 同 品种 、体重 相 一 近的 ３ ０～ ３ ２日龄仔 猪 （ 未免 疫猪 瘟
和猪 繁殖 与 呼 吸综 合征 疫 苗 ）７ ２头 ，
时 免 疫 猪 瘟 疫 苗 受 母 源 抗 体 的 干 扰 较 小 ， 可 缩 短 免 疫 后 产 生 抗 体 的 时 间 ；免 疫 后 １ ，试 验 组 和 对 ４ｄ
行显著 性分 析 。
（ 五）猪繁殖与呼吸综合征疫 苗
了 ５ ３ ％，差 异 显 著 （＝－ ． ２ ， ．１ ｔ ２ ６ ９
圳绿 诗 源生物 技 术有 限公 司提供 。 猪 免 疫试验 将 ３ 头 仔猪随 机分 为 ２ Ｐ ． ５ ，说 明 转 移 因子 与 猪 瘟 疫 ６ ＜０ ０ ） 瘟 细胞 苗 由中牧集 团提供 （ 号 ： 批
１ 见 ，对 照 组 和 试 验 组 在 免 疫 前 可
高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果评估
高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果评估作者：刘承军，王海丽，王芸来源：《江西畜牧兽医杂志》 2014年第6期刘承军1，王海丽2，王芸1（1.聊城市畜牧兽医局，山东聊城 252000；聊城职业技术学院）基金项目：山东省高等学校科技计划项目（项目编号：J14LF56）高致病性猪蓝耳病又称“猪繁殖与呼吸综合症（ PＲＲS）”，是在编码Nsp2 的基因上发生缺失变异毒株引起的一种猪只死亡率高、造成损失巨大的烈性传染病。
该病病毒致病性强，传播迅速，可以致使猪大批死亡，尤其以仔猪最为明显。
为进一步做好高致病性猪蓝耳病防控工作，科学制定免疫程序，避免该病的发生和蔓延，笔者在某大型养猪企业饲养的35日龄的仔猪中进行了高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果对比实验，并根据农业部规定的《2014年高致病性猪蓝耳病监测方案》中制定的标准对使用不同疫苗的仔猪抗体水平进行跟踪监测，摸清两种不同疫苗抗体产生的规律，分析制约免疫抗体水平的主要原因，为合理选择疫苗类型和制定免疫方式及免疫时间等提供科学依据。
1 试验材料1.1试验动物在同一目标猪场的同舍选择同一日龄（35日龄）、相同批次、体形和体重基本相同的同品种仔猪160头，所有试验仔猪均没有注射过任何猪蓝耳病（PＲＲS）疫苗。
1.2疫苗分别选取国内4家在山东省重大动物疫病中标疫苗厂家提供的高致病猪蓝耳弱毒苗和灭活苗，4家企业弱毒苗的标号分别用A、B、C、D 表示，4家企业灭活苗标号分别为E、F、G、H 表示。
所有分组严格根据疫苗说明书指定的要求进行储藏和使用。
1.3检测所用试剂盒使用猪繁殖与呼吸综合征检测试剂盒，法国LSI，批号为2 － TTVETPRA－40。
2 试验方法2试验动物随机分组160头猪共分8组，平均每组20头。
使用A、B、C、D四组弱毒活疫苗对其中4组仔猪在35日龄进行免疫注射1次，剂量1头份/头。
使用E、F、G、H四组疫苗对剩余的4组仔猪分别在35日龄首免，65日龄二免疫，均为2 mL/头。
猪场蓝耳病检测结果与案例分析
等综 合分析 才有意 义 。
３ ． ２保育阶段或育肥前期发病场
由于 猪 舍 全 进 全 出 和 空舍 消 毒 执 行 不 到 位 、蓝 耳 病 活疫 苗 使用 不 当 、母猪 群 蓝耳 病 不
２ ． １病原 Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ ｌ ｌ Ｈ 性
检 测 到 的可 能 是野 毒 或者 疫 苗毒 ，但 猪 群 不 一 定发 病 。对于 大 多 数猪场 ，仔 猪在 ５ ０ ～９ ０ 日龄 阶段 容 易检 到ＰＣＲ阳性猪 。在成 年猪 或 者
疫情 多是 从外部传人 ，由于 引种不谨慎 ，滥 用蓝 耳病疫 苗 ，后备猪 隔离驯化不 到位 ，运 猪车
辆消 毒不严格 等 因素 ，导致全场 暴发蓝耳病 。繁 殖 区一般需要 １ ～２ 个月恢 复稳定 。血清学检 测显 示 ，各阶段发 病猪群蓝耳 病抗体处 于较高水 平 ，
４ ３ ３ ２ ２ ｔ １
稳 定和 转 群应 激 等 因素 均可 弓１ 起该 阶 段蓝 耳 病 活跃 、发病 。多 与伪 狂 犬 、支原 体 、 圆环 病毒
等混 合 感染 ，容易 继 发 猪副 嗜血 杆 菌 、链 球菌 等 细菌 病 。血 清学 检 测显 示 ，发 病 猪群 蓝耳 病 抗体 水 平 呈 急剧 上 升趋 势 ，一 般 抗 体Ｓ ／ Ｐ 值 高
场 蓝耳 病 阳性 。蓝 耳病 标 准株ＲＴ —Ｐ ＣＲ阳性率 １ ２． ９ ％，变异 株 阳性 率３ ５ ． ３ ％。
２ ． ２病 原 Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ 阴性
未 检 测到 说 明没 有感 染 或者 曾经感 染过 但
已不 排毒 ，也可 能 是样 品 中病 原 含量 低 、检 测 方 法不敏 感等 。
群 ，如 果抗 体 水平 适 中、 离散 度小 ，一般 蓝 耳
猪蓝耳病灭活苗与弱毒苗免疫效价试验
将 供 试 仔 猪 随 机 分 成 ２组 ，每组 ４ ０头 。
３ ． ２ 首 免
贮 玉 米 的 蜡 熟 期 与 饲 用 高 粱 营 养 最 高
但 是 无 论 怎 样 种 植 收 割 时 候 应 该 考 虑
高 粱 。 所 以在 供 应 奶 牛 和 肉牛 的 混 贮 饲 料 中 ，饲 用高 梁 的含 量 不应 过 高 ．不 可 以超 过 ３ ０ ％。
１ ． ３ 检 测 试 剂
殖 与 呼吸 综合 症 病 毒 引起 。 主要 是 猪 群 发 生 以 繁 殖 障 碍 和 呼 吸 系统症状 为特征的 一种急性 、高度传染 的病毒性 传 染病 ，
本 实 验 使 用 试 剂 为 北 京 爱 德 士 元 亨 生 物 科 技 有 限公 司 生 产 的猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 症 病 毒抗 体检 测 试 剂 盒 。
应 该 在 本 试 验 对 高 致 病 性
Ｉ Ｄ Ｅ Ｘ Ｘ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｘ ３抗 体 检 测 试 剂 盒 是 用 于 检 测 猪 血 清 和 血
浆中 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ抗 体 的 酶 联 免 疫 吸 附试 验 。 本 试 剂 盒 是 采 用 灭
Ｐ ＲＫＳ弱 毒 苗 和 灭 活 苗 的免 疫 效 价 进 行 对 比 ． 为 更 好 的 预 防
和控制 Ｐ ＲＲＳ提 供 依 据
活过 的猪 蓝 耳 病病 毒 抗 原 包 被 微 孔 板 ，在 试 验 中 ，按 操 作 步 骤 加 入 对 照 血 清 和 待 检 血 清 ，经 温 育 后 ，若 样 品 中含 有 猪 蓝 耳 病 特 异 性 抗 体 ，则将 与 微 孔 板 上抗 原 结 合 ，经 洗 涤 除 去 未 结 合 的抗 体 和其 他 成 分 后 ；再 加 入 酶 标 二 抗 ，与 微 孔 板 上 抗 原 抗 体 复 合 物 发生 特 异 性 结 合 ；再 经 洗 涤 除 去 未 结 合 的 酶 结 合 物 ，在 孔 中加 Ｔ ＭＢ底 物 液 ，与酶 反 应 形 成 蓝 色 产 物 ，加 入 Ｈ Ｆ溶 液 中 止 反 应 后 ，用 酶标 仪 ６ ３ ０ ｉ ｒ ｍ波 长测定各反应孔 中
猪蓝耳病二免后抗体检测及疫苗免疫效果试验
ｌ ｌ
一 实验 组 一 对照 组
一
免疫 后 时问
图 ２ 临 床调 查抗 体 检测 结果
首 免 后 时 间
图 １ 临床 实验 抗体 检 测结 果
从图２ 中可 以看 出 ：免疫 后３ 周 可检测 到抗体 ；免疫 后３ 周－ ￣ Ｊ ｌ ６ 周 ，为抗 体上升 期 ，其 中 ，免疫 后６ 周Ｒ Ｊ ％值达
１ ． １ ． １ 试验 材料
蓝耳病 灭活苗（ 由中牧 实业股份 有限公
司生产） ，抗体检测采用Ｌ Ｓ Ｉ 猪繁殖 与呼吸综合征抗体检测 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试剂盒（ 北京天之泰生物科技有 限公司生产） 。
１ ． １ ． ２ 试验 样品 选 自某猪 场新 出生健 康且 未经任 何疫 苗免疫 的仔猪３ Ｏ 头。
１ ． ２ 方 法
１ ． ２ ． １ 分组 及免疫
免疫前 对试 验猪进 行基 础抗 体滴度
检 测 ，所 选试 验 猪 的 猪繁 殖 与 呼 吸 综 合征 病 毒 抗 体 阴 性 。随机分成２ 组 ，试验 组 ｌ ５ 头 ，对 照组 ｌ ５ 头。３ ０ 日龄 时
用蓝耳病灭活苗（ 由中牧 实业股份有 限公司生产） 对实验组
现 、既往病史等 以便数据分析 。
起 的一种猪 的高度 传染 性的病 毒传 染病 ，主要 引起妊 娠 母 猪繁殖 障碍 以及 仔猪 的呼 吸道症 状 ，给养 猪业造 成巨 大 的经济 损失 ，我 国已经将 其列 入对生 猪 的强制免 疫病 种 。为 了解 泰安地 区高 致病 性猪蓝 耳病 的免 疫状况 ，检
组相应时期的血样，分离血清 ，液相 阻断Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试验检测
高致病 性猪蓝 耳病抗 体水 平 ，研 究 实验 组和对 照组在 不
猪蓝耳病同源组织灭活苗的临床疗效试验
ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｆ ｏ ｕ ｒ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ，ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ｗ ｈ ｉ ｃ ｈ ｗ ａ ｓ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｔ ｉ ｍ ｅ ｓ ａ ｄ ａ ｙ ｆ ｏ ｒ ３ ｄ ａ ｙ ｓ
第５ ２卷 第 １ ２期 ２ ０ １ ３年 ６月
湖 北 农 业 科 学
Ｈｕ ｂ ｅ ｉ Ａｇ ｒ ｉ ｅ ｕ ｈ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
Ｖｏ ｌ ＿ ５２ Ｎｏ ． １ ２
Ｊ ｕ ｎ ． ， ２ ０ １ ３
猪蓝耳病同源组织灭活苗的临床疗效试验
陈金 山 ， 陈俊 杰 ， 李任 峰 ， 吴 玉苹 ， 葛亚 明， 安志 兴 ， 王 丽荣
Ｃ ＨＥ Ｎ Ｊ ｉ ｎ － ｓ ｈ ａ ｎ， Ｃ ＨＥ Ｎ Ｊ ｕ ｎ － ｊ ｉ ｅ ， Ｌ Ｉ Ｒｅ ｎ － ｆ ｅ ｎ ｇ ， ＷＵ Ｙ ｕ － ｐ ｉ ｎ ｇ ， ＧＥ Ｙａ － ｍｉ ｎ ｇ ， Ａ Ｎ Ｚ ｈ ｉ － ｘ ｉ ｎ ｇ ， ＷＡ ＮＧ Ｌ ｉ － ｒ ｏ ｎ ｇ
关键词 ： 猪蓝耳病 ： 同源 组 织 灭活 苗 ： 治 疗
中图 分 类 号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ ８
文献标识码 ： Ａ
文章 编号 ： ０ ４ ３ ９ — ８ １ １ ４ （ ２ ０ １ ３ ） １ ２ — ２ ８ ６ ９ — ０ ２
Ｔｒ ｅ ａ ｔ ｍｅ ｎｔ Ｅｆ ｆｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｈｏ ｍｏ ｌ ｏ ｇ ｏ ｕ ｓ Ｔｉ ｓ ｓ ｕｌ ａ ｒ Ｉ ｎａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ Ｖａ ｃ ｃ ｉ ｎｅ ａ ｇ ａ ｉ ｎｓ ｔ ｔ ｈｅ Ｐｏ ｒ ｃ ｉ ｎｅ Ｒｅ ｐｒ ｏ ｄｕ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｎｄ Ｒｅ ｓ ｐ ｉ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｓｙ ｎｄ ｒ ｏ ｍｅ
猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫和猪蓝耳病灭活苗两两联合应用的免疫效果观察
Ａｂ ｔａ ｔ Ａ ｓｃａｉｎ ｐ ｌ ａｉｎ ｈｅ ａｃｎ ｓ ｓ ｃ ａ Ｃ Ｆ Ｆ ｓｒ ｃ ： ｓｏ ｉｔ ａ ｐｉ ｔ ｔｒｅ ｖ ｃ ｉｅ ， ｕ ｈ ｓ ｏ ｃ ｏ Ｓ 、 ＭＤ （ 、 Ｒ Ｓ， ｏ ３ ｄ ｙ ０）Ｐ Ｒ ｎ ５ ａｓ
ｈ ａ ｔ ｉｌ ｔ ｎ ｉ ｅｅ ｔ ａ ｔ ｍｅ ｎ ｈ ｌ ｂ ｅ ｖ ｄ ｈ ｉ ｅ ｌｈ ｐ ｇｅｓ ｄｆ ｒ ｎ ｐ ｒ， ｉ ｆ ａ ｗ ｉｅ ｏ ｓ ｒｅ ｔｅ ｍｍｕ ｅ ｒａ ｔ ｎ ．Ａｆ ｒ ０， ４， １ ｎ ｅ ｃｉ ｓ ｏ ｔ ｅ ４， ２１ ｎ ２ ａ ｄ ８ ｄ ｙ ， ｗｅ ｏｌｃｅ ｈ ｉ ｅｕ ａ ｄ ｄ ｔｃｅ ｈ ｍｍｕ ｅ ａ ｔ ｏ ｙ ｙ ＥＬ ＳＡ．Ｔｈ ｆｅ ｔ ｈ ｗｄ ｔ ａ： ａｓ ｃ ｌ ｔｄ ｔ ｅ ｐ ｇ ｓ ｒ ｍ ｎ ｅｅ ｔｄ ｔ ｅ ｉ ｅ ｎ ｎｉ ｄ ｂ Ｉ ｂ ｅ ｅ ｃｓｓ ｏ ｈ ｔ
ｗｈ ｔ ｅ ＣＳ ｖ ｃ ｉ ｅ ｎ Ｐ ｅｈ ｒ Ｆ ａ ｃｎ ａ ｄ ＲＲＳ ａ ｃｎ ｃ ｕｄ ｅ ｍｍｕ ｅ ｓｍｕｔｎ ｏ ｓｙ ｒ ｏ ， ｉ ｓ ｅ ｄ ｏ ｅ ｖ ｃ ｉ ｅ ｏ ｌ ｂ ｉ ｎ ｄ ｉ ｌａ ｅ ｕ ｌ ｏ ｎ ｔ ｔ ｎ ｅ ｔ ｂ ｉ ａ ｔ ｅ ｔｃ ｔ ｄ ｆ ｒｈ ｒ ｕｈ ｎｉａｅ ｕ ｔ ｅ ． Ｋｅ ｗｏ ｄｓ Ｃ ｙ ｒ ： ＳＦ； Ｆ Ｄ ： ＰＲＲＳ； Ｖａ ｃｎ Ｍ ｃ ｉｅ； Ａｓｏ ｉｔ ｎ ｐ ｌ ａｉｎ ｆ ｃｓ ｓｃ ａｉ ａ ｐ ｉ ｔ ｅｆ ｔ ｏ ｃ ｏ ｅ
测试剂盒 ， 由兰 州 兽 医研 究所 生产 ， 号 ２０ １２ ０ ； 批 ０７ ２ ４ １
３ ７日龄 健 康 的断 奶 仔 猪 ， 间 猪 的 大 小 基 本 一 致 。 人 组 工 投 料 ， 自由采 食 ， 猪 自由饮 水 。
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猪蓝耳病同源组织灭活苗的临床疗效试验摘要：无菌采集确诊为蓝耳病的病猪肺脏、脾脏、全身淋巴结等病料制作同源组织灭活苗。
选取体重相近、有猪蓝耳病临床表现的发病仔猪120头，随机分成4组（3个试验组和1个对照组），试验Ⅰ组：同源组织灭活苗+黄芪多糖注射液；试验Ⅱ组：猪多价免疫球蛋白注射液+黄芪多糖注射液；试验Ⅲ组：黄芪多糖注射液；对照组：不作治疗处理。
每组30头。
每天用药1次，连用3 d，在相同条件下进行饲养管理。
结果表明，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和对照组的成活率分别为90.0%、80.0%、43.3%和10.0%。
关键词：猪蓝耳病；同源组织灭活苗；治疗Treatment Effect of Homologous Tissular Inactivate Vaccine against the Porcine Reproductive and Respiratory SyndromeAbstract：Homologous inactivate vaccine was made from the lung，spleen and lymph nodes tissues which was sterilely collected from the ill porcine diagnosed of porcine reproductive and respiratory syndrome. 120 diseased piglets were randomly divided into four groups，including a control group and three treatment group which was injected three times a day for 3 days with inactivated vaccine matching astragalus polysaccharide，porcine multivalent immuloglobulin matching astragalus polysaccharide and single astragalus polysaccharide，respectively，under same feeding condition. The results showed that the rate of curing about the control group and three treatment groups was 90.0%，80.0%，43.3% and 10.0%，respectively.Key words：pigs’porcine reproductive and respiratory syndrome；homologous tissular inactivate vaccine；treatment猪蓝耳病是猪繁殖与呼吸障碍综合征的俗称。
其临床特征是发热，皮肤发绀，高度呼吸困难，妊娠后期发生流产、死胎和木乃伊胎等[1]。
自1996年中国报道该病后在养猪场普遍存在并造成了巨大的经济损失。
目前还没有较理想的药物可治疗该病。
本课题组无菌采取肺脏、脾脏、全身淋巴结等病料制成了同源组织灭活苗，对猪蓝耳病进行治疗试验，成活率达90.0%。
此方法可供广大养殖户和同行们参考。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验动物某养猪户存栏1 250头，其中成年母猪118头，哺乳期仔猪350头，断奶仔猪782头。
2011年2月26日断奶仔猪出现咳嗽，采食量减少。
3月3日病猪数量增多，表现为食欲废绝，呼吸困难，体质下降、消瘦，共计发病662头，死亡2头。
母猪出现耳朵发绀，有36头发生了早产、流产。
哺乳期仔猪的口鼻端蓝紫，消瘦、被毛粗糙，生长缓慢，发病20头。
总发病率为57.4%（718/1 250）。
临床检查所见：病猪两耳、蹄部周围、腹部、臀部等部位呈红紫色，体温40.0～42.0 ℃。
剖检5头病情严重的猪，主要表现为肺淤血，淋巴结肿大充血。
经流行病学调查、临床表现、病理剖检、ELISA方法检查确诊为猪蓝耳病。
从发病群体中挑选2头具有典型症状的发病仔猪，人工放血处死，无菌采集肺脏、脾脏、淋巴结等病料送至无菌实验室，制作同源组织灭活苗。
1.1.2 试验药物黄芪多糖注射液[天一诺法维它生物科技有限公司，批号：兽药字（2007）160852712]；猪多价免疫球蛋白[吉林省五星动物保健药厂，批号：兽药字（2006）070172074]。
1.2 方法1.2.1 同源组织灭活苗的制备无菌条件下，将病猪人工放血后采集肺脏、脾脏、全身淋巴结等组织，用1 000 U/mL的双抗液冲洗表面，除掉筋膜，切成小块，称取病料250 g，加入生理盐水，使干物质占20%～30%，加入高速组织匀浆机中搅拌1～2 min，再以2 000 r/min匀浆4～5 min，用3层灭菌纱布过滤、分装，向其内加入等量的0.35%甲醛、0.1%叠氮钠、10%硫代硫酸钠，38 ℃恒温箱进行灭活48 h后，于2～8 ℃下保存备用[2]。
1.2.2 细菌的检查将灭活后的同源组织灭活苗接种在普通琼脂培养基上，37 ℃培养48 h，检查有无细菌生长[3]。
1.2.3 安全性试验选择哺乳期仔猪、断奶仔猪、妊娠期母猪各5头，分别肌肉注射同源组织灭活苗2、3、6 mL，同时设对照组，连续观察7 d。
记录每天上、下午的体温变化，食欲是否有异常变化，母猪是否出现流产，注射局部是否出现炎性反应等[4]。
1.2.4 保存与使用方法同源组织灭活苗于2～8 ℃冰箱中保存3～5个月。
使用方法：使用前加入适量的20%铝胶生理盐水，哺乳期仔猪2 mL/头，育成猪4 mL/头，成年猪6 mL/头，保护期为90 d[5]。
1.2.5 临床应用选取体重相近、有典型症状的仔猪120头，随机分成3个试验组和1个对照组，每组30头。
试验Ⅰ组：同源组织灭活苗+黄芪多糖注射液，试验Ⅱ组：猪多价免疫球蛋白+黄芪多糖注射液，试验Ⅲ组：黄芪多糖注射液，对照组不作治疗处理。
每天用药1次，连用3 d（同源组织灭活苗只注射1次，其他药物按说明书进行），常规饲养管理。
试验开始后的1、3、5、7、10、15 d 记录各组病猪的精神状态、体温、呼吸、死亡等情况，计算每组的成活率[6]。
2 结果与分析2.1p连续3 d用药后不再给药，主要是加强饲养管理，在第15天统计各组成活数，结果见表2。
经过连续3 d用药后，试验Ⅰ组死亡3头，第5天后其他病猪的精神状态、体温、呼吸等方面的情况已趋于正常，第10天后已经完全恢复正常。
试验Ⅱ组死亡6头，第8天后病情趋于平稳。
试验Ⅲ组死亡17头，第12天病情趋于平稳。
对照组死亡27头，期间病猪精神高度沉郁，日渐消瘦，体温偏低，呼吸困难，走路不稳，食欲不振，被毛粗糙、无光泽。
从表2中可以看出，试验Ⅰ组成活率为90.0%，比试验Ⅱ、Ⅲ组成活率分别高出10.0、46.7个百分点，对照组成活率仅为10.0%，说明采用同源组织灭活苗配合使用黄芪多糖注射液效果比较好。
3 讨论试验表明，试验Ⅰ组和Ⅱ组的成活率较高，其中试验Ⅰ组最为理想。
这说明同源组织灭活苗对治疗猪蓝耳病有较好的效果。
通过注射同源组织灭活苗可以刺激机体的免疫系统，提高其免疫力，从而达到治愈的目的。
目前用于临床预防猪蓝耳病的疫苗虽然已在生产中推广使用，但由于有的养殖户对该病的认识不深刻，加之个别猪场注射后出现的不良现象，导致该病难以预防[7]。
通过本次试验采取同源组织灭活苗进行治疗，治愈率达90.0%；使用前加入适量的铝胶生理盐水，可以提高其免疫效果。
配合黄芪多糖，一方面可以提高机体的免疫力，另一方面可以防止注射同源组织灭活苗引起的发热。
在采取同源组织灭活苗进行治疗之前，首先应确诊，尤其适用于蓝耳病、圆环病毒病及二者的混合感染，而其他的病毒和细菌的感染，其效果还有待于研究。
制作同源组织灭活苗时要严格把握甲醛的浓度、用量以及灭活的时间，否则可能引起发热现象，甚至死亡[8]。
在规模化养猪场中，一旦生产母猪感染了猪蓝耳病，哺乳期和断奶期仔猪就非常容易被感染发病，要彻底治愈相当困难。
采用此方法可以达到净化该病的目的。
全群防治时，应先做小区安全性试验，一旦出现不良性反应，应停止使用[9]。
同源组织灭活苗可用于本场或者本地区对该病的防治，但由于安全性因素，生产中未能广泛推广。
笔者认为，有条件的养殖场在确保安全的情况下，为了减少损失可使用。
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