金黄色葡萄球菌-课件ppt课件
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金黄色葡萄球菌检测方法ppt课件
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌的检测方法
.
1
葡萄球菌属（Staphylococcus）
引起毒素型食物中毒 分为：金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌 腐生性葡萄球菌
对于加工过的食品或食品加工 设备而言，此菌或其肠毒素的 存在通常作为卫生条件差的一 种指标。
.
金黄色葡萄球菌的扫描 电镜照片
2
2.2 葡萄球菌属（Staphylococcus）
.
25
3 培养 在通常情况下，涂布后，将平板静置10 min，如样液不易 吸收，可将平板放在培养箱36 ℃±1 ℃培养1 h；等样品匀液吸收后翻转平皿，倒置于培养箱， 36 ℃±1 ℃培养，45 h～48 h。
.
26
4 典型菌落计数和确认 1）金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混 浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油 至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但 无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离 的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并 干燥。
生物学特性 1、形态与染色特性
G+，无芽孢、无鞭毛、无荚膜、不运动 2、培养特性： ① ② ③ ④ ⑤ 3、生化特性：MR阳性，V－P弱阳性，靛基质阴性…… 4、抵抗力
具有较强的抵抗力，80 ℃ 30min 5、抗原结构
蛋白抗原——表面抗原，无特异性。 多糖抗原——半抗原，有型特异性
.
3
食品中金黄色葡萄球菌的检验
.
28
4 典型菌落计数和确认 2）如果： d） 某一稀释度平板的菌落数大于200 CFU 且有典型菌落， 且下一稀释度平板上有典型菌落，但其平板上的菌落数不 在20 CFU～200 CFU 之间，应计数该稀释度平板上的典型 菌落；以上按公式（1）计算。 e） 2 个连续稀释度的平板菌落数均在20 CFU～200 CFU 之间，按公式（2）计算。 3 ) 从典型菌落中任选5 个菌落（小于5 个全选），分别 做血浆凝固酶试验。
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1
葡萄球菌属（Staphylococcus）
引起毒素型食物中毒 分为：金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌 腐生性葡萄球菌
对于加工过的食品或食品加工 设备而言，此菌或其肠毒素的 存在通常作为卫生条件差的一 种指标。
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金黄色葡萄球菌的扫描 电镜照片
2
2.2 葡萄球菌属（Staphylococcus）
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3 培养 在通常情况下，涂布后，将平板静置10 min，如样液不易 吸收，可将平板放在培养箱36 ℃±1 ℃培养1 h；等样品匀液吸收后翻转平皿，倒置于培养箱， 36 ℃±1 ℃培养，45 h～48 h。
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4 典型菌落计数和确认 1）金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混 浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油 至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但 无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离 的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并 干燥。
生物学特性 1、形态与染色特性
G+，无芽孢、无鞭毛、无荚膜、不运动 2、培养特性： ① ② ③ ④ ⑤ 3、生化特性：MR阳性，V－P弱阳性，靛基质阴性…… 4、抵抗力
具有较强的抵抗力，80 ℃ 30min 5、抗原结构
蛋白抗原——表面抗原，无特异性。 多糖抗原——半抗原，有型特异性
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3
食品中金黄色葡萄球菌的检验
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4 典型菌落计数和确认 2）如果： d） 某一稀释度平板的菌落数大于200 CFU 且有典型菌落， 且下一稀释度平板上有典型菌落，但其平板上的菌落数不 在20 CFU～200 CFU 之间，应计数该稀释度平板上的典型 菌落；以上按公式（1）计算。 e） 2 个连续稀释度的平板菌落数均在20 CFU～200 CFU 之间，按公式（2）计算。 3 ) 从典型菌落中任选5 个菌落（小于5 个全选），分别 做血浆凝固酶试验。
实验十二金黄色葡萄球菌(共40张PPT)
4
公式二
A1B1/C1=155×3÷5=93 A2B2/C2=17×4÷5=14
T=(93+14)/1.1d=127÷1.1÷0.1=970
结果报告
单位:cfu/g或cfu/mL 如T值为0，报告 ＜1× d cfu/mL
（g）。
检样
检样25g(mL)+ 225ml灭菌生理盐水，均质。
取新鲜配置兔血浆 0.
长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比 3 mL，振荡摇匀，置 36 ±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察 6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积
大于原体积的一半，被判定为阳性结果。
典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙 并干燥。
典型菌落计数和确认
品匀液接种到10%NaCl 胰蛋白胨大豆肉汤管，每个稀释度接种3管，将上述接种物36℃±1℃培养，45h～48h。
平板和血平板， 血平板 36 ℃±1 ℃培养 18 h A2B2/C2=17×4÷5=14
Baird-Parker平板
～24 h。Baird-Parker平板 36 ℃±1 ℃培养 18 Baird-Parker平板，血平板
B-P平板18h~24h或45h~48h 也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。 用于做血浆凝固酶的菌落数
将上述培养物， 分别划线接种到 Baird-Parker 取新鲜配置兔血浆 0.
根据对样品污染状况的估计，选择3个适宜稀释度 的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样
3.9 革兰氏染色液：见附录 A中 。 3.10 无菌生理盐水：见附录 A中 。
四、实验内容及操作
金黄色葡萄球菌定性检验程序见图
公式二
A1B1/C1=155×3÷5=93 A2B2/C2=17×4÷5=14
T=(93+14)/1.1d=127÷1.1÷0.1=970
结果报告
单位:cfu/g或cfu/mL 如T值为0，报告 ＜1× d cfu/mL
（g）。
检样
检样25g(mL)+ 225ml灭菌生理盐水，均质。
取新鲜配置兔血浆 0.
长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比 3 mL，振荡摇匀，置 36 ±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察 6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积
大于原体积的一半，被判定为阳性结果。
典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙 并干燥。
典型菌落计数和确认
品匀液接种到10%NaCl 胰蛋白胨大豆肉汤管，每个稀释度接种3管，将上述接种物36℃±1℃培养，45h～48h。
平板和血平板， 血平板 36 ℃±1 ℃培养 18 h A2B2/C2=17×4÷5=14
Baird-Parker平板
～24 h。Baird-Parker平板 36 ℃±1 ℃培养 18 Baird-Parker平板，血平板
B-P平板18h~24h或45h~48h 也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。 用于做血浆凝固酶的菌落数
将上述培养物， 分别划线接种到 Baird-Parker 取新鲜配置兔血浆 0.
根据对样品污染状况的估计，选择3个适宜稀释度 的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样
3.9 革兰氏染色液：见附录 A中 。 3.10 无菌生理盐水：见附录 A中 。
四、实验内容及操作
金黄色葡萄球菌定性检验程序见图
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)课件
特性
MRSA具有多重抗药性，除了对β-内酰胺类抗生素耐药外，还可能对大环内酯类、氨基 糖苷类等多种抗生素耐药。
发现与命名
发现
MRSA最早在1961年被发现，当 时在英国一家医院中出现了对甲 氧西林耐药的金黄色葡萄球菌感 染病例。
命名
由于这种葡萄球菌对甲氧西林耐 药，因此被命名为“耐甲氧西林 金黄色葡萄球菌”（MRSA）。
流行病学特征
传播途径
MRSA主要通过接触传播，如皮 肤接触、飞沫等。在医院、养老 院等医疗机构中，患者、医护人 员和探访者之间的传播尤为常见
。
易感人群
老年人、儿童、身体虚弱或免疫 系统受损的人群更容易感染
MRSA。在医院和养老院等医疗 机构中，住院患者也容易感染
MRSA。
预防措施
为了预防MRSA的传播，应加强 手卫生、清洁和消毒措施，对患 者和探访者进行筛查，以及采取
医疗环境传播
医护人员手部传播
医护人员在接触患者或操作过程中，如果不注意手卫生，可 能将MRSA从一个患者传播到另一个患者。
医疗器械污染
医疗器械如呼吸机、导管等在使用过程中可能被MRSA污染 ，导致患者之间的传播。
Part
03
MRSA感染的症状与诊断
症状表现
皮肤感染
皮肤出现红肿、疼痛、脓疱等症 状，有时伴有发热和寒战。
抗生素选择性压力
长期使用抗生素会对细菌 施加选择性压力，促使细 菌发生基因突变，从而产 生耐药性。
耐药性的传播与扩散
人与人传播
MRSA可以通过直接接触或间接 接触传播，如接触患者体液、接
触污染的环境等。
动物与人传播
某些动物携带的MRSA菌株可以传 播给人类，如猪、鸡等动物携带的 MRSA菌株。
MRSA具有多重抗药性，除了对β-内酰胺类抗生素耐药外，还可能对大环内酯类、氨基 糖苷类等多种抗生素耐药。
发现与命名
发现
MRSA最早在1961年被发现，当 时在英国一家医院中出现了对甲 氧西林耐药的金黄色葡萄球菌感 染病例。
命名
由于这种葡萄球菌对甲氧西林耐 药，因此被命名为“耐甲氧西林 金黄色葡萄球菌”（MRSA）。
流行病学特征
传播途径
MRSA主要通过接触传播，如皮 肤接触、飞沫等。在医院、养老 院等医疗机构中，患者、医护人 员和探访者之间的传播尤为常见
。
易感人群
老年人、儿童、身体虚弱或免疫 系统受损的人群更容易感染
MRSA。在医院和养老院等医疗 机构中，住院患者也容易感染
MRSA。
预防措施
为了预防MRSA的传播，应加强 手卫生、清洁和消毒措施，对患 者和探访者进行筛查，以及采取
医疗环境传播
医护人员手部传播
医护人员在接触患者或操作过程中，如果不注意手卫生，可 能将MRSA从一个患者传播到另一个患者。
医疗器械污染
医疗器械如呼吸机、导管等在使用过程中可能被MRSA污染 ，导致患者之间的传播。
Part
03
MRSA感染的症状与诊断
症状表现
皮肤感染
皮肤出现红肿、疼痛、脓疱等症 状，有时伴有发热和寒战。
抗生素选择性压力
长期使用抗生素会对细菌 施加选择性压力，促使细 菌发生基因突变，从而产 生耐药性。
耐药性的传播与扩散
人与人传播
MRSA可以通过直接接触或间接 接触传播，如接触患者体液、接
触污染的环境等。
动物与人传播
某些动物携带的MRSA菌株可以传 播给人类，如猪、鸡等动物携带的 MRSA菌株。
微生物-金黄色葡萄球菌ppt课件
增菌培养方法
Baird-parker（贝尔德- 帕克） 0.3ml、0.3ml、0.4ml
36± 1℃ 24hr
血平板
36± 1℃ 24hr
涂片染色
观察溶血
7．5％氯化钠肉汤或 胰酪胨大豆肉汤 36± 1℃ 24hr
血平板 ，Baird-parker
血浆凝固酶试验
报告 ;.
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
方法一：试管法 吸取1:4新鲜兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加入培养24h的金黄色葡萄球肉浸液
肉汤培养物0.5mL，振荡摇匀，放36±1℃恒温箱或水浴内，每半小时观察一次，观察 6h，如呈现凝固，即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者，被认为阳性结果。
;.
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
二、检验程序与操作方法 根据中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准： 《食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验》 GB 4789.10-94
金黄色葡萄球菌检验
;.
食品安全检验技术（微生物部分检）样 金色葡萄球菌检验
25g(ml)+225ml灭菌生理盐水
国标：金黄色葡萄 球菌检验程序
直接计数方法
葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃 肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。
当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等， 在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。
;.
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
试管法
;.
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
阴性反应
阳性反应
金黄葡萄球菌感染-PPT课件
3.生长特殊性
MRSA生长缓慢，在30°C，培养基pH 7.0及高渗(40 g/L
NaCl溶液)条件下生长较快。在30°C时，不均一耐药株表现为 均一耐药和高度耐药，在37°C又恢复不均一耐药。均一耐药株 在>37°C或pH<5.2时，均一耐药性可被抑制而表现为敏感。增 加NaCl浓度，低温孵育和延长时间，可使不均一耐药株群体中 敏感亚群中的耐药性得到充分表达，即能耐受较高浓度的甲氧 西林，而对其中耐药亚群无影响。
革兰氏染色为阳性。其衰老、 死亡或被白细胞吞噬后，以 及耐药的某些菌株可被染成 革兰氏阴性。
葡萄球菌
• 自然界广泛分布
• 抵抗力较强 • 分类： ---血浆凝固酶（+）：金黄色葡萄球（S.aureus）、 ---血浆凝固酶（-）：表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.saparophytics) 等。
• CA-MRSA感染:患者均为社区发病，发病前 身体健康，无基础疾病，无医院、医疗保 健机构或护理院等接触史，亦无透析、手 术、留置导管或人工医疗装置等诱发因素。
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
• 对所有β-内酰胺类抗生素均耐药，并对对 氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟 喹喏酮类、磺胺类等产生不同程度的耐药 • 院内感染的主要病原菌之一 • CA-MRSA 和HA-MRSA 混杂
•
诊断：
临床表现+辅查
鉴别诊断： 其它化脓性细菌感染 药物所致表皮坏死松解症
S. Aureus Treatment
• 引流脓液、清除异物是进行抗菌治疗的先决条
件！！
浅表或深部脓肿：切开 体位引流 骨髓炎：开窗 人工心脏瓣膜：置换瓣膜 静脉置管：拔出导管
MRSA生长缓慢，在30°C，培养基pH 7.0及高渗(40 g/L
NaCl溶液)条件下生长较快。在30°C时，不均一耐药株表现为 均一耐药和高度耐药，在37°C又恢复不均一耐药。均一耐药株 在>37°C或pH<5.2时，均一耐药性可被抑制而表现为敏感。增 加NaCl浓度，低温孵育和延长时间，可使不均一耐药株群体中 敏感亚群中的耐药性得到充分表达，即能耐受较高浓度的甲氧 西林，而对其中耐药亚群无影响。
革兰氏染色为阳性。其衰老、 死亡或被白细胞吞噬后，以 及耐药的某些菌株可被染成 革兰氏阴性。
葡萄球菌
• 自然界广泛分布
• 抵抗力较强 • 分类： ---血浆凝固酶（+）：金黄色葡萄球（S.aureus）、 ---血浆凝固酶（-）：表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.saparophytics) 等。
• CA-MRSA感染:患者均为社区发病，发病前 身体健康，无基础疾病，无医院、医疗保 健机构或护理院等接触史，亦无透析、手 术、留置导管或人工医疗装置等诱发因素。
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
• 对所有β-内酰胺类抗生素均耐药，并对对 氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟 喹喏酮类、磺胺类等产生不同程度的耐药 • 院内感染的主要病原菌之一 • CA-MRSA 和HA-MRSA 混杂
•
诊断：
临床表现+辅查
鉴别诊断： 其它化脓性细菌感染 药物所致表皮坏死松解症
S. Aureus Treatment
• 引流脓液、清除异物是进行抗菌治疗的先决条
件！！
浅表或深部脓肿：切开 体位引流 骨髓炎：开窗 人工心脏瓣膜：置换瓣膜 静脉置管：拔出导管
金黄色葡萄球菌ppt课件
肠毒素是一种可溶性蛋白质，耐热，经100℃煮沸30分 钟不被破坏，也不受胰蛋白酶的影响（破坏食物中存在 的肠毒素须加热至100℃，并持续2h），且具有"超抗 原"(superantigen)特性 ，故误食污染肠毒素的食物后 ，在肠道作用于内脂神经受体，传入中枢，刺激呕吐中 枢，引起呕吐，并产生急性胃肠炎症状。
• 菌落直径2-3mm，颜色从灰色到黑色，边缘为 淡色，周围有一浑浊带，其外层有一透明圈， 用接种针触碰有奶油树脂的硬度。
3种葡萄球菌鉴别的主要性状
主要性状 色素
血浆凝固酶 甘露醇发酵
溶血性 耐热核酸酶活性 磷壁酸核糖醇型 磷壁酸甘油型 蛋白A（SPA）
致病性
金黄色葡萄球菌 金黄色 ＋（－） ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ 强
（表皮/腐生性葡萄球菌）
白色/柠檬色 － － － － － ＋ －
弱或无
三 、生化特性
1.可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不 产气。甲基红反应阳性，V-P反应弱阳性。
2.许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸 盐，液化明胶。
3.具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低， 但对青霉素、红霉素等高度敏感。
4.表皮溶解毒素（Epidermolytic toxin）
表皮溶解毒素也称表皮剥脱毒素（Exfoliatin)，可引 起人类或新生小鼠的表皮剥脱性病变、烫伤样皮肤综 合征（剥脱性皮炎），多见于新生儿、婴幼儿及免疫 功能低下者。它主要是由噬菌体Ⅱ型金葡菌产生的一 种蛋白质，分子量24000，具有抗原性，可被甲醛脱 毒成类毒素。
致病性与免疫性
烫伤样皮肤综合症
5.中毒性休克综合症毒素-Ⅰ（Toxic shock syndrome toxin-1,TTST-1）
金黄色葡萄球菌GBppt课件
三． 每个梯度吸取1mL,以0.3，0.3,0.4mL分别 接种3个BP平板；
四． 涂布，完全吸收样液后，倒置培养；
五 一．．注选意点取：3个平板菌落数合计20-200cfu的梯度 二．1，平用板于涂，布计平板数必典须型干燥菌；落数 六 三边．．缘2，挑浆涂去 凝布是固5个，酶涂典布实型棒验不菌。要落接（触平不板够5个全挑）做血
六．A2----第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落总数
七．B1----第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性菌落总数
八．B2----第二稀释度（高稀释倍数）血浆凝固酶阳性菌落总数
一． 金黄色葡萄球菌：属于微球菌 科，葡萄球菌属的；有“金葡 菌”等别称
二． 金葡菌是化脓性感染的常见致 病菌，能导致肺炎，心包炎， 毛囊炎，败血症，烫伤样皮肤 症等
三． 传播途径：水、食物等
四． 超级细菌：耐甲氧西林金葡（
3
金黄色葡萄球菌生物特征
一． 形态特征：革兰氏染色阳性，呈葡萄串状排列 。
或凝固 体积大不良于原体积的一半。
四． 的，可能导致假阴性；
五．3，不能使用甘露醇氯化钠琼脂上的菌落，
11
高盐
GB 4789.10-2010
一．第一法：定性检测
一．第二法：平板计数法
一．第三法：MPN计数 法
12
法一 ． 平 板 计 数
13
平பைடு நூலகம்计数法——平板接种
一． 步骤：
二． 10倍系列梯度稀释，并选取2-3个适宜梯 度；
9
定性检测——平板划线分离
一．菌落形态：白色或者金黄色菌 落，周围有透明溶血环（β-溶血） 。 二．主要成分：蛋白胨，牛肉粉， 脱纤维羊血
一．注意点： 二．一，使用前观看平皿是否有干裂或染菌； 三．二，开封后未使用完的培养基要及时放于冰箱保存。
四． 涂布，完全吸收样液后，倒置培养；
五 一．．注选意点取：3个平板菌落数合计20-200cfu的梯度 二．1，平用板于涂，布计平板数必典须型干燥菌；落数 六 三边．．缘2，挑浆涂去 凝布是固5个，酶涂典布实型棒验不菌。要落接（触平不板够5个全挑）做血
六．A2----第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落总数
七．B1----第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性菌落总数
八．B2----第二稀释度（高稀释倍数）血浆凝固酶阳性菌落总数
一． 金黄色葡萄球菌：属于微球菌 科，葡萄球菌属的；有“金葡 菌”等别称
二． 金葡菌是化脓性感染的常见致 病菌，能导致肺炎，心包炎， 毛囊炎，败血症，烫伤样皮肤 症等
三． 传播途径：水、食物等
四． 超级细菌：耐甲氧西林金葡（
3
金黄色葡萄球菌生物特征
一． 形态特征：革兰氏染色阳性，呈葡萄串状排列 。
或凝固 体积大不良于原体积的一半。
四． 的，可能导致假阴性；
五．3，不能使用甘露醇氯化钠琼脂上的菌落，
11
高盐
GB 4789.10-2010
一．第一法：定性检测
一．第二法：平板计数法
一．第三法：MPN计数 法
12
法一 ． 平 板 计 数
13
平பைடு நூலகம்计数法——平板接种
一． 步骤：
二． 10倍系列梯度稀释，并选取2-3个适宜梯 度；
9
定性检测——平板划线分离
一．菌落形态：白色或者金黄色菌 落，周围有透明溶血环（β-溶血） 。 二．主要成分：蛋白胨，牛肉粉， 脱纤维羊血
一．注意点： 二．一，使用前观看平皿是否有干裂或染菌； 三．二，开封后未使用完的培养基要及时放于冰箱保存。
金黄色葡萄球菌的致病性及检测技术.pptx
死 • b.杀死白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞 • c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或
凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关
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• d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄 色葡萄球菌
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• 显色培养基A计数法：稀释好的菌液0.2 mL涂布接种培养基平板上，36℃±1℃培养24 h，按说明 书判读，可疑菌落做补充实验（血浆凝固酶试验，目标菌落血浆凝固酶试验为阳性）。
• 显色培养基B计数法：稀释好的菌液0.2 mL涂布接种培养基平板上，36℃±1℃培养24 h，按说明 书判读，可疑菌落做补充实验（滴加1 mol/L盐酸，目标菌落有透明圈）。
• e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、 C3、D、E及F八种血清型。肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状 是呕吐和腹泻。
• 此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
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检测与诊断
萄球菌相鉴别。
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鉴别实验 一、血浆凝固酶试验
血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的，与其致病力有关的一种侵袭性酶，其作用 是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。 血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上，能直接作用于血浆中的 纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产 生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但可以激活血浆凝血酶原，使之转 化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。 具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。
凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关
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• d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄 色葡萄球菌
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• 显色培养基A计数法：稀释好的菌液0.2 mL涂布接种培养基平板上，36℃±1℃培养24 h，按说明 书判读，可疑菌落做补充实验（血浆凝固酶试验，目标菌落血浆凝固酶试验为阳性）。
• 显色培养基B计数法：稀释好的菌液0.2 mL涂布接种培养基平板上，36℃±1℃培养24 h，按说明 书判读，可疑菌落做补充实验（滴加1 mol/L盐酸，目标菌落有透明圈）。
• e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、 C3、D、E及F八种血清型。肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状 是呕吐和腹泻。
• 此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
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检测与诊断
萄球菌相鉴别。
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鉴别实验 一、血浆凝固酶试验
血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的，与其致病力有关的一种侵袭性酶，其作用 是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。 血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上，能直接作用于血浆中的 纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产 生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但可以激活血浆凝血酶原，使之转 化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。 具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。
金黄色葡萄球菌演示课件
诊断方法
根据临床表现、细菌学检查和血清学 检查等综合判断。其中，细菌学检查 包括涂片镜检、分离培养和药敏试验 等。
02
生物学特性
形态与结构特点
革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列 细胞壁含有肽聚糖和磷壁酸
无芽孢、无鞭毛，大多数无荚膜
生长条件及繁殖方式
01
需氧或兼性厌氧菌，最适生长温度为37°C
02
在普通培养基上生长良好，形成圆形、凸起、 光滑、湿润的菌落
05
临床治疗策略与预防措施
抗菌药物治疗原则及选用建议
早期、足量、联合使用敏感抗菌药物
01
在感染初期，应尽早使用足量、敏感的抗菌药物，以迅速控制
感染，减少并发症的发生。
个体化治疗方案
02
根据患者的年龄、病情严重程度、感染部位等因素，制定个体
化的治疗方案，以提高治疗效果。Biblioteka 避免滥用抗菌药物03
严格掌握抗菌药物的使用指征，避免不必要的滥用，以减少耐
04
实验室检测方法与技术
传统培养法鉴定原理及操作步骤
鉴定原理
通过选择性培养基，如Baird-Parker琼脂平板，抑制其他细菌生长，促进金黄色葡 萄球菌生长并形成典型菌落。根据菌落形态、色素产生和生化反应进行鉴定。
免疫学检测方法介绍及应用范围
免疫学检测方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光 技术、免疫磁珠分离技术等检测金黄色葡萄球菌。
03
繁殖方式主要为二分裂，也可进行多次分裂形 成短链状
代谢途径与产物分析
01
主要代谢途径包括糖酵 解、磷酸戊糖途径和三
羧酸循环等
02
可产生多种酶类，如凝 固酶、葡萄球菌溶血素
根据临床表现、细菌学检查和血清学 检查等综合判断。其中，细菌学检查 包括涂片镜检、分离培养和药敏试验 等。
02
生物学特性
形态与结构特点
革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列 细胞壁含有肽聚糖和磷壁酸
无芽孢、无鞭毛，大多数无荚膜
生长条件及繁殖方式
01
需氧或兼性厌氧菌，最适生长温度为37°C
02
在普通培养基上生长良好，形成圆形、凸起、 光滑、湿润的菌落
05
临床治疗策略与预防措施
抗菌药物治疗原则及选用建议
早期、足量、联合使用敏感抗菌药物
01
在感染初期，应尽早使用足量、敏感的抗菌药物，以迅速控制
感染，减少并发症的发生。
个体化治疗方案
02
根据患者的年龄、病情严重程度、感染部位等因素，制定个体
化的治疗方案，以提高治疗效果。Biblioteka 避免滥用抗菌药物03
严格掌握抗菌药物的使用指征，避免不必要的滥用，以减少耐
04
实验室检测方法与技术
传统培养法鉴定原理及操作步骤
鉴定原理
通过选择性培养基，如Baird-Parker琼脂平板，抑制其他细菌生长，促进金黄色葡 萄球菌生长并形成典型菌落。根据菌落形态、色素产生和生化反应进行鉴定。
免疫学检测方法介绍及应用范围
免疫学检测方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光 技术、免疫磁珠分离技术等检测金黄色葡萄球菌。
03
繁殖方式主要为二分裂，也可进行多次分裂形 成短链状
代谢途径与产物分析
01
主要代谢途径包括糖酵 解、磷酸戊糖途径和三
羧酸循环等
02
可产生多种酶类，如凝 固酶、葡萄球菌溶血素
金黄色葡萄球菌课件
将金黄色葡萄球菌的基因编码插入载 体DNA，形成DNA疫苗，通过转染机 体细胞诱导免疫反应。
亚单位疫苗
利用金黄色葡萄球菌的表面蛋白、毒 素等抗原成分，制备亚单位疫苗，以 诱导特异性免疫反应。
治疗药物研究进展
新型抗生素
针对金黄色葡萄球菌的耐药性问 题，研究新型抗生素的作用机制 和抗菌活性，以期发现更有效的
制定和实施针对金黄色葡萄球菌防控的国家 标准和行业规范。
科研支持
加大对金黄色葡萄球菌防控研究的投入，推 动相关科研成果的转化和应用。
金黄色葡萄球菌的研究进展
基础研究进展
基因组学研究
通过对金黄色葡萄球菌基因组进 行测序和分析，揭示其致病机制 和进化历程，为抗感染治疗和疫
苗研发提供理论基础。
毒力因子研究
THANKS
感谢观看
预防措施
分析预防金黄色葡萄球菌感染的有效措施，如加 强个人卫生、食品卫生管理等。
案例启示与建 议
提高认识
强调认识金黄色葡萄球菌危害性的重要性，提高公众对食品安全 和卫生的关注度。
加强监管
提出政府和相关部门应加强对食品生产和销售环节的监管，确保食 品安全。
个人防护
提供预防金黄色葡萄球菌感染的个人防护措施，如勤洗手、避免食 用不洁食品等。
加强食品安全
遵循食品安全指南，如正确烹 饪肉类和蛋类，避免生食。
提高免疫力
保持健康的生活方式，包括均 衡饮食、适量运动和充足的睡 眠，以增强身体对疾病的抵抗力。
控制策略
01
02
03
04
及时诊断和治疗
尽早识别金黄色葡萄球菌感染 的症状，并采取适当的抗生素
治疗。
隔离措施
对确诊患者进行隔离，以防止 疾病传播。
金黄色葡萄球菌1ppt课件
2
◆
金黄色葡萄球菌及其危害
金葡菌概念
金葡菌传播
金葡菌危害
寄生于人和动 物皮肤粘膜﹑ 鼻腔﹑胃肠道 等处，无鞭毛 不形成芽孢和 荚膜的革兰氏 阳性葡萄球菌
经呼吸道、消 化道、交配、 昆虫叮咬、挤 奶工的手或挤 奶机械等途径 引起哺乳动物 的感染
金葡菌对人畜 均产生多种危 害，诸如各种 化脓性疾病、 败血症或脓毒 败血症、乳房 炎等
7d和10d，分别采1g样品用平板计数法测定其金葡菌的
数量。 14
◆ 石灰氮添加量的确定
试验设计
根据培养温度的检测结果，选择最佳培养温度（即 30℃），石灰氮的添加量设为0%、2%、2.5%、3%。
测定方法
取300g牛粪按上述比例的石灰氮混合均匀，在30℃
培养5d。在培养0d、1d、3d和5d，分别采1g样品用平板 计数法测定其金黄色葡萄球菌的数量。
量氮◆ 定的添石 确加灰
LogCFU/g 6 5 4 3 2 1 0 0d 1d 堆肥天数（d) 3d 5d 0% 2% 2.50% 3%
注：“+”号表示不敏感，抑菌圈直径在7mm～10mm ；“++”号表示敏感， 菌圈直径10mm～15mm之间 ；“+++”表示高敏感，抑菌圈直径大于15mm
结小 经分离菌的形态、染色、培养特性，从206份奶牛鲜粪样
中共检出34株疑似金黄色葡萄球菌。生化试验、动物致病性
试验和PCR鉴定结果表明，从34株疑似金黄色葡萄球菌中，供 分离出7株致病性金黄色葡萄球菌，致病菌检出率为20.59％ 。丹参、大黄、枸杞等3种草药对金黄色葡萄球菌高敏感,茜 草和青蒿敏感，其它草药对金黄色葡萄球菌不敏感。
机选择的206头奶牛的直肠粪便。 方 ◆法 致病菌的纯培养 ◆ 致病菌的鉴定: 镜检 ◆ 体外抑菌： 茜草、乳香、牛蒡子、青蒿、姜黄、大黄、丹参CR鉴定
微生物金黄色葡萄球菌市公开课获奖课件省名师示范课获奖课件
试管法
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
阴性反应
阳性反应
不凝固
少许、 零散凝
固
明显旳块 状凝固
巨大块 凝固
完全凝固， 倒置不流动
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
有凝块
均匀混浊
血浆
生理盐水
措施二：玻片法 在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水，用接种环取
待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液， 若经10~20s内无自凝现象发生，则加入人或兔新鲜血浆 1环（不用稀释），与菌悬液混合，观察成果 。
措施一：试管法 吸收1:4新鲜兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加入培
养24h旳金黄色葡萄球肉浸液肉汤培养物0.5mL，振荡摇 匀，放36±1℃恒温箱或水浴内，每半小时观察一次，观 察6h，如呈现凝固，即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者， 被以为阳性成果。
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
品
计算方法：（三个平板中疑 似金黄色葡萄球菌黑色菌落
血平板、镜 检与 肉浸液肉汤培养
36± 1℃ 24hr
数相加）×血浆凝固酶阳性 数÷5 ×稀释倍数
血浆凝固酶试验
36± 1℃ 6hr
报告成果 金葡菌数
/g(mL)
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
第一天 器材准备、样品处理、增菌培养和BP平板分离接种
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
大而突起，圆形，不透明， 表面光滑，有溶血环
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
血平板制作
成份：豆粉琼脂（或营养琼脂）100mL，脱纤维 羊血（或兔血）5-10mL。
制法：加热融化琼脂，冷至50℃，以无菌操作加 入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装 灭菌试管，摆成斜面。
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
阴性反应
阳性反应
不凝固
少许、 零散凝
固
明显旳块 状凝固
巨大块 凝固
完全凝固， 倒置不流动
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
有凝块
均匀混浊
血浆
生理盐水
措施二：玻片法 在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水，用接种环取
待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液， 若经10~20s内无自凝现象发生，则加入人或兔新鲜血浆 1环（不用稀释），与菌悬液混合，观察成果 。
措施一：试管法 吸收1:4新鲜兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加入培
养24h旳金黄色葡萄球肉浸液肉汤培养物0.5mL，振荡摇 匀，放36±1℃恒温箱或水浴内，每半小时观察一次，观 察6h，如呈现凝固，即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者， 被以为阳性成果。
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
品
计算方法：（三个平板中疑 似金黄色葡萄球菌黑色菌落
血平板、镜 检与 肉浸液肉汤培养
36± 1℃ 24hr
数相加）×血浆凝固酶阳性 数÷5 ×稀释倍数
血浆凝固酶试验
36± 1℃ 6hr
报告成果 金葡菌数
/g(mL)
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
第一天 器材准备、样品处理、增菌培养和BP平板分离接种
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
大而突起，圆形，不透明， 表面光滑，有溶血环
食品安全检验技术（微生物部分） 金色葡萄球菌检验
血平板制作
成份：豆粉琼脂（或营养琼脂）100mL，脱纤维 羊血（或兔血）5-10mL。
制法：加热融化琼脂，冷至50℃，以无菌操作加 入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装 灭菌试管，摆成斜面。
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金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌的生物学特性 • 1、形态与染色：(staphylococcus aureus)
•
典型的金黄色葡萄球菌为球型，
•
直径0.8μm左右，显微镜下排
•
列成葡萄串状。
•
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，
•
大多数无荚膜。
•
革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型， 直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜
金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生
长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生
长pH 7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血
金黄色葡萄球菌快速检测方法 法国梅里埃公司生产的RPF试剂盒、API检测系统等。梅
里埃公司生产的miniVIDAS利用荧光免疫的方法检测葡萄 球菌肠毒素，在仪器上45分钟可以得到结果。
美国3M公司生产的金黄色葡萄球菌快速检测试片，可以 直接Байду номын сангаас数产生耐热核酸酶的金黄色葡萄球菌，操作简单， 缩短了时间。
平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl
肉汤中生长。
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，
液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物
防止金黄色葡萄球菌污染食品 金黄色葡萄球菌污染的控制
防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工 人员进行健康检查。
防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶 厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的 牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生 成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温 保存。
后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用
主要经营：网络软件设计、图文设计制作、 发布广告等
公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做 到让客户满意！
致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、 PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各 类模板等方方面面，打造全网一站式需求
敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
绝大多数金葡含有A型抗原，B型抗原主要存在于凝
固酶阴性菌株，C型抗原在致病性和非致病性菌株中都存
在。
用血清学金反黄应色检葡验萄金球黄菌色肠葡毒萄素球的菌检肠测毒素，方法主 要有：
免疫琼脂扩散法 反向间接血凝试验 免疫荧光法 酶联免役吸附法
金黄色葡萄球菌的生物学特性 • 1、形态与染色：(staphylococcus aureus)
•
典型的金黄色葡萄球菌为球型，
•
直径0.8μm左右，显微镜下排
•
列成葡萄串状。
•
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，
•
大多数无荚膜。
•
革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型， 直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜
金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生
长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生
长pH 7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血
金黄色葡萄球菌快速检测方法 法国梅里埃公司生产的RPF试剂盒、API检测系统等。梅
里埃公司生产的miniVIDAS利用荧光免疫的方法检测葡萄 球菌肠毒素，在仪器上45分钟可以得到结果。
美国3M公司生产的金黄色葡萄球菌快速检测试片，可以 直接Байду номын сангаас数产生耐热核酸酶的金黄色葡萄球菌，操作简单， 缩短了时间。
平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl
肉汤中生长。
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，
液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物
防止金黄色葡萄球菌污染食品 金黄色葡萄球菌污染的控制
防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工 人员进行健康检查。
防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶 厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的 牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生 成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温 保存。
后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用
主要经营：网络软件设计、图文设计制作、 发布广告等
公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做 到让客户满意！
致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、 PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各 类模板等方方面面，打造全网一站式需求
敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
绝大多数金葡含有A型抗原，B型抗原主要存在于凝
固酶阴性菌株，C型抗原在致病性和非致病性菌株中都存
在。
用血清学金反黄应色检葡验萄金球黄菌色肠葡毒萄素球的菌检肠测毒素，方法主 要有：
免疫琼脂扩散法 反向间接血凝试验 免疫荧光法 酶联免役吸附法