分光光度法测定红细胞渗透脆性
医学检验·检查项目：红细胞渗透脆性试验(ROFT)_课件模板
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临床意义： 症、血红蛋白增多症、脾切除术后、肝脏 疾病、阻塞性黄疸等。
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正常值： 开始溶血：4.2-4.6g/L NaCl (71.8-
78.6mmoL/L) 完全溶血：2.8-3.29g/L NaCl (47.9-54.7mmoL/L)。
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相关检查： 网织红细胞计数、红细胞直径（MCD）、 红细胞聚集性ห้องสมุดไป่ตู้红细胞变形性、红细胞计 数、红细胞机械性脆性试验。
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相关症状： 贫血。
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相关疾病： 遗传性血色病、铁利用性贫血、镰状细胞 病、先天性红细胞膜病、再生障碍性贫血、 原发性血小板减少性紫瘢、血友病。
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医学检验·各论 红细胞渗透脆性试验
（ROFT） 内容课件模板
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别名： 红细胞渗透脆性试验。
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简介：
正常红细胞为双凹圆盘形，在低渗盐 水中溪水膨胀的适应性大，一般可增加 70%的体积而不破裂。红细胞渗透脆性是 测定红细胞对不同低渗盐水溶液的抵抗力。 这种抵抗力与红细胞表面积与体积的比值 有关。表面积大的体积小者对低渗盐水抵 抗力较大(脆性低);反之则抵抗力较小(脆 性增加)。本试验对确定
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
❖ 不同物质旳等渗溶液不一定都能使红细胞旳体积和 形态保持正常，能使悬浮于其中旳红细胞保持正常 体积和形状旳盐溶液，称为等张溶液。所谓“张力” 实际是指溶液中不能透过细胞膜旳颗粒所造成旳渗 透压。例如NaCI不能自由透过细胞膜，所以 0.85%NaCI既是等渗溶液，也是等张溶液；但如尿 素，因为它能够自由经过细胞膜，使胞外成为低渗 溶液从而发生溶血。1.9%尿素溶液虽然与血浆等渗， 但红细胞置入其中后立即溶血，所以不是等张溶液。
【试验原理】
❖ 将红细胞悬浮于等渗NaCl液中，其形态不变。若置 于低渗NaCl溶液中则发生膨胀破裂，此现象称为红 细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵 抗力，其大小可用NaCl溶液浓度旳高下来表达。将 血液滴入不同浓度旳低渗NaCl溶液中，开始出现溶 血现象旳NaCl溶液浓度为该血液红细胞旳最小抵抗 力。出现完全溶血现象时旳NaCl溶液浓度为该红细 胞旳最大抵抗力。前者代表红细胞旳最大脆性(最小 抵抗力)，后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。
生理学实验红细胞渗 透脆性的测定
【试验目旳】
❖ 1、本试验学习测定红细胞渗透脆性旳措施。 ❖ 2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正
常形态与功能主要性方面旳了解。
【试验原理】
❖ 在临床或生理试验使用旳多种溶液中，与血浆渗透 压相等旳称为等渗溶液（如0.85%NaCI溶液），高 于或低于血浆渗透压旳则相应地称为高渗或低渗溶 液。将正常红细胞悬浮于不同浓度旳NaCI溶液中即 可看到：在等渗溶液中旳红细胞保持正常大小和双 凹圆碟形；在渗透压递减旳一系列溶液中，红细胞 逐渐胀大并双侧凸起，当体积增长30%时成为球形； 体积增长45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血，这 时血红蛋白逸出细胞外，称为溶血。
红细胞渗透脆性试验
红细胞渗透脆性试验一、原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。
在低渗盐溶液中，由于水分渗入细胞内，红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。
因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中，观察发生溶血的情况，可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。
红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度，红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。
当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时，红细胞容易破碎，发生溶血，称为红细胞渗透脆性增加；反之，称为红细胞渗透脆性降低。
二、检测方法（一）试剂与器材1、器材：分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。
2、试剂：1% NaCl溶液：用分析天平称取分析纯 NaCl 1.000g，加少量蒸馏水溶解，于100ml容量瓶中用蒸馏水定容，置于玻璃瓶中灭菌后使用。
(二）操作1、取12支无菌小试管编号，配制不同浓度的 NaCI 溶液。
2、用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml，向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血，轻轻摇，室温静置2小时后观察结果。
3、结果判断从1号管开始观察溶血情况。
不溶血：上清液透明无红色;开始溶血：上清液刚呈浅红色，管底有较多未溶的红细胞；完全溶血：溶液呈透明红色，管底无红细胞。
三、参考区间开始溶血 NaCl浓度：3.8~4.6g/L;完全溶血 NaCl浓度：2.8~3.2g/L四、注意事项1、NaCl必须干燥，可将分析纯氯化钠于100℃下烘干，置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。
2、所用器具应干燥清洁，避免出现人为溶血。
向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中，不可沿管壁注入，混匀时动作须轻柔。
3、观察溶血情况时以白色背景为宜。
4、结果不易判断时，可低速短时离心后观察5、每次试验应以相同实验条件做正常对照。
被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。
优质文档红细胞渗透渗出脆性试验
[优质文档]红细胞渗透渗出脆性试验红细胞渗透脆性试验来源于:江西检验医学网红细胞渗透脆性试验red cellosmotic fragility test参考范围:开始溶血 O.40,一0.44, (NaCl液)完全溶血 O.32,一O.36, (NaCl液)临床评价:1(红细胞膜，有人称为鬼影(ghost)，是一种由磷脂、非酰化的胆固醇和糖蛋白等组成膜脂质和主体、膜蛋白质(转运蛋白和表面抗原)与周围膜蛋白质(膜骨架中的收缩蛋白和肌动蛋白以及膜骨架依靠的锚蛋白)所组成。
这些成分要保证红细胞在120天寿命内50，000次通过“急流旋涡”仍能生存;要控制Na+和K+在细胞内的浓度，任何导致K+漏出增高超过Na+的漏入，均会导致细胞内单价阳离子和水分的丢失。
这些生理功能的完善与否，可用简单且明白的膜渗透脆性试验来了解。
2(正常红细胞为双凹盘形，在低渗盐水中吸水膨胀的适应性大(可增加70,的体积而不破裂)，遗传性球形红细胞增多症(HS)等红细胞的S,V比率小，对低渗盐水的适应性小(脆性大)，所以红细胞渗透跪性试验是检测HS最有用的方法，当红细胞混悬于不同浓度的NaCl低渗溶液时，正常红细胞于O(4,一0(44,NaCl浓度时开始溶血，于o(32,一O(36,NaCl浓度时完全溶血。
HS病人的红细胞大多于0(50,一0(75,NaCl时开始溶血，于0(4,NaCl浓度时完全溶血，患者红细胞渗透脆性试验与正常对照组相比提高0.04,(NaCl液)以上即为阳性，还可见于遗传性椭圆形红细胞增多症，某些伴有球形红细胞增多的自身免疫性溶血性贫血。
3(红细胞渗透脆性试验显示，低于参考溶血的NaCl浓度可见于地中海贫血，血红蛋白C、D、E病，缺铁性贫血和肝脏疾病。
4(在试验过程中要严格控制加血量的准确性和防止血标本在体外溶血，否则易影响试验的准确性。
1(原理:悬浮于低张溶液中的红细胞，由于溶液张力差异，可使红细胞外的水渐渐进入红细胞中。
红细胞渗透脆性名词解释
红细胞渗透脆性名词解释红细胞渗透脆性是指红细胞在一定环境条件下受到渗透压作用而发生破裂的现象。
它是一种质量性指标，用于评估红细胞膜的强度和稳定性，反映红细胞对渗透压变化的敏感性。
红细胞渗透脆性与红细胞膜的组成和功能密切相关。
红细胞膜主要由磷脂、胆固醇、蛋白质等组成，具有半透膜的特性。
正常情况下，红细胞膜对水和溶质有一定的渗透性，能够维持细胞内外的渗透平衡。
但当红细胞受到渗透压变化的刺激时，红细胞膜受到牵拉作用，渗透脆性增加，导致红细胞的膨胀和破裂。
红细胞渗透脆性常用渗透脆性试验来评估。
试验中，通过改变外部溶液的渗透性和浓度，观察红细胞在不同渗透压环境下的破裂情况，从而判断红细胞的渗透脆性。
一般来说，红细胞在低渗透压环境下不易破裂，渗透脆性低；而在高渗透压环境下容易发生破裂，渗透脆性高。
红细胞渗透脆性的变化受多种因素影响。
例如，红细胞膜的组成和结构异常，如糖尿病、遗传性贫血等病理情况下，红细胞渗透脆性通常增高；而缺乏某些营养物质，如铁、叶酸等，会使红细胞渗透脆性降低。
此外，温度、pH值、药物作用等因素也会对红细胞渗透脆性产生影响。
红细胞渗透脆性在临床上有着一定的意义。
在红细胞疾病的诊断和治疗中，渗透脆性可以用来评估红细胞膜的状况，指导治疗策略。
例如，在溶血性疾病中，红细胞渗透脆性的增加可帮助确定溶血的程度和类型。
此外，红细胞渗透脆性还可以用来评估药物的抗溶血效果，指导药物治疗的调整。
总之，红细胞渗透脆性是指红细胞受到渗透压变化而发生破裂的现象，是评估红细胞膜强度和稳定性的指标。
其变化受多种因素的影响，对于红细胞疾病的诊断和治疗具有重要意义。
红细胞渗透脆性(仅供参照)
红细胞渗透脆性试验[实验目的]：学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。
试管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10试管蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。
红细胞渗透脆性试验
红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验介绍：本试验测定红细胞对各种浓度低渗溶液的抵抗力。
在低渗盐水中，水分透过细胞膜，使红细胞逐渐胀大破坏。
红细胞的渗透性主要取决于红细胞的表面积与体积之比。
表面积大而体积小者对渗盐溶液的抵抗力较大，反之则抵抗力较小(脆性增加)。
球形红细胞表面积/体积比值减少，对低渗溶液特别敏感，脆性显著增加。
红细胞渗透脆性试验正常值：桑福德法：初溶(开始溶血)：0.0042～0.0046 (0.42%～0.46%)氯化钠溶液。
完全溶血：0.0032～0.0034 (0.32%～0.34%)氯化钠溶液。
红细胞渗透脆性试验临床意义：异常现象：(1)增高：遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。
(2)降低：镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。
需要检查人群：贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群红细胞渗透脆性试验注意事项：检查时：(1)地中海贫血的渗透脆性降低，应进行低浓度NaCl溶液的检查。
(2)严重贫血者，要把RBC配成50%浓度，黄疸者要洗红细胞。
(3)血标本在冰箱中保存不得超过6h。
红细胞渗透脆性试验检查过程：1、制备不同浓度的NaCl溶液。
先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100m l,然后去口径相同的干净试管12支，编号排列在试管架上，按下表分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水后混匀，配置12种0.68%~0.24%不同浓度的低渗NaCl溶液2、分别配置0.85%浓度的NaCl溶液、1.9%浓度的尿素溶液。
另取3支小试管，编号13~15，分别盛2.5ml 0.85%NaCl溶液。
1.9%尿素溶液和蒸馏水3、碘酒、酒精消毒皮肤后用灭菌干燥的、肝素湿润的注入器从肘正中静脉取2ml，利己混匀，将其中1ml加入试管，余血一次向15支试管内各加入1滴，轻轻混匀。
4、观察13、14、15管的变化，其余12管在室温下静置1小时，然后观察混合液的颜色和透明度。
红细胞渗透脆性的测定
红细胞渗透脆性的测定[目的与原理] 掌握测定红细胞渗透脆性的方法，测定不同鱼类红细胞渗透脆性并理解细胞外液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。
正常情况下，动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等，哺乳动物约相当于0.9％NaC1溶液的渗透压，鱼类的等渗溶液为0.85％～1.0％NaC1溶液。
将红细…[目的与原理]掌握测定红细胞渗透脆性的方法，测定不同鱼类红细胞渗透脆性并理解细胞外液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。
正常情况下，动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等，哺乳动物约相当于0.9％NaC1溶液的渗透压，鱼类的等渗溶液为0.85％～1.0％NaC1溶液。
将红细胞置于等渗溶液中，其形态和容积可保持不变。
若将红细胞悬浮于低渗的NaC1溶液中，则水分进入红细胞使之膨胀甚至破裂溶解，但红细胞对低渗溶液具有一定的抵抗力，其抵抗力大小与红细胞膜脆性有关。
通常用不同浓度的NaC1溶液来测定红细胞膜的渗透脆性，红细胞膜渗透脆性大的，则对低渗NaC1溶液的抵抗力小，NaC1溶液的渗透压稍有降低，此类红细胞便发生破裂而溶血。
反之，脆性小的则对NaC1溶液的抵抗力大，Nac1溶液的渗透压降到很低时才使这些红细胞破裂溶血。
刚能引起一部分红细胞溶解的低渗NaCl的浓度可以代表最小抵抗值；使全部红细胞溶解的NaCl浓度为最大抵抗值。
通常就以抵抗值表示红细胞的渗透脆性。
在刚成熟的红细胞，其膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。
[实验对象]鲤、鲫或草鱼。
[试剂与器材]5毫升无菌注射器，消毒棉球，中试管，小试管，试管架，滴管，1%NaCl，蒸馏水，75%酒精，碘酒，凹瓷盘，1%肝素钠或10%草酸钾溶液，3.8% 枸橼酸钠。
[实验步骤]滴血，将试管夹在两掌心中迅速搓动，使血液与管内NaCl溶液混匀（切勿用力震荡），室温下放置2小时后观察结果。
多余血液注入盛有0.1毫升3.8% 枸橼酸钠的试管内。
加以混合，以备重复实验使用。
红细胞渗透脆性
红细胞渗透脆性试验[实验目的]：学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。
[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。
蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。
红细胞渗透脆性测定
实验六红细胞渗透脆性测定、影响血液凝固的因素及血型鉴定一、红细胞渗透脆性的测定【实验目的】1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。
2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。
【实验原理】将红细胞悬浮于等渗NaCl液中，其形态不变。
若置于低渗NaCl溶液中则发生膨胀破裂，此现象称为红细胞渗透脆性。
但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCl溶液浓度的高低来表示。
将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，开始出现溶血现象的NaCl溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力(正常为0.42-0.46%NaCl溶液)。
出现完全溶血现象时的NaCl溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力(正常为0.28-0.32%NaCl溶液)。
前者代表红细胞的最大脆性(最小抵抗力)，后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。
生理学上将能使悬浮于其中的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液，不能跨过细胞膜的微粒所形成的力，但等渗溶液并不一定是等张溶液(如1.9%的尿素溶液)。
【材料与方法】（一）实验对象家兔（二）器械药品：试管架、小试管45支、载玻片、盖玻片注射器、8号注射针头、棉签，1%NaCl溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水，1.9%尿素溶液、地塞米松、皂甙。
（三）方法与步骤1．配制不同浓度的低渗NaCl溶液取口径相同的干洁小试管12支，分别编号排列在三个试管架上，按表8-1分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水混匀，配制从0.68-0.24%12种不同浓度的NaCl低渗溶液，每管总量均为2.5ml。
表8-1 不同浓度低渗氯化钠溶液的配制试管编号试管编号试剂1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6蒸溜水(ml) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9NaCl浓度% 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24 另取3支小试管，在三个试管架中分别编号13-15，分别加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml。
红细胞渗透脆性的测定
目的要求
学习凝血时间的测定方法。
基本原理
• 血液流出血管后，受到刺激的血小板就会 释放出一系列凝血因子，使血中的纤维蛋 白原转换成网状的纤维蛋白，血液发生凝 固。 • 凝血时间是指从血液流出体外时起至凝固 时止所需的时间。测定凝血时间可反映血 液本身的凝血因子是否缺乏或减少。
实验动物与器材
基本原理
• 红细胞膜对低渗溶液具有一定的抵抗力， 这一特征称为红细胞的渗透脆性。将血液 滴入不同的低渗溶液中，可检查红细胞膜 对低渗溶液抵抗力的大小。
• 开始出现溶血现象的低渗溶液浓度，为该 血液红细胞的最小抵抗力；开始出现完全 溶血时的低渗溶液浓度，则为.8％柠檬酸钠、171mmol/L氯化钠溶 液、蒸馏水；注射器(2ml或5ml)、针头（6 号或6.5号）、5ml试管12支、5ml移液管3 支、滴管、试管架、吸耳球。
方法与步骤
• 1. 配制不同浓度的低渗NaCl溶液：取试管 12支，分别标记后，排列在试管架上，按 表3－1配制各种浓度的NaCl溶液。
• 2．取血，每管1滴，轻轻摇匀后于室温下 静置1～2hr后观察各试管之溶血情况。
• 3．结果判断：从高浓度管开始观察—— • 未发生溶血者：液体下层有大量红细胞下沉，上层为无色 透明，表明无红细胞破裂； • 部分红细胞溶血者：液体下层有红细胞下沉，上层出现透 明淡红（淡红棕）色，表明部分红细胞已经破裂，称为不 完全溶血； • 红细胞完全溶血者：液体完全变成透明红色，肉眼观察管 底已无红细胞，表明红细胞完全破裂，称为完全溶血。 • 开始完全溶血试管之溶液浓度代表红细胞的最高抵抗力， 即最小脆性；开始不完全溶血管之溶液浓度代表红细胞的 最低抵抗力，即最大脆性）。
• 4. 记录开始溶血和完全溶血的两管NaCl浓度。
红细胞渗透脆性实验
红细胞渗透脆性实验红细胞渗透脆性实验是一种常用的血液分析方法，用于评估红细胞膜的稳定性和弹性。
该实验利用了红细胞在不同渗透压下的脆性变化，可以对红细胞膜的功能、水平和吸收能力进行评估和分析，具有重要的临床意义。
实验原理：红细胞内部有一定的渗透压，当红细胞分离出体外时，如果外部环境的渗透压高于红细胞内的渗透压，则会通过半透膜透过膜进入红细胞内部，使红细胞体积膨胀，红细胞膜被撑开。
反之，当外部环境的渗透压低于红细胞内的渗透压时，水会从红细胞内部流出，红细胞体积缩小。
实验过程：1、准备标准盐水浓度，即0.9%的氯化钠溶液。
2、取一定量的患者血液样本，离心去上清液，弃去上清液后，将沉淀物用相同体积的0.9%氯化钠溶液洗涤3次。
3、取少量的红细胞沉淀，加入不同浓度的盐水，称出每种浓度的盐水加入相应的样本内。
4、使样本和盐水充分混合，放置不同的时间（一般为30分钟），孵育后进行离心处理。
5、标记沉淀物的红细胞体积，对分离出的上清液测定其吸光度（或乳胶凝集率）。
6、计算红细胞的溶血率，溶血率越高，表示红细胞的渗透脆性越高。
实验结果：在不同盐水浓度下孵育后，红细胞和盐水发生渗透压差异，导致红细胞脆性变化，失去完整性。
通过测定溶血率，可以得到红细胞的溶血程度，从而分析红细胞渗透脆性的高低，反映红细胞膜的稳定性和弹性。
一般来说，红细胞膜的完整性越强，渗透脆性越低，溶血程度越小；反之，红细胞膜的完整性越弱，渗透脆性越高，溶血程度越大。
实验注意事项：1、样本应在离心前密闭保存，避免污染。
2、孵育时间需控制在一定范围内，过长过短都会影响实验结果。
3、盐水和样本的比例应准确。
4、实验过程需严格按照操作流程，避免误差。
结论：红细胞渗透脆性实验可以反映红细胞膜的稳定性和弹性，对于临床疾病诊断、治疗和预后评估有着很高的应用价值。
在具体应用时，需结合其他临床检测项目综合分析，才能准确地诊断疾病并制定科学的治疗方案。
红细胞的渗透脆性实验报告
红细胞的渗透脆性实验报告红细胞的渗透脆性实验报告引言：红细胞是人体血液中的重要组成部分，具有运输氧气和二氧化碳的功能。
红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。
本实验旨在通过测量红细胞在不同渗透压下的溶血程度，来评估红细胞的渗透脆性。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 新鲜采集的人体全血样本- 生理盐水- 不同渗透压的溶液（0.3%，0.6%，0.9%，1.2% NaCl溶液）2. 实验方法：1. 将采集的全血样本离心，分离出红细胞。
2. 用生理盐水洗涤红细胞，去除血浆和其他细胞成分。
3. 将红细胞悬液分成若干等份。
4. 在不同的试管中，分别加入不同浓度的NaCl溶液和红细胞悬液，形成不同渗透压的溶液。
5. 将试管放入恒温水浴中，保持温度恒定。
6. 按照设定的时间，取出试管，离心沉淀红细胞。
7. 通过测量上清液的吸光度，确定红细胞的溶血程度。
实验结果与讨论：在本实验中，我们选取了不同浓度的NaCl溶液，以模拟不同渗透压环境下红细胞的受损程度。
通过测量上清液的吸光度，我们可以得到红细胞的溶血程度。
实验结果显示，随着NaCl溶液浓度的增加，红细胞的溶血程度也逐渐增加。
当NaCl溶液浓度为0.3%时，红细胞的溶血程度较低，吸光度较小。
随着溶液浓度的增加，红细胞的溶血程度逐渐增加，吸光度也随之增大。
当NaCl溶液浓度达到1.2%时，红细胞的溶血程度最高，吸光度最大。
这一结果表明，红细胞在高渗透压环境下容易发生溶血。
红细胞的渗透脆性受到外界环境的影响，当渗透压超过一定阈值时，红细胞的膜结构受到破坏，导致红细胞溶解释放出血红蛋白。
红细胞的渗透脆性与人体健康状况密切相关。
一些疾病，如贫血和遗传性溶血性贫血等，会导致红细胞的渗透脆性增加。
此外，一些药物和化学物质也可能对红细胞的渗透脆性产生影响。
因此，通过测量红细胞的渗透脆性，可以为临床诊断和治疗提供一定的参考。
结论：红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。
红细胞渗透脆性实验报告
红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验是一项常见的生物学实验，用于评估红细胞的脆性程度。
本次实验旨在了解红细胞在不同渗透压条件下的渗透脆性，并探讨其与细胞膜完整性的关系。
实验材料和方法：1. 实验材料：新鲜采集的人类全血、生理盐水、不同浓度的高渗溶液（如5%、10%、15%的NaCl溶液）。
2. 实验步骤：a. 将采集的全血分装到离心管中，并在4℃下离心10分钟，以分离红细胞。
b. 轻轻吸取上清液，将红细胞沉淀洗涤3次，每次用生理盐水洗涤。
c. 将洗涤后的红细胞与不同浓度的高渗溶液混合，制备一系列不同渗透压条件下的红细胞悬液。
d. 将悬液置于37℃恒温水浴中孵育30分钟。
e. 孵育结束后，离心悬液，观察上清液的颜色和透明度。
实验结果：根据实验结果观察，可以发现不同浓度的高渗溶液对红细胞的渗透脆性有不同的影响。
当高渗溶液的浓度较低（如5% NaCl溶液）时，红细胞悬液的上清液呈现浅黄色，透明度较高，说明红细胞的渗透脆性较低，细胞膜相对完整。
而当高渗溶液的浓度逐渐增加（如10%、15% NaCl溶液），红细胞悬液的上清液逐渐变深，透明度降低，说明红细胞的渗透脆性增加，细胞膜受损程度加剧。
实验讨论：红细胞的渗透脆性与细胞膜完整性密切相关。
正常情况下，红细胞细胞膜由磷脂双分子层和蛋白质组成，具有较高的弹性和稳定性。
当红细胞暴露于高渗溶液中时，溶液中的溶质会通过渗透作用进入红细胞内部，导致细胞内外渗透压差增大。
当渗透压差超过红细胞膜的承受能力时，细胞膜可能发生破裂或变形，导致红细胞渗透脆性增加。
实验结果表明，高渗溶液的浓度越高，红细胞的渗透脆性越大。
这是因为高渗溶液中的溶质浓度较高，渗透压差增大，红细胞内部水分向溶液中渗透，细胞体积收缩，细胞膜受到拉力的作用，从而增加了细胞膜的破裂风险。
此外，红细胞的渗透脆性还受到其他因素的影响，如温度、pH值等。
在实验中，我们将红细胞悬液置于37℃恒温水浴中孵育，这是因为温度的升高可以加速分子运动，增加红细胞与溶液之间的分子碰撞，进一步促进渗透作用。
红细胞渗透脆性试验
「参考值」开始溶血：0.42%～0.46%氯化钠溶液完全溶血：0.28%～0.32%氯化钠溶液「临床意义」红细胞在低渗盐水中，水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。
本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。
红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度有关，厚度越大，膜面积与体积比值越小，则渗透脆性越大。
1.红细胞脆性增加遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。
2.红细胞脆性减低见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。
缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等。
生理学实验教案——红细胞的渗透脆性
红细胞的渗透脆性一、实验目的及原理目的：测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。
原理：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，至于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40％~0.45％ NaCl溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30％~0.35％ NaCl溶液）。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。
二、实验准备1.实验对象：家兔2.实验药品：1％氯化钠、蒸馏水3.实验器材：5ml试管10支、2ml滴管2支、5ml注射器、试管架、棉签4.环境：安静的实验室三、实验学时1学时四、实验方法1.低渗盐溶液的配制取试管10支，洗净烤干，编号后依次排列于试管架上，参照下图向各试管中加入1％ NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2ml。
2.采血从家兔颈总动脉取血2ml，立即向每个试管各加血液1滴，轻摇试管，使血液与盐溶液充分混合。
静置30分钟。
3.实验观察按各试管液体颜色和透明度判断是否溶血、部分溶血或完全溶血。
①未发生溶血试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。
②部分溶血试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，表示红细胞部分溶解，最先出现部分溶血的盐溶液为红细胞的最大脆性（即最小抵抗力）。
③完全溶血试管内溶液呈透明红色，管底无红细胞，说明红细胞全部破裂。
最先出现完全溶血的盐溶液为红细胞的最小脆性（即最大抵抗力）。
五、实验结果认真完成实验，将实验结果记录于下表。
红细胞的渗透脆性观察项目试管编号未发生溶血部分溶血完全溶血六、思考1.什么是红细胞的渗透脆性？红细胞的渗透脆性一般是指红细胞，在低渗溶液中发生溶血的性能，称为渗透脆性。
红细胞渗透脆性实验报告
红细胞渗透脆性实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过对红细胞在不同渗透压下的渗透脆性进行观察和分析，探究红细胞在不同环境条件下的渗透特性，为进一步研究红细胞的生理功能提供实验数据支持。
二、实验原理。
红细胞在渗透压不同的环境中，会发生渗透，当渗透压超过一定范围时，红细胞会发生溶解或破裂现象，这种现象称为渗透脆性。
通过观察红细胞在不同渗透压下的渗透脆性变化，可以了解红细胞的渗透调节能力。
三、实验材料和方法。
1. 实验材料，新鲜采集的血液样本、生理盐水、不同浓度的葡萄糖溶液、显微镜、玻璃片、封片剂等。
2. 实验方法：a. 取适量的血液样本置于离心管中，离心800转/分，将上清血漆吸去。
b. 取一定量的红细胞悬液加入不同浓度的葡萄糖溶液中，制备不同渗透压的试验液。
c. 取一滴制备好的红细胞悬液滴于玻璃片上，加一滴显微镜液，覆盖玻璃片，用封片剂封片。
d. 在显微镜下观察每种试验液中红细胞的形态变化，记录观察结果。
四、实验结果。
在不同浓度的葡萄糖溶液中观察红细胞的渗透脆性变化，得到如下实验结果：1. 在低渗透压条件下，红细胞呈现正常的形态和结构，无明显变化。
2. 随着葡萄糖溶液浓度的增加，红细胞开始出现不同程度的凸起和溶解现象。
3. 在高渗透压条件下，部分红细胞发生破裂现象，出现溶血现象。
五、实验分析。
通过实验结果可以看出，红细胞在不同渗透压下呈现出不同的渗透脆性。
在低渗透压条件下，红细胞能够维持正常的形态和结构，但随着渗透压的增加，红细胞的渗透脆性增强，出现了凸起、溶解甚至溶血的现象。
这说明红细胞对外界渗透压的调节能力有限，当渗透压超过一定范围时，红细胞会发生破裂。
六、实验结论。
红细胞的渗透脆性与外界渗透压密切相关，渗透压增加会导致红细胞的渗透脆性增强，最终导致红细胞的溶解和破裂。
这一结论对于进一步研究红细胞的生理功能和疾病诊断具有重要意义。
七、实验注意事项。
1. 实验中要注意操作的无菌和规范，避免外界细菌的污染。
家兔抗凝全血分光光度法检测红细胞渗透脆性
⑤结果计算 溶血百分率 =A1/A0*100； 与低渗盐水溶血率相比的相对比率 = 药液溶血百分率 / 低渗盐水溶血百分率。
1.3.3 胞磷胆碱钠注射液加入量的考察[5] 选 取济南 利民 制药责 任有 限公司（使 用国 产 原料 ，且 添 加影响渗透压的辅料），和齐鲁齐鲁制药有限公司（使用进口 原料，且未添加影响渗透压的辅料）两个具有代表性厂家的 胞磷胆碱钠注射液进行加入量的考察。考察方法：两个生产 厂家各准备 6 只试管，预加入 4 ml0.4 %盐水，然后分别依 次加入 125 mg/mL 的胞 磷胆 碱钠溶 液 0.1 ml、0.2 ml、0.3 ml、0.4 ml、0.5 ml、0.6 ml，随后分别依次加入 0.1 ml 肝素抗 凝的家兔全血，放置于室温环境 2 h，以 4 200 rpm 速度离心 15 min，以蒸馏水调零后，取上清液于波长 545 nm 处测定吸
(苏制)；肝素(1 000 U/ml)。 1.2 动物
大耳家兔若干只,体重 2.5 kg±0.5 kg，雌雄兼用。 1.3 方法
1.3.1 家兔抗凝全血制备：抽取静脉血适量,放入含肝素 抗凝剂的管内即得。
1.3.2 0.4 %生理盐水的配制：取 200 ml0.9 %生理盐 水，加双蒸水 250 ml 摇匀即得[4]。
摘 要 目的：建立一种操作简单的红细胞脆性试验定量方法，进而利用建立的方法检定胞磷胆碱钠注射液对红细胞脆性
影响是否超出正常范围。方法：45 nm 波长下分别测定红细胞在加有一系列不同量的两种质量明显差异的胞磷胆碱注射液的
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生理学实验设计
————分光光度法测定红细胞渗透脆性
分光光度法测定红细胞渗透脆性
红细胞膜，有人称为鬼影(ghost)，是一种由磷脂、非酰化的胆固醇和糖蛋白等组成膜脂质和主体、膜蛋白质(转运蛋白和表面抗原)与周围膜蛋白质(膜骨架中的收缩蛋白和肌动蛋白以及膜骨架依靠的锚蛋白)所组成。
这些成分要保证红细胞在120天寿命内50，000次通过“急流旋涡”仍能生存；要控制Na+和K+在细胞内的浓度，任何导致K+漏出增高超过Na+的漏入，均会导致细胞内单价阳离子和水分的丢失。
这些生理功能的完善与否，可用简单且明白的膜渗透脆性试验来了解。
传统的测定方法采用目测观察其溶血情况，观察需要静置几个小时且过程中不能晃动。
此法仅能观察到溶血的大致情况，不能量化红细胞破裂的程度。
本实验采用分光光度法精确测定红细胞在低渗氯化钠溶液中的溶血情况，本实验操作简单、准确可靠、时间短，能消除常规目测观察的主观误差。
【实验原理】
正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。
如环境渗透压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白，称之为溶血。
红细胞对低渗溶液有一定的抵抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。
【实验目的】
1、理解细胞外渗透压对维持细胞正常形态和功能的重要性。
2、掌握红细胞渗透脆性的实验原理。
3、采用分光光度法精确测定红细胞在低渗氯化钠溶液中的溶血情况。
【实验材料】
1、仪器与试剂
LDZ4-0.8离心机、722S可见分光光度计、维生素C注射液0.5g/ml、桔梗煎剂0.16g/ml、20％氨基甲酸乙酯、肝素（1000U、ml）。
2、动物
家兔，体重（2.5±0.5）kg，雌雄兼用。
【实验操作】
1、不同浓度低渗氯化钠溶液的配置
取口径相同、清洁干净的小试管做好编号，制成不同浓度的低渗盐溶液，每管总量为2.5ml，第14管为蒸馏水。
具体见表一。
Tab 1 Preparation of different concentrations of hypotonic NaCl solution
试管编号1％氯化钠（ml）蒸馏水（ml）氯化钠浓度（％）
1 1.7 0.8 0.68
2 1.6 0.9 0.64
3 1.5 1.0 0.60
4 1.4 1.1 0.56
5 1.3 1.2 0.52
6 1.2 1.3 0.48
7 1.1 1.4 0.44
8 1.0 1.5 0.40
9 0.9 1.6 0.36
10 0.8 1.7 0.32
11 0.7 1.8 0.28
12 0.6 1.9 0.24
13 2.25 0.25 0.90
14 0 2.5 0
2、最大吸收波长的测定
取14管加入0.1毫升血液，轻轻颠倒混匀5分钟，3000r/min 离心10分钟，取上清液至比色皿中，以13管为空白对照，在722S 可见分光光度计上扫描，测得其最大吸收波长为535nm。
3、红细胞在不同浓度低渗氯化钠溶液中溶血率的测定
用20％氨基甲酸乙酯0.75--1.0g/kg麻醉家兔后注射肝素。
从耳缘静脉取血，依次向14支试管内各加0.1毫升血液，轻轻颠倒混匀5分钟，置入干燥离心管中以3000r/min离心10分钟，取上清液在光度计545nm波长处检测。
用13管生理盐水的上清液调零，测其他每管吸光度，分别计算出1到12管的溶血率：溶血率＝样品吸光
度÷最大溶血吸光度×100％。
4、桔梗煎剂、维生素C对红细胞渗透脆性的影响
取血方法同上，依次向14支试管内各加0.1毫升血液后，用加样器加入50微升桔梗煎剂或者维生素C，用上述相同方法分别测定各管溶血率。
5、统计结果
计算出每管平均溶血率，与目测法的结果进行比较。
【实验预期结果】
1、不同浓度低渗氯化钠溶液对红细胞渗透脆性的影响
常规目测法1—6管内红细胞肉眼观察无溶血，测其溶血率在9％以下，表明溶血程度很低；7—9管内红细胞肉眼观察部分溶血，测其溶血率在30％—67％，表明有部分溶血；9—12管内红细胞肉眼观察完全溶血，结果见表二。
溶血率的测量结果与目测法观察结果一致。
2、桔梗煎剂、维生素C对红细胞渗透脆性的影响
在加入桔梗煎剂后家兔红细胞对低渗溶液抵抗力降低，0.68％—0.24%NaCl溶液内红细胞的溶血率均在89%—99%，溶血程度很高，说
明红细胞大多破裂溶解。
在加入维生素C后家兔红细胞对低渗溶液抵抗力增大，0.68％—0.24%NaCl溶液内红细胞的溶血率1%—30%，溶血程度较低，说明红细胞破裂明显减少，见图一。
Fig 1 effect of campanulaceae decoction and vitamin C on red blood cell osmotic fragility 【实验讨论】
红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，其大小可用氯化钠溶液浓度来表示。
将血液加入不同浓度的低渗氯化钠溶液中后，开始出现溶血现象的溶液浓度为该血液红细胞最小抵抗力，出现完全溶血现象的溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力。
前者代表最大脆性，后者代表最小脆性。
本实验采用分光光度计测量法代替肉眼观察法，通过计算溶血率分析了家兔红细胞在不同渗透压的渗透脆性，以量化指标客观地判断溶血情况。
选择545nm波长为入射光，此处波长吸光系数高，测定的灵敏度高。
此外，在加样中，改用微量加样器加样，加样准确。
正常红细胞为双凹盘形，在低渗盐水中吸水膨胀的适应性大(可增加70％的体积而不破裂)，遗传性球形红细胞增多症(HS)等红细胞的S／V比率小，对低渗盐水的适应性小(脆性大)，所以红细胞渗透跪性试验是检测HS最有用的方法，当红细胞混悬于不同浓度的NaCl 低渗溶液时，正常红细胞于O．4％一0．44％NaCl浓度时开始溶血，于o．32％一O．36％NaCl浓度时完全溶血。
HS病人的红细胞大多于0．50％一0．75％NaCl时开始溶血，于0．4％NaCl浓度时完全溶血，患者红细胞渗透脆性试验与正常对照组相比提高0.04％(NaCl液)以上即为阳性，还可见于遗传性椭圆形红细胞增多症，某些伴有球形红细胞增多的自身免疫性溶血性贫血。
【非预期结果及可能原因分析】
1、实验因素：
血液放置过久；混匀血液或向试管内滴加血液时用力过大；肝素抗凝时用量过多；玻璃器皿未干燥等。
2、溶血程度不随NaCl溶液浓度改变而有规律地变化原因：
各试管加血量不准确；试管编号不准；溶液浓度配制不准等。
【临床意义】
红细胞渗透脆性增加，见于遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血和遗传性椭圆形细胞增多症。
红细胞渗透脆性减低，见于缺铁性贫血、海洋性贫血、地中海贫血、血红蛋白C、D、E病、肝脏疾病以及阻塞性黄疽等。
【参考文献】
1、姚泰，《生理学》，第二版。
人民卫生出版社，2005，79—84。
2、徐丽萍，《桔梗皂苷提取方法的比较》，食品工业科技，2007，133—134。
3、张义兵，田会，李建民等《离心机与离心次数对MAP洗涤红细胞脆性极其损伤的影响》，河北医药，2005，386—389
4、齐晓娟，彭如心等《维生素C增加兔血红细胞渗透抵抗性》，中国微循环，1999，142—143。