石斛组织培养及快繁技术
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖
有效地 挽救 这一濒 临 灭绝 的珍 稀物 种 。
原 球 茎 分别 接 种 于 （ 、 ４） （ 、 ６） ３） （ 、 ５） （ 、
１ 材料 与方 法
１１ 试 验 材 料 ，
（ 培养基上 ， ３） 培养基 ６ 天后原球茎增 ７） （ 号 ０
铁皮石斛是附生植物 ， 野生状态在多湿森林 中的树上和林下岩石上 ， 特别是半 阴半阳的附有 苔藓植物的石灰岩上和树上 ， 以驯化栽培时采 所 用地栽方法是不能成活 的 ，必须采用适合 的基
０ ＋香蕉 泥 ２％。 ． ５ ０
１ 培 养条件 ． ４
上述培养基均加蔗糖 ３ ％、琼脂 ０ ％、Ｈ值 ． ｐ ７ ５、 ． 培养温度 ２ ￣左 右 、 ８ ５Ｃ 光照 １ ２小时 ／ 光 照 天、 强度 １０￣ ００ 、 ５ ０ ２０ ￣ 湿度 ７ ％。 ０
将 增 殖后 的胚 状 体 转 到 （ ） ８ Байду номын сангаас壮苗 ， 可提 高
１ ． 子萌发 培养 基 。（）Ｓ （）／ ＭＳ ． １种 ３ １Ｍ ， １ 。 ２ ２ １． ．２原球 茎增 殖 培养 基 。（）／ ＋ Ｍ２ ％（Ｍ ３ ３ｌ ＭＳ Ｃ ０ Ｃ ２ 为 椰 汁） ４１ ＋ 一 Ａ ０２ｍｇ （ 位 下 同） ，（）／ ＭＳ ６ Ｂ ． ／ 单 ２ Ｌ
２ 生长 与分化 情况
２１ 无 茵苗的获得 ．
质， 摸拟野生环境栽培。 移栽前 ， 先将试 管苗 练苗 ｌ ， 周 出瓶 时注意 不要伤及根茎部 ， 用流水洗去根部附着的培养基
后 ， 阴凉通风处晾根半天 ， 在 栽入盛锯木屑和塘 基兰石的穴盘中 ， 或者混合基质 （ 份 陶粒 ＋ 份 ２ １ 腐 叶 土 ＋ 份树 皮 ＋ 份锯 木 屑 ）（ 转第 １ １ １ ，下 ３页） ⑨
铁皮石斛组织培养快繁技术
＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・Ｌ ＋ ＮＡＡ ０ ． １ ｍｇ・Ｌ － 。 ， 不 加 活
（ １ ） 继代培养基为 ： ① ＭＳ ＋Ｂ Ａ２ ． ０ ｍｇ・Ｌ
陈碧华 张 娟 范辉 华 李乾振
（ 福建省林业科学研 究院 福州 ３ ５ ０ ０ １ ２ ）
铁皮 石斛 Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍｏ ｆ ｆ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ ， 又 叫黑 节草 、
（ ２ ）生 根 基 本 培 养 基 采 用 ： ＭＳ 、１ ／ ２ ＭＳ 、 １ ／ ４ ＭＳ ， 附力 ⅡＢ Ａ０ ． ２ ｍｇ・ Ｌ 一 、 ＮＡＡ１ ． ０ ｍｇ・ Ｌ 一 。
云南 铁皮 、 铁皮兰， 是 兰科 Ｏ ｒ ｃ ｈ ｉ ｄ ａ ｃ ｅ ａ ｅ多年 生 附 生 草本植物 ， 是 一种 珍贵 的野 生药 用 植物 。石 斛具 有 抗肿瘤 、 抗衰老、 增 强人 体 免 疫力 和扩 张 血 管 的作 用 。铁皮石斛 种子 自然 条件 下 繁殖 力低 ， 仅 靠分 株
１ ． １ 试 验材 料
将 无菌瓶 苗 生长正 常 的茎 芽 切下 ， 转 入继 代增 殖培养 基 ， 每次 培 养 ６ ０天 ， 重 复 ３次 ， 共培养 １ ８ ０
天， 观 察茎 芽增殖 生长状 况 ， 结果见 表 １ 。 表 １ 可 以看 出 ： 连续 采 用 ＭＳ为基 本 培 养 基 ， 导致 下部 叶片 轻 度 黄 化 ， 生长迟缓 ； 采 用 Ｎ６为 基
ｃ ｍ， 达 到组 培 工 厂 化 育 苗 水 平 。在 此 基 础 上 增 加 ０ ． ５ ｇ・ Ｌ 活性 炭 ， 茎 芽 增 殖倍 数 只 达 到 ２ ． ９ ， 但
铁皮石斛组培快繁技术的研究分析
铁皮石斛组培快繁技术的研究分析摘要：铁皮石斛的种子极为细小、无胚乳，自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发，因此自然繁殖率很低，不易获得实生苗；而传统的分株、杆插等方式的繁殖率极低，加上人为的过度采挖和破坏生境，其资源已濒临灭绝，被国家列为重点保护的药用植物之一。
文章基于此，对铁皮石斛组培快繁技术进行综述性分析。
关键词：铁皮石斛；组培快繁；技术研究植物组织培养技术是20世纪初，以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术。
植物组织培养是指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。
目前，植物组织培养技术己经在科学研究以及实际生产上得到非常广泛的应用。
该技术不仅具有缩短育种年限、加快繁殖过程，改良品质，节省空间，减少劳力，并可全年进行生产，不受季节、气候等自然条件限制等特点，而且组培苗的体积不大，方便运输和资源交流。
在促进农林业现代化方面展现出了巨大的经济、社会和生态效益，被认为是一项很有潜力的高新技术。
铁皮石斛种子细如粉尘，一个果实内所含种子达100万粒之多，由于缺乏胚乳，种子需与真菌共生才能正常萌发，自然条件下萌发率非常低。
因此，虽然分布广，但生活环境狭窄，产量还不能满足目前药用需求，利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。
铁皮石斛的组织培养中有几个关键的时期：原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。
根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件，我国研究人员在铁皮石斛组培快繁技术方面的研究取得了一定的进展。
在20世纪70年代谭文澄等就进行铁皮石斛组织培养研究并获得完整植株；何静波等尝试通过种胚培养繁殖铁皮石斛；左春芳等于1985年开始研究铁皮石斛的组织培养，并取得进展。
1外植体的选择在植物组织培养中，外植体的选择是十分关键的因素，不同的取材部位和时期，培养的结果也不一样。
目前，诱导铁皮石斛原球茎采用的外植体主要有种子种子、无菌苗幼苗茎段、根尖、不定芽、幼叶，及人工种子等。
石斛组织培养及快繁技术
石斛组织培养及快繁技术石斛兰是近几年在我国插花市场上流行的花卉，种类繁多，花形花姿优美，色彩艳丽，花期较长，具有较高的观赏价值。
由于其分株能力弱，繁殖系数低，繁殖速度慢，远远不能满足商品化生产的要求。
因此，组织培养和快繁技术是石斛商品化生产中重要的一个环节。
石斛属于兰科植物，通过不同的途径都可以形成完整的组培苗，以实现。
野生石斛的茎尖、茎段、叶片、种胚、鳞叶期原球茎、幼根以及根段等均可作为外植体，在适当条件和适当培养基中，就可诱导产生全能性的再生小植株。
但以嫩枝的茎尖、腋芽或茎节、花梗诱导成功的可能性较大，而正在生长的芽是最理想的外植体。
休眠芽也可用作外植体，但由于体积比较小，剥离较困难，生长也较慢。
一、无菌播种石斛兰的种子极为细小，胚胎发育不完全，所谓的胚实际上就是一团未分化的胚细胞，且无胚乳组织，在自然状态下发芽率极低，只有与兰菌共生才能少量发芽，成苗更难，因此不能像其他植物一样在大田或苗床上播种，只有在无菌的补充营养的人工培养基上，促进其萌发成苗。
1、种子的采收与播种应用于无菌播种的石斛兰的种子的果实以刚成熟但尚未开裂时效果较好，未成熟时能发芽，但发芽率略低，而如果果实成熟开裂，种子难以收集与消毒，且种子发芽力降低。
2、培养基的选择石斛兰的播种培养基多种多样，不同的品种的最适培养基不同，比较常用的基本培养基有MS、改良MS、Nistch、N6、RE等。
3、培养基的消毒由于培养基内有丰富营养物质，极适合细菌和真菌的繁殖，造成污染，影响组培的成功，因此培养基消毒是必不可少的一个环节。
消毒的方法一般有高温高压消毒和过滤消毒两种方法。
二、组织培养1、外植体的采集与灭菌采用花梗为外植体时，由于花梗较光滑，消毒相对容易，污染率较低。
采用花芽作外植体时，在花梗再长出、花朵未长成时效果最好。
2、培养基的选择和培养以石斛的播种培养为基本培养基再加入适量激素进行茎尖、节、花梗的组织培养均有成功的报道。
3、试管苗的移植一般来说，当石斛兰试管苗长出3～4片叶，与3～4条根，高约5cm～10cm后，才可移植于温室，由于在移栽过程中，要适应从无菌状态进入有菌自然状态，从光、温、湿稳定环境中进入不稳定的自然环境，从异养过渡到自养的过程。
铁皮石斛组培快繁技术实例分享 · 附配方
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物，是名贵的中药材。
本文在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛的再生体系，其研究结果可为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 材料与方法1.1 外植体材料及培养条件1.1.1 外植体选择实验材料为八成熟的铁皮石斛蒴果。
1.1.2 材料预处理及消毒将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后。
在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟，倒去酒精；再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基表面。
1.1.3 培养条件培养室温度为(25±2)℃，以日光灯为光源，光照强度为2000-2500lx，照光10小时/天。
2 结果与分析2.1 初代培养：种子的萌发与无菌材料的建立将铁皮石斛的未成熟种子接种在初代培养基（配方见文末，下同）上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。
这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。
此时，铁皮石斛无菌材料的建立即告完成，应该及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基或者生根壮苗培养基上进行培养。
2.2 继代增殖培养建立了铁皮石斛的无菌材料后，将原球茎转接到增殖培养基，培养90天，增殖系数非常高。
铁皮石斛的组织培养
铁皮石斛的组织培养作者：黄子聪来源：《农家科技下旬刊》2014年第09期摘要：铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，为传统名贵中药。
由于对生境要求十分苛刻，加之人为过分采收，现已濒临灭绝，已被列为“濒危珍稀植物”。
对铁皮石斛的组织培养及人工栽培进行研究，实现保护野生铁皮石斛资源的同时满足人们的消费需求，具有重要的现实意义。
关键词：铁皮石斛；组培快繁一、铁皮石斛组培培养（一）材料与方法1.供试材料供试材料：果荚：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的铁皮石斛单株进行授粉，获得果荚。
茎段：从浙江省购买回来的组培苗，栽种于温室大棚中，选择品质纯正的、生长健壮的、二年生的、具有20厘米以上的铁皮石斛，自上而下剪下15厘米左右，带回实验室，备用。
2.方法（1）消毒方法果荚的消毒方法：将生长了5个月的果荚用消毒的剪刀从植株上剪下，带到超净工作台下，用75%的酒精浸泡2分钟，然后用灭菌去离子水清洗两次，放在灭菌的空瓶中。
播种前，将要切开的部位及花朵着生位置在酒精灯下稍微过火，然后再将基切开，播种。
（2）种子无菌播种将灭菌的果荚在果荚蒂附近的位置上用灭菌的手术刀切开一个约1.5厘米的切口，然后直接将种子均匀地撒在培养基上。
放在培养架上进行光照培养。
培养基配方：Z0：MS+NAA0.1mg/L+土豆汁100g/L（3）原球茎的增殖及分化将转绿的原球茎转接到增殖分化培养基上，每瓶接种6个点，每个点5个原球茎，5瓶一个重复，设3次重复。
茎段的消毒方法：选取茎段特征明显的铁皮石斛单株，用消毒的剪刀从节间靠下的位置将优选单株剪下，然后将叶片摘除，在自来水下将表面的灰尘洗去。
接下来将茎段上的叶鞘撕掉，特别是底部与节相连接的位置要去干净，同时注意不要伤到休眠芽，再用洗洁精进行表面清洗，在自来水下将洗洁精清洗干净，带到超净工作台下，用75%酒精浸泡两分钟，期间不断地搅拌，再用灭菌去离子水清洗2两，切成每段3-5节，用0.1%升汞（加吐温20 2滴）浸泡9分钟，期间不断地搅拌，倒去升汞溶液，再用灭菌去离子水清洗6次，每次2分钟。
铁皮石斛的组织培养及快速繁殖
０ 前言
铁皮石斛 （ ｅｄ ｂ ｍ ｅ ｉ ｍ 系兰科石斛 Ｄ ｎｒ ｉ ａ ｄ ） ｏ ｕ ｄｕ 属多年生附生植物 ， 种子无胚乳需与某些真菌共
间有称其为“ 救命仙 草” 医学界称其为“ ； 药界大 熊猫 ” 由于资源 匮乏 ， ； 用途广泛 ， 价格 昂贵 曾被 植物界称为“ 植物界 的大熊猫” 。据资料报道 ， 现
在铁皮石斛的鲜株达到 ２００ ｋ 。为了保护 ０ ｇ
濒危植物 ， 迅速发展新 、 、 奇 特物种 。本试验取 材本地野生铁皮石斛 ， 运用植物组织培养快速繁
生才能萌发 ， 不能用种子进行繁殖…。而传统的
分株、 扦插等方式繁殖率很低 ， 生长速度缓慢 ， 加
上现在人为无节制 的采集和破坏 ， 自然资源 的蕴
Ｔｈ ｐ ｄ Ｐ ｏ ａ ａ ｉ ｎ ｏ ｎ ｒ ｂｕ ｃ ｎ ｉｕ ｅ Ｒａ ｉ ｒ ｐ ｇ ｔ ｆＤｅ ｄ ｏ ｉ ｍ ａ ｄｄ ｍ ｏ
Ｗ ａ１ ｅ ｎ ｌ ｎ Ｖｉ ｏ ｌ ｘ Ｌｉ ｄ ｔ ． ｉ ｒ
ＷＡ Ｇ Ｂ—ｉ， Ａ ｎｊｎ Ｎ ｉ ｎ Ｇ Ｉ － ｑ Ａ ｕ
Ａｂｔａ ｔＴ ｅｃｕｔ ｆ ｈ ｏｓ ｏｌ ｅｉｄ ｃｄｉ ｅｍ ｄｕ ｆ Ｓ＋ ｓ ｃ ：ｈ ｌｓ ｒ ｏｔ ｃｕｄｂ ｕ ｅ ｔ ｅ ｉｍ ｏ ｒ ｅｏ ｓ ｎ ｎｈ Ｍ ６一Ｂ ． ｓ Ｌ一 ｓ Ａ Ｏ ５ｍ ／ ２ｍ ／ Ｌ＋Ｎ Ａ ０ ２ ｓ Ｌ－ ． ／ Ｌ＆ ２ ４一Ｄ ０ ２ ｓ Ｌ ａ ｅｅｐａｔ ｏ ｅｄｏｉｍ ｃｎ ｉｕ Ａ ．５ ｍ ／ ０ ４ ｍｓ ． ． ５ｍ ／ ．ｓ ｈ ｘ ｌ ｓ ｆ ｎ ｒｂ ａｄｄ ｍ ｔ ｎ Ｄ ｕ
铁皮石斛 的组织培养及快速繁殖
王碧琴 盖安俊 ，
（． Ｉ江西省科学院生物资源研究所， 江西 南昌 ３０２ ；． ３０９２南昌工程学院， 江西 南昌 ３０２） ３０９
泼墨石斛高位芽组培快繁体系的建立
泼墨石斛高位芽组培快繁体系的建立一、基本介绍泼墨石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）属兰科植物，是中国南北药用植物中的佼佼者，其存在的历史可追溯至3千多年前的商周时期并流传至今。
泼墨石斛含有丰富的多糖、黄酮、游离氨基酸、游离脯氨酸等营养成分，具有明显的保健功能，包括调节免疫功能、抗疲劳、降血压、降血脂等，广泛应用于人类健康领域。
然而，天然采摘的泼墨石斛的供应量很难满足大众需求，同时也对野生泼墨石斛的保护提出了巨大压力。
因此，人们不断探索以组织培养技术为基础的高效繁殖方法。
其中，以高位芽独立体系建立为核心技术，快速繁殖泼墨石斛成育苗正逐渐成为主流。
二、组培条件优化1.组织培养基的选择在泼墨石斛的繁殖过程中，选择合适的组培基质是至关重要的。
常用的组培基质包括MS培养基、B5培养基、KN培养基等。
在实验中，以MS基本培养基为基础，添加0.3mg/L TDZ、0.1 mg/L NAA、30 g/L 果糖、6 g/L琼脂糖等成分，经过多次筛选并进行试验改良，找到最适合泼墨石斛高位芽快速繁殖的培养基，其成分如下：成份量（mg/L）NH4NO3 1650CaCl2•6H2O 440MgSO4•7H2O 370KH2PO4 170KNO3 1900H3BO3 6.2KI 0.83Na2MoO4•2H2O 0.25Sucrose 30 g/LTDZ 0.3 mg/LAgar 6 g/LpH5.82.高位芽的制备从生长旺盛的泼墨石斛枝条中取下高位芽，进行消毒（70%酒精涂抹3min，0.1%汞豆蔻酚液浸泡10 min，接着冲洗三次）后切割成大小相近的小块，并置于无菌操作下的工作台上利用离心机高速离心2分钟，以去除多余水分。
3.生长条件的设定在进行培养前，需要注意一些生长环境条件的设定。
泼墨石斛的生长温度适宜在25℃左右，不要低于20℃或高于35℃。
光照需要进行适度控制，一般室内遮光栽培比较适宜。
铁皮石斛组培技术介绍
铁皮石斛组培技术介绍铁皮石斛的组织培养技术，大都以茎段、根尖、原球茎、茎尖和种胚等为外植体。
除了固体培养外，近几年来还出现了铁皮石斛液体悬浮培养。
一、铁皮石斛组培技术（1）茎段培养1.培养条件2.取材与消毒从铁皮石斛植株上切下长2～5cm的幼嫩茎段，在流水下冲洗，用刷子蘸少许洗衣粉水溶液轻轻刷洗，并经自来水充分洗净。
在超净工作台上将茎段放置在75%的酒精中消毒30s后，再用0.1%的HgClz 水溶液浸泡8～10min，无菌水冲洗5～6次。
3.诱导培养用解剖刀将铁皮石斛的幼嫩茎段切下，接种在诱导培养基①中进行培养。
15～20天后，外植体开始萌动，茎段膨大，切面及顶部组织形成疏松组织。
继续培养20天后，转入培养基②中，切面及顶部膨大组织的表面形成凹凸不平的颗粒物，随着培养时间的延长，颗粒物长大形成直径1～2mm的类原球茎颗粒物。
4.增殖培养将诱导形成的原球茎转入到增殖培养基中，原球茎增殖速度很快，增殖倍数可达3～4倍，同时部分原球茎开始分化出芽点并长出1～2片小叶，原球茎的增殖与芽分化同时进行。
5.生根培养待增殖芽数量较多时，将高1～2cm、带有2～3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养。
培养30天左右，基部开始出现2～3条约1cm长的白色根，随后逐渐伸长，生根率达到90%以上。
6.出瓶苗的过渡管理当苗高3cm以上、具3～4片叶时，便可出瓶移栽。
移栽前，将生根瓶苗打开瓶盖，移至常温下炼苗7天，然后将瓶苗取出，洗去附着在根部的培养基，用0.01%的高锰酸钾溶液浸泡8～10min，栽种于已灭菌的碎树皮基质中(移栽前浇透水)，放置在遮光度50%～60%、湿度达80%以上的温室中，2 个月后，成活率达90%以上。
（2）种子培养(胚培养)取人工授粉的铁皮石斛果实，用75%的酒精表面消毒，30秒后再用0.1%升汞消毒8分钟，无菌水冲洗4—5次。
在无菌操作下，把果实切成0.1mm方块，接种到培养基上，每瓶3—5块。
铁皮石斛的组织培植
铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。
由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。
本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。
材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。
2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。
- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。
过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。
使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。
2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。
3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。
4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。
每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。
结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。
在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。
值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。
培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。
同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。
结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。
通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。
这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。
铁皮石斛的组织培养技术
铁皮石斛的组织培养技术简介铁皮石斛（Scientific name: Dendrobium officinale），是一种珍贵的药用植物，在中医药中有着悠久的历史和广泛应用。
铁皮石斛的组织培养技术是指利用无菌培养方法，通过细胞分裂和再生，培育大量优质的植株，以满足人们对铁皮石斛的需求。
本文将介绍铁皮石斛的组织培养技术的基本步骤和注意事项。
步骤1. 选择合适的外植体材料：铁皮石斛的外植体材料通常选取新鲜的茎段、叶片或花轴，并确保这些材料来自无病虫害的植株。
2. 表面消毒处理：将收集到的外植体材料进行表面消毒处理，常用的消毒剂包括漂白粉和酒精。
消毒时间和浓度应根据不同的外植体材料进行调整。
3. 建立无菌培养基：制备含有适当激素和营养物质的无菌培养基。
常用的基本培养基是MS培养基和B5培养基。
可以根据实验需要调整培养基的成分和浓度。
4. 培养和增殖：将表面消毒后的外植体材料放入含有适当培养基的培养瓶中，并置于暗室或恒温箱中进行培养。
光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要因素，应根据植物的生长性进行调控。
5. 分化和再生：通过植物激素的投入和适当调控培养条件，促使外植体材料分化和再生成优质的铁皮石斛植株。
这一步骤往往需要持续几个月到数年的时间。
注意事项1. 保持无菌条件：组织培养需要在无菌条件下进行，以避免外源病原微生物的污染。
实验器具、培养基和操作环境必须经过严格的消毒和无菌处理。
2. 控制培养基成分和浓度：培养基的成分和浓度对植物的生长和分化起着重要的影响，需要根据不同的外植体材料和培养阶段进行合理的调整。
3. 确保适当的光照和温度：铁皮石斛对光照和温度有一定的要求，光照不足或温度过高都会影响植物的生长和分化。
应根据植物的生理特性，设置合适的光照和温度条件。
4. 定期检查和处理：组织培养过程中，应定期检查植株的生长状态和培养基的污染情况，并采取适当的措施处理。
需要及时除去培养瓶内的污染物，以保证植株的健康生长。
铁皮石斛的种植方法及繁殖
铁皮石斛的种植方法及繁殖铁皮石斛是一种多年生攀援灌木，原产于岭南一带，常见于许多我国的园林庭院，因其叶片表面的色泽独特，形状似豆荚而又有石状的特点，所以又被叫做石斛或铁皮石斛。
铁皮石斛在园林中可以做绿化点缀，是一种被广泛种植的灌木植物，可以改善空气质量，有利于环境美化。
一、种植方法：1、地块选择：铁皮石斛耐阴性较强，最好选择地势较高的地块种植，以获得较好的通风状况以及日照充足的条件，可以提高植物的生长发育环境。
2、准备土壤：铁皮石斛喜欢肥沃，排水性好的土壤，可以在种植前，提前将土壤施用适量的有机肥料，以改善土壤质地，促进植物生长发育。
3、种植方法：铁皮石斛有花、果、叶三个部位，可以选择不同部位种植，可以在秋季种植，也可以在春季种植，在选择好种植位置后，将植物挖进植坑中，平衡植株的高度，待根系有一定的发育以后，再对土壤进行深耕，保证湿润，这样可以加速植物的生长发育。
二、繁殖方法：1、嫁接繁殖：铁皮石斛嫁接繁殖比较常见，嫁接的效果比较好，嫁接的方法有横向嫁接、角向嫁接或植物茎嫁接等，可以根据植物的需求来选择嫁接的方式，并将嫁接点涂抹树脂，以保证嫁接点不容易脱落。
2、分类繁殖：铁皮石斛可以选择将植株拆分为2-3个地段，然后挖出土壤，将植株拆分为几部分，再将植株放回原地即可，只需要定期浇水，植株就会发芽繁殖。
三、养护方法：1、浇水：为了保证植物的正常生长发育，应定期根据季节的不同，适当浇水，但不能过多的浇水，也不能浇水过于频繁，以免引起植物生长过快，出现逆生等现象。
2、肥料施用：为了保证植物有良好的生长状态，可以在春季和秋季适当施用少量的有机肥料，以满足植物的营养需求，从而达到维持植物叶片的新鲜度以及营养的需求。
总的来说，铁皮石斛要想获得较好的成果，必须要注意在种植、繁殖以及养护方面的关键点，这样才能让植物生长发育的更好，达到环境美化的目的。
铁皮石斛组培快繁技术研究进展
［ ４］郑丹 ．烤烟香气物 质的成 分及其影 响 因素 研究进 展 ［ ］ ．江 Ｊ 西农业学报 ，２０ ０ ９，２ ３ ：２ １（ ） ３—２ ． ６
［ ］任永浩 ，陈建军 ，马常力 ． ５ 不同根 际 ｐ Ｈ下烤烟 香气化学 成分
的研究 ［ ］．华南农业 大学学 报 ，１９ Ｊ ９４，１ （ ） ２ ５ １ ：１７—１２ ３． ［ ］ 中国烟草总公司郑州烟草研究院 ，中国农业科学院资源与农 业 ６ 区划研究所 ．中国烟草种植 区划 图册 ［ Ｍ］．陕西 ：西安 地图
２ 基本培养基及培养条件
铁 皮石 斛 组 织 培 养 主要 采 用 ＭＳ 、改 良 ＭＳ和 Ｂ ｜． １Ｈ为基 本培 养基 ；适 宜 光照 周期 为 １ ／ ｌ］ Ｉ ２ｈｄ ； １ ７
温度 以 （ ５±１ ℃最 适合 原球 茎 的生 长繁 殖 ，较 低 ２ ）
种源的重要基础。关于铁皮石斛 的组培快繁技术 已
参 考文 献 ：
［ ］ 白智 勇．１９ １ ９３～１９ ９ ８年世界 各 国烟 叶产量统 计 ［ ］．上 海烟 Ｊ
叶 ，１９ （ ） ５— ７ ９ ９ ２ ：５ ５ ．
出 版 社 ，２ ０ ． ０９
［ ］ 王丹林 ．不 同育 苗方式对 烟株生 长发育 的影 响 ［ ］．耕 作与 ７ Ｊ
［２ １］黄光荣 ． 同轮作方式对烤烟病虫害及产量品质的影响 ［］． 不 Ｊ
河 南 农 业 科 学 ，２０ （ ） ０— ２ ０ ９ ５ ：４ ４ ．
（ 责任 编辑 ：柯 文辉 ）
２ ６
琅 舛妓
２０ 第１ ０年 期 １
箱 ｔ 琅 舛艘
２ ５
铁 皮 石 斛 组培 快 繁 技 术研 究 进展
铁皮石斛组织培养与快速繁殖(简报)
＋ 香蕉汁 ２ ％；（ ） ／ ０ １ １ ＭＳ －Ａ２ ＋ Ａ ．＋ ０ ２ ＋６ ． Ｎ Ａ ０ 香蕉汁 ２％；壮苗培养基（１ ＭＳ＋ Ｂ ０ ５ ０ １） 香蕉汁 ２ ％＋ ０ ０ ２ ｇ ／ Ｌ白糖 ； １） （２ ＭＳ＋ 蕉 汁 ２ ％ ＋３ ｍ 白糖 ； １） 香 ０ ０ｇ （３ ＭＳ＋ 香蕉 汁 ２ ％ ＋ＮＡ ．；１） ０ Ａ０２ （４ ＭＳ＋ 香蕉 汁 ２％ ０ ＋ Ａ ． （５ ＭＳ 香蕉汁 １％；１） ＋ Ｎ Ａ ０ ；１） ＋ ５ ０ （ ＭＳ 香蕉汁 １％；１） ＋ ６ ５ （７ ＭＳ 香蕉汁 ２ ％； ０ 生根培养基（ ） ／ １ １ ＭＳ ８ ２ ＋Ｎ Ａ ０ ＋ Ａ ５ 香蕉汁 １％。上述培养基中的 １ ＭＳ大量元素为 ＭＳ的 ０ 倍 ，其他成分不变，未加 白糖 ． ５ ／ ２ ． ５
果 实切 开一小 口，让 种子均 匀撒播在 培养基 上培 养 。
３ ． ２获得无茵苗 将经过处理的种子接种到萌发培养基（ 一 ４上 ， １ （） 先在暗培养箱中培养 ７ ， ） 再转入光 ｄ 照条件下培养 ，１ 后种子变绿 （ １ 胚开始萌发 ， ０ 后培养基（ ～ ３中的种子发育成原球茎 ， ０ ｄ 图 ）， ４ ｄ １ （） ） 三者无明显差异 ，而培养基（） ４上产生了很多分化芽。由此可知 ，加入一定浓度的马铃薯汁可以加速种 子萌发分化成小苗。 ３ ． ３原球茎的增殖与分化 原球茎分别接种于培养基（） （） ， ５、 ６ 上 培养 ４ 后 ， ０ ｄ 培养基（） ５ 原球茎分化成 整齐的小苗 （ ２ 图 ），培养基（ 的原球茎分化较少 ，由此可知 ，添加马铃薯提取物更有利于促进原球 ６ ） 茎分化。原球茎分别接种于（ ０ ） ７ ） ｏ培养基上 ，培养 ４ 后观察可知 ，培养基（ 、（ ） ０ ｄ ９ １ 原球茎增殖多 ， ） ０ 分化芽较为矮小；同时发现 ， 加入一定浓度的 Ｎ Ａ可以促进原球茎的分化。 Ａ 综合 以上试验结果初步确 定 ：最有利于铁皮石斛原球茎分化的培养基配方为 １ ＭＳ＋ ／ ２ 马铃薯汁 ２％＋ Ａ １ ０ Ｎ Ａ０ 。 ．
泼墨石斛高位芽组培快繁体系的建立
泼墨石斛高位芽组培快繁体系的建立泼墨石斛（Dendrobium officinale）是一种重要的中药材，具有抗疲劳、抗菌、抗肿瘤等药理作用。
由于野生资源日益减少，传统的繁育方式已经不能满足市场需求。
利用组织培养技术进行快速繁殖已经成为泼墨石斛育种的重要手段之一。
本文通过研究泼墨石斛高位芽的形成与快速繁殖，建立了一套有效的繁殖体系，为其种质资源的保护与利用提供了可行的技术支持。
选择泼墨石斛鲜嫩的茎段作为外植体材料。
经过消毒处理后，将茎段切割成三个节点的小段，然后将其置入含有不同浓度植物生长调节剂的培养基中。
通过试验，得出最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.01 mg/L。
在这个培养基中，茎段可以迅速发生增殖，并产生大量的高位芽。
通过研究不同干扰条件对高位芽生长的影响，找到了适合高位芽生长的最佳环境条件。
选择不同细胞培养盒（如维生素添加量不同的MS培养基、不同生长调节剂浓度的培养基等），对高位芽进行长期培养。
结果发现，维生素添加量为1/2 MS培养基对高位芽生长的影响最小，并且有更好的增殖效果。
细胞培养盒内的气体成分也对高位芽生长的影响很大。
添加适量的CO2可以提高高位芽的增殖率，而高浓度的CO2则会抑制高位芽生长。
为了提高高位芽的生根率，需要对生根诱导条件进行优化。
通过试验发现，生根培养需要在无激素培养基上进行。
在生根培养过程中，适量添加乙酸可增强生根效果。
光照强度和培养基pH值的调节也对生根效果有一定影响。
在试验中，光照强度为45-55μmol/m2/s、pH值为5.5-6.5的条件下，高位芽的生根率最高。
通过以上一系列的实验研究，建立了一套高位芽组培快速繁殖体系。
该体系具有操作简便、繁殖速度快、繁殖效果好的特点。
通过该体系，可以大规模培育泼墨石斛，提高其利用效率，为泼墨石斛的种质资源保护和种植业的发展提供了有力支撑。
铁皮石斛的组培快繁技术
铁皮石斛的组培快繁技术
1.植物简介
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是兰科石斛属多年生附生草本植物，为我国特有的名贵药材。
2.培养条件
增殖培养基：MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L；
生根培养基：MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。
pH调至5.8，培养温度21~25℃，光照1500lx，光照时间12h/d，环境湿度60%~80%。
3.材料与方法
选取生长旺盛、植株健壮的铁皮石斛无菌幼苗植株，以茎节为中心切下，节的上下各留0.5cm的茎段，接种于增殖培养基上，待苗子长至2~3cm时即可进行生根。
4.炼苗移栽
移栽前先将瓶苗移至炼苗房炼苗，慢慢适应自然环境，通常在常温下炼苗7天左右。
待瓶苗生长健壮、叶色浓绿，苗长5~7cm高时出瓶移栽。
组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，不要伤及根茎部。
先用流水洗去根部附着的培养基，在阴凉通风处晾根半天至根发白，栽入盛有基质的穴盘中。
石斛兰组织培养及快繁技术研究
泡７ｍｉ １ ％的 Ｎ Ｃ 溶液 中 １ ｍｉ。用蒸馏水洗 ４ 次。 ｎ ０ ａ１ ７ ｎ ～５ Ｂ： 先用 ７ ％ 的酒精擦洗 整个 带叶和叶鞘 的的幼茎 ．再剥去下部叶和叶鞘 ，留下包 裹茎尖的 １２片叶 ， ０ ￣
在升汞 （ 加两滴Ｔ ｅ ｎ ０）中浸泡 ７ ｉ，１ ｗ ｅ ２ ａ ｒ ｎ ０％的 Ｎａ Ｉ Ｃ 溶液 中浸泡 ｌ ｉ，用蒸馏 水洗 ４～５ ７ｍ ｎ 次至无 异味 。 在 接种时采用刀背挤压法挤 出茎尖。 Ｃ：在 ０１ ． ％的升汞 中浸泡 ６ｍ ｎ ｉ，其它与方法 Ｂ相同。 Ｄ： 在０１ ％的升汞 中浸 泡 ９ ｉ，其它与方法 Ｂ相同。 ａ ｒｎ 把 灭好 菌的茎 尖接种在 预先准备好的 １ ／ ２ＭＳ 养基上 ．一个 试管接一个茎 尖 ，培养 】 培 ０ｄ左右 ，存活 的茎 尖转接 到 ① 、② 培养基上。
维普资讯
第２ 卷 第 ２ ２ 期
２００２年 ３月
浙
江
林
业
科
技
ＶＯ ２ Ｎｏ ２ 】 ２
Ｊ ＯＵＲ．ＯＦ ＺＨＥ Ｉ Ｊ ＡＮＧ ＯＲ．Ｓ １ Ｆ Ｃ ．＆ Ｔ ＣＨ Ｅ
Ｍ ａ ２０ ０２ ｒ
文 章编 号 ： １０ ・７６ （ ０ ２ ２０ ３・ ３ ０ 【３ ７ ２ ０＇ ・０ ８０ ）０
石 斛 兰组 织 培 养 及 快 繁 技 术研 究
王 春
杭 州 ３ ０ ２ ００ １
（ 浙江 森禾种业股份有限公司组培中心．浙江
摘要 ：对两种 石斛兰 属植物进行了茎尖培 养和快繁技术研 究 ，结果 表明 ，在不同激素配 比的 ＭＳ培养基 中 ， ＭＳ Ｂ ． Ｎ ＋ Ａ０５ ＡＡ０ ＋Ｃ ＋ ． Ｈ有利于石斛兰的原 球茎 球状体 （ Ｌ ５ Ｐ Ｂ）分化 成幼苗 ：在 ＭＳ—Ｂ Ａ２ ０＋ＮＰ Ｈ ． ５ Ｃ ． ｔ Ａ０
铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较
铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较饶宝蓉;陈泳和;江文清;刘忠辉;梁彦;陈琦辉【摘要】[目的]筛选适宜铁皮石斛繁殖的最佳方法.[方法]以铁皮石斛成熟蒴果和1年生植株茎段作为外植体,研究MS培养基中添加不同浓度激素对铁皮石斛种子和茎段诱导、增殖以及生根的影响,同时比较了传统玻璃兰花瓶与聚丙烯透明薄膜袋在铁皮石斛工厂化生产上的成本投入.[结果]适合铁皮石斛诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+ 120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合增殖的培养基为MS+ 1.0 mg/L6-BA+ 0.05 mg/L NAA+ 120 g/L香蕉+35 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶;适合生根的培养基为1/2MS+0.80 mg/L NAA+ 120 g/L香蕉+20 g/L蔗糖+7.0 g/L卡拉胶.对于工厂化生产而言,选用蒴果作为外植体具有利于无菌体系建立、增殖倍数多和苗长势整齐一致等优点,聚丙烯透明薄膜袋可以代替传统的玻璃兰花瓶.[结论]该研究可为减少铁皮石斛组培苗的生产成本、缩短生长周期、获得大量优质组培苗提供一定的理论依据.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2017(045)004【总页数】5页(P138-141,195)【关键词】铁皮石斛;组织培养;激素;种子;茎段;聚丙烯透明薄膜袋【作者】饶宝蓉;陈泳和;江文清;刘忠辉;梁彦;陈琦辉【作者单位】南平市华科生物科技有限公司,福建建阳354200;福建省南平市农业科学研究所,福建建阳354200;南平市华科生物科技有限公司,福建建阳354200;福建省南平市农业科学研究所,福建建阳354200;福建省南平市农业科学研究所,福建建阳354200;福建省南平市农业科学研究所,福建建阳354200;福建省南平市农业局,福建南平353000;福建省南平市建阳区农业局,福建建阳354200【正文语种】中文【中图分类】S503.53铁皮石斛(Dendrobium officinale)又称黑节草，是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生草本植物，含有多糖、生物碱、氨基酸、菲类化合物等大量有益于人体健康的药用活性成分，具有抗肿瘤、抗凝血、降血脂、降血压、提高免疫力、抗衰老等功效[1-2]，是一种名贵珍稀中药材，在《神农本草经》和《本草纲目》中均被列为上品，被誉为“中华九大仙草之首”，被录入2015版《药典》。
石斛的种植方法及繁殖
石斛的种植方法及繁殖
一、种植方法
1、准备土壤：石斛对土壤的要求高，种植的时候要配制适应的土壤才行，必须要保证松软、透气、排水能力强且富含腐殖质才行，这样的土壤环境它才可更旺盛的生长。
可用花生壳、木屑、苔藓、水苔等进行混合，也可购买石斛专用的基质。
2、处理植株：不管是购买的石斛苗还是自己挖取的石斛苗，在种植前都要先特意处理，将上面干枯、发黄的部分剪掉，若有烂根、枯根也要处理掉，这样后期才可更好的吸收肥水，促使尽快恢复生长。
3、入土种植：基质备好，植株处理好之后就可入土种植。
先在花盆中放入部分基质，然后放入植株，慢慢填土压实即可，栽种之后需要及时浇灌透水，让根系和基质紧密结合，促使它尽快恢复正常生长。
注意，后期要放在温暖、通风好且阴凉的环境下。
二、繁殖方法
1、扦插繁殖：选5到6月进行扦插。
插条从三年生的健壮的植株上剪取，选饱满的茎，每段有4到5个小节。
基质用纯河沙就行。
直接将处理好的茎插入河沙中，等到茎上面的芽点长出后就可进行移栽。
2、分株繁殖：分株也是选在春季进行的，选生长健壮的石斛，剪取二年生的茎，去掉老根，然后直接分开栽种就行，可贴石栽
植，也可贴树栽植。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
石斛组织培养及快繁技术
石斛兰是近几年在我国插花市场上流行的花卉，种类繁多，花形花姿优美，色彩艳丽，花期较长，具有较高的观赏价值。
由于其分株能力弱，繁殖系数低，繁殖速度慢，远远不能满足商品化生产的要求。
因此，组织培养和快繁技术是石斛商品化生产中重要的一个环节。
石斛属于兰科植物，通过不同的途径都可以形成完整的组培苗，以实现石斛的快速繁殖。
野生石斛的茎尖、茎段、叶片、种胚、鳞叶期原球茎、幼根以及根段等均可作为外植体，在适当条件和适当培养基中，就可诱导产生全能性的再生小植株。
但以嫩枝的茎尖、腋芽或茎节、花梗诱导成功的可能性较大，而正在生长的芽是最理想的外植体。
休眠芽也可用作外植体，但由于体积比较小，剥离较困难，生长也较慢。
一、无菌播种
石斛兰的种子极为细小，胚胎发育不完全，所谓的胚实际上就是一团未分化的胚细胞，且无胚乳组织，在自然状态下发芽率极低，只有与兰菌共生才能少量发芽，成苗更难，因此不能像其他植物一样在大田或苗床上播种，只有在无菌的补充营养的人工培养基上，促进其萌发成苗。
1、种子的采收与播种
应用于无菌播种的石斛兰的种子的果实以刚成熟但尚未开裂时效果较好，未成熟时能发芽，但发芽率略低，而如果果实成熟开裂，种子难以收集与消毒，且种子发芽力降低。
2、培养基的选择
石斛兰的播种培养基多种多样，不同的品种的最适培养基不同，比较常用的基本培养基有MS、改良MS、Nistch、N6、RE等。
3、培养基的消毒
由于培养基内有丰富营养物质，极适合细菌和真菌的繁殖，造成污染，影响组培的成功，因此培养基消毒是必不可少的一个环节。
消毒的方法一般有高温高压消毒和过滤消毒两种方法。
二、组织培养
1、外植体的采集与灭菌
采用花梗为外植体时，由于花梗较光滑，消毒相对容易，污染率较低。
采用花芽作外植体时，在花梗再长出、花朵未长成时效果最好。
2、培养基的选择和培养
以石斛的播种培养为基本培养基再加入适量激素进行茎尖、节、花梗的组织培养均有成功的报道。
3、试管苗的移植
一般来说，当石斛兰试管苗长出3～4片叶，与3～4条根，高约5cm～10cm后，才可
移植于温室，由于在移栽过程中，要适应从无菌状态进入有菌自然状态，从光、温、湿稳定环境中进入不稳定的自然环境，从异养过渡到自养的过程。
因此，必须要有一个好的栽培环境，才能保证它们的成活率。
三、石斛组培技术存在的一些问题
1、石斛组培技术要求较高，操作严格，价格不菲，只有具备了一定的经济和设备条件，才能实现规模化生产，这需要政府和大型企业的参与支持。
2、石斛试管苗出瓶后的成活率低，生长缓慢，苗期的管理十分困难，这是目前限制其生产的关键问题。
对此，国内许多单位正在开展相关研究，研究内容主要集中在以下三个方面：一是石斛特殊生理需求的机理研究；二是各类养分供应对于苗期石斛生长的作用；三是幼年石斛根系与菌根真菌的共生现象。
3、由组培苗长成的石斛与野生石斛相比，药用成分的含量和品质是否发生变化，还须要深入研究；同时，组培阶段各类前体物质的添加与后期药用成分的关系也值得继续探讨。