组织病理检查

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组织病理检查对病毒性皮肤病的诊断十分重要。当临床诊断有困难或者对结果又疑问时,就可以借助皮肤组织病理学的改变来确定到底是何种病毒感染引起该病,它可以作为临床辅助诊断的重要手段。同时由于皮肤位于体表,火检取材较为简单,这也为组织病理检查提供了便利条件。

(一)获取组织标本

首先要对拟取部位进行常规消毒和局部麻醉。局部麻醉可用1%-2%盐酸普鲁士因或者0.5%-2%盐酸利多卡因,麻醉应集中于皮损部位及其周围,药物不可直接注入皮损内。皮损的选择也很重要,要选择发育成熟的具有典型的皮损,尽量在原发部位取材。

水疱、脓疱应取早期皮损。材料面积要足够,应包括皮下组织,要尽量选择日后形成瘢痕不易部位取材。要同时取正常皮肤与皮肤皮损,便于进行对比。较小皮损沿其边缘全部取下即可,对于较大、切忌挤压、钳夹所取组织,水疱、脓疱要防止破裂。

取材方法一般有刀切法、钻孔法和削除法。刀切法适用范围较广,可取较大较深组织,一般用手术刀做菱形切口,长约1cm,宽0.3-0.5cm,切口方向顺着皮肤纹理,刀与切面垂直。钻孔法较为方便,一般用于较小或浅表皮损,抑制刀切较困难者,钻孔器应根据皮损大小来选择,一般多用直径4mm的环钻。而削除法适用于表浅增生组织,如疣状物等。

(二)标本处理

标本取下后要进行固定。脱水、去脂、包埋、切片以及染色,有时还要进行免疫荧光检查及电镜检查等。

1.组织固定其作用在于迅速防止组织、细胞的死后变化,以及组织的自溶与腐

败,

还可防止细胞的过度收缩或膨胀而失去原有的形态结构。因此取下的组织标本应

立即放入固定液中,并且使其完全侵入,以防标本出现人为的变化。一般用10%

甲醛溶液作固定液,若标本同时需做去他检查,则应做相应处理。若需做直接免

疫荧光检查,一半组织标本放入10%甲醛液中供HE染色,另一半放入michel保

存液。如要做酶检查,则应将标本放入湿纱布中并做冷冻切片。固定时间应足够,

4mm厚的标本至少需要8h,6mm厚的标本至少12h。

2.脱水目的在于解决水与笨不溶的问题,脱水是逐级进行,不同的组织脱水时

间有所不同。大多数的皮肤病毒在甲醛溶液固定液及石蜡包埋的组织快中都能

保存完好。

3.染色分普通染色和特殊染色两种。普通染色,即苏木精-伊红(HE)染色,

是最常用的染色方法、其原理是,在细胞核中,尤其是染色质一般由酸性物质

组成,故与酸性染料伊红有较强的亲和力。而氧化的苏木精为碱性染料细胞质

则由碱性物质组成,故与酸性染料伊红有较强的亲和力、染色的结果示核为蓝

色,细胞质、结缔组织、肌肉、神经为红色,红细胞则为粉红色。此外,少数

组织需要特殊染色,如PAS染色、甲紫染色、刚果红染色、吉姆萨染色等。

文章转自:西安碑林华医医院

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