PBS缓冲液的配方

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PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中,常用到PBS缓冲液。

以下是我们实验室的配方,供大家参考:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4,分子量136.09)加入100ml双蒸水中。

B液:0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,分子量177.99)加入100ml双蒸水中。

或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,分子量358.14)加入100ml双蒸水中。

pH值。

A液(ml)。

B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)、NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)和NaCl。

用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。

配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,浓度为0.01M。

PBS缓冲液的配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调节pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一,但不同实验室的配方可能不同。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml水。

0.2M NaH2PO4:取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水。

不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制:先配制0.2M PBS(pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。

PBS缓冲液的配方

PBS缓冲液的配方

P B S缓冲液的配方发布日期:2008-11-11 热门指数:865PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCL 的话,加入NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7分子生物学常用溶液配制发布日期:2008-8-25 热门指数:3471分子生物学常用溶液配制一、分子生物学常用贮存液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。

PBS缓冲液配方

PBS缓冲液配方

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L 磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。

pH ,, A液 (ml) ,, B液(ml)5.60 ,, 9.50 ,, 0.255.91 ,, 9.00 ,, 1.006.24 ,, 8.00 ,, 2.006.47 ,,7.00 ,, 3.006.64 ,, 6.00 ,, 4.006.81 ,, 5.00 ,, 5.006.98 ,, 4.00 ,, 6.007.17 ,, 3.00 ,, 7.007.38 ,, 2.00 ,, 8.007.73 ,, 1.00 ,, 9.008.04 ,, 0.50 ,, 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

PBS缓冲溶液的配制

PBS缓冲溶液的配制

PBS(Phosphate-buffered Saline) 分子克隆上的配方 NaCl 8g 137mM KCl 0.2g 2.7mM Na2HPO4 1.44g 10mM KH2PO4 0.24g 2mM 溶到 800ml 蒸馏水中,用 HCl 调 pH 到 7.4,然后加水补充到 1000ml,15psi(1.034× 105)20min 高压灭菌或 者滤膜除菌,室温保存。一般用于实验室中的 PBS 缓冲液都是这样配制,而不用摩尔分数表示。分子克隆 上补充“PBS 是一种通用试剂。值得指出的是本文列出的配方缺乏双价阳离子,如果需要,PBS 可以补加 成 1mM CaCl2 和 0.5mM MgCl2” 。但本人在试验过,加入后立马形成沉淀,不明何故。 免疫学手册上的配方: NaCl 19.00g 154mM Na2HPO4 1.15 g 8.1mM NaH2PO4 0.23 g 1.9mM 加水 900 ml 调 pH 7.2~7.4 再加水补充到 1L 0.05M 储存液 NaCl 100.00g Na2HPO412H2O 66.15g NaH2PO4H2O 6.66g KCl 4.50g 加双蒸水至 4500ml,用 HCl 或 NaOH 调 pH 到 7.4 即可。使用时稀释 5 倍,即 0.01M。 PBS(0.1M,pH 7.4)贮存液配方(10 倍浓缩) NaCl 80g Na2HPO412H2O 32.3g NaH2PO42H2O 4.5g 加蒸馏水至 1000ml 或者 NaCl 80g Na2HPO42H2O 11.5g KH2PO4 2g KCl 2g 加蒸馏水至 1000ml 天津百浩生物科技有限公司 PBS(0.01M) NaCl 8g Na2HPO4· 12H2O 2.9g NaH2PO4· 2H2O 0.2964g 加蒸馏水至 1000ml takara 公司:与分子克隆基本相同,不同之处为 Na2HPO4 1.42g(分子克隆是 1.44g) ,并且也提示可以加入 钙镁离子。

PBS配制

PBS配制

0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。

保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

pbs缓冲液的配制方法

pbs缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。

pH --A液(ml)--B液(ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 --1.006.24 --8.00 --2.006.47 --7.00 --3.006.64 --6.00 --4.006.81 --5.00 --5.006.98 --4.00 --6.007.17 --3.00 --7.007.38 --2.00 --8.007.73 --1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

PBS缓冲液配制方法

PBS缓冲液配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。

pH --A液(ml)--B液(ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 --1.006.24 --8.00 --2.006.47 --7.00 --3.006.64 --6.00 --4.006.81 --5.00 --5.006.98 --4.00 --6.007.17 --3.00 --7.007.38 --2.00 --8.007.73 --1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

pbs缓冲液配制方法

pbs缓冲液配制方法

8.04 -- 0.50 -- 9.50 一般免疫组化用 PBS 都只包含 Na2HPO4?12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4?2H2O ( 磷 酸 二 氢 钠 ) Nacl 用于细胞培养的 PBS需含有氯化钾
称取 8g NaCl 、0.2g KCl 、 1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4, 溶于 800ml 蒸馏水中,用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4,最后加蒸馏水定 容至 1L 即可 0.01M
问题 1:磷酸盐缓冲盐水( phosphate buffered sodium),为什么用第 三种或第一种呢 :这么多年以来我都以为 PBS就是磷酸盐缓冲溶液, 其他两种说法的英语名称常见到,不过我一直都以为他们是差不多 的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。 我们公司用的 PBS有很多种,抗体组用的中和 PBS配方就比较简 单,没有 K+ 离子, 只起到缓冲 PH 的作用; Na2HPO4+ KH2PO4 按
5.7
93.5
6.5
5.8
92.0
8.0
5.9
90.0
10.0
6.0
87.7
12.3
6.1
85.0
15.0
6.2
81.5
18.5
6.3
77.5
22.5
6.4
73.5
26.5
6.5
68.5
31.5
6.6
62.5
37.5
6.7
56.5
43.5
6.8
51.0
49.0
6.9
45.0
55.0
7.0
39.0
61.0
7.9
7
8.0

pbs-缓冲液的配置

pbs-缓冲液的配置

称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。

“PBS”缓冲液试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。

若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.3 6.185.015.0 6.281.518.5 6.377.522.5 6.473.526.5 6.568.531.5 6.662.537.5 6.756.543.5 6.851.049.06.945.055.07.039.061.0 7.133.067.0 7.228.072.0 7.323.067.0 7.419.081.0 7.516.084.0 7.613.087.0 7.710.589.5 7.88.591.57.97.093.08.0 5.394.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。

pbs 缓冲液的配置

pbs 缓冲液的配置

1、0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。

2、磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。

若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。

PBS缓冲液配制方法

PBS缓冲液配制方法

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS 缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A 液:0.1mol/L 磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4, MW136.09) 1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O, MW177.99) 1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O, MW358.14) 3.58g,加双蒸水至100ml。

pH -- A 液 ( ml) -- B 液( ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 -- 1.006.24 --8.00 -- 2.006.47 --7.00 -- 3.006.64 -- 6.00 -- 4.006.81 -- 5.00 -- 5.006.98 -- 4.00 -- 6.007.17 -- 3.00 --7.007.38 -- 2.00 --8.00 7.73 -- 1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O (磷酸氢二钠)NaH2PO4?2H2O ( 磷酸二氢钠 ) Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4 禾口0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH 值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS 缓冲液称取NaCI 8g,KCI 0.2g,Na2HPO4?12H2O3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4 :称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4 :称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4) 的配制:先配0.2M PB (pH=7.4 ,100ml) :取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4 ,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可然后只需将0.2M PB (pH=7.4) 按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB ( PH=7.4) :取500ml 0.2M PB ,加水稀释至1000ml 即可。

PBS缓冲液配方

PBS缓冲液配方

PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L 磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。

pH ,, A液 (ml) ,, B液(ml)5.60 ,, 9.50 ,, 0.255.91 ,, 9.00 ,, 1.006.24 ,, 8.00 ,, 2.006.47 ,,7.00 ,, 3.006.64 ,, 6.00 ,, 4.006.81 ,, 5.00 ,, 5.006.98 ,, 4.00 ,, 6.007.17 ,, 3.00 ,, 7.007.38 ,, 2.00 ,, 8.007.73 ,, 1.00 ,, 9.008.04 ,, 0.50 ,, 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制
pbs缓冲液配方ph76747270h2o1000100010001000nacl85858585na2hpo422222222nah2po401020304根据经验来看新鲜配置的pbs搅匀后其ph值约在7274之间可是在温度的影响下尤其在夏天其电离常数发生了改变在经过昼夜的时间后ph值会明显改变我亲自测过偏酸
NaCl 8.0g;KCl 0.2g;Na2HPO4 1.44g;KH2PO4 0.24g;加蒸馏水至1000ml,调节pH到7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液取300μl Tween-20加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~
PBS缓冲液配方
PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。

【2017年整理】PBS缓冲液的配制方法

【2017年整理】PBS缓冲液的配制方法

【2017年整理】PBS缓冲液的配制方法PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。

我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。

B液:0.1mol/L 磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。

pH ,, A液 (ml) ,, B液(ml)5.60 ,, 9.50 ,, 0.255.91 ,, 9.00 ,, 1.006.24 ,, 8.00 ,, 2.006.47 ,,7.00 ,, 3.006.64 ,, 6.00 ,, 4.006.81 ,, 5.00 ,, 5.006.98 ,, 4.00 ,, 6.007.17 ,, 3.00 ,, 7.007.38 ,, 2.00 ,, 8.007.73 ,, 1.00 ,, 9.008.04 ,, 0.50 ,, 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

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P B S缓冲液的配方发布日期:2008-11-11 热门指数:865PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。

以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCL 的话,加入NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。

另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7分子生物学常用溶液配制发布日期:2008-8-25 热门指数:3471分子生物学常用溶液配制一、分子生物学常用贮存液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。

加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。

用滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。

称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。

可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。

一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。

在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。

2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。

继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。

【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。

3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。

放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml 的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。

【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。

药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。

只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。

4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。

6.10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。

7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。

9.1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。

【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。

10.2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。

11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris 碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。

碱基波长(nm)消化系数(ε)[L/(mol?cm)]A 259 1.54×104G 253 1.37×104C 271 9.10×103T 260 7.40×103比色杯光径为1cm时,吸光度=εM13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。

【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。

14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。

【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。

15.2×HEPES缓冲盐溶液【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml。

用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。

16.IPTG溶液【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。

17.1mol/L乙酸镁溶液【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌。

18.1mol/L MgCl2溶液【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用。

【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。

19.β-巯基乙醇(BME)溶液【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃。

【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。

20.NBT溶液【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。

21.酚/氯仿溶液【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH=7.6)液层,保存于4℃。

【注意】酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。

所有操作均应在化学通风橱中进行。

与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。

如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

PMSF在水溶液中不稳定。

应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。

保存于室温。

24.1mol/L乙酸钾(pH=7.5)溶液【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃。

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