标本采集、运送、保存程序

标本采集、运送、保存成序1.目的规范标本采集程序，保证实验室检测前标本质量。

2. 范围微生物标本。

3. 职责3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。

3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。

4. 程序4.1 采集标本前，采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计划并进行适当的准备工作，包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。

4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致，严防差错。

4.3 标本送到微生物室，标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检，一般不得超过2h.5 采集方法5.1 血液及骨髓5.1.1 血液5.1.1.1采血时间：①在抗菌药物治疗前；②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血；③如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；④同时或短时间内完成几套血培养采集，除非怀疑存在持续性菌血症时（如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本）5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,儿童2～5 ml婴幼儿为1～2ml。

（附注：儿童的采血量不能超过其总血容量的1%）。

5.1.1.3采血方法：①成年病人，推荐同时在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶）；对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集；对于婴幼儿病人，推荐同时在不同部位采集2～3瓶。

因为儿童患者很少见厌氧菌感染，因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。

②采血量充足时，应先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足时，应先注入需氧瓶，后注入厌氧瓶。

5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。

5.1.3 标本保存：采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于室温，切勿放入冰箱。

冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。

5.2 脑脊液标本：由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺，抽取脑脊液2～3ml,盛于无菌容器中送检。

脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自酶，会迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌离体后也易死亡，因此，脑脊液无论图片或培养，必须于采集后立即送检。

5.3 上呼吸道标本5.3.1 鼻咽标本：将鼻咽拭子缓缓地伸进鼻孔直至鼻咽喉部（注意：不可用力），轻轻转动，并于该深度停留20～30s,然后迅速地抽出（注意：避免受口或咽部中细菌的污染）。

5.3.2 喉标本：用压舌板压舌，用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区采样。

喉拭子培养不能用于会厌发炎的病人。

将转运管安全封口，注明标识和日期，将标本尽快送到实验室。

5.4 下呼吸道标本5.4.1 痰5.4.1.1 采集标本以晨痰为好。

支气管扩张症病人清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。

5.4.1.2 自然咳痰法：在留取痰之前，用清水反复漱口，从气管深部咳出痰，吐入无菌容器内。

5.4.1.3 支气管镜下采集法：在病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。

5.4.1.4 气管穿刺法：在环甲膜下穿刺抽取痰液，收集标本，适用于厌氧菌培养。

5.4.1.5 棉拭采集法：用无菌棉拭子轻轻擦拭病人鼻咽部黏膜，留取标本，置无菌试管内送检，放置时间不应超过2h.5.4.2 支气管灌洗液：用不少于140ml无菌生理盐水灌洗小支气管和肺泡，40～80ml回收的灌洗液中包含约1ml支气管末梢和肺泡中的分泌物；弃去前段可能污染的部分，收集其余部分后立即送检。

5.4.3 保护毛刷(PSB):保护毛刷因有双层套管保护，不易污染上呼吸道和口腔定植菌。

用无菌剪刀剪断毛刷，置于1ml生理盐水的无菌容器中（仅供需氧培养），快速送检。

5.5 穿刺液标本5.5.1 采用无菌方法采集体内可疑感染部位的液体约2ml，注入无菌试管，或抽取穿刺液1～2ml注入多功能体液培养瓶，或抽取穿刺液2～5ml注入血培养瓶，混匀，立即送检。

5.5.2 标本保存：采集标本后立即送到实验室，若不能及时送检可置于室温，放置时间不应超过2h.5.6 生殖器来源5.6.1 阴道：经过阴道口（introitus），将拭子插入约5ml,轻轻转动10～30s。

确保拭子触及阴道壁，小心退出，不要触及皮肤，将拭子转移到Aptima采集管，与第二线折断。

拭子必须必须置于运输管中，尽快送抵实验室。

梅毒螺旋体标本从外生殖器的硬下疳处蘸取渗出液，置于载玻片上，加盖玻片后立即送检。

5.6.2 前庭大腺：不要在黏膜部位使用乙醇。

皮肤准备参见一般部位，吸取前庭大腺脓肿，使用厌氧转运培养基送至实验室。

5.6.3 用于培养基的子宫颈（宫颈管）标本5.6.3.1 准备阴道窥器，除温水外，避免使用润滑剂，插入阴道窥器，见到子宫颈，用棉拭子拭去多余的黏液，将涤纶拭子插入子宫颈，轻轻转动，并停留10～30s,取出拭子，置于细菌转运培养基。

5.6.3.2 一般情况下，阴道标本培养不会产生有意义的结果，所以除B群链球菌筛检外，不推荐阴道标本培养。

阴道标本不用于厌氧培养。

5.6.4 羊膜腔穿刺术：通常由医生经超声定位留取样本，置于封口的注射器或厌氧转运培养基送抵实验室。

5.7 前列腺：用肥皂水清洗阴茎头，经直肠前列腺按摩获取前列腺液，用无菌拭子采集前列腺液，在室温下运送标本，选择前列腺按摩前和最近时刻的尿液同时送去培养。

5.8 尿5.8.1 女性：先以肥皂水清洗外阴部，再以无菌水冲洗，用无菌纱布擦拭，以手指将阴唇分开排尿，弃去前段尿，留取中段尿5～7ml于无菌试管内。

5.8.2 男性：翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水冲洗，留取中段尿。

5.8.3 儿童、婴儿：先以无菌生理盐水棉球清洗其外阴或外生殖器，将无菌拭管或瓶口对准尿道口，以胶布固定于皮肤上，待尿排出后送检。

5.8.4 两侧肾盂尿：由专科医生采集，左右侧标本必须标明，避免混淆而误诊。

5.8.5 膀胱穿刺：此法用于厌氧菌培养。

耻骨上皮肤经碘酊消毒后，再以75%乙醇擦拭，用无菌注射器行膀胱穿刺，吸取尿液后排去注射器内的空气，针头插于无菌橡皮塞上及时送检，2h内进行接种。

5.9 粪便标本5.9.1 自然排便采集：自然排便后，挑取其脓血、黏液部分2～3g,黏液粪便取絮状物2～3ml，盛于灭菌容器内，或置于保存液（运送培养基）、增菌培养基中送检。

5.9.2 直肠拭子：如不易获得粪便时，或排便困难病人及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插入肛门内4～5cm（幼儿2～3ml）轻轻转动取出，插入卡布（Cary-Blair）运送培养基内或无菌培容器内送检。

5.9.3 粪便标本应该立即送检，室温保存下不能超过2h，如不能及时送检可以发放入磷酸盐甘油（ph7.0）或转运培养基，但不能超过24h.培养艰难梭菌的标本保存于20℃以下。

培养沙门菌和致贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。

保存弯曲杆菌和弧菌的标本，需加Cacl2(100mg/L)试剂。

5.10 脓及创伤标本5.10.1 封闭性脓肿消毒局部皮肤或黏膜表面后，用无菌注射器抽取，用无菌手术刀切开栗粒状脓肿（miliary abscess），使用无菌注射器和针头采集露出的标本。

5.10.2 将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。

疑为厌氧菌感染时，应做床边接种或厌氧运送培养基内送检。

5.10.3 开放性脓肿和脓性分泌物用无菌盐水或75﹪乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡深处采集2支拭子，1支为图片检查用，1支为培养用。

5.10.4 大面积烧伤的创面分泌物用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。

5.10.5 对未引流脓肿：使用无菌注射器和针头，按无菌操作技术，从中采集脓性物。

用无菌手术刀切开栗粒状脓肿，使用无菌注射器和针头采集露出的标本。

5.10.6 疑为放线菌属、奴卡菌属感染时，在检查单上注明需要排除放线菌属、奴卡菌属。

5.11 褥疮溃疡：用无菌盐水清洗表面后如得不到活检标本或抽吸物，则用拭子用力采集损伤底部。

由于褥疮溃疡拭子临床价值不大，一般选择组织活检或针头抽吸样本。

5.12 大疱、蜂窝组织炎、小疱：皮肤消毒同血液培养，用无菌针头和注射器抽吸液体或化脓性物质，如果获得了抽吸物，将之置于合适细菌转运培养基。

如果没有得到抽吸物，将小疱或大疱性病变打开，使用棉拭子采集病变部位，置于转运培养基中。

5.13 中心静脉导管标本：用无菌镊子将5cm导管尖端或近心端送至实验室。

5.14 耳部标本514.1 内耳：穿刺前用肥皂水清洗外耳道再进行消毒程序，最后用注射器穿刺鼓室抽吸脓液。

对鼓室破裂者，用专用采样管中配备的细头软杆拭子采集脓液，脓液量大也可采用注射器抽吸。

5.14.2 外耳：先用润湿的棉签清洁外耳道，再用专用采样管中配备的毛刷状采样拭子在外耳道内用力旋转摩擦取样。

5.15 眼部标本5.15.1 结膜：采样前先用无菌盐水润湿拭子，再绕结膜取样，最好两眼各采集2支拭子：其中1支用于涂片。

建议在床边接种。

采集时，须小心地避免感染延至眼部临近区域。

注意，须标明左眼、右眼的标本。

5.15.2 角膜：由眼科医生采用刮取法采集标本：采集前先滴2滴局部麻醉液，再用角膜上皮刮铲刮取病变角膜组织，将刮擦物用少许生理盐水洗下，置无菌杯中送检。

5.16组织标本采集：表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除，对窦道和瘘管应深部刮取，获得部分管壁组织。

深部组织标本可在手术过程中或采取穿刺活检或抽取分泌物送检，也可使用相应的内镜采集活检标本。

标本置无菌容器中并加入少量生理盐水以保持湿度，或置肉汤增菌液中送检。

如怀疑为军团菌感染，肺组织切片不要滴加生理盐水（能抑制军团菌生长）。

如果怀疑为厌氧菌感染，应把组织放入厌氧的传输系统内立即送检。

5.17引流液：用70%乙醇消毒导管采集部位，用注射器从引流管无菌采集2～3ml。

标本不能直接从引流袋放出，因引流液在袋中潴留时间太长容易滋生细菌。