ABTS自由基清除法SOP
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
主要目的:
——为了测定样品清除ABTS自由基的能力。主要原理:
——用 K
2S
2
O
8
与 ABTS 直接生成稳定的阳离子自由基 ABTS+,抗氧化物质与
ABTS+发生反应而使反应体系褪色。
实验室签章
一、试剂
——K
2S
2
O
8
水溶液
——ABTA溶液
——乙醇(分析纯)——PBS 溶液
二、仪器设备
——96孔酶标板
——UV-Vis可见多功能酶标仪——移液枪
——200 µL量程枪头
三、实验方法
◆前期准备
ABTS储备液(7.4 mmol/L)取ABTS 96 mg,加蒸馏水25 mL。
K 2S
2
O
8
储备液(2.6 mmol/L)取K
2
S
2
O
8
378.4 mg,加蒸馏水10 mL。
将5 ml 7.4 mmol/L ABTS储备液与88 µL 2.6 mmoL/L K
2S
2
O
8
混匀,静置12-16
小时,配制成ABTS工作液。
◆ABTS自由基清除法
0.4 mL ABTS工作液,用 PBS 溶液稀释,要求在常温下734nm 处吸光值为0.7±0.02。0.2 mL ABTS+·工作液与 10uL 不同浓度受试物混合,常温避光静置 6min,在 734 nm 波长处测吸光度,平行3次。
ABTS自由基清除能力由下式计算:
清除率(%)=[A
0-A
i
/A
]×100%
式中: A
0为不加样品,加入 ABTS 的吸光度;A
i
为加入样品和 ABTS 的吸光度
(注:专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注)