ABTS自由基清除法SOP

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主要目的:

——为了测定样品清除ABTS自由基的能力。主要原理:

——用 K

2S

2

O

8

与 ABTS 直接生成稳定的阳离子自由基 ABTS+,抗氧化物质与

ABTS+发生反应而使反应体系褪色。

实验室签章

一、试剂

——K

2S

2

O

8

水溶液

——ABTA溶液

——乙醇(分析纯)——PBS 溶液

二、仪器设备

——96孔酶标板

——UV-Vis可见多功能酶标仪——移液枪

——200 µL量程枪头

三、实验方法

◆前期准备

ABTS储备液(7.4 mmol/L)取ABTS 96 mg,加蒸馏水25 mL。

K 2S

2

O

8

储备液(2.6 mmol/L)取K

2

S

2

O

8

378.4 mg,加蒸馏水10 mL。

将5 ml 7.4 mmol/L ABTS储备液与88 µL 2.6 mmoL/L K

2S

2

O

8

混匀,静置12-16

小时,配制成ABTS工作液。

◆ABTS自由基清除法

0.4 mL ABTS工作液,用 PBS 溶液稀释,要求在常温下734nm 处吸光值为0.7±0.02。0.2 mL ABTS+·工作液与 10uL 不同浓度受试物混合,常温避光静置 6min,在 734 nm 波长处测吸光度,平行3次。

ABTS自由基清除能力由下式计算:

清除率(%)=[A

0-A

i

/A

]×100%

式中: A

0为不加样品,加入 ABTS 的吸光度;A

i

为加入样品和 ABTS 的吸光度

(注:专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注)

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