细胞生物学实验PPT课件：细胞膜的渗透性
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• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （3）分别取3只试管，各加入3ml的 0.12 mol／L
硫酸钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸 钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载 玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形 态差异。
• 五、结果与分析
• 将观察到的现象记录， 并进行分析
试管编号 溶液种类 是否溶血 溶血所需时间 结果分析
1 2 3 4 … … 10
• 六、思考题
• 1.推断下列溶液的溶血反应会如何。
• 0.17 mol/L氯化钾、0.17 mol／L硝酸钾 0.12mol／L 氯化镁、0.12 mol／L氯化钙、0.10 mol／L硫酸钾、 0.10mol／L醋酸钾、0.10mol/L 柠檬酸钠、0.32 mol ／L甘露醇、0.32mol/L 蔗糖。
实验三、细胞膜的渗透性
一 、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。 二、实验原理 与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极
性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种 极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多 细胞代谢产物通过特有的机制通过。
• 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
2. 试剂 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯 化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖， 0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L 丙醇；0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠， 0.10mol／L醋酸钠，
3. 器材 试管，1mL移液枪，载玻片，盖玻片， 光学显微镜等。
血液的主要成分
• （一）血浆 • 血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄
色液体，其中除含有大量水分以外，还有 无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、 酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。
（二）血细胞
• 血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。 • 1、红细胞 • 呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，
• 四、实验程序 • 1．血红细胞悬液： • 用注射器吸入 2mL含有肝素的等渗液后从鸡
翼下静脉取鸡血5mL，加 入50mL烧杯，将 鸡血用等渗液进行1：10稀释。
• 2． 溶血现象观察： • 取试管一支加入3mL蒸馏水， 加入1滴
或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意 观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂， 溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶 血现象。
• 渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、 溶液温度和溶质解离度相关，因此有时 若得之渗透压的大小和其他条件，可以 反推出溶质分子的分子量。
• 将红细胞放置在各种溶液中 ，渗入红细胞的溶 质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起 溶血及细胞膜破裂。
• 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此， 可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。
• 三、材料、试剂和仪器 1．材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等
渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在 0.01-0.2mg /mL；等渗液为0.15mol/L NaCl）
细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就 是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结 合的能力。
• 2、白细胞 • 在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进
入周围组织中。 • 根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为
粒细胞和无粒细胞。 • 无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。 • 粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。
3、血小板
• 也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的 圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小 板的功能是参与止血与凝血。
两个概念
• 红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血 液中所占的容积百分比。正常成年男性为40%～ 50%，女性37%～48%，它反映了血液中红细胞和 血浆的相对数量变化。
• 2.抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？
渗透压（osmotic pressure）
• 用符号π表示，单位：atm • π的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的
溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积× 比重）。也可用Vant Hoff提出的公式计算：
π = icRT或π=n/VRT c=溶液的摩尔浓度；i = 等渗系数 π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的体积（dm3)， n是溶质的物质的量，R是摩尔气体常数，约8.314 。
• 血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析 出淡黄色透明液体即血清。
抗凝血剂的种类与特点
• 常用抗凝血剂包括： • 1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素； • 2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素 、华法令和新抗凝
等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和 Ⅹ减少而抗凝； • 3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑 制作用； • 4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成 的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。
肝素的作用机理
• 肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。
• 与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一 作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin III，AT III ）。
• At III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸 的蛋白酶的抑制剂。肝素与At Ⅲ所含的赖氨酸结合后 引起AT Ⅲ构象改变，使At Ⅲ所含的精氨酸残基更易与 凝血酶的丝氨酸残基结合，形成At III凝血酶复合物而 使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。
• 3、溶血前后的镜检观察 • 在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻
片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的 形态差异。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （1）分别取3只试管，各加入3ml的 0.17 mol／L氯
化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （2）分别取4只试管，各加入3ml的 0.32 mol／L葡 萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇， 0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反 应现象。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （3）分别取3只试管，各加入3ml的 0.12 mol／L
硫酸钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸 钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载 玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形 态差异。
• 五、结果与分析
• 将观察到的现象记录， 并进行分析
试管编号 溶液种类 是否溶血 溶血所需时间 结果分析
1 2 3 4 … … 10
• 六、思考题
• 1.推断下列溶液的溶血反应会如何。
• 0.17 mol/L氯化钾、0.17 mol／L硝酸钾 0.12mol／L 氯化镁、0.12 mol／L氯化钙、0.10 mol／L硫酸钾、 0.10mol／L醋酸钾、0.10mol/L 柠檬酸钠、0.32 mol ／L甘露醇、0.32mol/L 蔗糖。
实验三、细胞膜的渗透性
一 、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。 二、实验原理 与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极
性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种 极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多 细胞代谢产物通过特有的机制通过。
• 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
2. 试剂 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯 化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖， 0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L 丙醇；0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠， 0.10mol／L醋酸钠，
3. 器材 试管，1mL移液枪，载玻片，盖玻片， 光学显微镜等。
血液的主要成分
• （一）血浆 • 血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄
色液体，其中除含有大量水分以外，还有 无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、 酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。
（二）血细胞
• 血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。 • 1、红细胞 • 呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，
• 四、实验程序 • 1．血红细胞悬液： • 用注射器吸入 2mL含有肝素的等渗液后从鸡
翼下静脉取鸡血5mL，加 入50mL烧杯，将 鸡血用等渗液进行1：10稀释。
• 2． 溶血现象观察： • 取试管一支加入3mL蒸馏水， 加入1滴
或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意 观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂， 溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶 血现象。
• 渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、 溶液温度和溶质解离度相关，因此有时 若得之渗透压的大小和其他条件，可以 反推出溶质分子的分子量。
• 将红细胞放置在各种溶液中 ，渗入红细胞的溶 质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起 溶血及细胞膜破裂。
• 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此， 可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。
• 三、材料、试剂和仪器 1．材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等
渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在 0.01-0.2mg /mL；等渗液为0.15mol/L NaCl）
细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就 是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结 合的能力。
• 2、白细胞 • 在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进
入周围组织中。 • 根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为
粒细胞和无粒细胞。 • 无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。 • 粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。
3、血小板
• 也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的 圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小 板的功能是参与止血与凝血。
两个概念
• 红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血 液中所占的容积百分比。正常成年男性为40%～ 50%，女性37%～48%，它反映了血液中红细胞和 血浆的相对数量变化。
• 2.抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？
渗透压（osmotic pressure）
• 用符号π表示，单位：atm • π的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的
溶液对下部产生的静水压力表示（h×s×比重=体积× 比重）。也可用Vant Hoff提出的公式计算：
π = icRT或π=n/VRT c=溶液的摩尔浓度；i = 等渗系数 π是溶液的渗透压（kPa），V是溶液的体积（dm3)， n是溶质的物质的量，R是摩尔气体常数，约8.314 。
• 血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析 出淡黄色透明液体即血清。
抗凝血剂的种类与特点
• 常用抗凝血剂包括： • 1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素； • 2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素 、华法令和新抗凝
等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和 Ⅹ减少而抗凝； • 3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑 制作用； • 4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成 的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。
肝素的作用机理
• 肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。
• 与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一 作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin III，AT III ）。
• At III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸 的蛋白酶的抑制剂。肝素与At Ⅲ所含的赖氨酸结合后 引起AT Ⅲ构象改变，使At Ⅲ所含的精氨酸残基更易与 凝血酶的丝氨酸残基结合，形成At III凝血酶复合物而 使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。
• 3、溶血前后的镜检观察 • 在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻
片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的 形态差异。
• 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 • （1）分别取3只试管，各加入3ml的 0.17 mol／L氯
化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 • （2）分别取4只试管，各加入3ml的 0.32 mol／L葡 萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇， 0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反 应现象。