检验科性能验证程序文件

性能验证

1 目的

验证检测试剂在仪器上的性能指标。

2 适用范围

适用于检验科检验项目试剂的性能指标验证。

3 职责

3.1 科主任：负责审批性能验证计划。

3.2 技术负责人

3.2.1 负责制定性能验证方案和计划。

3.2.2 负责组织性能验证的实施。

3.2.3 负责定期对科室性能验证数据的统计、分析和总结。

3.2.4 负责组织对上述活动的可行性和有效性评审。

3.3 各专业组技术管理员

3.3.1 负责组织本组人员完成本组性能验证的验证工作。

3.3.2 负责对本组性能验证数据的统计、分析和总结工作。

3.4 检验人员

3.4.1 负责协助科室技术负责人和本组技术管理员完成本组的性能验证工作。

3.4.2 负责完成本组性能验证工作中应承担的检验工作。

3.4.3 负责认真填写本组性能验证的检验记录。

4 内容

4.1生化

生化室项目需要验证的参数包括批内精密度，批间精密度、正确度、线性范围、参考区间、可报告区间等，适用时，还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时，可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。

4.1.1 精密度

4.1.1.1 标本准备及要求

可采用新鲜或冻存的样本。当样本中待测物不稳定或样本不易得到时，也可考虑使用基质与实际待检样本相似的样本，如质控品。应至少评估 2 个浓度水平样本的不精密度。当 2 个浓度水平样本的不精密度有显著差异时，建议增加为 3 个浓度水平。所选样本的被测物水平应在测量区间内，适宜时，至少有 1 个样本的被测物水平在医学决定水平左右。

注 1：通常较高值样本的不精密度较小，较低值样本的不精密度偏大。对低值有临

床意义的检测项目，宜评估有判断价值的低水平样本的不精密度。

注 2：如检测结果没有明确的医学决定水平，可在参考区间上限左右选1个浓度，

注 3：如与厂商或文献报导的不精密度比较，所选样本水平宜与被比较的样本水平接近。

4.1.1.2 方案

方案1：

对验证材料每天分析1批次，2个浓度，每个浓度重复测定4次，连续5天。记录结果并计算均值、标准差和批内、批间变异系数CV（%）。

方案2：

批内精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测混合的新鲜临床标本20次。记录结果并计算均值（X）、标准差（SD）和批内变异系数CV（%）。

批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。

4.1.1.3 结果判断

从卫生标准或美国临床实验室室间质量评估或卫生部/省临检中心室间质评允许总误差表中查阅评价项目的允许误差范围，由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于等于允许误差范围的1/4和1/3作为检测系统不精密度性能的的可接受标准，且又小于等于厂商提供的精密度性能指标，说明由实验室评价的检测系统的不精密度性能可接受，符合要求。若大于判断限，检测系统的不精密度是否符合要示，应再进一步做统计学处理作出判断。

4.1.2正确度

4.1.2.1 标本准备及要求

按照如下优先顺序选用具有互换性的标准物质或基质与待测样本相类似的标准物质：1）有证标准物质（CRM），包括国家标准物质（如 GBW）、国际标准物质（如WHO、IFCC）、CNAS 认可的标准物质生产者（RMP）提供的有证标准物质、与我国签署互认协议的其他国家计量机构提供的有证标准物质（如NIST、JSCC）等；

2）标准物质（RM），如厂商提供的工作标准品；

3）标准物质（RM），如厂商提供的工作标准品；

4）正确度控制品；

5）正确度验证室间质评样本，如 CNAS 认可的 PTP 提供的正确度验证样本。宜根据测量区间选用至少 2 个浓度水平的标准物质样本。

6）卫生部或省临检中心室间质评质控血清含盖的项目，则以卫生部或省临床检验中心室间质评结果为准。卫生部或省临检中心室间质评未涉及的项目，通过仪器之间的比对来验证。

4.1.2.2 方案

方案1：

根据测量区间选用2个浓度水平的室间质评血清，每个浓度水平每天重复测定2次，连续测定5天，记录检测结果，计算全部检测结果的均值和偏倚。

方案2:

使用5个水平的室间质评血清，每个水平重复测定3次。记录结果，计算每份质控血清均值与靶值的偏倚。

卫生部或省临检中心室间质评未涉及的项目，通过仪器之间的比对来实现，以参加卫生部或省临检中心的室间质评的作为比对基准仪器，其最近1次参加卫生部或省临检中心的室间质评结果。采用5个患者的标本，标本浓度水平尽量覆盖测量范围，包括医学决定水平。计算在医学决定性水平下的系统误差（偏倚%），偏倚=︱测定值-靶值︳/靶值*100%,偏倚%应<1/2 CLIA’88 或卫生部或省临检中心室间质评最大允许误差，80%以上的数据符合以上要求即为通过。成绩在80%以上者即为验证通过。

4.1.2.3 结果判断：偏倚≤1/2 卫生标准或美国临床实验室室间质量评估或卫生部/省临检中心室间质评允许总误差。80%以上的数据符合以上要求即为通过。

4.1.3 线性范围

4.1.3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。

4.1.3.2 标本来源：采用本实验室常规检测标本获得的高值/低值标本进行。

4.1.3.3 验证频率：仅在更换试剂盒厂家时进行验证。一旦验证通过，无特殊情况，不重复验证。

4.1.3.4 方案

方案1：不同浓度标本制备：取高值和低值标本各一份，按如下配比：

标本1：低浓度样本；

标本2：三份低浓度标本与一份高浓样标本混匀；

标本3：二份低浓度标本与二份高浓样标本混匀；

标本4：一份低浓度标本与三份高浓样标本混匀；

标本5：高浓度样本。

检测时，按标本1,2，3，4，5，5，4，3，2，1，1,2，3，4，5排列，每个标本测量3次，记录浓度以理论浓度为纵坐标(Y)，实测浓度为横坐标(X)。由统计学计算出 r2 和回归方程Y=aX+b。

方案2：取高值标本和低值标本各一份，将两者按一定的比例稀释成系列不同浓度的标本（如 4:0、3:1、2:2、1:3、0:4等），浓度范围遍布整个预期可报告区间，分别上机按低到高各重复测定3次，计算线性回归方程 Y=aX+b及相关系数 R2。

4.1.3.5 验证结果判断

a在0.95～1.05范围内，b接近0，R≥0.975,R2≥0.95，则判断为线性范围验证通过。

4.1.4 参考区间

4.1.4.1 标本选择

选择年龄、性别等均匀分布，符合建立参考区间的健康体检者血清标本20份，对不同项目的参考区间进行验证。如碱性磷酸酶(ALP)等在不同年龄人群的不同参考区间应分别进行验证，如某些年龄人群标本不易获得时，可暂不做验证，但需与临床沟通，对于性激素等检测项目因生理周期变化等因素导致无法获取有效人群标本，暂不做验证，但亦需与临床沟通。

4.1.4.2 结果判断：规定小于或等于2份标本结果超出参考区间，即为验证通过。或R=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数≥90%即合格。

4.1.5 最大稀释倍数和可报告范围验证

4.1.

5.1 仅对于那些临床可报告区间大于分析测量范围的检测项目才需要进行验证。通常是在线性范围高值的基础上外延至最大稀释度倍数对应的值。

4.1.

5.2 标本来源：含本项目浓度接近线性范围上限的临床新鲜标本。