《植物营养学实验技术》

实验一植株粗灰分及氮、磷、钾含量的测定

一、植株粗灰分的测定（直接灰化法）

1、本次实验的目的和要求

（1）掌握植株灰化的条件和判断灰化完全的标准；

（2）灼烧的温度必须控制在适宜温度；

（3）样品应先炭化，以防灰化时爆燃，引起残灰飞失。

2、实验原理

将样品在高温下灼烧，有机物化分解挥发，剩下的部分即为植株粗灰分。

3. 需用的仪器和试剂

仪器：高温电炉、万分之一天平、调温电炉、瓷坩埚。

4. 实验步骤

样品预处理：吹干→烘干→粉碎过筛→混匀→装瓶。

测坩埚重：洗净→灼烧→冷却→称重

炭化、灰化：称样→炭化→灰化→冷却→称重。

5. 教学方式

每个班分成两个小班，每个小班安排一个老师负责讲解、指导，每个学生动手操作。

6. 考核要求

（1）能正确判断植株样品是否灰化完全；

（2）明确要先碳化的原因。

7. 实验报告要求

要求写清楚项目测定的目的意义、测定方法、原理、操作步骤、结果计算、注意事项以及实验结果分析或实验过程出现的问题。

二、植株全氮含量的测定

1．本次实验的目的和要求

⑴实验目的

掌握H2SO4—H2O2消化—蒸馏定氮法测定植株全氮的原理和操作方法。

⑵实验要求

溶液中残余的H2O2必须分解除去；消化完全标志是溶液无色透明；检查2%硼酸溶液pH值是否变化；蒸馏定氮时注意消化管密封；确保待测液中NH3蒸馏完毕。

2．实验内容或原理（不包括硝态氮）

植物样品首先经浓硫酸的脱水碳化、氧化等一系列作用后，而未被硫酸破坏和分解的有机物和碳又经过双氧水分解出的新生态氧的强烈氧化作用，从而使有机氮等转化为无机铵盐，消煮液中的铵用半微量蒸馏法定氮，从而计算出植株中氮的含量。

3．需用的仪器或试剂等

⑴需用的仪器

150ml（细口）、250ml三角瓶；万分之一电子天平、电热板或普通电炉、定氮仪等

⑵需用的试剂

浓硫酸、双氧水、2%硼酸溶液、定N指示剂等

4．实验步骤

称植株样品→加浓硫酸和H2O2消化→容量瓶中定容→准确吸取一定体积待测液用蒸馏法定氮→结果计算。

5．教学方式

实验操作过程分小班进行，即指导学生人数每位教师不得超过16人；学生实验过程是一人一组。实验前老师先检查学生预习实验内容情况，再由老师讲解实验原理、操作方法和注意事项，学生们再动手操作，实验过程中老师应随时提醒学生应注意的问题或指出操作不当等问题，最后检查每位学生实验过程所得原始数据。

6．考核要求

⑴植株样品的消化过程和消化完全的标志

⑵定氮仪的测定原理和使用

⑶待测液定量体积估算

⑷标准铵态氮的回收实验

⑸硼酸吸收液和氢氧化钠加入量的估算

⑹硫酸标准溶液浓度的选择

7．实验报告要求

实验报告要求写明实验目的意义、实验原理、操作步骤、原始数据记录、结果计算和注意事项以及实验结果分析或实验过程出现的问题。

三、植株全磷含量的测定

1．本次实验的目的和要求

⑴实验目的

掌握H2SO4—H2O2消化—钒钼黄比色法测定植株全磷的原理和操作方法。

⑵实验要求

待测液制备要求同植株全氮测定；比色时溶液酸度控制在0.50~ 1.10mol·L-1 2．实验内容或原理

植物样品经H2SO4—H2O2消煮分解制备待测液方法同“植株全氮”，待测液中正磷酸在酸性条件下能与偏磷酸盐和钼酸盐作用生成黄色的杂聚化合物钒钼酸盐，其黄色深浅与溶液中正磷酸中磷含量在一定浓度范围内成正相关，通过比色可定量测定磷含量。

3．需用的仪器或试剂

⑴需用的仪器

150ml细口三角瓶、50ml容量瓶；万分之一电子天平、电热板或普通电炉、722或723型分光光度比色计等。

⑵需用的试剂

浓硫酸、双氧水、钒钼酸铵试剂、10MNaOH、2，6—二硝基酚指示剂等。4．实验步骤

植物样品消化同“植株全氮”→待测液干过滤→准确吸取一定体积滤液于容量瓶→二硝基酚→10MNaOH调至刚呈黄色→钒钼酸铵试剂→定容→于波长450nm处比色测定→结果计算。

5．教学方式

实验操作过程分小班进行，即指导学生人数每位教师不得超过16人；学生实验过程是一人一组。实验前老师先检查学生预习实验内容情况，再由老师讲解实验原理、操作方法和注意事项，学生们再动手操作，实验过程中老师应随时提醒学生应注意的问题或指出操作不当等问题，最后检查每位学生实验过程所得原始数据。

6．考核要求

⑴分光光度计的测定原理和使用

⑵待测液定量体积估算

⑶磷标准浓度系列溶液的制作

7．实验报告要求

实验报告要求写明实验目的意义、实验原理、操作步骤、原始数据记录、结果计算和注意事项以及实验结果分析或实验过程出现的问题。

四、植株全钾的测定

1．本次实验的目的和要求

⑴实验目的

掌握H2SO4—H2O2消化—火焰光度法测定植株全钾的原理和操作方法。

⑵实验要求

待测液制备要求同植株全氮测定；标准钾溶液系列中加入与待测液等量的空白溶液。

2．实验内容或原理

植物样品经H2SO4—H2O2消煮分解制备待测液方法同“植株全氮”，待测液中的钾经稀释后即可于火焰分光光度计上直接测定。

3．需用的仪器或试剂

⑴需用的仪器

150ml细口三角瓶、50ml容量瓶；万分之一电子天平、电热板或普通电炉、火焰光度计。

⑵需用的试剂

浓硫酸、双氧水、100mg·L-1K标准溶液。

4．实验步骤

植物样品待测液制备方法同“植株全氮”→待测液干过滤→稀释→火焰光度计上直接测定→结果计算。

5．教学方式

实验操作过程分小班进行，即指导学生人数每位教师不得超过16人；学生实验过程是一人一组。实验前老师先检查学生预习实验内容情况，再由老师讲解实验原理、操作方法和注意事项，学生们再动手操作，实验过程中老师应随时提醒学生应注意的问题或指出操作不当等问题，最后检查每位学生实验过程所得原始数据。

6．考核要求

⑴植株样品的消化过程和消化完全的标志

⑵火焰光度计的测定原理和使用

⑶待测液定量体积估算