菌种的鉴别
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《药品微生物检验技术》
能力目标 知识目标 学习情境
项目2 实验菌种的鉴别、保藏和使用
任务1 前期准备工作（玻璃器皿的清洗、培养基的 配制、实验用物及培养基的消毒灭菌） 任务2 菌种的复苏与分离纯化 任务3 菌种的鉴别 任务4 工作菌株的制备及保藏 2010年药物制剂技术专业 邓雪萍
菌种的鉴别
一、根据微生物的形态结构特征进行鉴别 二、根据微生物（细菌）在普通培养基中的 生长现象进行鉴别（平板、半固体、液 体） 三、根据微生物（细菌）在鉴别培养基中的 生长现象进行鉴别 四、根据生化反应试验结果进行鉴别
沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长
表2-10 常见细菌在NB中的生长现象
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 特点 兼性厌氧菌 兼性厌氧菌 专性需氧菌 产生水溶性 绿脓色素 生长现象 均匀浑浊生长 均匀浑浊生长 液面菌膜，上部菌Leabharlann Baidu呈现蓝绿色 或黄绿色，膜下培养液浑浊 液面菌膜，膜下培养液澄清，培 养一定时间，有菌下沉 均匀浑浊生长
绿脓杆菌
表2-9 常见细菌的在NB半固体中的生长现象
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 绿脓杆菌 枯草芽孢杆菌 沙门菌 特点 无鞭毛 周鞭毛，有动力 生长现象
沿穿刺线成线状生长，穿刺线两 边的培养基仍澄清透明 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长
单端丛鞭毛，运动 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长 活泼 周鞭毛，有动力 周鞭毛，有动力
表2-8 常见细菌的在NA平板上的典型菌落特征
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 菌落特征 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的金黄色菌落 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的灰白色菌落 菌落大而扁平，边缘不规则，表面光滑，湿 润， 呈灰白色或灰绿色，培养基呈现黄绿色或 蓝绿色 圆形、边缘不规则、表面较不光滑、凸起、较 枯草芽孢杆菌 大的灰白色菌落 沙门菌 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的半透明菌落
霉菌的菌落特征 较疏松（由许多菌丝体和孢子构成） 较大，外观干燥、不透明，有皱褶 呈蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状 用接种针不易挑起 菌落正反面颜色常不同；菌落边缘和中 心的颜色常不同
霉菌菌落
黑根霉 毛霉
青霉
黑曲霉
米曲霉
红曲霉
点青霉菌落（外观干燥，有皱褶）
放线菌的菌落特征（放射状） 基内菌丝和孢子的颜色常不同 1、硬，致密，较小。有的为粉质。 2、表面呈紧密的绒状，或絮状，或粉末 状，或颗粒状，或坚实、干燥、多皱； 3、接种针难以挑起； 4、菌落不透明，正、反两面常呈现不同 颜色。
液体培养特征：静置培养、振荡培养（如摇床）
酵母菌的菌落特征 菌落形态与细菌菌落相似。比细菌菌落 大且厚 多为乳白色，表面湿润、光滑 易用接种环挑起 正面与反面、边缘与中央颜色一致 液体培养特征
血平板
铜绿假单胞菌在鉴别培养基上的典型菌落特征
溴化十六烷三甲铵平板（CTB） ：扁平、圆形或无定形、边 缘不齐，光滑湿润，呈灰白色，周边略呈扩散现象，在菌 落相邻处常有融合现象。菌落周围常有水溶性黄绿色或蓝 绿色素扩散，使培养基显黄绿色或蓝绿色 ，但亦有不产色 素的菌株。 血平板：菌落大而扁平，边缘不整齐，表面光滑，湿润，有 生姜气味，培养基呈现黄绿色或蓝绿色，有透明溶血环
铜绿假单胞菌菌落特征
大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基中的典型生长现象（6、7、8组）
培养 基 EMB 鉴别成分 伊红、美蓝，乳糖 大肠埃希 菌 沙门菌 沙门菌属分 沙门菌属 解葡萄糖产 酸产气（伤 寒沙门菌只 产酸不产 气），不分 气）， 解蔗糖和乳 糖（少数分 解乳糖或迟 缓分解乳 糖），多数 糖）， 可产生硫化 氢
大肠埃希 氏菌能分 氏菌能 MacC 乳糖、中性红pH红6.8-8.0黄 解葡萄糖 产酸产 乳糖，硫代硫酸钠，枸橼酸铁（III） DHL 气，绝大 铵，中性红pH红6.8-8.0黄 多数菌株 乳糖、硫代硫酸钠，枸橼酸铁（III） 能分解乳 SS 铵，中性红pH红6.8-8.0黄 糖、蔗 乳糖、蔗糖、葡萄糖（10：10：1）、硫 糖，不生 成硫化氢 TSI 酸亚铁、硫代硫酸钠、酚红pH6.8黄8.4红，半固体斜面（琼脂1.2%）
绿脓杆菌
枯草芽孢杆菌 专性需氧菌 沙门菌 兼性厌氧菌
金黄色葡萄球菌在鉴别培养基上的生长现象（4号）
培养基 卵黄氯化钠琼脂 甘露醇氯化钠琼脂 鉴别或选择性成分 卵黄，约5%NaCl 甘露醇，7.5%NaCl，酚红 pH6.8黄-8.4红 脱纤维羊血（或兔血） 菌落特征
血琼脂平板
金卜菌菌落
甘露醇氯化钠平板
抽 签
1 、 5种菌在NA平板上的典型菌落特征 2、 5种菌在NB半固体培养基中的生长现象 3、 5种菌在NB培养基中的生长现象 4、金黄色葡萄球菌在鉴别培养基（卵黄氯化钠琼脂平板、甘露 醇氯化钠琼脂平板、血平板）上的典型生长现象
5、铜绿假单胞菌在鉴别培养基（CTB、血平板）上的典型生长现象 6、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（EMB、MacC）中的典型生长现象 7、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（DHL、SS）中的典型生长现象 8、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（TSI）中的典型生长现象
能力目标 知识目标 学习情境
项目2 实验菌种的鉴别、保藏和使用
任务1 前期准备工作（玻璃器皿的清洗、培养基的 配制、实验用物及培养基的消毒灭菌） 任务2 菌种的复苏与分离纯化 任务3 菌种的鉴别 任务4 工作菌株的制备及保藏 2010年药物制剂技术专业 邓雪萍
菌种的鉴别
一、根据微生物的形态结构特征进行鉴别 二、根据微生物（细菌）在普通培养基中的 生长现象进行鉴别（平板、半固体、液 体） 三、根据微生物（细菌）在鉴别培养基中的 生长现象进行鉴别 四、根据生化反应试验结果进行鉴别
沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长
表2-10 常见细菌在NB中的生长现象
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 特点 兼性厌氧菌 兼性厌氧菌 专性需氧菌 产生水溶性 绿脓色素 生长现象 均匀浑浊生长 均匀浑浊生长 液面菌膜，上部菌Leabharlann Baidu呈现蓝绿色 或黄绿色，膜下培养液浑浊 液面菌膜，膜下培养液澄清，培 养一定时间，有菌下沉 均匀浑浊生长
绿脓杆菌
表2-9 常见细菌的在NB半固体中的生长现象
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 绿脓杆菌 枯草芽孢杆菌 沙门菌 特点 无鞭毛 周鞭毛，有动力 生长现象
沿穿刺线成线状生长，穿刺线两 边的培养基仍澄清透明 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长
单端丛鞭毛，运动 沿穿刺线成生长，穿刺线两侧可 见羽毛状或云雾状浑浊生长 活泼 周鞭毛，有动力 周鞭毛，有动力
表2-8 常见细菌的在NA平板上的典型菌落特征
细菌 金卜菌 大肠埃希菌 菌落特征 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的金黄色菌落 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的灰白色菌落 菌落大而扁平，边缘不规则，表面光滑，湿 润， 呈灰白色或灰绿色，培养基呈现黄绿色或 蓝绿色 圆形、边缘不规则、表面较不光滑、凸起、较 枯草芽孢杆菌 大的灰白色菌落 沙门菌 圆形、边缘整齐、表面光滑、凸起、湿润、中 等大小的半透明菌落
霉菌的菌落特征 较疏松（由许多菌丝体和孢子构成） 较大，外观干燥、不透明，有皱褶 呈蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状 用接种针不易挑起 菌落正反面颜色常不同；菌落边缘和中 心的颜色常不同
霉菌菌落
黑根霉 毛霉
青霉
黑曲霉
米曲霉
红曲霉
点青霉菌落（外观干燥，有皱褶）
放线菌的菌落特征（放射状） 基内菌丝和孢子的颜色常不同 1、硬，致密，较小。有的为粉质。 2、表面呈紧密的绒状，或絮状，或粉末 状，或颗粒状，或坚实、干燥、多皱； 3、接种针难以挑起； 4、菌落不透明，正、反两面常呈现不同 颜色。
液体培养特征：静置培养、振荡培养（如摇床）
酵母菌的菌落特征 菌落形态与细菌菌落相似。比细菌菌落 大且厚 多为乳白色，表面湿润、光滑 易用接种环挑起 正面与反面、边缘与中央颜色一致 液体培养特征
血平板
铜绿假单胞菌在鉴别培养基上的典型菌落特征
溴化十六烷三甲铵平板（CTB） ：扁平、圆形或无定形、边 缘不齐，光滑湿润，呈灰白色，周边略呈扩散现象，在菌 落相邻处常有融合现象。菌落周围常有水溶性黄绿色或蓝 绿色素扩散，使培养基显黄绿色或蓝绿色 ，但亦有不产色 素的菌株。 血平板：菌落大而扁平，边缘不整齐，表面光滑，湿润，有 生姜气味，培养基呈现黄绿色或蓝绿色，有透明溶血环
铜绿假单胞菌菌落特征
大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基中的典型生长现象（6、7、8组）
培养 基 EMB 鉴别成分 伊红、美蓝，乳糖 大肠埃希 菌 沙门菌 沙门菌属分 沙门菌属 解葡萄糖产 酸产气（伤 寒沙门菌只 产酸不产 气），不分 气）， 解蔗糖和乳 糖（少数分 解乳糖或迟 缓分解乳 糖），多数 糖）， 可产生硫化 氢
大肠埃希 氏菌能分 氏菌能 MacC 乳糖、中性红pH红6.8-8.0黄 解葡萄糖 产酸产 乳糖，硫代硫酸钠，枸橼酸铁（III） DHL 气，绝大 铵，中性红pH红6.8-8.0黄 多数菌株 乳糖、硫代硫酸钠，枸橼酸铁（III） 能分解乳 SS 铵，中性红pH红6.8-8.0黄 糖、蔗 乳糖、蔗糖、葡萄糖（10：10：1）、硫 糖，不生 成硫化氢 TSI 酸亚铁、硫代硫酸钠、酚红pH6.8黄8.4红，半固体斜面（琼脂1.2%）
绿脓杆菌
枯草芽孢杆菌 专性需氧菌 沙门菌 兼性厌氧菌
金黄色葡萄球菌在鉴别培养基上的生长现象（4号）
培养基 卵黄氯化钠琼脂 甘露醇氯化钠琼脂 鉴别或选择性成分 卵黄，约5%NaCl 甘露醇，7.5%NaCl，酚红 pH6.8黄-8.4红 脱纤维羊血（或兔血） 菌落特征
血琼脂平板
金卜菌菌落
甘露醇氯化钠平板
抽 签
1 、 5种菌在NA平板上的典型菌落特征 2、 5种菌在NB半固体培养基中的生长现象 3、 5种菌在NB培养基中的生长现象 4、金黄色葡萄球菌在鉴别培养基（卵黄氯化钠琼脂平板、甘露 醇氯化钠琼脂平板、血平板）上的典型生长现象
5、铜绿假单胞菌在鉴别培养基（CTB、血平板）上的典型生长现象 6、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（EMB、MacC）中的典型生长现象 7、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（DHL、SS）中的典型生长现象 8、大肠埃希菌、沙门菌在鉴别培养基（TSI）中的典型生长现象