微生物检验原始记录(平板计数法)
平板菌落计数法水中微生物的检测
2、由于细菌易吸附玻璃器皿表面，菌液加入后应 尽快倒培养基，立即摇匀；
3、倾注平板时的培养基温度冷却至45℃左右。 4、计数时，30―300个菌落的稀释度计算每毫升
的菌数最为合适 5、同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊
菌落计数方法及原则：
1）若只有一个稀释度的平均菌落数在30-300范围 时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之。
2）若有两个稀释度，其生长的菌落数均在 30~300之间，则视二者之比值来决定，若 其比值小于2应报告两者的平均数。若大于 或等于2则报告其中较小的菌落总数。
3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释 倍数报告之
水中细菌总数的测定
——平板菌落计数法
一、细菌总数测定的意义
水中细菌总数往往同水中有机物污染的程度呈 正相关，它是评价水质污染程度重要指标之一
细菌总数：指水样在一定条件下培养后，1mL水样 所含菌落的总数。
我国生活饮用水标准（GB5749-85）规定，细 菌总数不得超过100个/ml
含细菌10-100个/ml的水体为极清洁
代表性：多采几个部位，液体样品需经过震摇，以 获得均匀稀释液。
2 水样的10倍稀释
第一步 稀释 水样 第二步： 接种平板
注意：稀释 度的选择
平板混合分离法： 将菌液分离样品摇匀，用无菌移液管取1 ml的
菌液移至无菌培养皿中，然后将融化，凉至45℃ 左右的培养基，在每个培养皿内各倒入约15 ml， 摇匀，凝固，制成平板。
4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30， 则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀 释倍数报告之
微生物学 实验三 平板菌落计数法
微生物学实验三平板菌落计数法微生物学实验三平板菌落计数法微生物学实验三平板菌落计数法实验三平板菌落计数学习菌种的平板菌落计数的基本原理和方法。
平板菌落计数法就是将试样样品经适度吸收之后，其中的微生物充份集中成单个细胞，挑一定量的吸收样液注射至平板上，经过培育，由每个单细胞生长产卵而构成肉眼可知的菌落，即为一个单菌落应当代表原样品中的一个单细胞。
统计数据菌落数，根据其吸收倍数和采样注射量即可折算出来样品中的含菌数。
但是，由于试样样品往往难于全然集中成单个细胞，所以，孵出的一个单菌落也可能将源自样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往相对较低，为了确切地阐释平板菌落计数的结果，现在已女性主义采用菌落形成单位（colony-formingunits,cfu）而不以绝对菌落数去则表示样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水（包括水源水）等的含菌指数或污染程度的检测。
1．菌种：大肠杆菌菌悬液。
2．培养基：lb培养基。
3．仪器或其他用具：1ml无菌液体，无菌平皿，器皿4.5ml无菌水的试管，试管架，恒温培养箱等。
取无菌平皿9套，分别用记号笔标明10、10、10（稀释度）各3套，另-1-2-3-4-5挑6支盛存有4.5ml无菌水的试管，依次标是10、10、10、10、10、用1ml无菌吸管吸取1ml已充分混匀的大肠杆菌菌悬液（待测样品），精确地放-10.5ml至10的试管中，此即为10倍吸收。
将多余的菌液送回原菌液中。
-6-4-5-6将10试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取一支1ml吸管插入10试管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸入管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
11金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数法
第页共页检验日期：报告/样品编号：检品名称：型号规格：质量等级：判定标准：检验方法依据：□GB 4789.10-2010 食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验（第二法）□其他检验项目：金黄色葡萄球菌标准规定：n= c= m= M=一、实验准备1、仪器设备生化培养箱编号：BSYJ-YQ- 高压蒸汽灭菌器编号：BSYJ-YQ-电子天平编号：BSYJ-YQ- 高压蒸汽灭菌器编号：BSYJ-YQ-显微镜编号：BSYJ-YQ- 均质器编号：BSYJ-YQ-其他编号：BSYJ-YQ-2、培养基生产厂家、批号及培养基配制见年月日培养基配制及高压记录。
二、实验步骤及结果实验地点：□微生物限度室□无菌室□生物安全柜环境条件：温度℃相对湿度% 沉降菌：局部cfu 操作间cfu样品处理：称取样品25□g至下列液体中，供试液□充分振摇（8000 r/min处理 2 min）混匀；□ml □置均质器225ml □磷酸盐缓冲液或□0.85%生理盐水，制成1：10的样品匀液，吸取1ml至9ml □磷酸盐缓冲液或□0.85%生理盐水中,做10倍递增稀释；选、和三个适宜稀释度的样品匀液，每个稀释度以0.3ml、0.3ml、0.4ml接种三块Baird-Parker琼脂平板，用无菌L棒涂布整个平板，培养时间为日时至日时°C；第页共页结果计算公式：T = A B / C dT——样品中金黄色葡萄球菌菌落数；A——某一稀释度典型菌落的总数；B——某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数；C——某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数；d——稀释因子。
结果： n= c= 结论：。
速冻肉制品检验熟品
结晶紫中性红胆盐琼脂，36℃±1℃，18h—24h培养，各平板菌落数 样品 空白 n1 n2 n3 n4 n5 1/10
1/100 1/1000 选择菌落平板数 15CFU-150CFU
BGLB肉汤培养 36℃±1℃，培养24h—48h
微生物检验原始记录表（速冻肉制品）（熟制品）
编号：QR-J-019-A
企业名称 产品名称
广州市
食品有限公司
检验依据 环境温度
SB/T 10379-2012 ℃
检验日期 相对湿度
%
ห้องสมุดไป่ตู้
生产日期 生产数量
生产批号
报告日期
一、菌落总数 稀释度 条件
检验方法
GB 4789.2 -2010 菌落总数 cfu/g 判定报告 判定标准要求： n=5，c=1，m=1000， M=10000
样品 空白
1/10
1/100
1/1000
菌落计算公式
n1 n2 平板计数琼脂，36℃±1℃48h± 2h各平板菌落数 n3 n4 n5 备注：N=样品中菌落数；∑C=平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1=第一个适宜稀释度的平板个数；n2=第二个适宜稀释度的平板个数；d=稀 释因子（第一个稀释度）；dn=相应的稀释度。 二、大肠菌群 检验方法 GB 4789.3 -2010 第二法 平板计数法 判定报告 判定标准要求： n=5，c=1，m=10， M=100
接种BGLB肉汤管 数
大肠菌群平板计数报 告：产气管数×平板菌 落总数×稀释倍数 产气管数
备注：n:同一批次产品应采集的样品件数；c:最大可允许超出m值的样品数；m:微生物指标的最高安全限量值；M:微生物指标的最高安全限量值。
实验四微生物平板菌落计数法
实验四微生物平板菌落计数法一、实验目的学习并掌握平板菌落计数的基本原理和方法。
二、实验原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低，为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位（cfu）而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水（包括水源水）等的含菌指数或污染程度的检测。
三、实验器材1 ．菌种：酵母菌。
2 ．培养基：YEB培养基。
3 ．仪器或其他用具： 1ml 无菌吸管，无菌平皿，盛有无菌水的试管，试管架，恒温培养箱等。
四、实验步骤1 ．编号取无菌平皿 9 套，分别用记号笔标明 10-4、 10-5、 10-6（稀释度）各 2 套，另取 6 支盛有无菌水的试管，依次标是 10-1、 10-2、 10-3、 10-4、 10-5、10-6。
2 ．稀释用 1ml 无菌吸管吸取 1ml 已充分混匀的大肠杆菌菌悬液（待测样品），精确地放至 10-1的试管中，此即为 10 倍稀释。
将多余的菌液放回原菌液中。
将 10-1试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取一支 1ml 吸管插入 10-1试管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸入管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
用此吸管吸取 10-1菌液 1ml ，精确地放至 10-2试管中，此即为 100 倍稀释。
微生物检测原始记录
微生物检测原始记录一、目的本文档旨在规定微生物检测的原始记录格式和内容，以确保检测过程和结果的准确性和可追溯性。
二、记录格式1、记录纸张：使用A4纸，横向排列，页边距至少留有2cm。
2、记录标题：在页面顶部居中书写“微生物检测原始记录”。
3、日期和实验室名称：在页面右下角书写检测日期和实验室名称。
4、检测样品信息：在页面中部或适当位置填写样品信息，包括样品名称、编号、来源、处理方式等。
5、检测项目和指标：在页面中部或适当位置列出检测项目和指标，如菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等。
6、检测方法和仪器：在页面中部或适当位置描述检测所采用的方法和使用的仪器设备。
7、检测结果记录：在页面中部或适当位置详细记录每个检测项目的实验数据，并确保数据准确、清晰、可追溯。
8、结论和建议：在页面底部或适当位置总结检测结果，并给出相应建议或处理意见。
9、检测人员签名：在页面右下角或适当位置由检测人员签名，以示负责。
10、备注：根据需要添加其他相关信息，如样品异常情况说明、引用标准、注意事项等。
三、记录内容1、样品信息：样品名称、编号、来源（如生产批次、产地等）、处理方式（如取样、前处理等）。
2、检测项目和指标：根据实际需要确定检测项目和指标，如菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等微生物指标，以及可能的化学指标等。
3、检测方法：描述微生物检测所采用的方法，如国标法、第三方检测方法等。
同时应注明所用方法的版本号和发布机构。
4、仪器设备：列出在检测过程中使用的所有仪器设备的名称、型号、编号和使用状态等信息。
5、实验数据记录：详细记录每个检测项目的实验数据，包括观察结果、计数结果、吸光度值等。
数据应准确、清晰、可追溯，并附上必要的图表和曲线图。
6、结论和建议：根据检测结果给出相应的结论和建议，如是否符合标准要求，是否需要进一步处理或跟进等。
7、其他信息：根据需要添加其他相关信息，如样品异常情况说明、引用标准、注意事项等。
8、检测人员签名：由检测人员签名，以示负责。
微生物的平板菌落计数法
<实验十三微生物的平板菌落计数法>一、实验目的学习微生物的平板计数法。
二、原理概述微生物的稀释平板计数是根据在固体培养基上所形成的一个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成，且肉眼可见的子细胞群体这一生理及培养特征进行的。
也就是说一个菌落即代表一个单细胞。
计数时，首先将待测样品制成均匀的一系列不同稀释液，并尽量使样品中的微生物细胞分散开来，使成单个细胞存在( 否则一个菌落就不只是代表一个菌 ) ，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。
经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数，一般用于某些成品检定 ( 如食品等 ) 、生物制品检定、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检定。
三、实验器材1 、待测样品、所需各类培养基2 、天平、称样瓶、记号笔、容量瓶、无菌生理盐水、 1ml 和 5ml 无菌移液管、无菌平板、无菌试管四、操作步骤和内容1 、样品稀释液的制备准确称取待测样品 10g 或 10ml ，放入装有 90ml 无菌水并放有小玻璃珠的 250mL 三角瓶中，用手或置摇床上振荡 20min ，使微生物细胞分散，静置约 20-30s ，即成 10 -1 稀释液；再用 1ml 无菌吸管，吸取 10 -1 稀释液 1ml 移入装有 9ml 无菌水的试管中，吹吸 3 次，让菌液混合均匀，即成 10 -2 稀释液；再换一支无菌吸管吸取 10 -2 菌液 1mL 移入装有 9ml 无菌水试管中，即成 10 -3 稀释液；以此类推，一定要每次更换吸管，连续稀释，制成 10 -4 、 10 -5 、 10 -6 、 10 -7 、 10 -8 等一系列稀释度的菌液，供平板计数使用 ( 如图 13 － 1) 。
图 13 － 1 平板计数法中样品的稀释和稀释液的取样用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应根据样品确定。
实验四微生物平板菌落计数法
实验四微生物平板菌落计数法一、实验目的学习并掌握平板菌落计数的基本原理和方法。
二、实验原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2〜3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低，为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位（cfu ）而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水（包括水源水）等的含菌指数或污染程度的检测。
三、实验器材1 ．菌种：酵母菌。
2 ．培养基：YEB 培养基。
3 ．仪器或其他用具：1ml 无菌吸管，无菌平皿，盛有4.5ml 无菌水的试管，试管架，恒温培养箱等。
四、实验步骤1 ．编号取无菌平皿9 套，分别用记号笔标明10 -4、10-5、10 -6（稀释度）各2 套，另取6 支盛有4.5ml 无菌水的试管，依次标是10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
2 ．稀释用1ml 无菌吸管吸取1ml 已充分混匀的大肠杆菌菌悬液（待测样品），精确地放0.5ml 至10 -1的试管中，此即为10 倍稀释。
将多余的菌液放回原菌液中。
将 10 -1 试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取一支 1ml 吸管插入 10 -1 试 管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸 管伸入管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
速冻肉制品化验记录
菌落计算公式
菌落总数 cfu/g
n1 n2 平板计数琼脂，36℃±1℃48h± 2h各平板菌落数 n3 n4 n5 备注：N=样品中菌落数；∑C=平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1=第一个适宜稀释度的平板个数；n2=第二个适宜稀释度的平板个数；d=稀释因 子（第一个稀释度）；dn=相应的稀释度。 二、大肠菌群 结晶紫中性红胆盐琼脂，36℃±1℃，18h—24h培养，各平板菌落数 样品 空白 n1 n2 n3 n4 n5 备注：n:同一批次产品应采集的样品件数；c:最大可允许超出m值的样品数；m:微生物指标的最高安全限量值；M:微生物指标的最高安全限量值。 1/10
1/100 1/1000 选择菌落平板数 15CFU-150CFU □N=<1dn □N=(∑C/2)dn □N=∑C/(n1+0.1n2)dn
检验方法：
GB 4789.3 -2010
第二法
平板计数法 判定报告 判定标准要求： n=5，c=1，m=10， M=100
BGLB肉汤培养 36℃±1℃，培养24h—48h
接种BGLB肉汤管 数
产气管数
大肠菌群平板计数报告： 产气管数×平板菌落总数 ×稀释倍数
检验员：
日期：
审核：
日期：
微生物检验原始记录表（速冻肉制品）
产品名称/号 检验依据
SB/T 10379-2012
检验日期
生产日期
生产批号
GB 4789.2 -2010 判定报告 判定标准要求： n=5，c=1，m=1000， M=10000
一、菌落总数 稀释度 条件
检验方法： 1/10
样品 空白
1/100
1/1000
大肠菌群平板计数法原始记录
报告日期： 规格型号 样品数量
2
3
4
5
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA)，36℃±1℃培养18h-24h，单位CFU/g 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB），36℃±1℃培养18h-24h（产气
10-1
10-2
10-3 空白 计算公式 计算结果
大肠菌群数=阳性试管比例*平板菌落数*稀释倍数
检验员：
复核：
（+：表示产气；-：表示不产气）
报告日期： 规格型号 样品数量
10
-1
10
-2
10-3 空白 计算公式 计算结果
大肠菌群数=阳性试管比例*平板菌落数*稀释倍数
检验员：
复核：
****食品有限公司
大肠菌群平板计数法检验原始记录
编号： 检验日期： 产品名称 抽样日期 批次编号 抽样人 检测方法：GB4789.3平板计数法 稀释度 1 2 3 4 5 1
****食品有限公司
大肠菌群平板计数法检验原始记录
编号： 检验日期： 产品名称 抽样日期 批次编号 抽样人 检测方法：GB4789.3平板计数法 稀释度 1 2来自3 4 5 1 2 3 4 5
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA)，36℃±1℃培养18h-24h，单位CFU/g 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB），36℃±1℃培养18h-24h，
微生物限度测定原始记录表(平皿倾注法)
主要 仪器 设备
名称 高压蒸汽灭菌器
生物安全柜 生物安全柜 电热恒温培养箱
型号 LDZF-75KB-Ⅱ BHC/1300Ⅱ-A/B3
BHC-090A DH-420A
编号
1016A1-001
1014A1-001 1019A1-001
1001A1-001
主要培养基 及试剂
培养基名称 胰酪大豆琼脂
批号
生产厂家
计算 公式
菌落总数（CFU/ml 或 g 或 cm2）=平均菌落数（CFU）×稀释倍数
不同稀释度培养结果
菌落总数
序号
1 2 3
样品编号
-0001 -0002 空白
1:1
平
平
平 CFU/mL CFU/g CFU/cm2
1
2
3
均
1
2
3
均
1
2
3
均
27 24 / 26 / / / / / / / /
26
/
/
检验 步骤
取_______1mL_________的供试液于无菌平皿中，另取 1ml 于另一无菌平皿做平行接种，取 1ml 加到 9ml 稀释液中作 1：10 稀释，混匀后取 2ml 分别加到两个无菌平皿内，每皿 1ml，倾注熔化并冷却至_50.0___℃培养基于平皿中，立即旋摇平皿使其混匀，同时倾注培养基于空白平皿内 作为空白对照，待培养基凝固后，倒置平皿于__33.0____℃的培养箱内培养___5___d 后计数。
表格编号：
×××有限公司
微生物限度检查测 定 原 始 记 录 表
委托单编号：
样品名称：
收样日期：__2023_年_____月____日 测定日期：_2023_年____月____~____月____日
实验4 微生物的分离与平板菌落计数法
平板菌落计数法的稀释流程示意图
⑥转移菌液 用一支1ml无菌吸管吸取10-6,10-7,10-8的稀 释菌悬液各0.2ml，向已编好号的无菌平皿。 用涂布器涂匀。 ⑦倒置培养 待平板完全凝固后，倒置于37℃恒温箱中培 养。
⑧计菌落数
培养24、48h、72后，取出平板，算出同一稀 释度三个平板上的菌落平均数，在平板菌落计 数中，可用彩色笔或钢笔在皿底点涂菌落进行 计数，以防漏计和重复。实际工作中同一稀释 度重复对照平板不能少于三个，且同一稀释 度的三个重复对照的菌落数不应相差很大， 否则说明试验误差太大。
由10－6、10－7、10－8三个稀释度计算出 的每ml菌液中菌落形成单位数也不应相差 太大。平板菌落计数法，所选择倒平板的 稀释度是很重要的，培养后所出现的平均 菌落数小于100个左右为好，否则要适当增 加或减少稀释度加以调整。
【结果记录】
下面的表格是对一个培养时间菌液的平板计 数结果的记录表格，其余培养时间菌液的计 数表格请依此自行制作，将菌落计数结果填 入表格：
【实验报告】
1、平板菌落技术的原理。 2、要获得本实验的成功，那几步最为关键， 为什么？ 3、本实验结果记录与分析。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需 要培养一段时间才能取得，而且测定结 果易受多种因素的影响。 但是，由于该计数方法的最大优点是可 以获得活菌的信息，所以被广泛用于生 物制品检验，以及食品、饮料和水等的 含菌指数或污染程度的检测。
【材料和器皿】
①菌种：培养8h的大肠杆菌。 ②培养基 ：LB培养基。 ③器皿：无菌试管，无菌移液管，无菌平 皿等。 ④其他：无菌生理盐水，试管架，记号笔。
【方法和步骤】
①融化培养基 先将LB固体培养基加热融化，置于50度水浴 锅中备用。 ②倒培养液 将固体培养基融化并冷却至45℃左右倒入加 好样品的平皿中，每平皿约倒入10～12ml培 养基，随即快速而轻巧地晃动培养皿，注意 不要使培养基荡出平皿或溅到平皿盖上。
微生物检验原始记录范本
所选稀释度的平均菌落数（ ）X稀释倍数（ ）=
根据证实为大肠菌群阳性的管数，查大肠菌群（MPN）检索表，MPN值为=
3.霉菌和酵母计数
选择接种3个稀释度，平行接种2个平皿，每皿1ml检样或稀释样；注入46℃孟加拉红琼脂约15ml，凝固，26℃培养=d（ / :~/ : ）;空白对照菌数灭菌水对照菌数=
微生物检验原始记录范本
样品名称：生产日期：样品规格：产品批号：抽样数量：
检测依据：□ GB□GB□GB使用仪器：天平□ 电热恒温培养箱 □ 水浴箱 □ 环境条件：室温℃
实验地点：无菌室检测日期：20年月日~月日检测项目：□菌落总数、□大肠杆菌、□霉菌计数、□酵母计数、□霉菌和酵母计数
样品处理：1.□以无菌操作将检样25注入225ml灭菌□磷酸盐缓冲液或□生理盐水或□蒸馏水中均质或混匀，□用灭菌吸管吸取检样1ml注入9ml灭菌稀释液中充分振摇，做成1：10的均匀稀释样；2. □用灭菌吸管吸取1：10稀释样1ml注入9ml灭菌稀释液中，混匀做成1：100稀释样；3. □同样方法做成10倍递增稀释样。
1.菌落总数
2．大肠杆菌
接种2~3个稀释度各2的平皿，每皿1ml检样或稀释样，注入46℃平板计数琼脂约15ml，凝固，℃培养h（时分~时分）。
选择接种3个稀释度
10
x
1
x
x
x
x
稀释度
10-
10-
所选稀释度平均值
空白对照
稀释液对照
乳糖胆盐发酵管经36℃h
（时 分~时分）后产气管数
菌落数
转 种 在 伊 红 美 蓝 琼 脂 平 板上36℃h，革兰氏蓝色发酵管经36℃h（时分~时 分）后产气管数
稀释度
10-
化妆品企业微生物检验原始记录(国标法)
所用培养基及批号:□Baird Parker培养基□甘露醇发酵培养基
镜检
甘露醇发酵试验
血浆凝固酶试验
结果：□未检出（符合规定）
□检出（不符合规定）
结论：□检验合格□检验不合格
4、被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
所用培养基及批号:□SCDLP液体培养基
□十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基
2、如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃±1℃培养18h-24h。同时取该培养液1-2滴接种到蛋白胨水中，置44.5℃±0.5℃培养24h±2h。经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。平板上无菌落生长，可作出未检出耐热大肠菌群。耐热大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深菌落。挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约0.5mL，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色，阴性反应液面呈试剂本色。根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则报告被检样品中检出耐热大肠菌群。
微生物检验记录
产品名称
产品批号
检验日期
年月日
检验类别
原料半成品成品
报告日期
年月日
供试液制备：取供试品□10g□10mL，加到90mL灭菌生理盐水中，混匀制成1:10供试液，下一级稀释采用10倍递增稀释法。
大肠菌群平板计数法原始记录
BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h
样
2
样品稀释倍数
原液
10倍
100倍
VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h
典型菌落数
BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h
样
3
样品稀释倍数
原液
10倍
100倍
VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h
典型菌落数
BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h
样
4
样品稀释倍数
原液
10倍
100倍
VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h
典型菌落数
BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h
样
5
样品稀释倍数
原液
10倍
100倍
VRBA平板试验36℃±1℃培养18h±24h
典型菌落数
BGLB肉汤试验36℃±1℃培养24h±48h
备注
校核人员：检验人员：年月日
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样单编号：共页第页
样品名称
检验方法
GB4789.3平板计数法
收样日期
年月日
检验日期
年月日至月日
使用仪器设备名称
型号
精度
设备编号
状态
电热恒温培养箱
□HH-B11-420
±1℃
Sb005
□正常□不正常
检验项目
操作步骤及培养条件
空白对照
检验结果
大
肠பைடு நூலகம்
菌
群
CFU/g
(mL)
平板计数法SOP
1目的制订平板计数法标准操作规程，确保微生物制品中有效活菌数、杂菌率、霉菌数等微生物指标测定的准确。
2适用范围适用于公司产品中微生物指标的测定。
3责任者实验室检测操作人员。
4内容4.1原理平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落即代表一个单细胞。
计数时，先将待测样品作一系列稀释，再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内。
经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可换算出样品中的含菌数。
4.2材料4.3操作方法4.3.1编号取无菌平皿，分别用记号笔标明连续的三个浓度，具体根据预计样品微生物数量而定，如10-7、10-8、10-9。
每个浓度2-3个。
4.3.2制板将琼脂培养基趁热倒入已编号的无菌平皿中，5-10min凝固后倒置待用。
4.3.3稀释取无菌冻存管，排列于冻存管盒内，数量根据稀释浓度而定。
用移液器移取1.8ml（冻存管为2ml，如冻存管为5ml，则取4.5ml）无菌生理盐水，备用。
1）液体样本：用移液器从样本中吸取0.2ml（冻存管为2ml，如冻存管为5ml，则取0.5ml。
下同）溶液，移入装有1.8ml（冻存管为2ml，如冻存管为5ml，则为4.5ml。
下同）无菌生理盐水水的冻存管中，震荡使菌液混合均匀，即成10-1稀释液；再用移液器吸取10-1稀释液0.2ml，移入装有1.8ml无菌生理盐水的冻存管中，震荡使菌液混合均匀，即成10-2稀释液；以此类推，连续稀释，制成10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液。
2）固体样本：准确称取样本5g，放入盛45ml无菌生理盐水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇约10min，使样品与水充分混合，即成10-1稀释液；用移液器吸取10-2稀释液0.2ml，移入装有1.8ml无菌生理盐水的冻存管中，震荡使菌液混合均匀，即成10-2稀释液；以此类推，连续稀释，制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液。
微生物活菌计数方法
若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300之间时， 应按两者菌落总数之比值决定：
若其比值小于等于2应计算两者的平均数； 若大于2则以稀释倍数小的菌落平均数计算。
第二十七页，共43页。
例次
不同稀释倍数的 菌落平均数
103
第三十三页，共43页。
稀释倍数
重复
（巨大芽孢杆菌在营养肉汤 培养基上）
/
1
2
3 菌落 平均
数
标准 差
103 无法数 无法数 无法数
/
/
104 115 126 124
121.7
±5.9
105
15 有效菌
19
数
17
亿/g
17.0
1.20
/
/
有效 /g ） 菌 1 8 0 1 数 .7 2 1 1 4 （ 01亿 0 0 1 .20 1.1 0 0 0 .1
（真菌杂菌在马丁培养
重复 基上，不包括霉菌）
/
103
104
105
1
3
/
2
2
/
3
4
/
菌落
平均数 3.0
/
/
真菌杂菌
/
亿/g
/
/
0.0030
真菌 /g ） 杂 1 80 3 菌 .0 13 0 （ 10 亿 0 0 .003 1.1 0 0 .1
第三十七页，共43页。
有效 /g ） 菌 1 8 0 1 数 .7 2 1 1 4 （ 01亿 0 0 1 .20 1.1 0 0 0 .1
第三十五页，共43页。
重复
微生物检验原始记录(平板计数法)
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），36℃±1℃培养18h～24h A-1 A-2
-2
空白 稀释液 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB），36℃±1℃培养24h～48h
+表示 产气 -表示 不产气
计算方法： N = 阳性试管比例 * 平板菌落数 * 稀释倍数 结果 检验员： 日期： 审核： 日期：
-1
若有两个连续稀释度的平板菌落数 在适宜计数范围内时，按公式 N= ∑C /( n1 + 0.1n2 )d 计算， 否则参见GB4789.2第7.1条
N——样品中菌落数 Σ C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和 n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数 n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数 d——稀释因子（第一稀释度）
微生物检验原始记录
编号 A B 一、菌落总数（CFU/g） 稀释度 10 10
-1
产品名称
生产日期
检验日期
检验方法：GB 4789.2 A-3 A-4 A-5 B-1 B-2 B-3 B-4 B-5
平板计数琼脂（PCA），36℃±1℃培养48h±2h A-1 A-2
-2
空白 稀释液 计算 方法 结果 二、大肠菌群（CFU/g） 稀释度 10 10
微生物检验原始记录101102空白稀释液煌绿乳糖胆盐肉汤bglb361培养24h48h结晶紫中性红胆盐琼脂vrba361培养18h24h平板计数琼脂pca361培养48h2h101102空白稀释液计算方法若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时按公式ncn101n2d计算否则参见gb47892第71条n样品中菌落数c平板含适宜范围菌落数的平板菌落数之和n1第一稀释度低稀释倍数平板个数n2第二稀释度高稀释倍数平板个数产品名称编号a检验日期生产日期表示产气表示不产气计算方法
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编号 A B 一、菌落总数（CFU/g） 稀释度 10 10
-1
产品名称
生产日期
检验日期
检验方法：GB 4789.2 A-3 A-4 A-5 B-1 B-2 B-3 B-4 B-5
平板计数琼脂（PCA），36℃±1℃培养48h±2h A-1 A-2
-2
空白 稀释液 计算 方法 结果 二、大肠菌群（CFU/g） 稀释度 10 10
检验方法：GB 4789.3 平板计数法 A-3 A-4 A-5 B-1 B-2 B-3 B-4 B-5
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），36℃±1ห้องสมุดไป่ตู้培养18h～24h A-1 A-2
-2
空白 稀释液 煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB），36℃±1℃培养24h～48h
+表示 产气 -表示 不产气
计算方法： N = 阳性试管比例 * 平板菌落数 * 稀释倍数 结果 检验员： 日期： 审核： 日期：
-1
若有两个连续稀释度的平板菌落数 在适宜计数范围内时，按公式 N= ∑C /( n1 + 0.1n2 )d 计算， 否则参见GB4789.2第7.1条
N——样品中菌落数 Σ C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和 n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数 n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数 d——稀释因子（第一稀释度）