医学微生物学问答题

②对数期：
特点：
生长速率常数最大，即代时最短；细胞进行平衡生长，菌体大小、形态、生理特征等比较一致；酶系活跃，代谢最旺盛；细胞对理化因素较敏感
。
③稳定期：
特点：
①新增殖的细胞数与细胞的死亡数几乎相等，微生物的生长速率等于零，培养物中的细胞数目达到最高值。
②细胞分裂速度下降，开始积累内含物，产芽孢的细菌开始产芽孢。
5压力蒸汽灭菌法
是一种灭菌效果最好的方法。压力蒸汽灭菌器(autoclave)是一个密闭、耐高压蒸锅。灭菌的温度取决于蒸汽的压力，在101.325kPa（1个大气压）下，蒸汽的温度是100℃。如果蒸汽被限制在密闭的容器中，随着压力升高，蒸汽的温度也相应升高。在超过标准大气压103.4kPa (1.05kg/cm2)蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15~20分钟，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。压力蒸汽灭菌器就是根据这一原理制成的，常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。但上述温度尚不足以灭活朊粒。
①延滞期：
特点：
1、生长速率常数= 0；
2、细胞形态变大或增长;Biblioteka Baidu
3、细胞内RNA特别是rRNA含量增高，原生质嗜碱性增强;
4、合成代谢活跃（核糖体、酶类、ATP合成加快），易产生诱导酶;
5、对外界不良条件敏感，如氯化钠浓度、温度、抗生素等化学药物。原因：适应新的环境条件，合成新的酶，积累必要的中间产物。
（5）Ames试验：
Ames试验全称污染物致突变性检测。Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验。
T（2）细菌基因转移的类型及其主要差异
1、转化：受体菌直接摄取供体菌游离的DNA段，从而获得新的遗传性状。
2、转导：以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中去，使受体菌获得新的遗传性状。
（2）区别大肠杆菌和产气杆菌
可以用甲基红实验
试验方法：挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用培养基，培养于36±1°C或30°C(以30°C较好)3-5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1-2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。
T（3）湿热消毒灭菌法有哪些?各有何用途?湿热法与干热法相比有何优点?
（2）路易·巴斯德,出生于法国东尔城,毕业于巴黎大学,法国微生物学学家、化学家,微生物学的奠基人之一。路易·巴斯德为笫一个创造狂犬病和炭疽病疫苗的科学家,常被称为“微生物学之父”。其发明的巴氏消毒法直至现在仍被应用。
（3）亚历山大·弗莱明,英国细菌学家,生物化学家,微生物学家亚历山大·弗莱明于1923年发现溶菌酶,1928年首先发现了青霉素。青霉素的发现,使人类找到了一种具有强大杀菌作用的药物,结束了传染病几乎无法治疗的时代;从此出现了寻找抗菌素新药的高潮,人类进入了合成新药的新时代。
（3）F质粒：
主要见于革兰氏阴性菌。在电镜下可观察到细菌间借伸长的性菌毛进行接合。细菌能在接合中作为基因传递供体取决于致育因子（Fertilityfactor）又称F因子
（4）R质粒：
是一种细胞质性的质粒，这种质粒具有使寄主菌对链霉素、氯霉素、四环素等抗菌素或磺胺剂产生抗药性的基因群，和F因子一样，通过接合进行转移，获得该因子的细菌同时获得对多种药剂的抗性
T（4）影印试验验证何种理论?研究细菌的突变在临床上有何意义
（1）理论:
把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上，使其沾上来自平板上的菌落。然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后，对各平板相同位置上的菌落作对比后，就可选出适当的突变型菌株。据报道，用此法可把母平板上10%-20%量的细菌转移到丝绒布上，并可利用这一“印章”接种8个子培养皿。
T（1）什么是细菌的生长曲线?该曲线有何特点?掌握细菌的生长规律对生产有何指导意义?
（1）细菌生长曲线：
是专指单细胞微生物的。它是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后，在适宜的条件下培养，定时取样测定细胞数量。以细胞增长数目的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，绘制的曲线
（2）曲线的特点
T（2）细菌有哪些与医学有关的合成代谢产物,各有何意义?请设计简单的实验来区别大肠杆菌和产气杆菌
（1）合成代谢产物及意义
（1）热原质：大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。注入人体或动物体内能引起发热反应，故称热原质。
（2）毒素和侵袭性酶：细菌产生毒素，包括内毒素和外毒素。内毒素为革兰阴性菌的脂多糖。外毒素是革兰阳性菌产生的蛋白质，毒性强且有高度的侵袭性酶，
（3）菌血症:
致病菌由局部侵入血流,但未在血流中生长繁殖,只是短暂的一过性通过血液循环到达体内适宜部位后再进行繁殖而致病。例如伤寒早期有菌血症期
3流动蒸汽消毒法
又称常压蒸汽消毒法，是利用1个大气压下100℃的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体15~30分钟可被杀灭，常不能杀灭全部细菌芽胞。该法常用的器具是Arnold消毒器，我国的蒸笼具有相同的原理。
4间歇蒸汽灭菌法
利用反复多次的流动蒸汽间歇加热以达到灭菌的目的。将需要灭菌的物品置于流通蒸汽灭菌器内，100℃加热15~30分钟，杀死其中的繁殖体。取出后放37℃孵箱过夜，使残存的芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次。如此连续三次以上，可达到灭菌的效果。此法适用于一些不耐高热的含糖、牛奶等培养基。若有些物质不耐100℃，则可将温度减低至75~80℃，每次加热时间延长至30~60分钟，次数增加至3次以上，也可达到灭菌目的。
3.简述现代医学微生物学新进展及其在生命科学中的意义。
1.微生物学促进许多重大理论问题的突破 为分子生物学和分子遗传学的发展奠定了基础
2.微生物对生命科学研究技术做了重大贡献
3医学微生物室生命科学中一门重要的基础学科,对学习临床各科的感染性疾病,超敏反应疾病和肿瘤等奠定了重要的理论基础,有助于控制和消灭这些疾病,保障和提高人类的健康水平。
（3）掌握细菌的生长规律对生产有何指导意义
根据微生物的生长曲线可以明确微生物的生长规律，对生产实践具有重大的指导意义。故根据对数期的生长规律可以得到培养菌种时缩短工期的方法:接种对数期的菌种,采用最适菌龄，加大接种量，用与培养菌种相同组成的培养基。根据稳定期的生长规律，可知稳定期是产物的最佳收获期，也是最佳测定期，通过对稳定期到来原因的研究还促进了连续培养原理的提出和工艺技术的创建。
转变的情况（1）正常菌群的寄居部位改变
（2）宿主免疫功能下降
（3）菌群失调
（2）全身性细菌感染的类型?
（1）毒血症:
致病菌侵入宿主体内后,只在机体局部生长繁殖,不进入血液循环,但其产生的外毒素入血。外毒素经血到达易感的组织和细胞,引起特殊的毒性症状。例如白喉等
（2）内毒素血症:
革兰阴性菌侵入血流,并在其中大量繁殖、崩解后释放出大量内毒素;也可由病灶内大量革兰阴性菌死亡、释放的内毒素入血所致。在严重革兰阴性菌感染时,常发生内毒素血症。
（1）湿热消毒灭菌法
1巴氏消毒法
用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。此法由巴斯德创建，用于消毒牛乳、酒类。方法有两种：一种是加热至61.1~62.8℃ 30分钟；另一种是71.7℃经15~30秒，现广泛采用后一种方法。
2煮沸法
在1个大气压下水的煮沸温度为100℃，一般细菌的繁殖体5分钟能被杀死，细菌芽胞需要煮沸1~2小时才被杀灭。此法常用于消毒食具、刀剪、注射器等。水中加入2％碳酸氢钠，既可提高沸点达105℃，促进细菌芽胞的杀灭，又可防止金属器皿生锈。海拔高度影响水的沸点，高海拔用此方法消毒时，可按海拔每升高300m，延长消毒时间2分钟的标准来计算。
（3）色素：有水溶性色素（铜绿假单胞菌的色素）和脂溶性色素（金黄色葡萄球菌的色素）。不同细菌产生不同的色素，在鉴别细菌上有一定意义。
（4）抗生素：是由某些微生物代谢过程中产生的、能抑制或杀死另一些微生物和癌细胞的微量生物活性医学.教育.网收.集整理物质。
（5）细菌素：某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质，细菌素作用范围狭窄，仅对与产生该种细菌素的细菌有近缘关系的细菌才能起作用
（2）湿热较干热灭菌效果好的原因有:
①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。
水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱的键，更易使蛋白质变性。蛋白质含水量与其凝固温度成反比。湿热灭菌中的菌体蛋白质吸收水分，因此较同一温度的干热空气中的菌体蛋白质更易凝固。
②蒸汽存在潜热，当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。
T（3）细菌遗传变异的机制及其研究的临床上意义?
（1）细菌遗传变异的机制
是细菌基因发生突变、转移或重组。突变是随机的，其突变率为10-6～10-9。包括转化、转导和接合。
（2）细菌遗传变异在医学上的实际意义：
1、 影响细菌学诊断医学|教育网
2、 预防耐药菌株的扩散
3、 制备疫苗
4、 检测致癌物
5、 基因工程方面的应用
1.简述微生物的概念和分类,介绍其特点并举例说明
微生物:微生物是自然界中一大群形体微小,结构简单,肉眼直接看不见,必须要借助放大镜放大很高倍数才能观察到的微小生物
（1）原核细胞型微生物:无细胞核,只有拟核,无核膜,核仁细胞器只有核糖体;DNA和RNA同时存在。细菌包括细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋菌、放线菌,后五类与细菌结构相似,故将他们划入广义的细菌范畴。
（2）为防止传染病传入、传出,应加强检验检疫实验室生物安全管理,以保障我国经济社会可持续发展。在检验检测和研究中不可避免接触到病原微生物,特别是高致病性微生物,每一项实验操作都可能存在感染的危险,因此操作人员一定要注意安全。
T（1）何谓Transposon、IS、F质粒、R质粒和Ames试验?
（1）Transposon：
3、接合：是指细菌通过性菌毛将遗传物质（主要为质粒）从供体菌转移给受体菌，使受体菌获得新的遗传性状。
4、溶原性转换：是由于温和噬菌体的DNA（前噬菌体）整合到宿主菌的染色体DNA后，使细菌的基因型发生改变，从而获得新的遗传性状。
5．基因重组:不同DNA分子间发生的共价连接称基因重组.有两种类型：位点特异的重组和同源重组
转位子transposon 是特定的DNA序列，50-1000碱基对，可以在基因组中“跳跃”，并且普遍存在于真核原核生物的各种组织器官中。人类基因组有百分之四十由转位子组成，其中不乏和一些病毒基因组相似。
（2）IS：
插入序列，是最简单的转座元件，因为最初是从细菌的乳糖操纵子中发现了一段自发的插入序列，阻止了被插入的基因的转录
因而湿热灭菌比干热所要温度低，如在同--温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。
③湿热的穿透力比干热大，使深部也能达到灭菌温度，
故湿热比干热收效好。
T（4）什么是生物安全?病原微生物实验室为什么要注意生物安全?
（1）生物安全
生物安全一般是指由现代生物技术开发和应用对生态环境和人体健康造成的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施
（2）非细胞型微生物是最小的微生物,无典型的细胞结构,只能在活细胞内生长增殖,病毒属于此类微生物
（3）真核细胞型微生物:细胞核分化程度高,有核膜和核仁。细胞器完整。真菌属于此类微生物。
2、请介绍三位对微生物学做出贡献的科学家和他们的故事。
（1）列文虎克,出生于代尔夫特,荷兰显微镜学家、微生物学的开拓者。首先观察并描述了单细胞生物,同时也最早纪录观察肌纤维、细菌、精虫、微血管中血流等。
（2）意义
细菌的变异可导致细菌的毒力变弱或者变强，临床上常用人工诱变的方法来减弱细菌的毒性制备减毒疫苗，来预防某些传染病。
（1）正常菌群与机会致病菌的关系?
正常菌群：是指正常寄居在宿主体内，对宿主无害而有利的微生物群的总称 。
机会致病菌：当正常菌群与宿主间的生态平衡失调时,一些正常菌群会成为机会致病菌而引起宿主发病
③此时期的微生物开始合成次生代谢产物，对于发酵生产来说，一般在稳定期的后期产物积累达到高峰，是最佳的收获时期。
④衰亡期：
特点：
①细胞死亡数增加，死亡数大大超过新增殖的细胞数，群体中的活菌数目急剧下降，出现“负生长”。
②细胞内颗粒更明显，细胞出现多形态、畸形或衰退形，芽孢开始释放。
③因菌体本身产生的酶及代谢产物的作用，使菌体死亡、自溶等，发生自溶的菌生长曲线表现为向下跌落的趋势。