蟾蜍实验1

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双毁髓技术剑突取材、染色、观察

朱琪璋 121140083

一、实验目的

1.理解双毁髓技术的意义

2.观察软骨组织的形态

3.观察蟾蜍的泌尿及生殖系统

二、实验原理

1.双毁髓法麻醉蟾蜍:用金属毁髓针破坏蟾蜍的脑和脊髓,使蟾蜍处于一种麻醉状态,四肢瘫软,从而对蟾蜍进行解剖,取出泌尿及生殖系统,观察各个组成部分。

三、实验动物与器材

1.实验动物:活的蟾蜍一只/每人

2.实验试剂:亚甲基蓝试剂

3.实验器械:显微镜,解剖器具,毁髓针,剪刀,镊子,吸水纸,大头针

四、方法与步骤

1.左手食指与中指,无名指与小指分别夹着前肢,后肢,握住蛙体,拇指按住吻端使头部上下活动,两耳后腺间出现一道褶线,此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处,即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起,同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入1mm,再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动,彻底捣毁脑组织使之成为“脊蛙”。

2.将蛙置于解剖盘上,腹部朝上,四肢伸展后用大头针固定。用镊子提起腹面皮肤,用剪刀剪开一小口,并从小口处向前将腹面皮肤剪开,至下颌前端。向后剪至两后肢基部之间,泄殖孔稍前方。然后将皮肤向两侧拉开,可见皮肤与皮下肌肉连接松散,两者之间较大间隙为皮下淋巴腔,翻看皮肤内测可见分布有丰富的血管。

3.用镊子提起腹部肌肉,用剪刀沿腹中线略偏左侧,剪开腹壁至肩带之剑突,然后向左,向右剪开,用剪刀剪取薄的剑突软骨组织,制成装片(用亚甲基蓝试剂染色效果更好),在显微镜下观察软骨组织细胞的形态。

4.小心剥离腹壁上的腹大静脉,再将腹壁向两侧分开,暴露心脏和其他器官,小心分开其他器官和系统,找到蟾蜍的泌尿和生殖系统,并用剪刀,镊子等将其完整的分离出来,放到解剖盘上,观察系统中各个器官的形态及位置,作好记录,并绘制好模拟图。

5.将蟾蜍处理掉,仪器清洁干净,整理实验台。

五、实验结果

1.剑突软骨组织细胞图

2.蟾蜍泌尿及生殖系统图

六、实验结论

1.双毁髓技术是经济而方便的麻醉蟾蜍的方法,可以让蟾蜍处于一种麻醉状态,从而在不受蟾蜍运动的情况下对蟾蜍进行解剖

2.雄性蟾蜍生殖系统由精巢,输精小管和输精管,米氏管组成。

精巢:有1对,位于肾脏腹面内侧,接近白色,长卵圆形。

输精小管和输精管:提起精巢,可见精巢内侧发出输精小管,进入肾脏前端。雄蛙的输尿管兼输精,故称精尿管。

米氏管;为退化的输卵管,体腔中细长而盘曲的白色管。

3.脂肪体:位于精巢前端的爪状形状的黄色指状体,是储存营养的结构。

七、问题解答

1.还有什么其他方法能处死蟾蜍?

答:①药物麻醉法:将蛙至于封闭容器内,用乙醚等药物麻醉处死。②敲击法:手持蛙后肢,用硬物猛击头部,使其脑震荡致死。③横断脊柱毁髓法:左手持蛙,右手用剪刀在两腋窝下横断脊柱,然后,在脊柱中呈白色的脊髓断面处向前插入探针破坏脑,再向后插入探针破坏脊髓。

2.用双毁髓法时要注意什么?

答:针尖刺入颅腔毁脑时,针的倾斜角度必须很小

3.观察剑突软骨组织细胞切片时为什么要用亚甲基蓝试剂染色?

答:用亚甲基蓝可以将细胞核染成蓝色,便于观察。

4.脂肪体的作用是什么?

脂肪体是营养物质中间代谢的场所,相当于人的肝脏。还有解毒,贮存,排泄等功能。

4.吴氏管与米氏管有什么区别?

当形成中肾时,原来的前肾管纵分为2管:一为中肾管,或称吴氏管。。吴氏管由肾脏的前端沿其腹面旋曲后通入尿殖窦,通过尿殖乳头上尿殖孔开口于泄殖腔。具有泌尿的功能

在中肾阶段,前肾导管纵裂为二,一根为中肾导管,各肾单位与中肾导管相连,在雄性动物有输精作用。另一根在雄性退化为米氏管(牟勒氏管),在雌性则为输卵管

5.毕氏器是什么,与蟾蜍性别的改变有什么关系?

答:毕氏器是位于生殖腺与脂肪体之间的肉红色圆形结构,相当于退化卵巢的残余部分,内含无数尚未分化或发育不全的卵细胞。在雄性蟾蜍体内,如果把精巢摘去,可导致毕氏器发育成具有产卵功能的卵巢,而原来存在的退化输卵管,这时在雌性激素的影响下,发展成为子宫。这种雄性转变为雌性的现象,在生物学上称为性逆转。

八、参考文献

1.《普通动物实验教程》赛道建、贾少波主编科学出版社,2010

2.《蛙体解剖学》周本湘主编科学出版社 1956

3.《普通动物学实验指导》刘凌云、郑光美主编高等教育出版社 2010

4.《脊椎动物比较解剖学实验指导》马克勤主编高等教育出版社 1986

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